华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达情况的影响

目的:探讨华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达的影响。方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型,造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,顺铂组,华蟾素注射液低、高剂量组。采用荧光定量RT-PCR方法检测华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达的影响。结果:华蟾素高剂量组、顺铂(DDP)组的抑瘤率分别为41.35%、53.85%,具有明显的抑制肿瘤生长作用。与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肿瘤组织中的Fas、FasL mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。而华蟾素高剂量组、DDP组能促进肝癌小鼠肿瘤组织中的Fas mRNA表达升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),同时降低FasL mRNA表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:华蟾素注射液抑制肝癌生长的分子机制可能是通过上调Fas基因表达并下调FasL基因表达,从而促进肿瘤细胞发生凋亡,达到抗肿瘤作用。     

清金得生片联合化疗对Lewis荷瘤小鼠Fas、FasL mRNA表达的影响

目的 观察清金得生片联合化疗对Lewis荷瘤小鼠Fas、FasL mRNA表达的影响。方法 Lewis肺癌荷瘤小鼠随机分为模型组、清金组、顺铂组、清金加顺铂组,给药10 d后,取肿瘤组织,采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠Fas、FasL mRNA的表达。结果 清金加顺铂组瘤体组织Fas mRNA的表达显著高于模型组(P ＜ 0.05),各给药组间差异无统计学意义;与模型组比较,清金组、顺铂组、清金加顺铂组瘤体组织FasL mRNA的表达差异均有统计学意义(P ＜ 0.05),各给药组间差异无统计学意义。结论 清金得生片联合化疗的抗肿瘤作用与调节Fas/FasL系统,从而逆转肿瘤的免疫逃逸有关。     

安胃汤对慢性萎缩性胃炎模型大鼠细胞凋亡因子表达的影响

目的:研究安胃汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠细胞凋亡因子表达的影响。方法:采用MNNG法建立CAG大鼠模型,将60只大鼠随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)、胃复春组(C组)、安胃汤低剂量组(D组)、安胃汤中剂量组(E组)、安胃汤高剂量组(F组)各10只,A、B两组给予3ml生理盐水灌胃,C组给予胃复春悬浊液按照0.078g/100(g·d)的剂量灌胃。D、E、F组分别给予0.5、1.0、2.0g/100(g·d)剂量的安胃汤灌胃,连续治疗4周。显微镜下观察胃黏膜组织形态的改变,使用QRT-PCR法和Western-blot法检测胃黏膜组织中Bax、Bcl-2、Fas、FasL mRNA及蛋白的表达,TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡指数。结果:镜下显示,B组胃黏膜明显萎缩,固有腺体萎缩消失,D、E、F组胃黏膜结构完整度呈递增趋势,固有腺体萎缩程度降低,数目增加,明显优于B组。与B组相比,C、D、E、F组的Bcl-2 mRNA相对表达量和蛋白表达量升高,Bax、Fas、FasL mRNA相对表达量和蛋白表达量降低(P0.05);与C组相比,E、F组的Bcl-2mRNA相对表达量和蛋白表达量升高,Bax、Fas、FasL mRNA相对表达量降低(P0.05)。与B组相比,C、D、E、F组凋亡指数均下降(P0.05);与C组相比,D、E、F组凋亡指数均下降,且随着剂量的升高,下降程度更明显(P0.05)。结论:安胃汤治疗CAG大鼠,能够通过调节Bax、Bcl-2、Fas、FasL等细胞凋亡因子水平,抑制胃黏膜细胞凋亡,改善胃黏膜萎缩,效果与安胃汤剂量正相关。     

