转染IKK2dn的受者树突状细胞回输延长同种异体肾移植大鼠的存活时间

目的 探讨IKK2dn基因转染并负载供者抗原的受者未成熟树突状细胞(imDC)延长同种异体肾移植大鼠的存活时间及其机制.方法 获取和培养Lewis大鼠骨髓源性DC,转染IKK2dn并负载BN大鼠可溶性抗原进行体外实验,检测CD86和主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ的表达及DC刺激T淋巴细胞增殖的能力.肾移植受者为Lewis大鼠,用随即数字表法分DC组、空转染组、转染组、对照组,术前7d分别输注1×10~7个D、Adv-0-DC、负载BN抗原的Adv-IKK2dn-DC和等量生理盐水,供者均为BN大鼠.另设第三方供者组,术前处理同转染组,供者为Wistar大鼠.移植后检测各组受者T淋巴细胞的增殖能力及血清白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的表达水平,观察各组大鼠的存活时间和发生排斥反应情况.结果 DC的体外实验结果显示:与转染IKK2dn前相比,转染后DC仍能低水平表达CD86和MHC Ⅱ,负载供者抗原后CD86和MHCⅡ表达均增加,而转染IKK2dn后再负载供者抗原,CD86和MHC Ⅱ的表达未发生明显变化;DC负载供者抗原后,刺激T淋巴细胞增殖的能力明显增强(P<0.05),而转染IKK2dn并负载供者抗原后不能有效刺激T淋巴细胞增殖.肾移植术后的检测结果显示:转染组T淋巴细胞的增殖能力明显低于其他4组(P<0.05或P相似文献   

肺癌抗原负载的树突细胞体外诱导细胞毒性T淋巴细胞的杀瘤作用

目的探讨不同方式肺癌抗原负载的树突状细胞(DC)在抗肿瘤免疫中的作用。方法取肺癌患者外周静脉血体外诱导和培养DC,分别以肺癌细胞总RNA转染DC(转染组)、肺癌细胞融合DC(融合组)和肺癌细胞冻融抗原负载DC(冻融组),以未负载抗原的DC(未负载组)和T细胞组作为对照,比较各组(每组n=6)DC诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肺癌细胞A_(549)的杀伤率(%)。结果转染组、融合组、冻融组、未负载组和T细胞组的杀伤率分别为(73．2±5．9)%、(61．6±6．2)%、(55．3±6．9)%、(22．3±6．1)%和(19．8±6．3)%(P＜0．05)；其中转染组、融合组和冻融组高于未负载组和T细胞组(P＜0．05)；转染组和融合组之间差异无统计学意义(P＞0．05),但两者均大于冻融组(P＜0．05)。RNA转染DC所需的肿瘤细胞数仅是冻融及融合方式的1/5和1/6。结论3种肺癌抗原负载DC方式均有诱导效应细胞杀伤靶细胞的增效作用,而以肺癌细胞总RNA转染方式为佳。     

转Fas配体基因的树突状细胞在诱导大鼠肝移植免疫耐受中的作用

目的 探讨受者体内注射转FasL基因垢树突状细胞（DC）诱导大鼠肝移植免疫耐受的作用机制。方法 建立SD大鼠→Wistar大鼠肝移植模型。分别于术前5d给受者腹腔注射转染多药耐药基因（mdr1)的DC细胞或转染FasL基因的DC细胞,并设空白对照组和环孢素A（CsA)对照组。术后3d和7d测定移植肝功能,册时以半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测移植肝组织中Fas,Fas配体（FasL)及白细胞介素12（IL-12）,并观察受鼠的存活时间。结果 空白对照组的大鼠术后9-15d全部死亡,CsA治疗组及转FasL基因治疗组;空白对照组及转mdr1基因治疗组的FasL及IL-12表达增高,而CsA治疗组及转FasL基因治疗组的FasL及IL-12呈不表达或低表达。结论 转染FasL基因的DC细胞能有效地诱导大鼠肝移植免疫耐受,其机理可能与诱导了肝脏内浸润淋巴细胞凋亡及抑制IL-2的表达有关。     

