CKS2在结直肠癌中的表达和临床意义

背景：细胞周期蛋白依赖性激酶亚基（CKS）家族在细胞周期调节中起重要作用。研究发现其家族成员CKS2在一些恶性肿瘤中呈高表达,并与肿瘤的高侵袭性行为和预后不良相关。目前关于CKS2与结直肠癌关系的文献报道较罕见。目的：研究CKS2在结直肠癌中的表达和临床意义。方法：应用realtimeliT—PCR和蛋白质印迹法检测23例临床结直肠癌手术标本癌组织、癌旁非癌组织和正常组织中的CKS2mRNA和蛋白表达。结果：CKS2mRNA和蛋白在结直肠组织中的相对表达量依次为：癌组织〉癌旁组织〉正常组织,癌组织与正常组织问差异有统计学意义（P〈0．01）。性别对CKS2mRNA在不同结直肠组织中的表达趋势无明显影响。癌组织中的CKS2蛋白表达与肿瘤大小和pTNM分期呈正相关（P〈0．01）,与肿瘤部位无关。结论：CKS2蛋白在结直肠癌中呈高表达并与肿瘤临床病理特征相关,有望成为结直肠癌新的分子标记物和治疗靶点。     

Cox-2在结直肠癌中的表达

目的研究结直肠癌(CRC)组织中环氧化酶(COX)-2的表达。方法采用RT-PCR方法,从吉林省人民医院肛肠外科2010年1月至2012年5月CRC手术标本50例中,分别测定伴淋巴结转移癌组织30例,未转移癌组织20例,正常结肠黏膜组织10例中COX-2的表达水平。结果三组COX-2表达水平有明显差异(P<0.05);COX-2基因表达从结直肠正常黏膜组织→无淋巴结转移的结直肠腺癌组织→有淋巴结转移的结直肠腺癌组织呈现逐渐增高的趋势,各个阶段两两比较差异显著(P<0.05)。结论 COX-2在转移性CRC中高表达,在其侵袭和转移的机制中起一定作用,可作为预测CRC侵袭、转移的分子生物学指标。     

HER2在结直肠癌中的表达及意义

目的 研究HER2在结直肠癌的表达及意义.方法 应用pathway array analysis方法分析了56例结直肠癌肿瘤组织及癌旁正常组织中HER2的表达.结果 在56例结直肠癌患者中共发现HER2阳性表达35例,21例正常黏膜组织中HER2过表达,其中16例结直肠癌患者有淋巴结转移.结论 HER2的表达与结直肠癌的发生发展相关,检测HER2的表达可作为判断结直肠癌的生物学行为和预后的重要指标.     

桑黄提取物抑制circ＿0012129表达阻碍结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制

目的 研究桑黄提取物对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能的分子机制。方法 体外培养结直肠癌Caco-2细胞,分为低、中、高剂量桑黄提取物组(100、200、400μg/ml桑黄提取物干预Caco-2细胞24 h)、si-NC组(转染si-NC至Caco-2细胞)、si-circ＿0012129组(转染si-circ＿0012129至Caco-2细胞)、高剂量+pcDNA-NC组(400μg/ml桑黄提取物干预转染pcDNA-NC的Caco-2细胞24 h)、高剂量+pcDNA-circ＿0012129组(400μg/ml桑黄提取物干预转染pcDNA-circ＿0012129的Caco-2细胞24 h)和对照组(NC组,细胞常规培养24 h),CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western印迹检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin的蛋白表达,RT-qPCR法检测circ＿0012129表达。结果 与NC组比较,桑黄提取物组Caco-2细胞A值、迁移数和侵袭数、MMP2、MM...     