补中益气汤对A549荷瘤小鼠脾组织Fas蛋白表达的影响

目的:研究补中益气汤对A549荷瘤小鼠脾组织中Fas蛋白表达的影响。方法:建立A549荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤实验,采用随机对照法将30只BALB/c小鼠分为正常组、空白对照组、中药高剂量组、中药低剂量组、西药组,除正常组外,余组荷瘤,成功后,每天灌胃相应药物1次,连续10天后取材。采用免疫组织化学检测脾组织中Fas蛋白的表达;逆转录-多聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测脾组织中Fas的mRNA表达。结果:正常组中Fas蛋白在细胞膜有表达,空白对照组出现较多棕黄色颗粒,与正常组比较,Fas表达明显升高(P<0.01);补中益气汤及顺铂作用后,Fas蛋白表达减少,与空白对照组比较,中药低剂量组、西药组Fas表达明显下降(P<0.05),中药高剂量组下降最显著(P<0.01)。中药高剂量组、中药低剂量组、西药组比较,Fas表达无明显变化(P>0.05)。与正常组比较,空白对照纽Fas的mRNA的表达量明显增加(P<0.01);经补中益气汤及顺铂作用后,Fas mRNA的表达减少,中药高剂量组、中药低剂量组及西药组与空白对照组的差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),而该3组的Fas mRNA的表达与正常组无明显差异。结论:补中益气汤可下调A549荷瘤小鼠脾脏中Fas蛋白的表达,从而促进机体免疫系统对肺癌细胞的杀伤。     

消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg免疫平衡的影响

目的:探讨消水方联合顺铂对肺癌移植瘤胸腔积液小鼠模型Th17/Treg细胞免疫平衡的影响。方法:将75只C57BL/6小鼠随机分为消水方(33.5 g·kg~(-1))组、顺铂(6 mg·kg~(-1))组、消水方(27 g·kg~(-1))+顺铂(6 mg·kg~(-1))组、模型组、空白组。除空白组小鼠胸腔内注射磷酸盐缓冲液(PBS)外,其余各组小鼠均采用Lewis肺癌细胞胸腔注射建立模型,连续给药10 d后各组取10只小鼠处死,采用流式细胞技术检测外周血中Th17,Treg细胞数量;流式微球阵列法(CBA)以及酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-17A(IL-17A),白细胞介素-21(IL-21),白细胞介素-23(IL-23)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脾组织维甲酸相关孤核受体γt(RORγt),叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA及蛋白表达。结果:各组小鼠外周血Th17,Treg细胞数量均高于空白组(P0.05,P0.01)。其中消水方+顺铂组、消水方组较模型组能明显增加Th17细胞数量(P0.05),降低Treg细胞数量(P0.01)。消水方+顺铂组IL-6,IL-17A,IL-21含量分别较其余各组均显著升高(P0.01);消水方+顺铂组较消水方组、模型组IL-23含量升高(P0.05),TGF-β1含量降低(P0.05)。与顺铂组、模型组比较,消水方+顺铂组、消水方组可上调脾组织中RORγt mRNA表达(P0.01),下调Foxp3 mRNA表达(P0.05)。与模型组比较,消水方+顺铂组可上调脾组织RORγt蛋白表达(P0.05),下调Foxp3蛋白表达(P0.01)。结论:消水方联合顺铂可能通过上调Th17细胞水平,下调Treg细胞水平,从而纠正Th17/Treg免疫失衡,发挥抑制MPE作用。     

乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4+/CD8+及Fas、FasL蛋白表达的实验研究

目的:观察乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠CD4+/CD8+及Fas、FasL蛋白表达的影响。方法:采用雌性BALB/c小鼠皮下多点注射小鼠透明带多肽,建立免疫性卵巢早衰模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、己烯雌酚组、六味地黄丸组、乌鳖颗粒大、中、小剂量组。另设正常组和佐剂组,共灌胃给药4周。实验末应用免疫组化法测定脾脏CD+4、CD8+,计算CD4+/CD8+的比值。应用免疫组化法测定卵巢Fas、FasL蛋白的表达。结果:模型组小鼠脾脏CD4+/CD8+比值明显高于正常组和佐剂组(P<0.05)。乌鳖颗粒各剂量组小鼠脾脏CD4+/CD8+比值明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。模型组小鼠卵巢Fas蛋白表达低于正常组,Fas-L蛋白表达明显高于正常组,卵巢Fas、Fas-L蛋白表达和Fas/Fas-L比值与正常组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。乌鳖颗粒大剂量组和中剂量组小鼠Fas蛋白表达明显高于模型组,(P<0.05,P<0.01)。乌鳖颗粒各剂量组Fas-L蛋白表达明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。乌鳖颗粒大剂量组、中剂量组小鼠Fas/Fas-L比值与模型组比较具有显著性差异(P<0.01)。结论:乌鳖颗粒对免疫性卵巢早衰小鼠具有调节CD4+/CD8+比值和Fas/FasL系统的作用。     

