生物安全实验室过氧化氢熏蒸消毒灭菌效果的监测

目的观察过氧化氢蒸汽熏蒸消毒对生物安全实验室内空间及物体表面灭菌效果,同时探索敞开性设备内部表面达到最佳灭菌效果的方案。方法采用载体定性杀菌试验法,检测不同过氧化氢蒸汽发生剂量对生物安全实验室内空间及敞开性设备表面熏蒸消毒效果。结果保持室内常温,相对湿度40%~50%,用Bioquell Z-2过氧化氢蒸汽发生器,进行汽化熏蒸消毒,密闭作用60 min,空间分布过氧化氢浓度含量为9 g/m3可以对室内空间不同位置表面放置的染菌嗜热脂肪芽胞杆菌完全杀灭;对室内敞开性设备内部不同位置表面放置的染菌嗜热脂肪芽胞杆菌,过氧化氢浓度含量15 g/m3可完全杀灭。结论用Bioquell Z-2过氧化氢蒸汽发生器产生的蒸汽对生物安全实验室空间和敞开性设备内部表面熏蒸可以将污染在载体上的细菌芽孢达到完全杀灭,消毒效果符合要求。     

智能机器人消毒与传统人工消毒在ICU终末消毒中的应用效果对比

目的 对比智能机器人与传统人工消毒在ICU终末消毒中的应用效果。方法 2022年3—9月,在河南省人民医院呼吸重症病区分别采用智能消毒机器人和传统人工消毒的方法进行终末消毒,比较两种消毒方式对物体表面和空气消毒的合格率、消毒后检出菌落数及终末消毒时间的影响。结果 观察组物表消毒合格率高于对照组(P<0.05)。观察组空气消毒合格率高于对照组,但差异无统计学意义(P=0.072)。观察组物表菌落数低于对照组(P<0.05)。两组空气菌落数差异无统计学意义(P=0.103)。两组终末消毒时间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 智能消毒机器人能提高ICU物体表面的终末消毒效果,减轻护士的工作负担。     

动物生物安全三级实验室的使用体会

根据生物安全实验室的分级,结合动物生物安全三级实验室的使用体会,阐述生物安全三级实验室的人员准入制度、工作人员行为准则以及突发状况下人员的撤离,对动物生物安全三级实验室的安全使用及管理提供借鉴作用.     

三级生物安全实验室操作病原微生物的体会

根据生物安全的的分级,结合我国病原生物学实验室的现状,阐述如何在三级生物安全实验室操作病原微生物,实验室出现问题应如何处理,对今后明确操作各种病原微生物的生物安全等级、掌握实验安全技术提供借鉴作用.     

生物安全防护技术在P3实验室设计中的应用

通过对生物安全、实验室生物安全防护技术的基本原理和方法的论述，从工程设计角度阐明了其在三级生物安全防护实验室(P3)一级和二级防护系统中的具体应用，并对P3实验室设计中应予以重视的问题提出了探讨性的解决方案。     

3%过氧化氢超声雾化在婴儿暖箱表面消毒的应用

目的：观察3%过氧化氢超声雾化对婴儿暖箱内表面消毒的可行性和有效性。方法：对婴儿暖箱消毒随机为实验组组和对照组。对照组选择普遍应用的含氯消毒液擦拭消毒法,实验组采用3%过氧化氢消毒液超声雾化消毒法,分别对暖箱内壁、水槽、操作窗进行采样,生物监测。结果：实验组水槽、操作窗监测合格率明显高于对照组。结论：使用3%过氧化氢消毒液超声雾化对婴儿暖箱表面进行消毒,其作用高效迅速,不留死角,操作方法简单,效果可靠,安全环保,减轻护理人员工作量,规避了目前国内报道消毒方法的缺点。为阻断新生儿医院感染,降低新生儿医院感染率提供科学依据,值得在临床推行使用。     

ABSL-3实验室猕猴实验中的生物安全管理

艾滋病、结核病、SARS等重大传染病严重危害人类健康,研发预防和治疗这些传染病的疫苗、药物是战胜疾病的重要手段。研发疫苗和药物离不开动物实验,由于与人类亲缘关系近,猕猴是研究人类重大传染病的重要模型动物。由于猕猴体型较大、动作敏捷、难以驯养、爱攻击、喜抓咬,因此重大传染病的猕猴动物实验有较大的生物安全风险。探讨此类动物实验中的生物安全问题,对确保生物安全意义重大,十分必要。本文分析了动物生物安全三级实验室(Animal Biosafety Level 3 Laboratory,ABSL-3)猕猴动物实验中可能存在的生物安全风险,提出了风险防控对策和系统化的生物安全管理思路。     

