肾衰胶囊对慢性肾衰竭大鼠肾组织TGF-β1表达的影响

目的探讨肾衰胶囊对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾脏转化生长因子(TGF-β1)表达的影响。方法大鼠灌胃腺嘌呤制成 CRF 模型,并分为5组肾衰胶囊高、低剂量治疗组及尿毒清治疗组分别以肾衰胶囊4.4g·kg~(-1)·d~(-1)、1.47 g·kg~(-1)·d~(-1)及尿毒清2.0 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,正常及模型对照组予等体积生理盐水共治疗31天,检测肾功能指标,用免疫组化法检测肾脏 TCF-β_1 表达水平。结果肾衰胶囊高剂量组改善 BUN 、SCr 方面与尿毒清组比较,差异均有显著性(P<0.05)。肾衰胶囊高、低剂量组对 CRF 大鼠肾小管上皮细胞 TGF-β_1表达有明显抑制作用(P<0.01,P<0.05)。结论肾衰胶囊能明显抑制 CRF 大鼠肾组织 TGF-β_1 表达,这可能是其延缓肾衰竭进展的作用机理之一。     

甲连盆腔胶囊对盆腔炎性疾病后遗症大鼠的保护作用及机制探讨

目的探讨甲连盆腔胶囊对盆腔炎性疾病后遗症(SPID)模型大鼠的保护作用及可能作用机制。方法将65只SD大鼠随机分为空白组(12只)、假手术组(12只)、造模组(41只),造模组大鼠采用苯酚胶浆建立SPID模型,鉴定造模成功后,将剩余造模大鼠再随机分为模型组(11只)、妇科千金胶囊组(12只)、甲连盆腔胶囊组(12只)。妇科千金胶囊组、甲连盆腔胶囊组分别每日予以妇科千金胶囊0.25 g/kg、甲连盆腔胶囊0.75 g/kg灌胃,其余组予以等体积生理盐水灌胃。连续灌胃14 d后处死各组大鼠,观察子宫大体情况,苏木素-伊红(HE)染色观察子宫组织病理形态变化,并采用分类评分标准进行病理评分,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)水平,免疫组化法检测子宫组织中核因子-κB p65(NF-κB p65)、TGF-β_1、Smad2、Smad3、Smad7蛋白表达情况。结果模型组大鼠子宫明显充血水肿,与周围组织广泛粘连;妇科千金胶囊组和甲连盆腔胶囊组子宫充血水肿减轻,与周围组织轻微粘连。光镜下模型组大鼠子宫上皮细胞坏死脱落,伴增生,大量炎细胞浸润,腺体数量减少,排列紊乱;妇科千金胶囊组和甲连盆腔胶囊组炎细胞浸润及增生减轻,大部分腺体恢复正常。与空白组和假手术组比较,模型组大鼠血清IL-1β、TGF-β_1水平和各项病理评分及子宫组织中NF-κB p65、TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达水平均明显增高(P均0.05),血清IL-10水平和子宫组织中Smad7蛋白表达水平均明显降低(P均0.05);与模型组比较,妇科千金胶囊组和甲连盆腔胶囊组血清IL-1β、TGF-β_1水平和各项病理评分及子宫组织中NF-κB p65、TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达水平均明显降低(P均0.05),血清IL-10水平和子宫组织中Smad7蛋白表达水平均明显升高(P均0.05),妇科千金胶囊组和甲连盆腔胶囊组各指标比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论甲连盆腔胶囊能明显减轻SPID模型大鼠炎症反应和组织损伤,其机制可能与抑制NF-κB/TGF-β_1/Smads信号通路过度激活有关。     