输注转染FasL基因的供者树突状细胞减轻小鼠心脏移植排斥反应

目的 探讨转染FasL基因的供者树突状细胞(DC)对小鼠心脏移植排斥反应的影响.方法 分离并培养C57BL/6小鼠骨髓DC,然后采用脂质体法以自行构建的pTracer-FasL真核表达质粒转染DC.以C57BL/6小鼠为供者,Balb/c小鼠为受者,将其分为转染组(n=12)、未转染组(n=12)及移植对照组(n=12).转染组小鼠心脏移植前7 d经阴茎背静脉注射1×106个转染FasL基因的供者DC;未转染组小鼠心脏移植前7 d经阴茎背静脉注射1×106个未转染的供者DC;移植对照组仅行心脏移植,不接受供者DC输注.供心均移植于受者腹腔内.各组中,6只小鼠用于观察移植心脏存活时间,另6只于术后7 d处死,取移植心脏,进行组织学观察及移植心脏排斥反应病理分级.结果 转染组、未转染组和移植对照组小鼠移植心脏存活时间的中位数分别为20 d、8.5 d和9 d,转染组移植心脏的存活时间明显长于未转染组和移植对照组(P＜0.01).转染组中,2只排斥反应的病理分级为0级,4只为1级;未转染组中,2只为2级,4只为3级;移植对照组中,1只为2级,5只为3级.转染组排斥反应的病理分级明显低于移植对照组(P＜0.01).结论 受者于心脏移植前输注转染FasL基因的供者DC,可有效延长移植心脏的存活时间,并减轻排斥反应的程度.     

腺病毒介导G250基因转染树突状细胞激活免疫效应细胞治疗肾癌的实验研究

目的 探讨以腺病毒(Ad)载体介导肾癌相关抗原G250基因转染制备树突状细胞(DC)瘤苗.体外诱导自体T淋巴细胞特异性抗肾癌免疫效应. 方法 自健康人外周血中提取单核细胞,将贴壁细胞分为3组(Ad-G250基因转染组、G250蛋白致敏组、未致敏组),用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和诱导活化;3组DC细胞中分别加入自体T淋巴细胞,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL).RT-PCR检测G250在DC细胞内的转录情况;流式细胞仪检测DC表面标志分子和G250抗原蛋白的表达情况;四甲基偶氮唑盐法检测3组CTL对肾癌细胞株786-0和肺癌细胞株A549的杀伤活性. 结果 Ad-G250高效转染DC,G250阳性细胞率为(52.2±1.5)%,G250蛋白在DC:内成功表达:基因转染组DC中成功扩增出G250产物;Ad-G250转染的DC表面标志CD_(80)、CD_(83)、CD_(86)、CD_(1a)、HLA-DR表达高于其他2组.差异均有统计学意义(P<0.05).Ad-G250基因转染组、G250蛋白致敏组、未致敏组诱导的3组CTL对786-0靶细胞杀伤活性分别为(83.4±2.8)%、(79.6±2.4)%、(77.3±2.1)%,组间比较差异有统计学意义(F=69.172,P=0.000);3组CTL对A549靶细胞杀伤活性差异无统计学意义(F=0.373,P=0.693). 结论 以Ad为载体介导抗原基因转染DC,并诱导特异的CTL,技术上可行,所诱导的CTL杀伤活性强,有望成为一种肿瘤免疫治疗方法.     