臭氧和过氧化氢协同消毒在血站采血室空气消毒中的应用

目的 对臭氧法与过氧化氢同时使用与两者单独使用的效果进行比较.方法 按照卫生部<消毒技术规范>和<医院消毒卫生标准>(GB15982-1995)的要求进行操作和采样.结果 单用臭氧消毒的杀灭率为87%,单用过氧化氢消毒的杀灭率为88.1%,而两种消毒方法协同消毒的杀灭率为94.3%,明显优于单一使用一种消毒方法的消毒效果.结论 同时使用过氧化氢复方空气消毒剂喷雾及臭氧消毒可提高消毒效果,对采血室等较大空间的空气消毒有较好的使用价值.     

2%戊二醛在口腔内科器械消毒中的应用

口腔内科医疗器械品种较多 ,使用频率高 ,如何进行有效灭菌消毒 ,特别是对乙肝病毒和细菌芽胞的杀灭 ,以预防乙肝和医源性的感染 ,是口腔医疗护理中的一个重要问题。2 %戊二醛 (Ｇｌｕｔａｒａｌ)是一种广谱高效灭菌剂 ,5～ 10ｍｉｎ可灭活乙肝病毒 ,3ｈ可杀灭细菌芽胞。口腔器械 :口镜、车针、拔髓针、光针、根管扩、挫针、刀柄、线剪、凿子、骨膜分离器、洁牙器等 ,全部采用 2 %戊二醛浸泡 ,定期抽样检查消毒液 ,合格率达10 0 % ,现介绍如下。1　方　　法1 1　药品　 2 %戊二醛消毒液 [四川华天科技实业有限公司 ,川卫消毒字 (2 0 0 0 )第…     

生物安全在临床实验室管理中的地位和重要作用

临床实验室客观存在影响生物安全的诸多因素.目前的生物安全管理现状不容乐观,要充分认识加强临床实验室生物安全是是减少实验室生物感染事故的重要手段,维护医务人员健康和保障公共安全的需要,提高对临床实验室管理中生物安全地位和重要作用的认识更有效地避免病源微生物对从事病源微生物实验活动的实验室工作人员和相关人员的危害,避免危险生物因子向实验室外扩散并导致对环境的污染和对公众的伤害,保护被试验因子免受污染,保证实验顺利进行.     

过氧化氢对肠上皮细胞线粒体的损伤作用

目的 观察过氧化氢对体外培养肠上皮细胞系SW－480线粒体的损伤作用。方法 以不同浓度的过氧化氢处理人肠上皮细胞株（SW－480），观察细胞形态学和线粒体超微结构的改变。以MTT法测定线粒体整体功能的变化。应用DNA凝胶电泳和Annexin-V及PI双标流式细胞术观察细胞凋亡的发生。应用免疫组织化学检测细胞色素c的释放。结果 400μmol/L过氧化氢在3h可引起线粒体整体功能的明显改变，但以后逐渐恢复。4mmol/L过氧化氢可引起线粒体整体功能不可逆的进行性下降；可引起线粒体空化，嵴肿胀，随着过氧化氢浓度的增加，线粒体的空化更加明显；可引起细胞发生凋亡。过氧化氢处理早期即出现细胞色素c的释放。结论 过氧化氢可引起肠上此细胞线粒体明显损伤，线粒体的结构和功能改变与细胞凋亡的发生密切相关。     