化痰通脉饮对多囊卵巢综合征大鼠IRS-1-PI3K/Akt及NF-κB信号串流的影响

目的:观察化痰通脉饮对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型胰岛素受体底-1-磷脂酰肌醇-3激酶(IRS-1-PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(Akt)及核转录因子-κB(NF-κB)信号串流的影响,为中药复方多靶点多通路作用起效模式的论证提供科学的依据,为治疗PCOS开辟新的思路。方法:将大鼠分为正常组、模型组、二甲双胍组(二甲双胍0. 16 g·kg~(-1)·d~(-1))和化痰通脉饮低、中、高剂量组(8,16,24 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组8只,利用"胰岛素(INS)联合绒毛膜促性腺激素(HCG)诱导大鼠PCOS模型"方案对非正常组大鼠进行造模,完成后采用蛋白免疫印迹法(Western blot)及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠肝脏中IRS-1,PI3K,Akt,NF-κB p65,NF-κB抑制蛋白(IκB)等蛋白表达和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL~(-1)β)的变化。结果:与正常组比较,模型组肝脏中IRS-1,Akt,PI3K,IκB蛋白表达明显降低(P 0. 05),NF-κB p65蛋白的表达明显升高(P 0. 05);与模型组比较,化痰通脉饮高剂量组大鼠的肝脏中IRS-1,Akt,PI3K,IκB蛋白表达明显升高(P 0. 05),NF-κB p65蛋白表达明显降低(P 0. 05)。模型组大鼠血清中TNF-α,IL~(-1)β水平较正常组明显升高(P 0. 05);化痰通脉饮低、中、高剂量组大鼠血清中TNF-α,IL~(-1)β水平较模型组明显降低(P 0. 05)。结论:PCOS发病过程中IRS-1-PI3K/Akt与NF-κB通路有交叉作用,化痰通脉饮对涉及的IRS-1-PI3K/Akt与NF-κB通路异常均有较好的回调作用。     

电针对宫腔粘连大鼠子宫内膜M1型巨噬细胞的调控作用

目的：观察电针对宫腔粘连（IUA）大鼠子宫内膜纤维化的影响,并以M1型巨噬细胞为切入点,探讨电针治疗IUA的可能机制。方法：雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组,每组5只。采用机械搔刮联合脂多糖感染双重损伤法建立IUA大鼠模型。电针组予“关元”针刺、“足三里”“三阴交”电针干预,20 min/次,1次/d,连续干预3个动情周期。每组大鼠于动情期取材,HE染色法观察大鼠子宫内膜形态、子宫内膜厚度及血管、腺体数目,Masson染色法观察子宫纤维化面积,免疫组织化学法检测子宫内膜组织中Runt相关转录因子（RUNX1）、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子（CTGF）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（Col-Ⅰ）、分化簇86(CD86)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的阳性表达,Westernblot法检测子宫内膜组织中RUNX1、TGF-β1、α-SMA、CD86、肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)的蛋白相对表达量,实时荧光定量PCR法检测子宫内膜组织中RUNX1、TGF-β1、α-SMA、CD86、TNF-α的mRNA相对...     

肾病Ⅰ号方对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的影响

目的:观察肾病Ⅰ号方对肾纤维化大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、UUO模型组、洛丁新组和肾病Ⅰ号方组,每组6只。采用单侧输尿管结扎的方法制备大鼠肾纤维化模型。假手术组和UUO模型组每日予2 m L生理盐水灌胃,洛丁新组按洛丁新片1.67 mg·kg~(-1)·d~(-1)给药,肾病Ⅰ号方组按18.75 g·kg~(-1)·d~(-1)给药。灌胃14 d后处死大鼠,采集血清检测尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,SCr);取肾组织行HE染色评价肾小管间质纤维化损伤程度;采用免疫组织化学染色方法检测α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1在肾组织中的表达情况;免疫印迹试验(Western blot)检测α-SMA相对蛋白表达量。结果:与模型组比较,洛丁新组、肾病Ⅰ号方组大鼠的SCr,BUN明显下降(P<0.05),肾组织α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1表达量下降显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:肾病Ⅰ号方对肾纤维化具有一定改善作用,其作用机制可能是通过下调α-SMA、COL-Ⅳ、TGF-β1的表达,从而达到肾脏保护的作用。     