转染RhoA基因对树突状细胞抗胃癌功能的影响

目的 研究转染RhoA基因对树突状细胞(DC)免疫功能的影响,观察修饰后的DC在体外诱导高效而特异的抗胃癌免疫效应.方法 用增强型绿色荧光蛋白标记的RhoA重组腺病毒载体作为介质,将RhoA基因转染入DC,用RT-PCR法检测培养上清RhoA基因的表达.检测这种DC分泌细胞因子IL-12、TNF-α的功能,以及表面分子CD1α、CD83、MHC-Ⅱ、CD80、CD86的表达,用MTT法诱导人特异的细胞毒性T淋巴细胞的能力. 结果培养上清中均可以检测到RhoA基因表达;在这种转基因DC的上清中IL-12、TNF-α 含量分别为(301±24)和(418±64)pg/ml,明显比非转染的DC组高,P＜0.05;转基因DC表面高表达CD1α(70.13±0.03)、CD83(68.10±0.03)、MHC-Ⅱ(69.73±0.13)、CD80(78.73±0.25)、CD86(74.20±0.05),而在非转染的DC中是低表达的;经转染RhoA基因的DC提呈的T细胞对胃癌细胞的杀伤率为87%,而未修饰的DC杀伤作用较低. 结论RhoA基因转染修饰的DC能诱导细胞毒性T淋巴细胞的特异性,显著地提高DC的抗原提呈功能,在体外能诱导高效而特异的抗胃癌免疫效应.     

干扰素γ诱导蛋白10基因修饰小鼠树突状细胞的抗前列腺癌作用研究

目的　探讨转染干扰素γ诱导蛋白 10 (IP 10 )基因构建的加载树突状细胞 (DC)瘤苗 ,对特异性细胞毒T淋巴细胞 (CTL)的诱导作用。　方法　将RM 1细胞的裂解产物作为肿瘤抗原加载小鼠骨髓来源的DC(Tuly DC) ,将IP 10DNA插入真核表达质粒 ,通过脂质体法将IP 10基因转染至Tuly DC ,构建DC瘤苗 ;RT PCR法检测IP 10基因转染成功 ,趋化实验检测对淋巴细胞的趋化作用 ,混合淋巴细胞反应 (MLR)检测瘤苗刺激T细胞的增殖能力 ,MTT法检测瘤苗诱导的特异性CTL的杀伤活性。　结果　转染DC的IP 10表达明显增强 ,其上清对淋巴细胞有较强的趋化作用 ;DC瘤苗刺激T细胞增殖能力增强 ,每分钟闪烁计数值分别为 18913.0 9± 2 735 .33(1∶10 )和 17736 .6 7± 2 5 31.70 (1∶2 0 ) ,与各对照组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 1) ;DC瘤苗诱导的CTL对RM 1细胞的特异性杀伤率分别为 (37.95± 5 .2 6 ) % (效靶比 2 0∶1)和 (43.87± 7.6 3) % (效靶比 4 0∶1) ,均高于各对照组 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　所构建的前列腺癌DC瘤苗能有效提高其抗原提呈功能和特异性CTL的诱导。     

人凋亡相关因子配体及人转化生长因子-β1基因共转染大鼠未成熟树突状细胞对其生物学活性的影响

目的 观察人凋亡相关因子配体(hFasL)及人转化生长因子-β1( hTGF-β1)基因共转染的大鼠未成熟树突状细胞(imDC)对其生物学活性影响.方法 实验分6组:mDC组、imDC组、空载体组、hFasL基因转染组、hTGF-β1基因转染组及hFasL-hTGF-β1基因共同转染组(即共转染组).用hFasL或(和)hTGF-β1真核表达载体(pIRES2-EGFP-hFasL、pIRES2-EGFP-hTGF-β1)转染培养6d后大鼠骨髓来源的imDC,转染24 ～48 h后应用荧光显微镜、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western blot、流式细胞术及混合淋巴细胞反应(MLR)检测不同基因修饰的imDC的生物学活性.结果 荧光显微镜观察显示pIRES2-EGFP-hFasL及pIRES2-EGFP-hTGF-β1质粒转染imDC后可见绿色荧光;ELISA检测共转染组和转化生长因子(TGF)组TGF-β1基因表达均高于mDC组、imDC组、空载体组及FasL组(P值均＜0.01),imDC组、空载体组及FasL组的TGF-β1基因表达均高于mDC组(P＜0.05).hFasL基因表达各组间的差异均无统计学意义(P值均＞0.05);经Westen blot检测hFasL及hTGF-β1基因转染组有均有相应蛋白表达(相对分子质量分别为31×103和43×103);流式细胞术显示表面分子CD86、CD80在mDC表达高于imDC及各基因转染组和空载体组;转染后混合淋巴细胞反应(MLR)显示,共染组T细胞的增殖反应均明显弱于TGF组和FasL组(P＜0.05).结论 联合FasL和TGF-β1基因转染的imDC在体外诱导同种异体免疫耐受的能力强于FasL或TGF-β1单基因转染.     