下调BAP31基因表达抑制结直肠癌细胞增殖侵袭及Wnt/β-catenin信号

目的探讨下调B细胞受体相关蛋白(BAP)31基因表达对结直肠癌细胞增殖侵袭及Wnt/β-catenin信号的影响。方法以正常结肠上皮细胞NCM460为对照细胞,Western印迹检测结直肠癌DLD-1,HT29,SW620和HCT116细胞中BAP31的蛋白表达。设计合成BAP31的特异性siRNA及阴性对照siRNA,分别命名为si-BAP31组和NC组,参照LipofectamineTM 2000说明转染HCT116细胞,仅加入脂质体的为空白对照组,Western印迹检测BAP31、β-catenin、增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶(MMP)-2的蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK)8检测细胞活力;Transwell小室检测穿膜细胞数。结果结直肠癌DLD-1,HT29,SW620和HCT116细胞中BAP31的表达均显著高于在NCM460细胞表达(P0.05)。转染si-BAP31的HCT116细胞BAP31表达明显受到抑制,与空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。与NC组比较,si-BAP31组在24、48和72 h的细胞活力显著降低,在48 h的细胞侵袭能力及β-catenin、PCNA和MMP-2的蛋白表达均显著降低(P0.05)。结论下调BAP31基因表达可抑制结直肠癌细胞增殖侵袭能力,机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。     

DLC2在结直肠癌中的表达和对结直肠癌细胞凋亡的影响

[目的]探讨肝癌缺失基因2(DCL2)在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞凋亡的影响。[方法]收集结直肠癌组织及对应的癌旁组织,培养人结直肠癌细胞HCT116、HT29、Caco2和人正常肠上皮细胞FHC,Western blot检测组织及细胞中DLC2表达水平。结直肠癌细胞转染DCL2过表达载体(过表达组)和空载体(阴性组),以只加入转染试剂的细胞为对照组,Western blot检测转染后细胞中DCL2、p38、磷酸化的p38(p-p38)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Cleaved Caspase-3)表达,流式细胞术检测细胞凋亡情况。[结果]癌组织中DLC2的表达水平明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=12.363,P=0.000)。HT29、HCT116、Caco2细胞中DLC2的表达水平明显低于FHC细胞,差异具有统计学意义(t1=8.624,t2=9.385,t2=10.322,P=0.000)。Caco2(0.06±0.03)细胞中DLC2的表达水平明显低于HT29、HCT116,差异具有统计学意义(t1=8.676,t2=7.645,P=0.000)。后续实验选用Caco2细胞继续研究。阴性组DLC2的表达水平与对照组相比,差异没有统计学意义(t1=2.325,P0.05)。过表达组DLC2的表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(t1=13.545,P=0.000)。阴性组细胞凋亡率与对照组相比,差异没有统计学意义(t1=1.646,P0.05)。过表达组细胞凋亡率明显高于对照组,差异具有统计学意义(t1=36.256,P=0.000)。阴性组、过表达组与对照组细胞中p38表达水平没有明显变化(t1=2.335,t2=1.464,P0.05)。阴性组与对照组细胞中p-p38表达水平没有明显变化(t1=4.587,P0.05)。阴性组与对照组细胞中Cleaved Caspase-3表达水平没有明显变化(t1=2.673,P0.05)。过表达组与对照组细胞中p-p38表达水平相比明显升高,差异有统计学意义(t1=9.617,P=0.000)。过表达组与对照组细胞中Cleaved Caspase-3表达水平相比明显升高,差异具有统计学意义(t1=10.696,P=0.000)。[结论]DLC2在结直肠癌中表达下调,DLC2可能通过作用于p38信号通路促进人结直肠癌细胞凋亡。     

SHP-2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨SHP-2蛋白在结直肠癌中的表达情况及其与病理特征的关系.方法采用免疫组织化学法和Western blot方法检测SHP-2蛋白在人结直肠癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理因素的关系.结果结直肠癌组织中S H P-2阳性表达率为25.6%(43/168),与正常结直肠组织比较,差异有统计学意义(P0.05).结直肠癌组织中SHP-2的蛋白水平为0.2396±0.0655,与配对正常结直肠组织比较(0.7665±0.1133),差异有统计学意义(P0.0001).SHP-2蛋白的低表达与分化程度和淋巴结转移有关,与性别、年龄、浸润程度、远处转移、TNM分期无关.结论SHP-2可能在结直肠癌的发生发展过程中起抑制作用,并可能成为潜在的治疗靶点.     