盆炎方对盆腔炎性疾病后遗症大鼠卵巢、子宫组织TGF-β1、TβRⅡ蛋白的影响

目的通过观察盆腔炎方对盆腔炎性疾病后遗症雌性大鼠子宫组织、卵巢组织转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及其受体Ⅱ(transforming growth factor-βreceptorⅡ,TβRⅡ)水平的影响,探讨其治疗盆腔炎性疾病后遗症的机制。方法将124只SD雌性大鼠随机抽取空白组10只、假手术组10只后造模,造模成功后按体质量随机分为盆炎方高、中、低剂量组,模型组及妇科千金胶囊组各15只。药物干预21天后,采用免疫组化法检测大鼠卵巢、子宫组织TGF-β1、TβRⅡ的表达。结果与空白组和假手术组比较,模型组子宫、卵巢组织TGF-β1、TβRⅡ表达均升高,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,盆炎方各剂量组和妇科千金胶囊组能不同程度地降低模型大鼠子宫组织、卵巢组织TGF-β1及TβRⅡ水平,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。盆炎方各剂量组中,以高剂量组的疗效最佳,且与妇科千金胶囊相当。结论盆炎方可能通过降低盆腔炎性疾病后遗症模型大鼠子宫组织、卵巢组织中粘连修复相关指标TGF-β1及TβRⅡ的表达,缓解和消除局部炎症过程,从而治疗盆腔炎性疾病后遗症。     

通心络超微粉联合津力达颗粒对糖尿病肾病大鼠Akt/mTOR信号转导通路的影响

目的:探讨通心络超微粉联合津力达颗粒对糖尿病肾病(DN)大鼠蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号转导通路的影响。方法:将SD大鼠80只大鼠分为正常组,模型组,厄贝沙坦组(25 mg·kg~(-1)·d~(-1)),通心络超微粉组(0.8 g·kg~(-1)·d~(-1)),津力达颗粒组(1.5 g·kg~(-1)·d~(-1)),通心络超微粉加津力达颗粒组(0.8+1.5 g·kg~(-1)·d~(-1)),共6组;尾静脉注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)动物模型;采用免疫组化SP法测定肾组织中的血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达;采用Western blot检测Akt/m TOR信号转导通路中Akt,m TOR蛋白及相应磷酸化蛋白p-Akt与p-m TOR的表达水平。结果:与正常组比较,模型组中VEGF蛋白的表达升高;各给药组中VEGF蛋白的表达与模型组比较均有不同程度降低,其中通心络超微粉加津力达颗粒组更接近于正常组;各组Akt及其下游分子m TOR的总蛋白表达水平无统计学差异,与正常组比较,模型组中p-Akt与p-m TOR蛋白的表达明显升高(P0.01),与模型组比较,各给药组则显著降低(P0.01)。结论:通心络超微粉联合津力达颗粒可抑制DN大鼠Akt/m TOR信号转导通路的活化,并致相关蛋白VEGF表达水平的降低。     

血府逐瘀汤对肺纤维化大鼠肺组织上皮间质转化的影响及其机制研究

目的:研究血府逐瘀汤对肺纤维化(PF)大鼠肺组织上皮间质转化(EMT)的影响,并探讨其可能机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(0.000405 g·kg~(-1)·d~(-1))和血府逐瘀汤高、中、低剂量组(14.04、7.02、3.51 g·kg~(-1)·d~(-1)),每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均于气管内滴注博来霉素溶液建立PF模型。造模后第2天开始灌胃给药,正常组和模型组予蒸馏水溶液(10 m L·kg~(-1)·d~(-1));各给药组灌胃相应药物,每日1次,连续28 d。末次给药24 h后,采用免疫组化法检测大鼠肺组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,采用Western blot法检测大鼠肺组织中TGF-β1、Smad3的表达情况。结果:模型组大鼠肺组织E-cadherin表达显著低于正常组(P 0.01),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著高于正常组(P 0.01);与模型组比较,血府逐瘀汤高、中、低剂量组肺组织E-cadherin表达显著升高(P 0.05或P 0.01),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著降低(P 0.05或P 0.01);与地塞米松组比较,血府逐瘀汤低剂量组的E-cadherin表达显著降低(P 0.05),而α-SMA、TGF-β1、Smad3表达均显著升高(P 0.05或P 0.01)。结论:血府逐瘀汤可通过干预上皮间质转化来减轻肺纤维化,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路有关。     