加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对小鼠Lewis肺癌PI3K/AKT/mTOR通路的影响

目的观察加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对小鼠Lewis肺癌组织、骨髓组织PI3K/AKT/mTOR信号通路的双重调控作用机制。方法建立气阴两虚型C57BL/6J小鼠Lewis肺癌模型,随机分为正常对照组,模型对照组,加味龟鹿二仙胶汤组(中药组),顺铂组,顺铂+加味龟鹿二仙胶汤低、中、高剂量组(顺铂+中药低剂量组、顺铂+中药中剂量组、顺铂+中药高剂量组,即联合组),每组20只,干预21 d。观察小鼠肿瘤体积、测定瘤重、抑瘤率及骨髓有核细胞计数,Western blot检测各组移植瘤组织及骨髓组织中PI3K、p-AKT、mTOR的蛋白表达。结果药物干预后,与模型对照组比较,除中药组外,顺铂组、联合组肿瘤体积增长均减慢,瘤质量均明显下降(P<0.01);与模型对照组比较,中药组小鼠骨髓有核细胞计数显著升高(P<0.01)。移植瘤组织中,顺铂组、联合组PI3K、p-AKT蛋白表达较模型对照组明显降低(P<0.01);中药组、顺铂组、联合组mTOR蛋白表达较模型对照组明显降低(P<0.05或P<0.01);骨髓组织中,中药组PI3K、p-AKT和mTOR蛋白表达较模型对照组明显升高(P<0.01),联合组随剂量增加PI3K、p-AKT和mTOR蛋白表达较顺铂组升高(P<0.05)。结论加味龟鹿二仙胶汤与顺铂联用可以显著抑制肿瘤体积增长,增强抗肿瘤作用,提高抑瘤率,对化疗所致骨髓有核细胞降低有保护作用,且呈剂量依赖性效应。通过下调肺癌组织中mTOR的蛋白表达和上调骨髓组织中PI3K、p-AKT、mTOR的蛋白表达发挥双重调控作用。     

黄芪、莪术联合顺铂对人肝癌裸鼠CD147、iNOS表达的影响

目的探讨黄芪、莪术配伍联合顺铂(DDP)对人肝癌裸鼠CD147、iNOS表达的影响。方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为8组:模型对照组、阳性对照组(DDP)、黄芪莪术配伍高剂量组(H)、黄芪莪术配伍中剂量组(M)、黄芪莪术配伍低剂量组(L)、黄芪莪术配伍高剂量+顺铂组(H+DDP)、黄芪莪术配伍中剂量+顺铂组(M+DDP)、黄芪莪术配伍低剂量+顺铂组(L+DDP),每组8只,给药15d,免疫组织化学染色及Real-time RT-PCR检测肿瘤组织中CD147、iNOS蛋白及mRNA的表达。结果与模型对照组相比,H、M、H+DDP、M+DDP、L+DDP组CD147、iNOS蛋白及mRNA表达均显著下降(P0.05或P0.01),并与剂量呈一定的正相关性。与DDP组相比,H+DDP组CD147、iNOS蛋白表达降低(P0.05或P0.01)。结论黄芪、莪术配伍可能是通过下调CD147、iNOS蛋白及mRNA表达对肿瘤新生血管生成产生影响。     

康莱特注射液对Lewis肺癌小鼠TAM及HIF-1α的影响

目的研究康莱特注射液对Lewis肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞(TAM)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法将造模成功Lewis肺癌荷瘤小鼠随机分为模型组、康莱特组、顺铂组及康莱特+顺铂组,模型组给予生理盐水腹腔注射,其余组均分别给予相应药物腹腔注射。干预14 d后处死各组小鼠取瘤组织,流式细胞仪检测TAM的比例,实时定量PCR检测HIF-1αmRNA的表达情况。结果康莱特组、顺铂组及康莱特+顺铂组小鼠瘤质量均明显低于模型组(P均0.05);康莱特+顺铂组与顺铂组抑瘤率均明显高于康莱特组(P均0.05),但康莱特+顺铂组与顺铂组比较差异无统计学意义(P0.05)。顺铂组小鼠脾指数明显低于其他3组(P均0.05),康莱特组小鼠脾指数明显高于其他3组(P均0.05),而康莱特+顺铂组与模型组比较差异无统计学意义(P0.05)。康莱特组和康莱特+顺铂组TAM比例均明显低于模型组(P均0.05),康莱特组和康莱特+顺铂组比较差异无统计学意义(P0.05),康莱特+顺铂组明显低于顺铂组(P0.05)。康莱特组、顺铂组、康莱特+顺铂组HIF-1α表达量均明显低于模型组(P均0.05),康莱特+顺铂组HIF-1α表达量均明显低于康莱特组、顺铂组(P均0.05),而康莱特组与顺铂组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论康莱特注射液具有抗肿瘤作用,与顺铂联用可增强化疗疗效、提高小鼠免疫功能,可能是通过降低TAM水平、改善缺氧实现的。     

