雷公藤多甙对支持细胞分泌蛋白和间质细胞LH／CG受体蛋白转录水平的影响

本实验通过给Ｗｉｓｔａｒ成年雄性大鼠灌服不同剂量的雷公藤多甙（ＧＴＷ），检测大鼠睾丸内支持细胞（ＳＣ）雄激素结合蛋白（ＡＢＰ）、硫酸化糖蛋白－２（ＳＧＰ－２）和间质细胞膜上黄体生成素受体（ＬＨ／ＣＧ－Ｒ）在转录水平上的变化，进一步探讨ＧＴＷ的雄性抗生育机制。雄性大鼠服ＧＴＷ剂量分为每日３０ｍｇ／ｋｇ共３５ｄ（组Ｉ），与服ＧＴＷ每日１０ｍｇ／ｋｇ共４９ｄ（组Ⅱ）。结果表明：两实验组中ＳＣ分泌蛋白ＡＢＰ与ＳＧＰ－２ｍＲＮＡ水平与对照组相比均有升高，并与喂服ＧＴＷ剂量呈正相关，ＡＢＰ的两种ｍＲＮＡ１．７ｋｂ与２．３ｋｂ）中１．７ｋｂｍＲＮＡ在实验组中呈升高趋势，而２．３ｋｂｍＲＮＡ基本无变化。分析间质细胞的ＬＨ／ＣＧ－ＲｍＲＮＡ变化发现，其１．２ｋｂｍＲＮＡ在实验组中有升高，而４．４ｍＲＮＡ变化不大。同时，对上述变化的机理进行了讨论。     

胆碱能受体不同亚型在介导孤束核及疑核神经元兴奋中的作用

向含有孤束核中央亚核（ＮＴＳｃ）、疑核（ＡＭＢｃ）及网状小细胞核（ＺＩＲＰ）的Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠脑薄片的ＮＴＳｃ表面压力注射毒蕈碱（ｍｕｓｅａｒｉｎｅ）１～２ｐｍｏｌ可引起ＡＭＢｃ神经元产生节律性兴奋性突触后电位（ＥＰＳＰ），注入６－氰基－７－硝喹啉－２，３－双酮（６－ｃｙａｎｏ－７－ｎｉｔｒｏｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ－２，３－ｄｉｏｎｅＣＮＱＸ）２μｍｏｌ／Ｌ及犬尿酸（ｋｙｎｕｒｅｎａｔｅ）１ｍｍｏｌ／Ｌ可阻断该ＥＰＳＰ；由疑核引导的神经元自发性电活动及刺激ＺＩＲＰ在ＡＭＢｃ引起的ＥＰＳＰ可被二氢－β－刺桐若定（ｄｉｈｙｄｒｏ－β－ｅｒｙｔｈ－ｒｏｉｄｉｎｅ）１～５ｐｍｏｌ抑制而被毒扁豆碱（ｐｈｙｓｏｓｔｉｇｍｉｎｅ）１０μｍｏｌ／Ｌ加强。结果表明，在孤束核－疑核传导通路中，疑核神经元的节律性活动来自孤束核中央亚核胆碱能Ｍ受体介导的兴奋，而网状小细胞核神经元向疑核的投射则通过胆碱能Ｎ受体而发挥作用。     