吡那地尔预处理对过氧化氢损伤心肌细胞保护作用的研究

目的　观察不同浓度的H2 O2 对心肌细胞的损伤作用 ,以及吡那地尔对H2 O2 损伤的保护作用。方法　胰酶消化法分离和培养KM乳鼠心肌细胞 ,按照 1× 10 5 ml的密度接种于 96孔培养板。分为正常对照组 ,H2 O2 组 ,观察 40 0、60 0、80 0 μmol LH2 O2 对心肌细胞处理 1、3、6、12、2 4h后MTT比色A值影响 ;用 40 0 μmol LH2 O2 处理心肌细胞后MTTA值的改变 ,以及 1× 10 - 4、1× 10 - 5、1× 10 - 6 mol L吡那地尔对心肌细胞保护作用的观察。结果　H2 O2 对心肌细胞的损伤作用 ,随H2 O2 浓度的增加和作用的时间的延长而加重。以 1× 10 - 5、1× 10 - 6 mol L吡那地尔预处理可以提高经H2 O2 处理心肌细胞的MTTA值 ,其中以 1× 10 - 6 mol L的浓度最佳。结论　心肌细胞对H2 O2 引起的损伤呈明显的剂量及时间依赖关系。小剂量的吡那地尔 (1× 10 - 6 mol L)预处理可明显减轻H2 O2 对心肌细胞的损伤。表明吡那地尔预处理对心肌的过氧化损伤有保护作用。     

丹参对体外关节软骨细胞抗过氧化氢损伤实验研究

目的观察过氧化氢(H2O2)对体外培养关节软骨细胞的损伤效应及丹参(salvia miltiorrhiza,SM)的干预作用。方法兔原代膝关节软骨细胞培养,Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光检测鉴定。将培养的软骨细胞随机分为正常组、损伤对照组(损伤组)和丹参组。损伤组用0.1mmol/L过氧化氢(终浓度)制造体外软骨细胞损伤模型,丹参组将不同浓度的丹参(终浓度0.01g/L、0.05g/L、0.25g/L)于过氧化氢损伤前30min加入,分别测定各组细胞活力(MTT法)、培养液上清中丙二醛(MDA)含量(硫代巴比妥酸法)、总蛋白含量(考马斯亮蓝法)及细胞DNA合成计数(氚标记脱氧嘧啶核苷酸法,3H-TdR法)。结果损伤组细胞活力显著降低、培养液上清MDA含量显著上升、蛋白含量及细胞DNA合成显著下降。丹参组细胞活性较损伤组显著升高、培养液上清MDA水平显著降低、蛋白含量及细胞DNA合成显著上升。结论丹参能抵抗过氧化氢造成的体外软骨细胞损伤。     

过氧化氢对关节软骨细胞过氧化损伤效应及中药黄芪干预实验研究

目的 观察过氧化氢对体外培养兔膝关节软骨细胞过氧化损伤效应及中药黄芪(astragalus)的干预作用,探讨黄芪抗氧化损伤作用机制.方法 兔膝关节软骨细胞原代培养,采用Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光法进行鉴定.分为正常对照组(正常组)、过氧化氢损伤对照组(损伤组)和过氧化氢损伤加黄芪干预组(黄芪组).损伤组采用终浓度 0.2mmol/L的过氧化氢制造体外软骨细胞过氧化损伤模型,黄芪组将终浓度分别为 0.02、0.1、0.5g/L的黄芪于过氧化氢损伤前 60min加入.测定各组细胞活力(MTT法)、细胞凋亡率(流式细胞术)、蛋白含量(考马斯亮蓝法)、培养上清液中丙二醛(MDA)含量(硫代巴比妥酸法)和SOD活性(邻苯三酚自氧化法).结果 与正常组比较,损伤组细胞活力显著降低、细胞凋亡率增加、蛋白含量下降、培养上清液中MDA水平显著上升、SOD活性和蛋白含量显著下降.黄芪组与损伤组比较,细胞活性显著升高、培养上清液中MDA水平显著降低、SOD活性和蛋白含量显著上升.结论 过氧化氢能造成体外软骨细胞显著的过氧化损伤,黄芪能抵抗体外软骨细胞过氧化损伤.     