消癌解毒方对H22荷瘤小鼠移植瘤的抗肿瘤作用机制

目的:通过消癌解毒方(XAJD)对H22荷瘤小鼠移植瘤肿瘤组织全基因组芯片的检测以及对相关蛋白的表达影响,探讨其抑制肿瘤的作用机制。方法:ICR小鼠随机分组,接种H22荷瘤小鼠腹水,移植瘤模型成功后,将模型小鼠随机分为空白组,XAJD低、中、高剂量组(10,30,90 g·kg~(-1)·d~(-1)),顺铂组(1 mg·kg~(-1)·d~(-1))。给药结束,动物处死并取各组动物瘤体组织,无菌生理盐水洗去血渍,称重,计算肿瘤抑制率,取部分新鲜瘤体组织进行全基因组表达谱芯片检测,部分瘤体组织用实时荧光定量PCR(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其相关mRNA及蛋白表达。结果:与空白组比较,消癌解毒方低、中、高剂量能够显著降低移植瘤瘤重(P0.05),消癌解毒方中剂量组与顺铂组效果优于消癌解毒方低、高剂量组(P0.01),抑瘤率分别达42.8%,58.6%;全基因组芯片检测分析发现,基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases,MMPs)和组织金属蛋白酶抑制剂(tissueinhibitor of metalloproteinase,TIMPs)相关蛋白在消癌解毒方不同剂量组中均发生了明显的改变。Real-time PCR,Western blot检测显示,与空白组比较,MMP-9 mRNA及蛋白在消癌解毒方低、中、高剂量组及顺铂组中表达均显著降低(P0.01),MMP~(-1)2 mRNA及蛋白在消癌解毒方中、高剂量组及顺铂组中表达均显著降低(P0.01),TIMP2 mRNA及蛋白在消癌解毒方中、高剂量组及顺铂组中表达均明显升高(P0.05)。结论:消癌解毒方能够抑制H22荷瘤小鼠移植瘤生长,可通过抑制MMPs相关蛋白的表达,降低肿瘤的转移和复发可能是其抗癌机制之一。     

益肺散结方对小鼠Lewis肺癌组织Bcl-2、Bax、MMP-9表达的影响

目的探讨益肺散结方对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,将50只建模小鼠随机分为模型组、顺铂组及益肺散结方低、中、高剂量组,每组10只。模型组给予生理盐水灌胃,1次/d,连续21 d;益肺散结方低、中、高剂量组分别给予含生药0.5,1.0,2.0 g/mL的益肺散结药液灌胃,1次/d,连续21 d;顺铂组给予2 mg/kg顺铂腹腔注射,隔日1次,共21 d。干预结束后处死各组小鼠,剥离瘤组织并称瘤质量,计算抑瘤率;采用实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中Bcl-2和Bax mRNA的表达量,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达量。结果益肺散结方中、高剂量组和顺铂组瘤质量均明显低于模型组(P均0.05),且益肺散结方中、高剂量组和顺铂组抑瘤率均明显高于益肺散结方低剂量组(P均0.05),益肺散结方高剂量组和顺铂组瘤质量和抑瘤率比较差异均无统计学意义(P均0.05)。益肺散结方中、高剂量组移植瘤组织中Bcl-2 mRNA表达量和MMP-9蛋白表达量均明显低于模型组和益肺散结方低剂量组(P均0.05),而Bax mRNA表达量均明显高于模型组和益肺散结方低剂量组(P均0.05),益肺散结方高剂量组和顺铂组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论益肺散结方对小鼠Lewis肺癌组织具有明显的抑制作用,其机制可能与上调Bax表达和下调Bcl-2、MMP-9表达有关。     

