白头翁药材中白头翁皂苷B4的测定

目的 建立测定白头翁药材中白头翁皂苷B4的方法.方法 比较回流法和药典超声提取法对白头翁药材中的白头翁皂苷B4的提取效果,筛选白头翁的最佳回流提取工艺.结果 白头翁的最佳提取工艺为90％甲醇8倍量,回流提取3次,1.0 h/次.在选定色谱条件下,白头翁皂苷B4在15.31～459.36μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为99.46％,RSD为0.98％(n=6).结论 该方法简便易行,可用于白头翁药材中白头翁皂苷B4的测定.     

白头翁皂苷B4对实验性急性肾功能损伤的保护作用

目的:研究探讨白头翁皂苷B4对急性肾功能损伤的保护作用,以及对其进行小鼠急性毒性评价。方法:通过体外细胞实验,以LPS诱导人胚肾细胞HEK293损伤模型,用白头翁皂苷B4进行干预24、48 h,MTT法检测细胞活性及炎性因子的表达,观察白头翁皂苷B4对肾细胞损伤的作用。整体动物实验,分别以甘油、顺铂和脂多糖(LPS)造成大鼠或小鼠急性肾功能损伤,尾静脉注射不同剂量的白头翁皂苷B4,给药一定时间后行眼眶采血,分离血清,检测反映肾功能指标的尿素氮(BUN)、肌酐(Cre)、总蛋白(TP)及尿液中蛋白含量,来观察白头翁皂苷B4对急性肾功能损伤的作用;给小鼠尾静脉注射不同剂量的白头翁皂苷B4,连续观察2周,根据死亡率计算半数致死量(LD50),初步评价白头翁皂苷B4的用药安全性。结果:白头翁皂苷B4能提高损伤的肾细胞活性,下调炎性因子TNF-α的表达。白头翁皂苷B4静脉给药对甘油,顺铂和LPS所导致的血清BUN,Cre升高均有明显的抑制作用,同时白头翁皂苷B4高剂量(2. 5 mg·kg-1)还可以明显降低甘油致急性肾损伤大鼠的尿蛋白浓度,其在大鼠有效剂量为1. 25～2. 5 mg·kg-1,小鼠有效剂量为5～10 mg·kg-1。白头翁皂苷B4对小鼠静脉给药的LD50为3. 36 g·kg-1,95%可信限为3. 34～3. 37 g·kg-1,根据小鼠最大给药剂量20 mg·kg-1,计算出其临床安全指数为168(3. 36/0. 02),具有较高的临床安全范围。结论:白头翁皂苷B4对于实验性急性动物肾功能损伤具有明确的保护作用,同时以其较大的临床安全指数提示该化合物具有较好的新药开发前景。     

比较四种因素所致实验性急性肾损伤及炎性坏死因子的表达

目的:观察比较内毒素(LPS)、甘油、顺铂和庆大霉素等4种因素所致实验性急性肾损伤动物血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cre),以及肾脏相关炎性坏死因子表达的变化。方法:采用大、小鼠进行整体动物实验。给小鼠腹腔注射顺铂或尾静脉注射LPS,给大鼠肌肉注射甘油或腹腔注射庆大霉素,造模一定时间后行眼眶静脉采血,分离血清,测试血清BUN、Cre。以qPCR法检测白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、转录因子κB (NF-κB)、凋亡坏死因子(Caspase3)、模式识别受体TLR4等mRNA表达。结果:LPS、甘油、顺铂和庆大霉素均可导致血清BUN、Cre升高。四种因素所致急性肾损伤中,肾小管均出现不同程度的损伤。LPS所致肾组织损伤可见白细胞浸润,甘油、顺铂和庆大霉素肾损伤动物肾小管内出现蛋白管型。此外炎性坏死因子表达明显升高,除顺铂组大鼠肾脏凋亡坏死因子Caspase3表达明显升高外,其它三种因素所致肾脏的Caspase3未见明显变化。地塞米松可以明显降低血清BUN和Cre,下调炎性坏死因子及凋亡因子的表达。结论:四种因素可以明显致实验性急性肾损伤,同时使受损肾脏炎性坏死子mRNA表达明显升高,与血清BUN和Cre的升高具有相关性。除此,顺铂还伴有凋亡因子Caspase3表达的明显上调,表现出与其它三种因素的不同性。地塞米松对于实验性急性动物肾功能损伤具有明确的保护作用。     