急性白血病Bcl-2反义寡核苷酸基因治疗的实验研究

目的选用２０ｎｔＢｃｌ－２反义硫代磷酸寡核苷酸（Ａｓ－Ｐｓ－ＯＤＮ，ＡＳＰＯ），并以其正义寡核苷酸（ＳＰＯ）为对照做如下问题探讨：（１）普通剂量（５～２０μｍｏｌ）ＡＳＰＯ对ＨＬ６０细胞、正常及缺铁性贫血患者骨髓细胞及急性白血病病人骨髓细胞或外周白血病细胞（幼稚细胞≥８５％）的作用；（２）大剂量（１６０μｍｏｌ）正义或反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞作用的特点，并通过ＡＳＰＯ引起ＨＬ６０细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达变化和ＳＰＯ对ＨＬ６０细胞毒性的变化，寻找可能的最佳效应剂量和最小毒性剂量；（３）ＡＳＰＯ联合化疗药物对ＨＬ６０细胞和原代急性白血病细胞的作用。方法台盼蓝拒染试验和克隆培养测定细胞的生长能力；免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测Ｐ２６Ｂｃｌ－２蛋白表达，ＲＴ－ＰＣＲ法检测Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ（Ｂｃｌ－２／β－ａｃｔｉｎ）相对水平；光、电镜下观察凋亡细胞形态，吖啶橙染色及流式细胞仪检测细胞凋亡率，ＤＮＡ提取及电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ降解片段的形成；ＭＴＴ法检测ＰＳ－ＯＤＮ及化疗药物的细胞毒作用。结果（１）普通剂量的ＡＳＰＯ即能降低ＨＬ６０细胞及白血病细胞Ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达，并抑制ＨＬ６０细胞及１８／２０例白血病细     

卡托普利抑制自发性高血压大鼠左心室肥厚与血管紧张素Ⅱ及原癌基因c－myc，c－fos表达的关系

目的高血压左心室肥厚是心肌细胞肥大、间质细胞（主要是成纤维细胞）增生和胶原堆积的结果，这一病理改变与心脏局部肾素－血管紧张素系统和某些癌基因的表达密切相关。本文探讨自发性高血压大鼠左心室肥厚与心肌细胞及成纤维细胞的局部血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）及原癌基因ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓ表达的关系，以及卡托普利逆转左心室肥厚的可能机理。方法雄性ＳＨＲ大鼠（ｎ＝４３）从宫内期开始给予卡托普利治疗（１００ｍｇ／ｋｇ·ｄ－１），到１６周停药，处死。性别、年龄配对的未治疗ＳＨＲ（ｎ＝３１）和ＷＫＹ大鼠（ｎ＝３２）作对照。测定收缩压（ＳＢＰ）、心率（ＨＲ）、左室重（ＬＶＭ）与体重（ＢＷ）比、左心室ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达（ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ）、右心室心肌细胞与成纤维细胞的ｃ－ｍｙｃ蛋白、ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＡｎｇⅡ表达（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ，免疫组化）。结果卡托普利早期治疗显著降低ＳＨＲ１６周时的ＳＢＰ（１３８．４１±１８．０１ｍｍＨｇｖｓ１９３．２２±１９．０２ｍｍＨｇ，Ｐ＜０．０５），抑制左心室肥厚形成［ＬＶＷ／ＢＷ（ｍｇ／ｇ），２．６１±０．２０ｖｓ３．５９±０．３５，Ｐ＜０．０５］，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达（随     

体外鼠脑星形胶质细胞损伤后c-fos蛋白、GFAP及其mRNA的动态表达

研究ｃ－ｆｏｓ蛋白、ＧＦＡＰ—ｍＲＮＡ和ＧＦＡＰ在鼠脑星形胶质细胞（ａｓｔｒｏｃｙｅ，ＡＳ）损伤后反应性星形胶质化时的动态变化。用ＡＳ原代培养技术建立体外ＡＳ机械损伤模型．并结合应用免疫组织化学和原位杂交方法．结果：（１） ｃ－ｆｏｓ蛋白于损伤后 ４５ ｍｉｎ即有阳性表达，伤后 ２ ｈ消失； （２损伤边缘的 ＡＳ于损伤后 ６ ｈ开始表达 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ， １ｄ达高峰，３ ｄ则在损伤边缘少数 ＡＳ中可检出 ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ；（３）损伤后 １ｄ，ＧＦＡＰ表达明显增强，胞体肥大，粗大突起伸向损伤区形成反应性星形胶质化。结论：（ｌ） ＡＳ受损后原癌基因 ｃ－ｆｏｓ首先被激活，ｃ－ｆｏｓ蛋白呈－过性的表达，参与调节ＡＳ的激活；（２）ＡＳ损伤后，ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ的转录增加，ＧＦＡＰ表达增强是由于在转录水平上ＧＦＡＰ－ｍＲＮＡ表达增强的结果；（３）反应性星形胶质化是ＡＳ的自身特性，以ＡＳ肥大为主，ＡＳ受损后，原癌基因ｃ－ｆｏｓ的蛋白参与调节ＡＳ激活的确切机制尚待阐明。     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织NOS基因表达的变化