柴胡对胰腺纤维化大鼠TIMP-1及TGF-β1增效作用的研究

目的探讨引经药柴胡对胰腺纤维化动物模型TIMP-1及TGF-β1增效作用及部分机制。方法将50只SD大鼠随机分成模型组、假手术组、柴胡组、大黄丹参组和柴胡大黄丹参组。假手术组开腹后直接关腹,其余各组均通过结扎胰胆管联合腹腔注射雨蛙素复制胰腺纤维化模型;用药组均分别于术前、后3天用相应药物灌胃(剂量1.38 g·kg~(-1)·d~(-1)、3.04 g·kg~(-1)·d~(-1)及4.11 g·kg~(-1)·d~(-1))。术后第4天取材。采用ELISA测血清TIMP-1表达,免疫组化测胰腺TGF-β1表达,Real-time PCR和Western blot分别测胰腺TGF-β1mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,用药组均可降低血清TIMP-1含量(P0.01);与柴胡组比较,柴胡大黄丹参组TIMP-1含量降低(P0.01);与大黄丹参组比较,柴胡大黄丹参组TIMP-1含量下降(P0.01)。与模型组比较,用药组TGF-β1 mRNA及蛋白均表达下降(P0.01);与柴胡组比较,柴胡大黄丹参组TGF-β1 mRNA及蛋白表达下降(P0.01),大黄丹参组TGF-β1蛋白表达下降(P0.01);与大黄丹参组比较,柴胡大黄丹参组TGF-β1蛋白表达下降(P0.01)。结论 "下调TGF-β1表达—抑制PSC活化—减少ECM合成"和"下调TGF-β1表达—抑制TIMP分泌—促进ECM降解"可能是柴胡、大黄丹参以及柴胡大黄丹参抗胰腺纤维化的两条作用主线。三者对TGF-β1的调控在ECM合成和降解中发挥双重作用。柴胡对大黄丹参在抗胰腺纤维化方面存在一定的增效作用,主要表现在抑制TIMP分泌和下调TGF-β1蛋白方面。     

痰脂消汤调控PCOS-IR模型大鼠卵巢PI3K/Akt途径探讨

目的:观察痰脂消汤对来曲唑灌胃联合高脂膳食诱导的多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(PCOS-IR)模型大鼠卵巢胰岛素信号转导途径的影响。方法:来曲唑灌胃联合高脂膳食喂养SD大鼠建立PCOS-IR模型,大鼠随机分为模型组、痰脂消汤组(35 g·kg~(-1)·d~(-1))、二甲双胍组(200 mg·kg~(-1)·d~(-1)),连续灌胃20 d;另设正常组。实验结束后,腹主动脉采血,测定血清空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FINS)浓度,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测大鼠卵巢胰岛素受体(INSR),胰岛素受体底物(IRS)-1,酯酰肌醇-3激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织INSR,IRS-1,PI3K,Akt蛋白及其相应磷酸化水平表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠空腹胰岛素(FINS),HOMA-IR水平均显著升高(P0.01),FPG无明显升高;模型组大鼠卵巢INSR,IRS,PI3K,Akt mRNA表达水平明显降低(P0.05);INSR,p-INSR,IRS,p-IRS,PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt等蛋白表达水平明显降低(P0.05);INSR,IRS,PI3K及Akt磷酸化比例明显降低(P0.05)。与模型组比较,中药和二甲双胍治疗后大鼠FINS,HOMA-IR均显著降低(P0.01);大鼠卵巢INSR,IRS,PI3K,Akt mRNA表达水平均明显升高(P0.05);INSR,p-INSR,IRS,p-IRS,PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt等蛋白表达水平明显升高(P0.05);INSR,IRS,PI3K及Akt磷酸化比例明显升高(P0.05)。结论:PCOS大鼠存在IR,卵巢内PI3K/Akt信号途径转导存在异常。痰脂消汤能够显著改善大鼠胰岛素抵抗,可能与调控胰岛素信号转导通路中关键的蛋白表达有关。     