白头翁皂苷B4调控结肠癌小鼠脂肪酸代谢重编程作用研究

为探究白头翁皂苷B4(anemoside B4)对结肠炎相关结肠癌(colities-associated cancer, CAC)小鼠肿瘤组织中脂肪酸代谢的影响,该研究采用氧化偶氮甲烷(azoxymethane, AOM)/葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)建立CAC小鼠模型,将实验小鼠随机分为5组(正常组,模型组以及白头翁皂苷B4低、中、高剂量组),实验结束后测量小鼠结肠长度、肿瘤大小,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色法观察结肠的病理变化,取结肠肿瘤切片进行空间代谢组学分析,分析肿瘤中脂肪酸代谢相关物质的分布变化情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR, RT-qPCR)检测结肠肿瘤组织中SREBP-1、FASN、ACCα、SCD-1、PPARα、ACOX、UCP-2、CPT-1 mRNA的表达。结果显示,模型组小鼠体质量显著降低(P<0.05),结肠长度显著缩短(P<0.001),肿瘤数量增加,病理学评分显著升高(P<0.01);空间代谢组学分析发现结...     

产地加工对白头翁皂苷B4含量的影响

目的:考察白头翁药材最佳产地加工方法.方法:2006年8月lO日于凤阳县雷达山采集白头翁后,选用晒干、烘干(50℃)、105℃杀青后烘干、沸水杀青后烘干、放置2 d后烘干等5种干燥处理方法.采用高效液相色谱法测定不同加工方法的白头翁中皂苷的含量.结果:105℃杀青后50℃干燥的药材白头翁皂苷含量最高.结论:该研究对白头翁药材产地加工方法的选用提供了科学依据.     

白头翁皂苷B4对脂多糖诱导的急性肺损伤的保护作用研究

目的探讨白头翁皂苷B4对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)的保护作用及其潜在的作用机制。方法采用RAW 264.7细胞进行细胞实验,用B4预先给药后,LPS刺激(100 ng·mL-1)24 h,然后测定培养液中一氧化氮(Nitric Oxide,NO)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)的浓度。将BALB/c小鼠随机分为正常对照组,模型组,地塞米松组(5 mg·kg~(-1)),B4高、中、低(2、4、8 mg·kg~(-1))剂量组。给药组小鼠腹腔注射不同剂量的药物,正常对照组和模型组给予生理盐水;地塞米松组、B4组及模型组鼻腔内滴入LPS建立急性肺损伤模型,24 h后收集支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid,BALF),全自动血液分析仪检测BALF中白细胞、中性粒细胞的数量,酶联免疫吸附法测定BALF中TNF-α,IL-1β和IL-6的水平,苏木素—伊红(HE)染色观察肺组织病理形态的改变。蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定肺组织中NF-κB蛋白表达水平。结果在细胞实验中,白头翁皂苷B4能够显著降低NO、TNF-α、IL-1β和IL-6的高表达(P 0.05,P 0.01)。体内实验中,与正常对照组相比,模型组小鼠BALF的中性粒细胞数量、TNF-α、IL-1β和IL-6的含量,肺组织损伤,以及NF-κB的蛋白表达均有显著上升(P 0.05,P 0.01);与模型组相比,白头翁皂苷B4低剂量组可以显著减少中性粒细胞的数量,降低TNF-α,IL-6的含量,改善肺组织损伤并下调NF-κB的蛋白表达(P 0.05,P 0.01)。结论白头翁皂苷B4能够有效改善LPS诱导的肺部损伤,其作用机制可能与下调NF-κB蛋白,降低相关炎性因子的释放有关。     

反相高效液相色谱法测定白头翁药材中白头翁皂苷B4的含量

目的 建立白头翁药材中白头翁皂苷B4的含量测定方法 .方法 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,色谱柱:Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸(28∶72)为流动相,流速:1.0 ml·min-1,检测波长:205 nm,柱温:30℃.结果 白头翁皂苷B4在29.4～147 mg·L-1内呈良好线性关系,相关系数为0.999 9,平均回收率为99.7%,RSD为1.14%.结论 该方法 简便、准确、重复性好,可用于白头翁药材的质量控制.     

