多发性骨髓瘤患者化疗后感染病原菌及Th17/Treg与细胞因子

目的探讨多发性骨髓瘤患者化疗后感染病原菌及辅助型T淋巴细胞/调节性T淋巴细胞(Th17/Treg)与细胞因子。方法选择核工业四一六医院血液风湿科2016年3月-2019年9月收治的多发性骨髓瘤化疗后感染患者60例作为感染组,选择同期收治的多发性骨髓瘤化疗后未感染患者40例纳入未感染组。对感染组患者感染部位及病原菌进行分析,检测两组患者外周血Th17/Treg、白细胞介素-17(IL-17)、IL-23、干扰素-γ(IFN-γ),对感染组不同分期患者Th17、Treg、Th17/Treg、IL-17、IL-23、IFN-γ水平进行比较。结果多发性骨髓瘤患者化疗后以呼吸道感染为主(71.67%);共培养分离病原菌10株,其中革兰阴性菌4株,革兰阳性菌2株,真菌(白假丝酵母)4株;感染组Th17、Th17/Treg、IL-17、IL-23分别为(2.09±0.61)%、1.77±0.29、(83.81±24.25)pg/ml、(43.51±16.34)pg/ml高于未感染组,Treg、IFN-γ分别为(1.18±0.35)%、(20.81±8.94)pg/ml低于未感染组(P<0.05);三组患者Th17、Treg、Th17/Treg、IL-17、IL-23、IFN-γ总体差异具有统计学意义(P<0.05),其中III期患者Th17、Th17/Treg、IL-17、IL-23分别为(2.41±0.31)%、(2.56±0.23)、(89.86±17.28)pg/ml、(47.61±12.19)pg/ml高于I期及II期患者,Treg、IFN-γ分别为(0.94±0.18)%、(14.29±4.97)pg/ml低于I期及II期患者(P<0.05);II期患者Th17、Th17/Treg、IL-17、IL-23高于I期患者,Treg、IFN-γ则低于I期患者(P<0.05)。结论多发性骨髓瘤患者化疗后以呼吸道感染居多,病原菌总体分布松散,且随临床分期增加Th17/Treg的失衡也逐渐严重,临床应加强病原培养及针对性用药。     

外周血Th17/Treg细胞平衡与儿童口腔溃疡严重程度的相关性分析

目的 探讨外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡与儿童口腔溃疡(OU)严重程度的关系。方法 选择浙江中医药大学附属广兴医院2018年5月—2020年7月收治的72例OU患儿进行研究(OU组),并选取同期75例体检健康儿童进行对照分析(健康组)。利用流式胞仪测定外周血Treg细胞、Th17细胞百分比，计算Th17/Treg细胞比值；利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测定叉头/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)mRNA表达水平，计算RORγt/Foxp3比值；比较不同严重程度OU患儿外周血Th17、Treg、Th17/Treg及血清RORγt、Foxp3 mRNA水平、RORγt/Foxp3比值；Pearson法分析OU患儿外周血Th17、Treg、Th17/Treg水平与血清RORγt、Foxp3 mRNA水平、RORγt/Foxp3比值，外周血Th17细胞百分比与Treg细胞百分比，及血清RORγt mRNA水平与Foxp3 mRNA水平的相关性。结果 OU组患儿外周血Th17细胞百分比、Th17/Treg细胞比值...     