Study on the Effect and Mechanism of Bushen Huayu Recipe(补肾化瘀方)on Endometrial Fibrosis in Rats with Uterine Adhesion Based on TGF-β1/Smad Pathway

目的:观察补肾化瘀方对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜纤维化的改善作用,探究其作用机制.方法:采取机械+感染双重损伤法建立IUA大鼠模型,将造模大鼠随机分为模型组、补肾化瘀方组、补肾化瘀方+SRI-011381组、SRI-011381组,每组15只.另取15只大鼠作为假手术组.药物治疗21d后,观察大鼠子宫形态,HE染色观察子宫组织病理变化,计数子宫内膜腺体数量,Masson染色观察纤维化情况,ELISA试剂盒检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的水平,qRT-PCR检测子宫组织转化生长因子-β1(TGF-β1) mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA和Smad7 mRNA表达水平,Western blotting法测定TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7、p-Smad3、p-Smad4、p-Smad7水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠子宫组织增粗,腺体数量减少,纤维化面积增加,血清炎症因子水平升高,TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA表达及Smad3、Smad4磷酸化增加,Smad7 mRNA表达及磷酸化减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,补肾化瘀方组大鼠子宫腺体数量增加,纤维化面积减少,血清炎症因子水平降低,TGF-β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad4 mRNA表达及Smad3、Smad4磷酸化减少,Smad7 mRNA表达及磷酸化增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).SRI-011381可抑制补肾化瘀方的作用,促进纤维化,进一步激活TGF-β1/Smad通路(P＜0.05).结论:补肾化瘀方对IUA大鼠子宫内膜纤维化有改善作用,其机制可能与调节TGF-β1/Smad通路有关.     

电针对宫腔粘连大鼠子宫内膜修复的效应观察

目的:观察电针对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜纤维化程度及炎性反应的影响，探讨电针修复子宫内膜的可能机制。方法:雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组，每组15只。采用机械搔刮联合脂多糖感染双重损伤法建立IUA大鼠模型。电针组予“关元”针刺、双侧“子宫”“三阴交”电针治疗，15 min/次，1次/d,连续干预2个动情周期。每组5只大鼠于动情期取材，HE染色法观察子宫内膜形态及腺体数目变化，Masson染色法观察子宫内膜纤维化面积，免疫组织化学法检测子宫内膜组织中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白阳性表达，Western blot法检测子宫组织中整合素αγβ3(Integrin αγβ3)的蛋白表达量，ELISA法检测大鼠子宫组织中白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量；每组剩余10只大鼠于妊娠第8天取出子宫组织，比较各组大鼠子宫内胚胎着床数目。结果:空白组大鼠动情期的子宫组织结构完整，内膜层清晰，宫腔通畅，形态规则，腺体密集；模型组大鼠动情期的子宫内膜层被破坏，宫腔明显狭窄呈粘连状态，腺体稀疏；电针组大鼠动情期的子宫组织结构...     