为探讨一氧化氮（ＮＯ）在缺氧性肺动脉高压（ＨＰＨ）发病中的作用，观察了不同时间（８小时～２８天）缺氧后大鼠肺动脉平均压（（ｍＰＡＰ）、肺组织ＮＯ合成酶（ＮＯＳ）基因ｍＲＮＡ表达及ｃＧＭＰ含量（血浆、肺组织）的变化及其相互关系。结果显示：缺氧８小时～２８天，ｍＰＡＰ逐渐升高，而ｃＧＭＰ含量随缺氧时间延长而呈下降趋势，ｍＰＡＰ与ｃＧＭＰ含量变化呈明显负相关；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ和斑点印迹杂交表明ＮＯＳ基因ｍＲＮＡ转录水平随缺氧时间的延长而呈下降趋势，而内参照β－ａｃｔｉｎ基因ｍＲＮＡ表达无明显变化。提示缺氧抑制了ＮＯＳ基因表达，ＮＯ释放减少，可能是介导ＨＰＨ发生、发展的重要机理。     

白介素—1受体相关激酶—2和磷脂酰肌醇3—激酶协同调控白 …

目的 研究白介素１受体相关激酶２（ＩＲＡＫ－２）和磷脂酰肌醇－３－激酶（ＰＩ３－激酶）在白介素－１（ＩＬ－１）诱导核因子－ＫＢ（ＮＦ－ＫＢ）活化中的作用。方法 Ｌｉｐｏｆｃｃｔｉｎ介导反义ＩＲＡＫ－２寡核苷酸或反义ＰＩ－３－激酶寡核苷酸转染ＨｅｏｐＧ２细胞后,用逆转录ＰＣＡＫ－２ｍＲＮＡ和ＰＩ－３－激酶ｍＲＮＡ表达水平,以Ｓａｎｄｗｉｃｈ ＥＬＩＳＡ法检测ＮＦ－ＫＢ的活化。结果 （１）反义ＩＲＡＫ     

大鼠自发性高血压和心肌肥厚时热休克蛋白70基因表达的研究

本工作采用热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）核酸分子杂交方法，检测了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）与其正常对照（ＷＫＹ）大鼠离体培养的主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）受热刺激后以及大鼠腹主动脉缩窄后心肌肥厚时左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的水平，并对ＳＨＲ和ＷＫＹ肝组织基因组ＤＮＡ进行了限制性酶切片断长度多态性（ＲＦＬＰ）分析。结果表明：ａ．３７℃培养的ＳＨＲＡＳＭＣ及整体ＳＨＲ肝组织ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的基础表达水平均低于ＷＫＹ大鼠，ＳＨＲＡＳＭＣ受热刺激（４２℃１５ｍｉｎ）后２ｈ，ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达增加的程度明显大于ＷＫＹ大鼠。ｂ．大鼠腹主动脉缩后造成左室压力超负荷，左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ在压力超负荷４ｈ时已明显升高，１ｄ、２ｄ、１ｗ均维持在高水平，１ｗ后逐渐降低。ｃ．ＳＨＲ和ＷＫＹ鼠肝组织基因组ＤＮＡ经ＢａｍＨＩ酶切后，ＳＨＲＨＳＰ７０基因缺失一条约５．６ｋｂ的片段。提示：ＳＨＲＡＳＭＣ对热敏感性增加；压力负荷增加早期，左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达明显增加；ＨＳＰ７０基因结构异常可能与高血压发生有关。     