人巨细胞病毒感染与不明原因反复胚胎种植失败患者Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的关系

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与不明原因反复胚胎种植失败(RIF)患者辅助性T细胞(Th)1/Th2、Th17/调节性T细胞(Treg)型细胞因子表达水平的关系。方法选择2018年1月-2020年1月海南现代妇女儿童医院生殖医学科收治接受IVF-ET助孕的不明原因RIF患者100例作为RIF组,均采用酶联免疫试验法测定HCMV-IgM、HCMV-IgG抗体情况,实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)测定外周血单个核细胞Th17、Treg相关细胞因子ROR-γt、Foxp3 mRNA表达,采血应用酶联免疫法测定白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,计算IFN-γ/IL-10、IL-17/TGF-β1比值,与同期收治移植后成功妊娠女性30例(成功组)进行对照,比较两组上述参数的差别;RIF组按是否发生HCMV感染分为感染组与非感染组,比较感染组与非感染组Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的差异,探究HCMV感染与RIF患者Th1/Th2、Th17/Treg型细胞因子表达水平的关系。结果 RIF组HCMV阳性率29.00%高于成功组3.33%(P0.05);RIF组外周血单个核细胞ROR-γt高于成功组,血IL-17、IFN-γ、IFN-γ/IL-10比值、IL-17/TGF-β1比值高于成功组(P0.05),Foxp3 mRNA及TGF-β1低于成功组(P0.05);感染组ROR-γt mRNA、IL-17、IFN-γ、IFN-γ/IL-10比值、IL-17/TGF-β1比值高于非感染组(P0.05),Foxp3 mRNA、IL-10和TGF-β1低于非感染组(P0.05);HCMV阳性率与Th1/Th2、Th17/Treg均呈正相关(r=0.595、0.640,P0.05)。结论不明原因RIF患者HCMV活动性感染率较高,伴HCMV感染患者Th1/Th2、Th17/Treg比值更高,向Th1、Th17免疫漂移更明显,整体免疫抑制程度更高,可能是造成胚胎移植排斥的重要原因。     

子痫前期阴道念珠菌感染孕妇Th17/Treg及其相关细胞因子的表达

目的 探讨子痫前期(PE)阴道念珠菌感染孕妇Th17/Treg及其相关细胞因子水平的表达。方法 选取2020年3月-2021年3月武汉市洪山区妇幼保健院和武汉市第三医院收治的149例PE患者,按照阴道念珠菌感染情况分为感染组32例、非感染组117例。收集两组的临床资料;检测患者辅助性T17细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)及其特异性转录因子维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA相对表达水平及血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、IL-21、IL-23、转化生长因子-β(TGF-β)各相关细胞因子水平。结果 感染组患者外周血Th17水平及Th17/Treg比值、RORγt mRNA相对表达水平、IL-6、IL-17、IL-21、IL-23及TGF-β水平高于非感染组,而Treg水平、Foxp3 mRNA相对表达水平、IL-10水平低于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 阴道念珠菌感染能影响患者Th17/Treg平衡及相关细胞因子水平的分泌,其与PE可能存在一定关联。     

外周血CD_8~+CD_(28)~- T细胞Foxp3 mRNA表达与老年肺部感染的关系

目的 分析外周血CD_8⁺CD_(28)+CD_(28)^- T细胞叉头框蛋白p3(Foxp3)mRNA表达与老年肺部感染的关系。方法 选择2019年12月-2021年12月乌鲁木齐市友谊医院收治的老年慢性支气管炎患者200例，根据患者是否合并肺部感染分为感染组(n=135)和未感染组(n=65),比较感染组和未感染组患者及不同肺部感染程度患者外周血CD_8- T细胞叉头框蛋白p3(Foxp3)mRNA表达与老年肺部感染的关系。方法 选择2019年12月-2021年12月乌鲁木齐市友谊医院收治的老年慢性支气管炎患者200例，根据患者是否合并肺部感染分为感染组(n=135)和未感染组(n=65),比较感染组和未感染组患者及不同肺部感染程度患者外周血CD_8⁺CD_(28)+CD_(28)^-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平，检测感染组和未感染组患者血清炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)]水平，分析老年肺部感染患者外周血CD_8-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平，检测感染组和未感染组患者血清炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)]水平，分析老年肺部感染患者外周血CD_8⁺CD_(28)+CD_(28)^-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平与血清炎性因子水平、临床肺部感染评分(CPIS)的关系。结果 感染组患者外周血CD_8-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平与血清炎性因子水平、临床肺部感染评分(CPIS)的关系。结果 感染组患者外周血CD_8⁺CD_(28)+CD_(28)^-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平均高于未感染组患者(P<0.05);不同肺部感染程度患者外周血CD_8-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平均高于未感染组患者(P<0.05);不同肺部感染程度患者外周血CD_8⁺CD_(28)+CD_(28)^-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平比较，差异具有统计学意义(P<0.05),中、重度感染组高于轻度感染组(P<0.05),重度感染组高于中度感染组(P<0.05);感染组患者血清IL-6、IFN-γ水平均高于未感染组患者(P<0.05),IL-10、TGF-β1水平均低于未感染组患者(P<0.05);Pearson相关检验结果显示，CD_8-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平比较，差异具有统计学意义(P<0.05),中、重度感染组高于轻度感染组(P<0.05),重度感染组高于中度感染组(P<0.05);感染组患者血清IL-6、IFN-γ水平均高于未感染组患者(P<0.05),IL-10、TGF-β1水平均低于未感染组患者(P<0.05);Pearson相关检验结果显示，CD_8⁺CD_(28)+CD_(28)^-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平与血清IL-6、IFN-γ水平、CPIS评分呈正相关(P<0.05),与IL-10、TGF-β1水平呈负相关(P<0.05)。结论 老年肺部感染患者外周血CD_8-T细胞水平和Foxp3 mRNA表达水平与血清IL-6、IFN-γ水平、CPIS评分呈正相关(P<0.05),与IL-10、TGF-β1水平呈负相关(P<0.05)。结论 老年肺部感染患者外周血CD_8⁺CD_(28)+CD_(28)^-T细胞Foxp3 mRNA表达显著上调，且与肺部感染程度存在密切关系。     