胆管癌抗原肽对转染全长野生型p53的树突状细胞免疫功能的影响

目的研究胆管癌抗原肽对转染全长野生型p53的树突状细胞(wtp53DC)免疫功能的影响。方法先将全长野生型p53导入脂质体内并转染小鼠骨髓来源的DC,然后用胆管癌抗原肽修饰wtp53DC,检测这种树突状细胞的抗原提呈功能。结果抗原肽修饰的wtp53DC和单纯DC的上清3种细胞因子含量明显增加,分别为(545.2±12.1)ng/L,(511.1±13.3)ng/L,(537.1±11.1)ng/L(P<0.05);wtp53DC刺激小鼠脾脏T细胞增殖水平明显高于对照组(P<0.01);该细胞高表达B7-1、B7-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ(P<0.05);能够特异性地杀伤胆管癌细胞,杀伤率81.6%。结论全长野生型p53基因转染+胆管癌抗原肽联合修饰树突状细胞能诱导小鼠细胞毒性T淋巴细胞的特异性。     

小鼠端粒酶蛋白亚单位转染树突状细胞体外诱导特异性抗肝癌细胞免疫应答

目的 观察携带小鼠端粒酶蛋白亚单位(mTERT)基因蕈组腺病毒载体(AdmTERT)转染树突状细胞(DC)后诱发免疫效应细胞产生特异性抗肝癌细胞免疫应答的研究.方法 用流式细胞仪分析及电镜观察培养6 d DC的细胞表型及形态,Ad-mTERT重组腺病毒转染体外培养的小鼠DC,Western blot检测mTERT融合蛋白表达;用负载mTERT的DC刺激同型淋巴细胞,免疫磁珠分选CD8~+T细胞做为效应细胞,小鼠肝癌细胞株(H22)及小鼠结肠癌细胞(CT26)作为靶细胞,用酶联免疫吸附试验(ELISA)及酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测干扰索(IFN)-γ分泌量和释放抗原特异性IFN-γ的T细胞数,~(51)Cr释放法检测细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞的杀伤活性.结果 细胞表型及形态观察证实小鼠骨髓来源的DC为成熟的树突状细胞;AdmTERT转染DC后能正确表达mTERT融合蛋白,用AdmTERT转染DC致敏的淋巴细胞IFN-γ分泌量(208.6μg/L)和分泌IFN-γ的特异性T细胞的数量(341/10~6脾细胞)都高于Ad-GFP转染的DC组(14.2μg/L,33/10~6脾细胞)和单纯DC组(12.1μg/L,19/10~6脾细胞,P＜0.05).AdmTERT修饰DC刺激产生的效应T细胞在效靶比为90:1时,对H22细胞的杀伤率(54.2%)明显高于AdGFP致敏组(8.2%)和未致敏DC组(4.5%,P＜0.05),而对CT26细胞无明显杀伤作用.结论 AdmTERT修饰的DC体外能够诱导出针对mTERT抗原特异性的CTL效应,可特异性杀伤mTERT阳性的肝癌细胞.     