NF-кB/Ⅰ-кB在过氧化氢所致心肌细胞损伤中的作用

目的探讨氧化应激损伤心肌细胞的分子机制.方法采用0.5 mmol/L过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)作用于原代培养的新生大鼠心肌细胞;末端标记检测细胞凋亡;Westernblot检测蛋白质含量;免疫组化检测NF-κB在细胞内的分布.结果①H2O2损伤3 h,心肌细胞死亡率和乳酸脱氢酶(LDH)释放率均较对照组明显升高(P＜0.01);②H2O2损伤24 h,末端标记发现大量凋亡细胞;Westemblot示NF-κB内源性抑制蛋白I-KB(inhibitor KB,I-KB)在H2O2损伤5 min即减少,15 min时减至最低,而后逐渐恢复;免疫组化显示H2O2损伤0.5 h可引起心肌细胞中NF-κB从胞浆向胞核移位;与单纯损伤组比,NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)能明显降低心肌细胞LDH释放率(P＜0.01).结论在H2O2所致心肌细胞损伤中,既有坏死,又有凋亡的发生,而NF-κB/I-κB信号通路的激活可能介导了H2O2所致的心肌细胞损伤.     

低浓度H2O2对HL-60细胞增殖的影响

目的探讨低浓度H2O2对同步化处理或未经处理的HL-60细胞作用的时间效应关系. 方法将培养的HL-60细胞进行同步化处理或取对数生长期细胞,施加不同浓度梯度的H2O2影响,作细胞计数,四唑盐（MTT）比色试验检测细胞生存率,流式细胞技术测定细胞周期分布. 结果低浓度H2O2作用组HL-60活细胞数明显高于未施加影响组,尤以H2O2终浓度为2 μmol*L-1组作用明显（P<0.01）,细胞周期也有轻度改变. 结论低浓度H2O2作用HL-60细胞可使细胞数增加,其影响有时间效应关系,机制可能同其影响细胞周期有关.     

3%过氧化氢联合氟康唑注射液治疗外耳道真菌病疗效分析

正外耳道真菌病是由于外耳道皮肤真菌感染引起的亚急性或慢性皮肤炎性疾病。由于真菌易于在温暖潮湿的环境下生长,因此该病在气候湿热的南方地区较多见。近年来,广谱抗生素、糖皮质激素的长期使用,亦成为外耳道真菌病高发的一大因素。由于缺乏有效的外用药物,给临床治疗带来很大困扰~([1])。本科采用3%过氧化氢联合氟康唑注射液治疗外耳     

刺五加叶皂苷B对过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用

目的：探讨刺五加叶皂苷B（C-B）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,阐明其对氧化应激损伤所致的心肌细胞凋亡的抑制作用。方法：乳鼠心肌细胞行原代培养,取自主搏动良好的心肌细胞随机分为正常对照组、H2O2 损伤组(200 μmol•L^-1H2O2诱导心肌细胞凋亡)、100 mg•L^-1C-B 组和200 mg•L^-1 C-B 组,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,AnnexinⅤ-FITC 流式细胞术检测凋亡率,分光光度法检测Caspase-3活性,免疫印迹法检测细胞Caspase-3、PARP、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果：与正常对照组比较,200 μmol•L^-1H₂O₂组心肌细胞有损伤性改变,细胞
存活率明显降低（P<0.001）,凋亡率升高（P<0.001）,Caspase-3活性增加（P<0.01）,细胞Bcl-2蛋白表达减少,Caspase-3及Bax蛋白表达增多,PARP蛋白降解增多。与H2O2损伤组比较,100及200 mg•L^-1C-B组心肌细胞损伤性改变均减轻,细胞存活率增加（P<0.05或P<0.01）,凋亡率降低（P<0.001）,Caspase-3活性降低（P<0.05或P<0.01）,细胞Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达和Caspase-3蛋白表达减少,PARP蛋白降解减少（依据电泳条带的宽窄及明暗度判断蛋白表达程度）,且200 mg•L^-1C-B组的作用更明显。结论：C-B对H₂O₂诱导的心肌细胞凋亡有一定的抑制作用,可能与其调节细胞内凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达有关。     

过氧化氢对PC12细胞plk1基因表达的影响

目的 观察过氧化氢对体外培养的PC12细胞plk1基因表达的影响.方法 采用MTT法观察不同浓度过氧化氢对体外培养的PC12细胞作用6h后,对PC12细胞存活率的影响;Western-blot检测不同浓度过氧化氢作用后,PC12细胞plk1基因蛋白表达水平的变化.结果 与对照组比较,过氧化氢剂量依赖性降低PC12细胞的存活率,增强PC12细胞plk1基因蛋白的表达水平.结论 过氧化氢降低PC12细胞的增殖活力,其机制可能是通过增强Plk1蛋白表达水平来实现.