平目汤对格雷夫斯眼病小鼠眼球后脂肪细胞凋亡的影响

目的探讨平目汤对格雷夫斯眼病小鼠模型眼球后脂肪细胞凋亡的影响及作用机制。方法 BALB/c雌性小鼠随机分为模型组和平目汤低、中、高剂量组,每组15只。采用hTSHR重组质粒免疫BALB/c雌性小鼠建立格雷夫斯眼病小鼠模型。造模成功后,平目汤低、中、高剂量组分别按照7.75 g·kg~(-1)·d~(-1 )、15.5 g·kg~(-1)·d~(-1 )、31 g·kg~(-1)·d~(-1 )生药量灌胃干预,共灌胃8周。观察小鼠眼球后脂肪细胞凋亡情况,以及眼球后脂肪细胞Bax、Bcl-2、Fas、Fasl、Chop、Caspase-12 mRNA及蛋白表达情况。结果与模型组比较,平目汤各组眼球后脂肪细胞凋亡率均升高(P0.05);除平目汤高剂量组Caspase-12 mRNA外,其余各组Bax、FasL、Chop、Caspase-12 mRNA及蛋白表达水平均升高(P0.05),以平目汤中剂量组更为明显。结论平目汤可有效促进格雷夫斯眼病小鼠眼球后脂肪细胞的凋亡,其凋亡途径可能为线粒体途径、死亡受体途径与内质网途径共同作用。     

华蟾素注射液对小鼠肝癌组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响

目的:观察华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因(mRNA)及蛋白表达的影响。方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型,造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,华蟾素注射液低、高剂量组,顺铂(DDP)组。观察各组小鼠肿瘤生长情况变化。采用荧光定量RT-PCR方法和Western Blot检测方法检测各组H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响。结果:华蟾素低剂量组不能有效抑制肿瘤的生长,而华蟾素高剂量组、DDP组的抑瘤率分别为41.67%、52.78%,具有明显的抑制肿瘤生长作用(P<0.01)。与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3表达无明显差异,而华蟾素高剂量组、DDP组能促进肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3的mRNA的表达升高(P<0.05)及蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论:华蟾素注射液具有抑制肝癌细胞生长的作用,其分子机制可能是上调肿瘤组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白的表达,从而促进肝癌肿瘤细胞发生凋亡,达到抗肿瘤作用。     

参芪抑瘤方联合顺铂对MFC荷瘤小鼠瘤组织XIAP、PTEN表达的影响

目的:研究参芪抑瘤方联合顺铂对MFC荷瘤小鼠瘤组织连锁凋亡抑制蛋(XIAP)及磷酸酶和张力蛋白同源缺失性基因(PTEN)表达的影响。方法:建立MFC荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将50只荷瘤小鼠随机分为模型组、顺铂组、参芪抑瘤方低剂量组(中药低组)、参芪抑瘤方高剂量组(中药高组)、参芪抑瘤方低剂量联合顺铂组(联合低组)、参芪抑瘤方高剂量联合顺铂组(联合高组),连续灌胃给药15 d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,15 d后处死小鼠,剥取瘤组织称重,计算抑瘤率;实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和免疫组织化学技术(IHC)分别检测肿瘤组织中XIAP、PTEN mRNA和蛋白的表达情况。结果:不同剂量组抑瘤率依次为顺铂组55.25%,参芪抑瘤方低、高剂量组分别为27.7%和30.58%,芪抑瘤方低、高剂参量联合顺铂组分别为66.3%和67.78%。联合用药组优于单纯用药组,差异具有统计学意义(P0.01)。与模型组相比,顺铂组、中药组、联合组中XIAP mRNA及蛋白的表达均降低,PTEN mRNA及蛋白的表达升高,差异有统计学意义(P0.01)。与顺铂组、中药低组和中药高组相比,联合低组和联合高组中XIAP mRNA及蛋白的表达均降低,PTEN mRNA及蛋白的表达升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论:参芪抑瘤方具有一定的抗MFC胃癌移植瘤作用,并与顺铂联用具有减毒增效作用。其作用可能是通过下调瘤组织中XIAP的表达,上调PTEN的表达有关。     