二硝基苯修饰B16细胞对黑色素瘤小鼠疗效的实验研究

目的：探讨半抗原——二硝基苯（DNP）修饰的恶性黑色素瘤（恶黑）细胞激活树突状细胞（DC）后,对转移性黑色素瘤小鼠的抗肿瘤效应。方法：采用DNP修饰恶黑细胞B16（H-2^b）,在体外激活C57BL/6小鼠（H-2^b）外周血来源的DC,用于激发自体的T细胞,观察其对T细胞的增殖和特异性T细胞杀伤功能。在由B16细胞接种产生的荷瘤C57BL/6小鼠实验中,将小鼠随机分为5组,于左背部注射及于左耳背面涂抹DNP修饰B16瘤苗联合DC（DNP-B16-DC组）、B16激活DC（B16-DC组）、单纯DC（DC组）、单纯DNP（DNP组）和生理盐水（生理盐水组,每组6只）,观察各组抑瘤率和迟发型超敏反应。结果：经DNP修饰的B16细胞激活的DC,诱发的T细胞增殖能力和对B16细胞的特异性杀伤效应均明显高于未其修饰的B16细胞组和DC组。荷瘤小鼠实验显示,DNP-B16-DC组和单纯DNP组小鼠耳肿胀明显增加,其迟发型超敏反应明显强于其他各组。实验中DNP组有1只小鼠用药后20d死亡,其余小鼠DNP-B16-DC组抑瘤率（96.16%）明显高于B16-DC组（50.11%）、DC组（22.12%）和DNP组（57.79%,P〈0.01）,显示DNP-B16-DC具有更强的抑瘤作用。结论：DNP修饰B16所激活的DC可以诱导更强的特异性抗肿瘤作用。     

来氟米特抑制狼疮肾炎患者树突状细胞成熟的实验研究

目的：观察来氟米特活性代谢产物A771726处理前后狼疮。肾炎（1upus nephritis，LN）患者树突状细胞（DC）表面标志及功能的改变，探索来氟米特治疗LN的新途径。方法：分离LN患者外周血单个核细胞，用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）、白细胞介素-4（interleukin-4，IL-4）等细胞因子诱导DC成熟，来氟米特组再加入A771726培养。培养第9天收集DC细胞，流式细胞仪检测CD80、CD86和HLA-DR的表达。肌法检测DC刺激淋巴细胞增殖的能力，ELISA法检测混和淋巴细胞反应培养上清IL-10和IFN-γ水平。结果：A771726处理后的DC表达0380、cm86和HLA-DR百分数较对照组均明显降低[（62．80±1．67）vS（78．35±4．50），（64．50±13．06）vs（84．91±9．80），（71．44±11．56）vs（91．51±7．63）]，P均〈0．01；A771726处理后的DC与T细胞混合培养，其刺激T细胞增殖相应的OD值较对照组明显降低[DC：TC=1：10时，（0．295±0．069）vs（0．468±0．100）；DC：TC=1：50时，（0．196±0．044）vs（0．391±0．023）]，P均〈0．01。其混合培养的上清液中IL-10水平较无A771726处理的DC与T细胞的混合培养上清液明显降低[（205．0±35．8）pg／ml vs （443．6±93．2）pg／ml，P〈0．01]，而IFN-γ两者间无统计学差异[（89．3±11．9）pg／ml vs （99．9±15．7）pg／ml，P〉0．05]。结论：A771726在体外可抑制LN患者外周血DC的成熟，未成熟DC能抑制T细胞增殖及T细胞向Th2细胞转化。     