LATS2在人结直肠癌中的表达及意义

目的 探讨LATS2在大肠癌组织中表达及意义.方法 应用免疫组织化学技术、Western印迹及RT-PCR法检测大肠癌及癌旁组织中LATS2的表达情况,其中石蜡切片107例,其中癌组织77例,正常结直肠组织切片30例.大肠癌新鲜组织20例,癌旁组织20例,收集临床资料,并分析其与临床病理资料的关系.结果 77例结直肠癌组织中LATS2蛋白表达阳性率为35.1％(27/77),明显低于正常癌旁组织的65％ (13/20)(P＜0.05).免疫组织化学显示LATS2蛋白主要表达在肿瘤细胞质,部分表达于胞核,癌组织中无表达或者低表达.RT-PCR及Western印迹半定量分析显示LATS2在基因及蛋白水平在癌组织与癌旁正常组织也有显著性差异(P＜0.05).结论 LATS2在正常组织中高表达,而在肿瘤组织中表达减低,推测LATS2可能在大肠癌中发挥重要作用.     

Argonaute2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

我国结直肠癌的发病率近年呈明显上升趋势,目前认为结直肠癌的发生、发展是多步骤、多基因畸变的结果,在此过程中可能涉及多个途径的分子改变,如微小核糖核酸(miRNA)通路中的重要通道蛋白argonaute家族.本研究利用高通量组织芯片技术结合免疫组化法检测结直肠癌及正常组织中Argonaute2(EIF2C2)的表达,并初步探讨其表达的临床意义.     

ETS2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨转录因子ETS2（E-twenty six 2）在结直肠癌组织中的表达情况,分析其与结直肠癌患者临床病理参数之间的关系,并评估其临床预后价值。 方法收集新鲜的结直肠癌、癌旁和相应正常组织,以及结直肠癌和癌旁组织的石蜡标本,采用实时荧光定量PCR法检测组织中ETS2 mRNA的表达,免疫组化检测石蜡切片中ETS2蛋白的表达。 结果结直肠癌组织中ETS2 mRNA的表达明显高于癌旁组织和正常组织（P<0.001）,而癌旁组织和正常组织中的ETS2 mRNA表达量差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组化结果显示ETS2在52.07%（63/121）的结直肠癌中表达,而仅在13.04%（6/46）的癌旁组织中表达,两者比较差异有统计学意义（P<0.05）。ETS2表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及MMR状态有关（P<0.05）。ETS2表达与结直肠癌患者术后无进展生存有关（P<0.001）。采用COX多因素回归分析发现,ETS2表达（HR：0.461,95%CI：0.271~0.683,P=0.003）和浸润深度（HR：0.352,95%CI：0.113~0.769,P=0.015）是结直肠癌患者术后无进展生存的独立预后因子。 结论与癌旁组织相比,ETS2在结直肠癌组织中的转录和翻译水平都过表达,ETS2是预测结直肠癌患者术后无进展生存的潜在标记物。     

Fibulin-2在结直肠癌中的表达及其对肿瘤侵袭转移的影响

背景:结直肠癌(CRC)是我国乃至全球的高发恶性肿瘤之一,肿瘤转移为患者的主要死亡原因,但目前尚缺乏足够的能有效预测转移发生的分子标志物.目的:分析fibulin-2(FBLN2)在CRC中的表达,探讨其对肿瘤侵袭、转移能力的影响和可能的作用机制.方法:从SRA数据库提取PRJNA218851数据集的生物信息学资料,筛...     

COX-2和MMP-2在结直肠癌中的表达及其意义

背景:结直肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,环氧合酶-2(COX-2)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)抑制剂的联合应用可能对结直肠癌浸润、转移具有协同抑制作用。目的:观察COX-2和MMP-2在结直肠癌中的表达,探讨两者在结直肠癌发生、发展中的作用。方法:收集2009年3月-2013年8月82例非遗传性结直肠癌患者的手术切除标本,采用免疫组化SP法检测COX-2和MMP-2表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果:结直肠癌组织中COX-2和MMP-2的阳性表达率分别为64.6%和65.9%,两者阳性表达与肿瘤临床分期、浸润深度、淋巴结转移相关(P0.05),但与性别、年龄、肿瘤大小以及分化程度无关。COX-2和MMP-2阳性表达具有协同效应(P0.05)。结论:COX-2和MMP-2在结直肠癌中高表达,且具有协同效应,共同促进结直肠癌的发生和发展。     