雄芍汤对DMN诱导肝纤维化大鼠TGF-β1和CTGF的影响

目的观察雄芍汤对肝纤维化大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的影响。方法采用DMN诱导制备肝纤维化大鼠模型,正常对照组注射等剂量生理盐水,将wistar大鼠随机分为4组,正常对照组:正常喂养;模型对照组:DMN诱导成模后,自然恢复;扶正治疗组:DMN诱导成模后,灌胃扶正化瘀胶囊(0.525g·kg~(-1));雄芍治疗组:DMN诱导成模后,灌胃雄芍汤(8.050g·kg~(-1))。结果雄芍治疗组肝纤维化程度及CTGF、TGF-β1表达均显著低于模型组(P0.01)。结论雄芍汤有促进DMN诱导肝纤维化大鼠恢复的作用,其机制可能与抑制其TGF-β1和CTGF表达有关。     

芪珠方对肝纤维化模型大鼠TGF-β1/Smad信号通路的作用

目的观察芪珠方的不同提取物对大鼠肝脏TGF-β1,Smad4,Smad 7蛋白与mRNA表达的影响,探讨芪珠方抗肝纤维化的作用机制。方法 70只大鼠随机分为正常组,模型组,芪珠方醇提高剂量组,芪珠方醇提低剂量组,芪珠方水提高剂量组,芪珠方水提低剂量组,秋水仙碱组。除正常组外,其余各组大鼠皮下注射40%四氯化碳(CCl_4)橄榄油造模,首次5ml·kg~(-1),以后每次3ml·kg~(-1),每周2次,共8周。于造模开始次日给药,芪珠方高,低剂量组16.2,9.72g·kg~(-1)ig,秋水仙碱组5ml·kg~(-1)剂量ig,每日1次,连续8周。造模结束后所有大鼠处死,肝脏组织学观察,Western-blot检测TGF-β1, Smad4,Smad 7蛋白表达,荧光定量PCR检测TGF-β1,Smad4,Smad 7 mRNA表达。结果模型组大鼠肝组织纤维化程度,炎症程度高于正常组,肝组织内TGF-β1,Smad4的表达增加, Smad7的表达减少(P0.05);经过芪珠方治疗后,治疗组与模型组相比肝组织纤维化和炎症程度降低,肝组织中TGF-β1,Smad4的表达降低,Smad7的表达增加(P0.05)。结论芪珠方抗大鼠肝纤维化有显著效果,其作用机制与其能影响TGF-β1/Smad信号传导通路相关因子表达有关。     

扶脾柔肝方对肝纤维化大鼠转化生长因子-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨扶脾柔肝方对肝纤维化(HF)大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路的干预作用。方法将SD大鼠随机分为7组:正常对照组,模型组,秋水仙碱组(0.2 mg·kg~(-1)),扶正化瘀组(0.415 g·kg~(-1)),扶脾柔肝方低、中、高剂量组(20,40,80 g·kg~(-1))。采用大鼠背部皮下注射(sc)50%四氯化碳和灌胃(ig)30%乙醇的方法诱导HF,造模10周,成功建立大鼠HF模型,其后给予相应药物10 m L·kg~(-1),每日1次,连续4周,正常对照组、模型组给予等量生理盐水。检测大鼠血清TGF-β1;HE染色和Masson染色观察肝组织病理学变化;免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;同时,采用荧光定量PCR方法及免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中TGF-β1、Smad 3、Smad 4、Smad7 mRNA及蛋白的表达。结果模型组的HF程度较其余组明显严重,与正常对照组比较,模型组大鼠血清TGF-β1明显升高(P0.01),肝组织α-SMA蛋白及TGF-β1、Smad3、Smad4 mRNA及蛋白表达升高Smad 7表达降低(P0.01);与模型组比较,扶脾柔肝方各组大鼠血清TGF-β1明显降低(P0.05,P0.01),肝组织α-SMA蛋白及TGF-β1、Smad3、Smad4 mRNA及蛋白表达下调(P0.01),Smad 7 mRNA及蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。结论扶脾柔肝方下调HF肝组织α-SMA蛋白及TGF-β1、Smad3、Smad4 mRNA及蛋白表达水平,上调Smad7 mRNA及蛋白表达水平,可能是其抗HF作用机制之一。     