重组腺病毒介导hPSMA和4—1BBL基因转染小鼠树突状细胞的变化及临床意义

目的：研究hPSMA和41BBL基因转染小鼠树突状细胞（DC）后的变化及其在前列腺癌方面的临床意义。方法 以含hPsMA和41BBL基因的重组腺病毒载体转染C57BL／6j小鼠骨髓来源的DC,将培养的DC分为阳性组（Ad／hPsMAIRES-m4—1BBL组）、阴性对照组（Ad5LacZ组）和未转染组,分别加入重组腺病毒、空载质粒腺病毒和生理盐水后,采用流式细胞仪测定腺病毒的转染效率;用相差显微镜、扫描电镜和透视电镜观察DC的形态学变化;用流式细胞仪分析表型变化;用Western blot检测DC hPSMA蛋白的表达。结果：经体外诱导培养后获得的树突状细胞在相差显微镜、透视电镜和扫描电镜下均观察到具有典型形态的成熟DC;流式细胞仪检测腺病毒转染效率为70％,Ad／hPSMA-IRES-m4—1BBL组DC细胞表面MHCⅡ、CD80、CD86较其余两组无明显差异（P〉0．05）,但4-1BBL有明显提高（P〈0．05）;Western blot检测DC蛋白表达出PSMA。结论：本实验中获得的DC具有成熟DC的典型特征,DC表面的4-1BBL表达率明显上调,表达出PSMA蛋白。本研究将为DC应用于前列腺癌的生物治疗奠定基础。     

FasL-transfected endothelial cells decrease the proliferative response of allogeneic PBL

Graft endothelium has a key role in organ transplantation because it regulates graft infiltration by allogeneic activated T cells. Overexpression of death molecules that could induce apoptosis of alloreactive T cells might be an alternative to the immunosuppressive treatment currently used in graft transplantation. Several studies have shown that immune-privileged sites express Fas ligand (FasL) and induce apoptosis of activated T-cells. We propose that endothelial cells engineered to express FasL could inhibit alloreactive T cell-proliferation by inducing apoptosis. An expression vector was constructed with human FasL cDNA and used to transfect an endothelial cell line (ECV304 cells). We demonstrated that FasL-transfected ECV304 cells were effective in inducing apoptosis of Jurkat T cell lymphoma as an agonist anti-Fas antibody. Using a mixed lymphocyte-endothelial cell culture model we observed that FasL-transfected ECV304 cells which conserved their two principal costimulatory pathways inhibited alloreactive T cell-proliferation by inducing activated T-cell apoptosis. These results suggest that endothelial cells could be interesting candidates to convey a death signal and induce hyporesponsiveness of alloreactive T cells during organ transplantation.     

血必净注射液对系统性红斑狼疮小鼠树突状细胞免疫效应的影响

目的：探讨树突状细胞（DC）在系统性红斑狼疮（SLE）发病机制中的作用以及血必净注射液对SLE 小鼠DC免疫效应的影响.方法：30只SLE模型小鼠（清洁级EB病毒膜抗原BLLF1基因转基因小鼠）,均为雌性,体重30~40 g.分为模型组（随机选择8周龄5只和10周龄5只）、8周龄给药组（10只）、10周龄给药组（10只）.雌性昆明种小鼠10只作为正常对照组.两给药组连续14 d腹腔内注射血必净注射液6.4 ml/kg后处死,分离脾脏,提取DC和T淋巴细胞,流式细胞术检测DC细胞免疫表型,MTT法检测脾T淋巴细胞增殖活性,并与模型组和正常对照组比较.结果：血必净注射液治疗可以显著升高SLE小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86和MHC结Ⅱ的表达（P〈0.05或P〈0.01）,提高脾脏组织和DC培养上清中IL-12水平,并明显减轻SLE小鼠T淋巴细胞增殖的抑制效应（P〈0.05或P〈0.01）.8周龄和10周龄给药组间差异无显著性（P〉0.05）.结论：血必净注射液治疗SLE可以改善DC的功能障碍,促进淋巴细胞的增殖和发育.     