健脾复方对结直肠癌细胞增殖及侵袭迁移的影响

目的探讨健脾复方对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移及MALAT1表达的影响。方法通过CCK-8法检测健脾复方对LoVo细胞增殖的影响;根据CCK-8法检测结果,设立空白对照组和健脾复方高、中、低浓度组,然后采用Transwell实验检测健脾复方对LoVo细胞侵袭和迁移能力的影响;采用RT-PCR检测健脾复方对LoVo细胞长链非编码RNA MALAT1表达的影响。结果 LoVo细胞的生长抑制率与健脾复方浓度呈正相关;侵袭实验显示与对照组相比,到达侵袭小室底部的LoVo细胞数量随着健脾复方浓度增高而减少;Transwell迁移实验显示健脾复方能够抑制LoVo细胞的迁移能力,并且随着健脾复方浓度的增高,其迁移能力显著降低。健脾复方亦能对MALAT1表达起抑制作用。结论健脾复方可抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移并降低MALAT1表达,其抑制LoVo细胞侵袭转移的机制可能与降低MALAT1表达有关。     

PTEN和Cdx2在溃疡性结肠炎和结直肠癌中的表达

PTEN具有磷酸酶活性，能调控细胞的增殖、迁移和凋亡。Cdx2是一种肠道特异性转录因子，在调节肠上皮细胞分化、增殖中起关键作用。近年溃疡性结肠炎（UC）与结直肠癌之间的关系日益受到关注。目的：观察UC和结直肠癌组织中PTEN和Cdx2的表达，探讨两者在UC癌变进程中的作用。方法：在上海瑞金医院1997年1月-2007年10月诊断的UC患者中收集经病理检查确诊者的蜡块标本，其中UC组17例，UC相关结直肠癌组7例，另收集非UC相关结直肠癌标本35例和正常肠黏膜标本15例，以免疫组化方法检测PTEN和Cdx2表达。结果：PTEN和Cdx2在正常结直肠组织中基本呈阳性表达．阳性率分别为93.3％和100％，UC组织两者表达阳性率显著降低，均仅为6.7％。UC相关结直肠癌组PTEN和Cdx2表达阳性率显著低于非UC相关结直肠癌组（PTEN：28．6％对83．9％，Cdx2：42．9％对90．3％，P〈0．01）。结论：UC与结直肠癌之间可能存在相关性。PTEN和Cdx2在调控肠上皮分化、增殖的过程中可能有相似的调节点或具有协同作用，两者可能共同参与了对UC癌变进程的调控。     

CTHRC1对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的观察胶原三股螺旋重复蛋白(CTHRC)1对结直肠癌HT29细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测结直肠癌组织中CTHRC1的表达情况。采用电穿孔转染法,将pc DNA3.1-CTHRC1和CTHRC1 si RNA转染HT29细胞中,通过克隆形成实验检测CTHRC1对HT29细胞增殖的影响;通过伤口愈合实验和Boyden小室检测CTHRC1对HT29细胞迁移和侵袭能力的影响。结果 RT-PCR和免疫组织化学检测显示,CTHRC1在结直肠癌组织中的表达显著高于正常对照组织。增殖、迁移和侵袭实验结果显示,对照组、转染CTHRC1和转染CTHRC1 si RNA的结直肠癌HT29细胞克隆形成数分别为(147.34±15.86)、(234.17±27.86)和(66.03±8.95);伤口宽度百分比分别为(1.00±0.00)、(0.37±0.12)和(1.48±0.35);发生侵袭的细胞数分别为(201.24±33.54)、(415.36±45.63)和(96.13±15.46);转染CTHRC1可显著促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力;而转染si-CTHRC1可显著抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论 CTHRC1可明显增加HT29细胞增殖、迁移和侵袭能力,这可能是CTHRC1参与结直肠癌发生发展的机制。     

CCR2在结直肠癌的表达及意义

目的探讨大肠癌中CCR2蛋白的表达与肿瘤病理特征的关系。方法用免疫组织化学方法检测148例大肠癌患者手术切除大肠癌组织及66例癌旁对照组织中CCR2表达情况。结果大肠癌组织中CCR2的表达明显高于大肠正常组织（P〈0．01）,并且其表达强度与DukeC＋D期、肿瘤淋巴结转移、远处脏器转移以及较低的分化程度有关（各组中P〈0．01,差异具有统计学意义）;与年龄、性别、肿瘤发生部位以及肿瘤大小无关。结论CCR2的过表达在大肠癌发生、发展及转移的过程中可能发挥一定作用。CCR2可以作为大肠癌分化程度较低且伴淋巴结转移、肝转移的预测指标之一。     