温胆汤对精神分裂症模型大鼠海马组织PI3K，Akt和GSK3β的影响

目的:研究温胆汤对精神分裂症模型鼠海马组织磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)信号通路的影响。方法:将60只大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、氯氮平组、温胆汤高、中、低剂量组,每组10只。正常组和模型组灌胃生理盐水,氯氮平组灌胃氯氮平原药20 mg·kg~(-1);温胆汤高、中、低剂量组分别灌胃温胆汤生药40,20,10 g·kg~(-1); 1次/d,共21 d。在最后1次给药2 h后,除正常组外,其余各组采用一次性左侧腹腔注射MK8010. 6 mg·kg~(-1),以诱发精神分裂症。观察并记录大鼠的刻板行为,3 d后,处死并取其海马组织待测。依照Sams Dodd和Hoffman标准对大鼠的刻板行为评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定海马组织PI3K,Akt和GSK3β蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测海马组织PI3K,Akt,GSK3βmRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠刻板行为评分显著升高(P 0. 01),海马组织PI3K,Akt,GSK3β蛋白和mRNA表达水平显著下降(P 0. 01)。与模型组比较,温胆汤给药组能明显降低大鼠刻板行为评分(P 0. 05),升高海马组织PI3K,Akt,GSK3β蛋白和mRNA表达水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论:温胆汤通过改善精神分裂症模型鼠刻板行为、升高其海马组织PI3K,Akt,GSK3β的表达,调控PI3K/Akt/GSK3信号通路,从而达到治疗精神分裂症的目的。     

复方芪珠方对肝纤维化模型大鼠作用及机制研究

目的观察复方芪珠方的不同提取物对大鼠肝脏TGF-β1, Smad2,Smad 3蛋白与mRNA, MMP-1, MMP-2,MMP-13, TIMP-1表达的影响,探讨复方芪珠方抗肝纤维化的作用机制。方法 70只大鼠随机分为正常组,模型组,复方芪珠方醇提高剂量组,复方芪珠方醇提低剂量组,复方芪珠方水提高剂量组,复方芪珠方水提低剂量组,秋水仙碱组。除正常组外,其余各组大鼠皮下注射40%四氯化碳(CCl_4)橄榄油造模,首次5mL·kg~(-1),以后每次3mL·kg~(-1),每周2次,共8周。于造模开始次日给药,复方芪珠方高,低剂量组16.2,9.72g·kg~(-1)ig,秋水仙碱组5mL·kg~(-1)剂量ig,每日1次,连续8周。造模结束后所有大鼠处死,肝脏组织学观察,酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测TIMP-1,MMP-1,MMP-2,MMP-13在肝组织的表达,Western-blot检测TGF-β1,Smad2/3蛋白表达,荧光定量PCR检测TGF-β1,Smad2,Smad3mRNA表达。结果模型组大鼠肝组织纤维化程度,炎症程度高于正常组,肝组织内TIMP-1,MMP-2,TGF-β1,Smad2,Smad 3的表达增加, MMP-1, MMP-13的表达减少(P0.05);经过复方芪珠方治疗后,治疗组与模型组相比肝组织纤维化和炎症程度降低,肝组织中TGF-β1,Smad2,Smad 3,TIMP-1,MMP-2的表达降低,MMP-1, MMP-13的表达增加(P0.05)。结论复方芪珠方抗大鼠肝纤维化有显著效果,其作用机制与其能影响TGF-β1/Smad信号传导通路,调节MMP/TIMP相关因子表达有关。     