白头翁皂苷对B16-F10黑色素瘤荷瘤小鼠炎症因子的影响及机制初步研究

目的探讨白头翁皂苷(Pulsatilla saponins,PS)对B16-F10黑色素瘤荷瘤小鼠炎症因子的作用及初步作用机制。方法通过皮下接种B16-F10黑色素瘤细胞建立荷瘤小鼠模型,灌胃给予白头翁皂苷低、中、高剂量(100、200、400 mg/kg)的药物,测量肿瘤体积及瘤重观察白头翁皂苷抗肿瘤作用;采用流式细胞术检测荷瘤小鼠血清中IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、INF-γ等细胞因子的水平变化;采用RT-PCR法进一步检测IL-6、INF-γmRNA表达;采用Western blot法检测肿瘤中Akt、p-Akt蛋白表达。结果与模型组比较,白头翁皂苷中、高剂量组均能抑制B16-F10皮下移植瘤的生长(P0.05)。给药组均能不同程度抑制血清中炎症因子IL-6、TNF-α、INF-γ水平;抑制肿瘤组织中INF-γ、IL-6 mRNA的表达以及p-Akt蛋白表达。结论白头翁皂苷能抑制B16-F10黑色素瘤荷瘤小鼠肿瘤的生长及炎症因子的表达,其机制可能与调控Akt信号通路有关。     

白头翁皂苷B4在正常大鼠和溃疡性结肠炎大鼠体内组织分布情况的比较

目的:建立大鼠体内白头翁皂苷B4的UPLC-ESI-MS/MS,比较白头翁皂苷B4在正常大鼠和溃疡性结肠炎大鼠肝、脾、肾、心、肺组织中的分布情况,为研究白头翁汤治疗溃疡性结肠炎的作用过程和机制提供参考。方法:雄性SD大鼠等分为正常组和模型组,均按5 g·kg~(-1)灌胃给药白头翁汤冻干粉,分别于15,45,120,360 min用5%水合氯醛麻醉正常大鼠和模型大鼠,取肝、脾、肾、心、肺组织,采用UPLC-ESI-MS/MS分析,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,ACQUITY BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),柱温35℃,流速0.4 m L·min~(-1)。结果:白头翁皂苷B4在大鼠体内存在广泛分布与代谢。在正常大鼠的肝、脾、肾、心、肺组织中,白头翁皂苷B4均在120 min时达到最大质量浓度。与正常组比较,在模型组大鼠肝、心组织中白头翁皂苷B4质量浓度各时间点均明显升高(P0.05);在脾和肾组织中,分别于45 min和120 min时明显升高(P0.05);在肺组织中,于120 min时显著增加(P0.05)。结论:溃疡性结肠炎大鼠对白头翁皂苷B4的吸收和生物利用度均优于正常组,溃疡性结肠炎的病理状态可导致白头翁汤中白头翁皂苷B4的吸收增强。     

薄层扫描法测定肠泰合剂中白头翁皂苷B4的含量

肠泰合剂是由白头翁、马齿苋等5味中药组成,具有迅速消除结肠及直肠充血、水肿,适用于慢性溃疡性结肠炎,直肠炎等疾病.本品目前无含量测定方法.本文拟对其进行定量测定.因方中白头翁为君药,本文运用薄层扫描法对肠泰合剂中的白头翁皂苷B4的含量进行测试,所得结果满意.     

白头翁汤对结直肠癌小鼠肠道菌群、炎症因子及HER-2表达的影响

目的:探讨白头翁汤对结直肠癌(CRC)小鼠肿瘤生长情况及血清炎症因子、HER-2表达的影响.方法:选择人源化BALB/c雌性小鼠40只,采用腋下注射小鼠法结直肠癌细胞株(CT 26)的方法成功建立小鼠结直肠癌模型后,依据随机数字表随机将小鼠分为对照组和研究组,每组各20只.对照组给予顺铂(0.1 mL/只)治疗,研究组...     