IL-37对变应性鼻炎患者相关细胞因子免疫调控研究

目的探究白介素37(IL-37)在变应性鼻炎(AR)患者外周血单核细胞(PBMCs)的表达水平及对相关细胞因子的免疫调控分析。方法选取120例AR患者作为研究组,另选择同期健康志愿者120例作为对照组,检测各组血清IL-37蛋白及mRNA表达,辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)和Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞百分比及相关细胞因子水平;提取2组PBMCs,并应用浓度为100、200 ng/mL的重组人IL-37蛋白(rIL-37)干预,分析干预前后相关细胞因子水平变化。结果研究组血清IL-37水平及IL-37 mRNA表达均显著低于对照组,Th1细胞、Th17细胞百分比及Th1/Th2比例显著高于对照组,Th2细胞、CD4+CD25+Treg细胞、Foxp3+CD4+CD25+Treg细胞百分比显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组IL-1β、IL-6、IL-17水平显著高于对照组,IL-4、IL-10、IL-27、IFN-γ、TGF-β1水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清IL-37与IL-1β、IL-6、IL-17存在负相关性,与IL-4、IL-10、IL-27、IFN-γ、TGF-β1存在正相关性(P<0.05)。rIL-37干预后,研究组IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IL-27、IFN-γ、TGF-β1各指标变化更加显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。200 ng/mL组干预PBMCs细胞各细胞因子变化水平相较于100 ng/mL组各指标变化更显著(P<0.05)。结论变应性鼻炎患者IL-37表达明显下降,进而影响了Th1/Th2、Th17/Treg细胞平衡,导致抑炎因子水平降低,促炎因子水平升高,在AR发病中具有重要作用。     

卡介苗感染人树突状细胞对miRNA-99b表达和Th17/Treg分化的影响

目的 探讨牛型分枝杆菌减毒活菌—卡介苗(BCG)感染对人树突状细胞(DCs)microRNA-99b(miRNA-99b)表达的影响及对新生儿脐血CD_4~+初始T淋巴细胞分化为Th17/Treg的作用。方法 BCG感染体外培养的人树突状细胞,然后与新生儿脐血CD_4~+初始T淋巴细胞混合培养,qRT-PCR观察人树突状细胞miRNA-99b的表达变化,qRT-PCR检测CD_4~+T淋巴细胞Foxp3、ROR-γt、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)基因转录水平,观察CD_4~+T淋巴细胞分化亚型的改变;ELISA法检测培养上清INF-γ、IL-17和IL-23表达水平。结果 BCG感染后,人树突状细胞miRNA-99b基因表达增加(P<0.001);CD_4~+T淋巴细胞IFN-γ、IL-10基因表达增加(P<0.05),ROR-γt基因表达降低(P<0.05),Foxp3基因转录增加,但差异无统计学意义;感染组培养上清中INF-γ表达水平增加(P<0.001),IL-17和IL-23表达水平均有一定的增加,但差异无统计学意义。结论 结核感染可能通过影响树突状细胞miRNA-99b的表达进而诱导初始CD_4~+T淋巴细胞分化为Th17/Treg的失衡参与结核病的发病过程。     