干预膜联蛋白A4表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响

目的探讨干预膜联蛋白(ANX) A4表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、黏附、剥脱和侵袭的影响及机制。方法采用RT-PCR和Western印迹检测结直肠癌HCT116细胞和正常结肠上皮NCM460细胞中ANXA4 m RNA和蛋白表达情况。将HCT116细胞分为Control组(未转染)、NC组(转染阴性对照)和ANXA4组(转染si RNA-ANXA4),脂质体lipofectamineTM2000转染HCT116细胞,RT-PCR检测各组细胞中ANXA4 m RNA表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测HCT116细胞增殖能力,黏附实验、剥脱实验和侵袭实验分别检测HCT116细胞的黏附能力、剥脱能力和侵袭能力,Western印迹检测ANXA4、埃兹蛋白(Ezrin)、骨桥蛋白(OPN)和细胞表面黏附分子(CD44v6)蛋白的表达。结果 HCT116细胞中ANXA4 m RNA和蛋白表达水平均显著低于NCM460细胞;与Control组相比,干扰ANXA4表达后,HCT116细胞的增殖能力受到抑制,同时黏附能力、剥脱能力和侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(P0. 05); ANXA4组细胞中ANXA4 m RNA表达水平及ANXA4、Ezrin、OPN和CD44v6蛋白表达水平较Control组均显著减弱,差异有统计学意义(P0. 05);而NC组与Control组各指标差异无统计学意义(P0. 05)。结论干预ANXA4表达能够抑制结直肠癌HCT116细胞的增殖、黏附、剥脱和侵袭能力,其分子机制可能与下调Ezrin、OPN和CD44v6蛋白表达有关。     

miR-199对结直肠癌细胞增殖、侵袭的影响及机制

目的 探讨微小RNA-199(miR-199)对结直肠癌细胞增殖、侵袭的影响及其作用机制。方法 常规培养人正常结肠上皮细胞系（HCoEpiC细胞）、结直肠癌细胞系（LOVE、SW620、SW480、HT29、DLD-1细胞）,用实时定量PCR法检测细胞中miR-199表达。将SW620细胞随机分为miR-199过表达组、阴性对照组及miR-199+转铁蛋白受体1(TFR1)共表达组（miR-199mimics+TFR1组）,分别将miR-199mimics、mimic-NC、miR-199mimics+TFR1过表达质粒转染至细胞内;另取部分未转染细胞作为空白对照组。实时荧光定量PCR法检测TFR1 mRNA表达,MTT实验检测细胞增殖能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测TFR1蛋白表达,生物学软件TargetScan及双荧光素酶报告基因实验分析miR-199的靶基因。结果 人结直肠癌细胞系中miR-199相对表达量均低于人结肠上皮细胞系（P均<0.05）,且SW620细胞中miR-199相对表达量最低,故选SW620细胞为实验...     

hMSH2和hMSH6蛋白在散发性结直肠癌中的表达及意义

目的研究广东地区散发性结直肠癌患者h MSH2与h MSH6蛋白表达情况及其与临床特征的关系。方法采用免疫组化法检测了100例广东地区散发性结直肠癌患者的癌组织h MSH2与h MSH6蛋白表达情况。结果 h MSH2、h MSH6蛋白表达缺失率分别为26.0%和11.0%,两者共同表达缺失率为9.0%;h MSH2蛋白缺失患者与阳性表达患者相比,在年龄、肿瘤部位方面存在显著差异(P0.01);h MSH6蛋白缺失患者与阳性表达患者在性别、肿瘤部位方面存在显著差异(P0.05);h MSH2蛋白和h MSH6蛋白表达呈正相关性(r=0.447,P0.05)。结论 h MSH2与h MSH6蛋白在广东地区散发性大肠癌中有一定比例的缺失,且与肿瘤发生部位、性别、年龄存在相关性,错配修复基因的突变可能参与了肿瘤发生的启动阶段。