睾丸间质细胞胰岛素样生长因子－ⅠmRNA表达的调控

作者报道胰岛素样生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）ｍＲＮＡ在大鼠睾丸中的基因表达。用１５％～６０％Ｐｅｒｃｏｌｌ密度梯度离心，可将粗制间质细胞分成三条带，ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ主要位于富含Ｌｅｙｄｉｇ细胞的组分（带３）中，带１和带２组分几乎不含ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ。Ｌｅｙｄｉｇ细胞ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ具有碱基从０．８～７．５ｋｂ的多种型，在２５～５５日龄大鼠中均存在ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ，用Ｋｌｉｎｅｆｅｌｔｅｒ等方法高度纯化Ｌｅｙｄｉｇ细胞，发现大多数ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡｆｔ于这些Ｌｅｙｄｉｇ细胞中，而在整个睾丸组织或其它间质细胞检测不到ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ。大鼠予以生长激素（ＧＨ）后，Ｌｅｙｄｉｇ细胞中ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ增加２倍以上，提示Ｌｅｙｄｉｇ细胞中的ＩＧＦ－ⅠｍＲＮＡ亦依赖ＧＨ，Ｌｅｙｄｉｇ细胞产生的ＩＧＦ－Ⅰ在睾丸中可能具有自分泌和旁分泌作用。     

大鼠支持细胞生后发育过程中卵泡刺激素受体mRNA水平的动态观察

本研究发现大鼠出生后２～６０ｄ，睾丸支持细胞卵泡刺激素受体（ＦＳＨＲ）ｍＲＮＡ水平处于波动状态。生后早期（２～５ｄ），睾丸ＦＳＨＲｍＲＮＡ水平轻度增加而后下降，在青春期前（１０～１５ｄ）维持较低水平。进入青春期后，睾丸ＦＳＨＲｍＲＮＡ水平再次升高，尤以生后２０～２５ｄ上升迅速，于生后２５ｄ达高峰。４０ｄ之后睾丸ＦＳＨＲｍＲＮＡ水平重又出现增加趋势。     

Serum Hormone and Cellular Proliferation Changes of Testis in Rats with Experimental Orchitis Induced by Lipopolysaccharide

Objective To explore the changes of serum male hormone, androgen binding protein (ABP) expression as well as the proliferation of testicular cells in rats with experimen- tal orchitis induced by bacterial lipoplysaccharide (LPS) in vivo and to elucidate the putative mechanism of LPS on spermatogenesis of testis. Methods The serum testosterone (T), luteinizing hormone (LH) levels were detected with magnetic enzyme immunoassay. The expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and ABP expression at mRNA level of testis were studied with immuno- histochemical staining and in situ hybrydization respectively. Results The serum T level in rats with experimental orchitis was significantly higher than that in the rats of control (P<0.05) and ABP mRNA expression in Sertoli cells of testis was significantly increased (P<0.05) while PCNA expression in seminiferous epithelium in experimental rats significantly was decreased as compared with that of the control (P<0.05). No significant change in serum LH level was seen between ex- perimental orchitis and control groups (P>0.05). Conclusion The serum level of T and ABP expression significantly increased in rats with experimental aspecific orchitis induced by LPS, and at the same time inhibition of cellular proliferation of seminiferous epithelium can be detected, which may be the possible mechanism of male infertility in inflammatory process.     

大豆异黄酮对大鼠睾丸支持细胞的影响

目的：研究大豆异黄酮对体外培养的大鼠睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs) 增殖以及卵泡雌激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)、抑制素α亚基(inhibin α,INHα)、抑制素βB亚基(inhibin βB,INHβB)、雄激素结合蛋白(androgen binding protein,ABP)、转铁蛋白(transferrin,Tf)和波形蛋白(vimentin) mRNA水平的影响。方法：体外培养大鼠SCs,用0.03,0.3,3及30 μmol/L的大豆黄酮(daidzein,Dai)和0.05,0.5,5及50 μmol/L的染料木黄酮(genistein,Gen)处理细胞,MTT检测细胞增殖,实时荧光定量PCR检测FSHR,INHα,INHβB,ABP,Tf和vimentin mRNA的相对表达量。结果：与对照组相比,其余各组细胞增殖和INHβB,ABP mRNA相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05),Dai (0.3及3 μmol/L)和Gen (0.05 μmol/L)组INHα mRNA表达增加,Dai (30 μmol/L)和Gen所有浓度组的FSHR mRNA表达下降,Dai (30 μmol/L)和Gen (5 μmol/L和50 μmol/L)组Tf mRNA表达下降,Dai (3 μmol/L及30 μmol/L)和Gen (50 μmol/L)组vimentin mRNA表达下降。结论：大豆异黄酮可能通过抑制SCs重要功能蛋白的mRNA转录而影响其功能发挥,从而对雄性生殖系统产生负面影响。     