环氧化酶2抑制剂对卡介苗感染的人脐血源性树突状细胞分泌的Thl／Th2细胞因子水平的影响

目的：通过研究环氧化酶2（cyclooxygenase2,Cox-2）抑制剂对卡介苗（BacillusCalmette-Guerin,BCG）感染的人脐血源性树突状细胞分泌的Thl／Th2型细胞因子水平的影响,探讨其抗膀胱肿瘤效应及其潜在机制。方法：从人脐带血中分离得到单个核细胞,将其诱导培养为树突状细胞（Dendritic cell,DC）。采用BCG感染DC,并与前列腺素E^2（PGE^2）、塞来昔布等共培养,ELISA法检测各组培养上清中Thl型细胞因子IL—12和Th2型细胞因子IL—10表达水平。结果：经鉴定证实获得形态学及表型典型的DC。ESISA检测结果显示BCG可同时增加DC的IL—12和lL—10分泌,而塞来昔布剂量依赖性地显著增强BCG感染DC的IL-12的表达,抑制其IL-10表达;PGE：的作用与此相反,提示塞来昔布可诱导偏向Thl型而PGF^2。可诱导偏向Th2型免疫应答的免疫漂移作用。结论：选择性Cox-2抑制剂塞来昔布能够增强BCG激活的Thl型免疫应答,抑制Th2型应答,诱导向Thl型应答漂移,从而增强BCG激活的抗肿瘤免疫效应。其机制可能是通过抑制Cox-2活性下调PGEz的表达,从而遏制PGE。诱导的IL—10的分泌及其对IL—12分泌的抑制作用。     

衣霉素诱导内质网应激对树突状细胞成熟分化的影响

目的:内质网应激(ERS)是真核细胞中普遍存在的适应性应激反应,本研究应用ERS特异性诱导剂衣霉素(TM)体外刺激小鼠脾脏树突状细胞(DC),观察DC功能状态的改变情况.方法:分离正常BALB/c小鼠脾脏DC进行体外培养,给予ERS特异性诱导剂TM刺激,观察不同剂量、不同作用时间TM刺激与DC表面共刺激分子表达及分泌功...     

人卵巢癌细胞光动力学细胞裂解物负载树突状细胞对体外免疫应答的影响

目的:研究人卵巢癌细胞光动力学细胞裂解物对体外免疫应答反应的影响.方法:体外诱导培养人脐血树突状细胞(DC).人卵巢癌细胞SKOV3分别用光动力学方法(激光照射)及冻融的方法制备细胞裂解物,与DC共培养48 h,RPMI1640与DC培养作为阴性对照,采用流式细胞仪检测DC免疫表型CD1a、CD80、CD86、HLA-...     

内质网应激对树突状细胞表面晚期糖基化终产物受体表达的影响

目的:晚期糖基化终产物受体(RAGE)与其配体结合在炎症及免疫反应中具有重要作用.本研究探讨内质网应激(ERS)在高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导树突状细胞(DC)表面RAGE上调中的作用及意义.方法:分离正常BALB/c小鼠脾脏DC进行体外培养,给予HMGB1刺激后检测DC表面RAGE表达水平及细胞ERS相关分子...     

Fas/Fas ligand interactions play an essential role in the initiation of murine autoimmune diabetes

Apoptosis via Fas/Fas ligand (FasL) interactions has been proposed to be a major T-cell-mediated effector mechanism in autoimmune diabetes. To elucidate the role of Fas/FasL interactions in NOD diabetes, the effects of neutralizing anti-FasL antibody on autoimmune responses were evaluated. Islet-specific CD8(+) and CD4(+) T-cells expressed FasL upon activation and mediated FasL-dependent cytotoxicity against Fas-expressing target cells in vitro, although their cytotoxicity against islet cells was not blocked by anti-FasL antibody. Moreover, administration of anti-FasL antibody failed to inhibit diabetes in vivo in the CD8(+) T-cell adoptive transfer model. On the other hand, blockade of Fas/FasL interactions significantly inhibited CD4(+) T-cell-dependent diabetes in adoptive transfer models. These results suggest a substantial contribution of Fas/FasL interactions to CD4(+), but not CD8(+), T-cell-mediated destruction of pancreatic beta-cells. When anti-FasL antibody was administered to NOD mice between 5 and 15 weeks of age, the onset of diabetes was slightly delayed but the incidence was not decreased. However, administration of anti-FasL antibody at 2-4 weeks of age completely prevented insulitis and diabetes. These results suggest that Fas/FasL interactions contribute to CD4(+) T-cell-mediated beta-cell destruction and play an essential role in the initiation of autoimmune NOD diabetes.