人参二醇组皂苷对内毒素诱导急性肾损伤小鼠肾脏UT-A2和UT-A3表达的影响

目的探讨人参二醇组皂苷(PDS)对内毒素血症小鼠肾脏保护作用,并揭示其保护作用与炎症因子的释放、尿素通道蛋白A2(UT-A2)和尿素通道蛋白A3(UT-A3)的表达关系。方法构建C57BL/6小鼠内毒素血症模型,实验分为4组,分别为对照组、LPS组、PDS+LPS组和Dexa+LPS组。麻醉下记录心率和平均动脉压;称取体质量和肾脏质量,并计算系数;肾脏固定和冻存,用于HE和免疫组化检测。结果与对照组比较,LPS组小鼠心率和平均动脉压下降(P0.05),TNF-α、IL-6含量明显升高(P0. 01),肾脏组织UT-A2和UT-A3蛋白表达水平显著降低且肾脏病理炎症增加和肾间质细胞水肿。与模型组比较,PDS+LPS组和Dexa+LPS组均能恢复心率和平均动脉压(P0.05);明显降低TNF-α、IL-6含量(P0.05),升高肾脏组织UT-A2和UT-A3蛋白的表达并且减轻肾脏病理炎症和间质细胞水肿。结论人参二醇组皂苷和地塞米松类似,可降低内毒素血症小鼠促炎因子TNF-α、IL-6含量,升高肾脏组织UT-A2和UT-A3蛋白的表达,改善肾脏病理炎症,减轻肾脏间质细胞水肿状态,从而有效防治保护内毒素血症肾脏损伤。     

不同产地白头翁遗传特性及白头翁皂苷B4量的比较

目的从遗传特性及化学成分角度研究不同产地白头翁的差异性。方法采用RAPD方法,通过反应体系的优化,借助于Nei法,对白头翁遗传差异性进行分析;采用HPTLC法和HPLC法比较10个产地白头翁的化学成分差异。结果在RAPD反应体系中,从100个随机引物中筛选出28个引物扩增产物具有多态性,各基因型间的Nei相似系数分布在0.080～0.839,平均相似系数为0.432。10个不同来源的白头翁明显地聚为A和B两大类群。10个产地的白头翁样品化学成分HPLC色谱图的相似度在0.757～0.989,白头翁皂苷B4的量相差达10～20倍;HPTLC图更直观的比较样品差异,聚类分析比较与遗传多态性并不完全一致。结论不同地区的白头翁之间遗传多样性较为丰富,遗传差异存在较明显的地域性;10个产地白头翁化学成分的组成和组分的量均存在一定的差异。     

和解法在急性肾损伤中的应用

近年来,由于我国社会逐渐步入老龄化,老年系统疾病逐渐增多,加之医疗过程中抗生素、肾素-血管紧张素-醛固酮系统阻滞剂、造影剂、对比剂等药物使用频率增多,急性肾损伤(AKI)的发病率明显升高.目前,西医治疗AKI 尚无有效方法,中医防治的相关临床报道也很少.自20 世纪70 年代末,本院赵金铎和戴希文两位教授开始应用和解法延缓肾损伤进展,临床取得良好疗效[1],并得到动物实验的进一步验证[2].在此基础上,我们采用和解法治疗AKI,不但能改善患者临床症状、缩短病程、恢复肾功能,甚至减少了终末期肾脏病的发生.兹总结介绍如下.     

人参皂苷K对顺铂所致小鼠急性肾损伤的保护作用

目的:探讨人参皂苷化合物K(简称人参皂苷CK)对顺铂所致小鼠急性肾损伤的保护作用。方法:32只小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、人参皂苷CK低、高剂量组(20,40 mg/kg)。除正常组别外,其他组别小鼠第5 d给药后1 h单次腹腔注射顺铂10 mg/kg,给药组分别给予人参皂苷CK 20 mg/kg、40 mg/kg连续灌胃10 d;正常组和模型组给予等体积生理盐水。第10d测定小鼠血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)含量,检测肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平,HE染色切片观察肾脏组织病理学变化。结果:与正常组相比,模型组小鼠血清Scr、BUN和MDA含量明显上升,SOD和GSH含量显著下降,病理改变加重,肾小管上皮细胞凋亡;人参皂苷CK给药组20、40mg/kg均可改善小鼠肾脏组织形态,抑制SOD和GSH活性下降,降低MDA含量。人参皂苷CK 20mg/kg给药组小鼠BUN、Scr含量均显著升高,分别为(6.4±0.7mmol/L)、(30.8±1.9μmol/L);40mg/kg给药组BUN水平显著升高,为(6.4±0.4mmol/L)。结论:人参皂苷CK对顺铂所致小鼠急性肾损伤有明显保护作用。     