大鼠胫神经损伤腓肠肌组织中Myostatin的表达变化

目的：分析myostatin（MSTN）在大鼠胫神经夹伤后腓肠肌失神经萎缩与神经再支配过程中的表达变化，探讨myostatin在失神经肌萎缩过程中的可能作用。方法：建立大鼠胫神经夹伤模型；采用RT—PCR法检测失神经与神经再支配不同时FB3段腓肠肌中myostatin mRNA含量。结果：失神经支配早期，腓肠肌myostatin mRNA水平迅速上升，在第2周达到高峰，随后表达又逐渐下降，至第4周与正常组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：成功建立大鼠胫神经夹伤模型，腓肠肌失神经肌萎缩过程中，myostatin基因表达有明显变化．提示myostatin在失神经肌萎缩过程中扮演重要角色。     

神经生长因子基因在大鼠心肌组织中的表达

目的：观察神经生长因子（NGF）基因在生后不同时期大鼠心肌组织中的表达,方法：采用RT－PCR方法,半定量分析生后1天、15天、30天、60天、120天,360天大鼠心肌组织中NGFmRNA含量。结果：大鼠生后1天,心肌组织即NGFmRNA的表达;随着生后发育过程,表达量逐步增加,30天时达峰值;此后随鼠龄的增加,表达量呈级慢下降趋势,结论：大鼠心肌组织中NGFmRNA的表达量,随鼠龄的增加,而呈现出先升后降的动态变化趋势。     

Rab13通过影响PKA活性调节occludin及F-actin在大鼠血睾屏障的分布

目的 探讨Rab13-PKA通路对大鼠血睾屏障功能的调节。方法 首先构建靶向大鼠Rab13的shRNA载体,通过大鼠睾丸内注射转染Rab13 shRNA,Western印迹检测Rab13体内沉默效果及沉默后BTB相关连接蛋白表达改变,放射自显影检测睾丸组织内PKA活性变化,睾丸组织冰冻切片免疫荧光染色及鬼笔环肽染色分别观察occludin及肌动蛋白丝在生精上皮的分布。结果 Rab13 shRNA睾丸内转染后Rab13表达量与对照shRNA转染相比下降约70%（P<0.01）,而BTB相关连接蛋白表达无变化;Rab13沉默后PKA活性与对照组相比有明显升高（P<0.01）;免疫荧光结果表明,Rab13沉默后occludin在VIII期生精上皮的分布显著高于对照组,而在其他期别生精上皮中则无显著变化;鬼笔环肽染色显示Rab13沉默后F-actin在BTB处的分布明显增强;此外,occludin及F-actin的分布变化可被PKA抑制剂H89所拮抗。结论 Rab13可通过影响PKA活性调节大鼠BTB紧密连接蛋白occludin及F-actin的分布,从而参与调节BTB功能。     