老年糖尿病患者口腔颌面部感染病原菌特点及Th17/Treg细胞免疫变化

目的探讨老年糖尿病患者口腔颌面部间隙感染(oral and maxillofacial space infection,OMSI)病原学特点及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞免疫的变化。方法选择三亚市人民医院老年科2017年1月-2019年3月收治的老年糖尿病患者142例作为研究对象,根据患者是否发生OMSI分为感染组82例及非感染组60例。分析感染患者病原菌分布及耐药性,分别采用流式细胞术及酶联免疫吸附法检测两组患者外周血中Th17/Treg及白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果感染患者临床标本共检出病原菌87株,其中革兰阳性菌57株,占65.52%,革兰阴性菌30株,占34.48%;检出的主要革兰阳性菌对头孢曲松、头孢噻肟、头孢唑林和氨苄西林耐药率较高;检出的主要革兰阴性菌对左氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素耐药率较高;感染组Th17(17.52±2.18)%、Th17/Treg(3.01±0.24)、IL-17(65.67±18.24)pg/ml、IL-23(42.08±11.39)pg/ml均高于对照组(均P<0.05),Treg(5.83±1.06)%、IFN-γ(18.89±5.22)pg/ml、TGF-β水平(23.24±6.01)pg/ml均低于对照组(P<0.05)。结论老年糖尿病患者口腔颌面部间隙感染病原菌以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血链球菌、普雷沃氏菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,可根据耐药性选用合理抗菌药物,感染患者Th17/Treg失衡,Th17细胞及促炎细胞因子表达升高,Treg细胞及抑炎细胞因子表达降低。     

补肾固冲方治疗原因不明复发性自然流产作用机制的研究

目的:探讨补肾固冲方治疗原因不明复发性流产(URSA)的作用机制。方法:采用病例对照研究方法。URSA患者30例(URSA组),给予补肾固冲方治疗,正常妊娠妇女30例(正常妊娠组)为对照。流式细胞术胞内外双染色法检测两组妇女外周血Th17、Treg亚群分化状态,RT-PCR法检测Th17亚群特异性核转录因子RORγt和Treg亚群特异性核转录因子Foxp3mRNA的转录水平。结果:与正常妊娠组比较,URSA组治疗前外周血Th17亚群比例升高(P=0.008),Treg亚群比例降低(P=0.003),两者比值(Th17/Treg)升高(P=0.001)。与补肾固冲方治疗前比较,治疗后URSA组Th17亚群比例及RORγt mRNA的表达降低(P=0.014,P=0.010);Treg亚群比例及Foxp3mRNA表达升高(P=0.007,P=0.005);Th17/Treg降低(P=0.005);URSA组治疗后与正常妊娠组比较无统计学差异(P=0.759)。相关性分析显示,URSA组治疗后子宫出血天数与Th17亚群比例呈显著正相关(r=0.760,P=0.002),与Treg亚群比例呈负相关(r=-0.540,P=0.009),与Th17/Treg呈正相关(r=0.789,P=0.001)。结论:URSA患者存在Th17/Treg亚群失衡,补肾固冲方通过上调RORγt转录水平、下调Foxp3转录水平,优势诱导Treg亚群分化,逆转Th17/Treg失衡,诱导母胎免疫耐受,进而治疗URSA。     

早产孕妇感染病原特点及外周血Th17/Treg细胞和血清炎性因子变化

目的探讨早产孕妇感染病原特点及外周血辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)细胞和血清炎性因子改变研究。方法选择浙江宁波市鄞州人民医院妇产科2016年3月-2018年12月收治的早产孕妇122例作为研究对象,根据孕妇是否发生感染分为感染性早产组42例和非感染性早产组80例,另随机选择同期非感染性足月分娩孕妇40例作为非感染性足月组。对三组孕妇Th17、Treg、Th17/Treg、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、干扰素-γ(IFN-γ)水平进行比较。结果感染性早产孕妇感染部位以宫内感染为主,感染病原以细菌感染为主;三组Th17、Treg、Th17/Treg、IL-17、IL-23、IFN-γ水平差异具有统计学意义(P0.05);感染性早产组Th17、Th17/Treg、IL-17、IL-23、IFN-γ水平高于非感染性早产组及非感染性足月组,Treg水平低于非感染性早产组及非感染性足月组(P0.001);感染性早产组Th17、Th17/Treg、IL-17、IL-23、IFN-γ水平均随分娩时间的不断提前而升高,Treg水平随分娩时间的不断提前而降低(P0.05)。结论早产孕妇合并感染发生存在明显的Th17/Treg免疫失衡,监测其细胞水平对于感染孕妇发生早产具有一定的预测价值。