白及多糖对GU模型大鼠胃组织PI3K/Akt的影响

目的:探讨白及多糖对胃溃疡(GU)模型大鼠胃组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K),蛋白激酶B(Akt) m RNA及蛋白,以及其介导细胞因子白细胞介素-2受体(IL-2R),白细胞介素-4(IL-4)表达水平的影响。方法:将60只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组和模型组,模型组大鼠采用乙酸直接烧灼法复制GU模型,将GU模型大鼠按随机数字表法分为模型组、盐酸雷尼替丁组和白及多糖高、中、低剂量组共5组,每组10只。空白组和GU模型组大鼠给予10 m L·kg~(-1)·d~(-1)蒸馏水灌胃,白及多糖高、中、低剂量组分别予0. 5,0. 25,0. 125 g·kg~(-1)·d~(-1)白及多糖灌胃,盐酸雷尼替丁组给予0. 3 g·kg~(-1)·d~(-1)盐酸雷尼替丁灌胃,治疗15 d。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清一氧化氮(NO)含量及胃组织胃蛋白酶活性及细胞因子IL-2R,IL-4含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测胃溃疡病灶组织PI3K及Akt m RNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃溃疡病灶组织PI3K及Akt蛋白表达水平。结果:与空白组比较,胃组织细胞因子IL-2R,IL-4含量及m RNA表达显著升高,PI3K,Akt m RNA及蛋白表达水平显著升高(P 0. 01);与GU模型组比较,白及多糖高、中、低剂量组IL-2R,IL-4含量及m RNA表达均降低,以白及多糖高剂量组降低显著,PI3K,Akt m RNA及蛋白表达水平均降低,以白及多糖高、中剂量组降低显著(P 0. 05,P 0. 01)。结论:白及多糖可通过下调PI3K及Akt m RNA和蛋白表达水平,抑制细胞因子IL-2R及IL-4异常分泌而发挥保护胃黏膜的作用。     

引经药柴胡配伍大黄-丹参药对抗大鼠肝纤维化作用的研究

目的:研究柴胡作为引经药与大黄-丹参药对配伍对大鼠肝纤维化的影响。方法:通过腹腔给予CCl_4复制SD大鼠肝纤维化的模型,实验设空白组、模型组、大黄-丹参药对组(5.0 g·kg~(-1))、药对+柴胡低、中、高剂量组(5.0 g·kg~(-1)+0.75 g·kg~(-1)、5.0 g·kg~(-1)+1.5 g·kg~(-1)、5.0 g·kg~(-1)+3.0 g·kg~(-1))。从第3周开始,各组大鼠按相应剂量灌胃给药6周,观察大鼠肝组织形态的病理改变,检测血中ALP、ALT、AST的活性,ELISA法测定Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LN)的含量,酸水解法分析肝中羟脯胺酸(HYP)的含量,免疫组化法测定肝中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果:与模型组比较,各给药组大鼠肝脏组织形态明显改善,血清中ALP、ALT、AST活性和PCⅢ、HA、LN的含量及肝中TGF-β1的表达降低,药对+柴胡组降低更明显。结论:大黄-丹参药对能明显改善SD大鼠的肝纤维化程度,柴胡作为引经药可增强其疗效。     

妇科千金片对阿奇霉素在慢性盆腔炎大鼠体内药物动力学的影响

研究妇科千金片对阿奇霉素(AZM)在慢性盆腔炎大鼠体内多次给药药物动力学的影响,评价联合用药的合理性。以雌性SD大鼠为实验对象,采用子宫内接种混合菌液加机械损伤法建立慢性盆腔炎动物模型。将模型大鼠随机分为对照组和联合用药组,对照组灌胃给予阿奇霉素10 mg·kg~(-1)·d~(-1),联合用药组给予等剂量阿奇霉素2 h后灌胃妇科千金片1.66 g·kg~(-1)·d~(-1),每日1次,连续7 d。于不同时间点采集血浆样本,HPLC-MS测定血浆中阿奇霉素浓度。采用ADAPT 5.1软件反向高斯模型计算药动学参数,SPSS软件对各组参数进行统计学分析。结果显示妇科千金片对阿奇霉素的药动学参数CL_t,CL_d,MIT,F均无显著影响,研究表明临床妇科千金片与阿奇霉素联合应用于慢性盆腔炎的治疗具有一定的合理性。