苦参碱干预狼疮样小鼠肾组织表达MCP-1、核因子-κB及肾损伤的作用

 目的 探讨苦参碱对慢性移植物抗宿主病狼疮样小鼠肾组织单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）、核因子Ｂ表达及肾小管-间质纤维化的影响。方法 6周龄Balb/c (B/C, H-2^d) 雌性小鼠与C57BL/6 (B₆, H-2^b ) 雄性小鼠自行交配,获得杂交第一代雌性小鼠[(B/C ×B₆) F₁ (H-2^d/b)]。无菌取出Balb/c雌性小鼠的胸腺、淋巴结和脾脏,分离淋巴细胞,按每只鼠5×10⁷个活细胞,分别于实验的第1、4、7、10天免疫F₁小鼠,末次免疫后,F₁的小鼠被随机分为模型组、苦参碱组各23只,苦参碱组每天按30 mg·kg^-1·d^-1腹腔注射苦参碱生理盐水,模型组、正常对照组予等量生理盐水注射,分别于实验的第8、16周末,随机取3组的小鼠各8只,收集24 h尿量,采血取肾,检测24 h尿蛋白定量和血肌酐,采用酶联免疫吸附法定量测定小鼠血清抗双链DNA（anti-dsDNA）抗体、抗核抗体(ANA)、白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α;用PAS染色、免疫组化技术检测肾小球和肾小管间质中的MCP-1、核因子（NF）-κB蛋白的表达和分布,采用HPIAS-1000型全自动彩色图像分析系统,对免疫组化染色阳性信号进行扫描,半定量分析各组阳性表达的光密度值。结果 治疗组小鼠的24 h尿蛋白定量、血清肌酐与同期病理组比较,有明显的改善（P<0.05）;anti-dsDNA、ANA、IL-6、TNF-α显著低于同期病理组(P<0.01);肾组织MCP-1、NF-κB表达较正常肾组织显著增高,但较同期病理组弱(P<0.05);肾小球硬化指数和肾小管间质损伤指数低于病理组。结论 慢性移植物抗宿主病小鼠模型,具有狼疮性肾炎的典型特征,苦参碱可降低血清anti-dsDNA、ANA、IL-6、TNF-α的水平,对杂交F₁代小鼠自身免疫反应有一定的抑制作用,并抑制NF-κB的活化,下调IL-6、TNF-α、MCP-1的表达,延缓肾小球硬化和肾小管间质纤维化的进展。     

白头翁皂苷对NCI-H460细胞增殖、凋亡的影响及其差异表达蛋白筛选

目的:采用nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术筛选白头翁皂苷抑制人大细胞肺癌细胞NCI-H460增殖及诱导凋亡作用的差异表达蛋白,初步推测其作用机制。方法:通过体外培养NCI-H460,人卵巢腺癌细胞SK-OV-3,人胃腺癌细胞SGC-7901,利用噻唑蓝(MTT)比色法检测白头翁皂苷的抗肿瘤活性;磷脂酰丝氨酸外翻分析-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)染色流式细胞术及4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测对细胞凋亡的影响;运用nano LC-LTQ-Orbitrap-MS/MS技术对白头翁皂苷干预后NCI-H460细胞全蛋白进行分析与鉴定;利用Thermo Proteome Discoverer 1. 4软件进行蛋白质鉴定,Sieve 2. 1软件对所有样本蛋白进行相对定量分析,筛选并鉴定差异表达蛋白后,通过DAVID Bioinformatics Resources 6. 8和京都基因及基因组百科全书(KEGG)数据库对差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果:白头翁皂苷对NCI-H460,SK-OV-3及SGC-7901细胞的增殖均有一定的抑制作用,且能诱导NCI-H460细胞的凋亡。白头翁皂苷主要通过调节核糖体的生物功能、糖酵解/糖异生、碳代谢、蛋白质的生物合成及mRNA的代谢等生物进程来影响NCI-H460细胞的增殖及凋亡,可能通过干预丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和调控Caspase途径来诱导NCI-H460细胞的凋亡。结论:白头翁皂苷具有抑制NCI-H460细胞增殖及诱导其凋亡的作用,其作用机制可能与干预MAPK信号通路和调控Caspase途径等有关,为研究白头翁皂苷抗肿瘤的分子机制提供了新思路。     