HSL表达和活性与豚鼠血清睾酮水平的相关性

目的研究不同发育阶段的豚鼠睾丸和附睾组织中激素敏感性脂肪（hormone-sensitive lipase,HSL）的表达及活性与生殖能力成熟的关系。方法取不同天龄阶段的豚鼠18只分为3组：6d龄幼鼠组;16d龄青春期豚鼠组;70d龄成年豚鼠组。用RT-PCR方法检测睾丸和附睾组织中HSL的mRNA表达,37℃下比色法对酶活性进行测定,放免法测定血清中睾酮水平,HE染色睾丸和附睾组织切片进行组织形态学分析。结果发育阶段的豚鼠随着天龄的增加,睾丸特异性HSL mRNA表达也增加（P〈0.05）,酶活性增强（P〈0.05）,血清中睾酮水平升高（P〈0.01）。组织病理学显示16d的豚鼠睾丸和附睾中开始出现精子,70d精子发育成熟。HSL的表达和酶活性与血清睾酮水平高度相关（r=0.75,P〈0.01;r=0.96,P〈0.01）。结论发育成熟豚鼠睾丸和附睾组织有较强的HSL表达及活性,HSL与睾丸的发育成熟以及精子发生可能存在相关关系。     

抗卵泡刺激素自身抗体引起大鼠睾丸生精细胞凋亡

目的：研究抗卵泡刺激素（FSH）自身抗体大鼠模型睾丸生精功能低下的可能机制.方法：SD大鼠（21d龄,30只）,随机分为实验组和对照组,每组各15只.实验组用18肽-KLH免疫,对照组用KLH免疫,每隔2周加强免疫1次,共7次,直至实验结束.分别于免疫第77、91及105 d时心脏取血处死实验组和对照组大鼠各5只,收集血清.采用ELISA法检测模型大鼠血清FSH、黄体生成素（LH）和抑制素B水平,并以Rpl19为内参照,用荧光定量PCR法检测睾丸内Bax mRNA水平,同时用末端标记技术（TUNEL）检测睾丸生精细胞凋亡情况.结果：免疫后第77和91 d的实验组大鼠血清FSH水平显著低于对照组（P＜0.05）,免疫105 d后,实验组大鼠FSH水平有所回升.与对照组相比,实验组大鼠血清抑制素B水平均显著降低（P＜0.05）.血清LH水平在两组大鼠间无显著差异.免疫后第77、91及105 d的实验组大鼠睾丸内Bax mRNA水平,分别为对照组的2.15、3.77和1.89倍,TUNEL检测结果也显示实验组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数显著高于对照组.结论：抗FSH自身抗体可能通过与FSH形成抗原抗体免疫复合物,以降低外周血中FSH浓度,进而激活Bax相关凋亡通路,诱导生精细胞凋亡,导致模型大鼠睾丸生精功能低下.     

大鼠肝慢性损伤后血浆白蛋白mRNA和丙氨酸转氨酶及羟脯氨酸的变化

目的：探讨大鼠肝脏纤维化损伤后血浆白蛋白mRNA水平、丙氨酸转氨酶、羟脯氨酸的活性变化用于评估早期肝损伤的可能性。方法：建立大鼠肝纤维化模型,在不同时间分离血清,采用实时定量多聚酶链反应技术测量血浆中白蛋白的mRNA水平;生化检测血浆丙氨酸转氨酶（ALT）、羟脯氨酸（Hyp）活性。结果：血浆中白蛋白mRNA水平在肝纤维化早期显著增加,丙氨酸转氨酶、羟脯氨酸在肝纤维化早期变化不明显。结论：在大鼠慢性肝损伤早期检测血浆中白蛋白mRNA比丙氨酸转氨酶、羟脯氨酸活性更具敏感性。     

心脏缺血再灌注损伤后一氧化氮合酶的变化

目的:研究大鼠心脏缺血再灌注损伤(IRI)过程中一氧化氮合酶(NOS)的变化规律及其作用.方法:制作SD大鼠心脏IRI动物模型,用同位素法测定正常及IRI心组织的NOS活性;用Western印迹和逆转录PCR法分析eNOS和iNOS在IRI过程中蛋白和基因表达的变化.结果:心脏eNOS活性、蛋白和mRNA表达水平,在缺血再灌注2～6 h后均增高,3天后降低,21天后逐渐恢复到正常水平.心脏iNOS活性、蛋白和mRNA表达水平,在缺血再灌注12 h后开始表达,3天达高峰,然后逐渐降至正常水平.结论:单纯缺血并不引起NOS活性的明显变化,再灌注损伤使NOS的mRNA表达增加,酶的合成增多,活性增高.