补中益气汤联合顺铂对小鼠移植性肺癌增效减毒的协同作用研究

目的:探讨补中益气汤联合顺铂对小鼠移植性肺癌增效减毒的协同作用。方法:建立Lewis肺癌细胞荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组、补中益气汤组、联合给药组,每组10只。各组给药22 d后解剖小鼠,称重瘤块质量计算抑瘤率,并在显微镜下计数肺转移瘤灶的个数;ELISA检测小鼠血清中IL-2、IL-10、IFN-γ、TNF-α的水平;流式细胞术检测小鼠外周血CD4+CD2+5Foxp3+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的表达比例; WB检测小鼠移植性肺癌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、Fas、Fasl和耐药相关蛋白MRP1、ERCC1的表达情况。结果:与模型组相比,补中益气汤以及联合顺铂均能有效抑制肿瘤的生长和肺转移灶的数量(P 0. 05)。补中益气汤、顺铂以及联合给药均能显著调节IL-2、IL-10、IFN-γ、TNF-α的表达水平,且联合组的IL-2、IL-10、TNF-α水平差异极显著(P 0. 01)。流式分析结果显示各组给药后均能显著降低小鼠外周血CD4+CD2+5Foxp3+Treg细胞比例,且联合给药组的降低效果最明显,与顺铂组相比差异显著(P 0. 05)。WB结果显示补中益气汤、顺铂以及联合给药均能促进促凋亡相关蛋白Bax、p53、Fas、Fasl的表达,降低抑凋亡相关蛋白Bcl2的蛋白表达(P 0. 05)。此外,与模型组相比,顺铂组的多药耐药相关蛋白MRP1、ERCC1的表达显著升高(P 0. 05),而补中益气汤联合顺铂给药后能显著降低MRP1、ERCC1的蛋白表达(P 0. 05)。结论:补中益气汤联合顺铂对Lewis肺癌细胞荷瘤小鼠抗肿瘤具有增效减毒的作用,其机制可能与调节细胞因子IL-2、IL-10、IFN-γ、TNF-α表达和Treg细胞比例,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、Fas、Fasl和耐药相关蛋白MRP1、ERCC1的表达有关。     

补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤LRP蛋白表达的影响

目的通过观察补中益气汤对肺腺癌荷瘤裸鼠移植瘤中LRP蛋白表达影响,探讨补中益气汤治疗肺腺癌的作用机制。方法体外培养A549/DDP及A549细胞,接种于BALB/c nu/nu裸鼠腋窝皮下,荷瘤成功后给予低、中、高剂量补中益气汤治疗。实验共分为10组:即A组(A549/DDP荷瘤对照组)、B组(A549/DDP荷瘤+顺铂组)、C组(A549/DDP荷瘤+顺铂+低剂量补中益气汤组)、D组(A549/DDP荷瘤+顺铂+中剂量补中益气汤组)、E组(A549/DDP荷瘤+顺铂+高剂量补中益气汤组)、a组(A549荷瘤对照组)、b组(A549荷瘤+顺铂组)、c组(A549荷瘤+顺铂+低剂量补中益气汤组)、d组(A549荷瘤+顺铂+中剂量补中益气汤组)、e组(A549荷瘤+顺铂+高剂量补中益气汤组)。测量移植瘤体积并计算药物抑瘤率,蛋白质印迹法检测移植瘤组织LRP蛋白的表达。结果顺铂对A549/DDP移植瘤体积无显著影响(P0.05),而使A549移植瘤体积显著缩小(P0.05);补中益气汤使A549/DDP及A549移植瘤体积均缩小(P0.05,P0.05),顺铂抑瘤率均增加(P0.05,P0.05),随着中药剂量的增加,移植瘤体积逐渐缩小,顺铂抑瘤率逐渐增加;顺铂使A549/DDP移植瘤组织中LRP蛋白表达增加(P0.05),A549移植瘤组织中LRP蛋白表达减少(P0.05);补中益气汤使A549/DDP移植瘤组织中LRP蛋白表达减少(P0.05),以中剂量效果最为显著,补中益气汤使A549移植瘤组织中LRP蛋白表达也减少(P0.05),但低、中、高剂量之间效果无显著差异。结论在对顺铂敏感及顺铂耐药的肺腺癌移植瘤组织中,补中益气汤均可使移植瘤体积缩小,顺铂的抑瘤率增加,LRP蛋白的表达下调。     