核因子кB对支气管哮喘大鼠淋巴细胞增殖和凋亡的调节作用及雷公藤甲素对其影响

目的 探讨核因子кB(NF-кB)是否参与支气管哮喘淋巴细胞增殖和凋亡的调节过程以及雷公藤甲素对哮喘淋巴细胞增殖和凋亡的调控作用是否通过NF-кB发挥。方法 分别给予哮喘大鼠模型NF-кB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)和免疫抑制剂地塞米松及雷公藤甲素干预,进行病理检查、气道反应性测定,采用免疫荧光法检测肺组织和脾淋巴细胞NF-кB P65的表达,免疫组织化学法测定脾淋巴细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、流式细胞术检测脾淋巴细胞凋亡,电泳迁移率改变试验测定NF-кB活性。结果 哮喘气道及脾淋巴细胞NF-кB的核表达量和活性均明显高于正常对照(均P<0.05);哮喘脾淋巴细胞的增殖率明显高于正常对照(P<0.05),而凋亡率明显低于正常对照(P<0.05);NF-кB抑制剂PDTC的应用可使哮喘异常上调的NF-кB核表达量及活性下降,脾淋巴细胞增殖减少、凋亡增多;且NF-кB活性与脾淋巴细胞的增殖率呈显著正相关(r=0.89,P<0.05),而与其凋亡率呈显著负相关(r=-0.54,P<0.05)。在体应用雷公藤甲素后,哮喘气道及脾淋巴细胞NF-кB的核表达量及活性、脾淋巴细胞的增殖率均明显下降(均P<0.05),而凋亡率明显增加(P<0.05),同时气道炎性细胞的浸润及气道高反应性亦明显减轻(均P<0.05),且气道嗜酸粒细胞的数量及气道的反应性与NF-кB活性呈     

核因子кB对支气管哮喘大鼠淋巴细胞增殖和凋亡的调节作用及雷公藤甲素对其影响

目的 探讨核因子κB(NF—κB)是否参与支气管哮喘淋巴细胞增殖和凋亡的调节过程以及雷公藤甲素对哮喘淋巴细胞增殖和凋亡的调控作用是否通过NF—κB发挥。方法 分别给予哮喘大鼠模型NF—κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)和免疫抑制剂地塞米松及雷公藤甲素干预,进行病理检查、气道反应性测定,采用免疫荧光法检测肺组织和脾淋巴细胞NF—κB P65的表达,免疫组织化学法测定脾淋巴细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、流式细胞术检测脾淋巴细胞凋亡,电泳迁移率改变试验测定NF—κB活性。结果 哮喘气道及脾淋巴细胞NF—κB的核表达量和活性均明显高于正常对照(均P<0.05);哮喘脾淋巴细胞的增殖率明显高于正常对照(P<0．05)。而凋亡率明显低于正常对照(P<0．05);NF—κB抑制剂PDTC的应用可使哮喘异常上调的NF-κB核表达量及活性下降,脾淋巴细胞增殖减少、凋亡增多：且NF—κB活性与脾淋巴细胞的增殖率呈显著正相关(r=0．89,P<0．05),而与其凋亡率呈显著负相关(r=0．54,P<0．05)。在体应用雷公藤甲素后,哮喘气道及脾淋巴细胞NF—KB的核表达量及活性、脾淋巴细胞的增殖率均明显下降(均P<0．05),而凋亡率明显增加(P<0．05),同时气道炎性细胞的浸润及气道高反应性亦明显减轻(均P<0．05),且气道嗜酸粒细胞的数量及气道的反应性与NF—κB活性呈显著正相关(r分别为0．79和0．68,P<0．05);雷公藤甲素的作用与地塞米松差异无显著性(P>0．05)。结论 (1)NF—KB通过促进淋巴细胞增殖并抑制其凋亡而参与哮喘炎症反应及气道高反应性的形成;(2)雷公藤甲素通过抑制NF—κB进而抑制淋巴细胞增殖,从而发挥抗哮喘气道炎症的作用,它抑制NF—κB的分子机制是否与糖皮质激素类似有待进一步研究。