益肾降浊冲剂对慢性肾衰竭大鼠肾脏Fas、FasL表达的影响

目的探究益肾降浊冲剂对慢性肾衰竭大鼠Fas、FasL表达的影响。方法建立大鼠5/6肾切除模型,并随机分为假手术组、模型组、大黄素组、益肾降浊冲剂低剂量组、中剂量组和高剂量组,予相应药液灌胃干预8周后,检测各组血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)含量,免疫组织化学法检测肾组织Fas、FasL蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清Scr、BUN含量及Fas、FasL蛋白表达明显提高(P0.01);与模型组比较,大黄素组和益肾降浊冲剂高、中、低剂量组血清Scr、BUN含量及Fas、FasL蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01);与大黄素组比较,高剂量组血清Scr、BUN含量及Fas、FasL蛋白表达明显降低(P0.05)。结论益肾降浊冲剂能通过抑制死亡受体介导的外源性凋亡信号通路,降低Fas、FasL蛋白表达来改善慢性肾衰竭的肾功能。     

“黄枇烟”吸入抑制肺癌小鼠肿瘤生长及其对HIF-1α、VEGF mRNA表达的影响

目的:观察"黄枇烟"吸入对肺癌小鼠抑瘤率、去氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及其上游基因mRNA表达的影响。方法:建立小鼠肺癌模型,随机分为模型组、顺铂组和黄枇烟低、高剂量组,每组10只,各组分别予相应药物或生理盐水雾化。治疗后计算各组抑瘤率,免疫印迹法(Western blotting)检测肿瘤组织HIF-1α、VEGF的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上游基因mRNA表达。结果 :黄枇烟低、高剂量组和顺铂组小鼠瘤重明显低于模型组(P0.05,P0.01),顺铂组小鼠瘤重明显低于黄枇烟低、高剂量组。与模型组比较,黄枇烟高剂量组和顺铂组小鼠肿瘤组织HIF-1α、VEGF蛋白及其上游基因mRNA的表达均明显降低,以顺铂组作用最明显。结论:"黄枇烟"吸入可抑制肺癌小鼠肿瘤生长,其作用机制可能为下调HIF-1α、VEGF蛋白及其上游基因mRNA的表达,继而抑制肿瘤血管生成而发挥抗肿瘤效应。     

电针“委中”对腰椎间盘退变模型大鼠椎间盘组织Fas和FasL表达的影响

目的观察电针"委中"对腰椎间盘退变模型大鼠椎间盘组织Fas、FasL表达的影响,探讨其作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组10只。假手术组仅手术切开皮肤,模型组和电针组通过纤维环穿刺法建立大鼠腰椎间盘退变模型。成模4周后,假手术组和模型组行等条件固定处理,电针组电针"委中"治疗,20 min/次,每日1次,连续4周。治疗结束后,Western blot、RT-PCR检测Fas、FasL的蛋白和mRNA表达。结果模型组Fas、FasL蛋白和mRNA表达较假手术组明显升高(P0.05),电针组Fas、FasL蛋白和mRNA表达较模型组明显降低(P0.05)。结论电针"委中"可降低Fas、FasL的表达,起到抑制腰椎间盘退变的作用。     

益气养阴活血化淤方对实验性病毒性扩张型心肌病小鼠细胞凋亡因子Fas／FasL蛋白表达的影响

目的通过观察小鼠心肌细胞凋亡因子Fas／FasL蛋白表达的水平,探讨益气养阴、活血化淤方的作用机制及Fas／FasL系统在细胞凋亡中的重要作用。方法210只Balb／c小鼠,随机分为4组。空白对照组30只;模型组、中药高剂量组、中药低剂量组各60只,采用多次接种柯萨奇B3m病毒的方式,建立重复感染的早期病毒性扩张型心肌病动物模型,中药高剂量组、中药低剂量组用益气养阴、活血化淤方治疗,于治疗4周后观测小鼠心肌病理形态学改变,免疫组化方法检测Fas／FasL蛋白表达。结果模型组心肌组织中Fas／FasL蛋白的阳性表达较空白组增多（P〈0．05）,中药高剂量组和中药低剂量组较模型组显著降低（P〈0．05）。结论益气养阴,活血化淤方能够下调扩张型心肌病小鼠Fas／FasL蛋白表达,对心肌细胞起到保护作用。