取材方法对病理标本结核病原学阳性率的影响及意义

目的 探讨五种病原学检测技术在不同取材方法获取的病理标本中结核阳性率的差异及其临床意义。方法 收集2017年武汉市肺科医院外科手术并临床确诊结核的345份病例的结核病原学检查结果,以标本取材方式不同为分组依据,对各组抗酸染色涂片（AFB）、实时荧光定量PCR（TB-DNA）、RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT-TB）、Gene-X-pert/RIF (X-pert)、结核培养（CTB）等结果进行回顾分析。结果 以临床常用的四种方法获取标本,分别为手术345例、穿刺55例、脓肿切排（简称切排）37例和收集分泌物7例。以临床诊断为标准,手术、穿刺、切排和收集分泌物获取的标本病原学总阳性率分别为86.38%、85.45%、100.00%、85.71%;X-pert阳性率分别为86.26%、83.33%、100.00%、85.71%,五种检测技术灵敏度由高到低排序各组前两名均为X-pert、TB-DNA,最低均为AFB;以手术标本结果为诊断标准,虽切排和穿刺标本CTB阳性率均高于手术标本,一致性均为中等（K=0.521、0.530）,但五种病原学阳性率比较差异均无统计学意义（McNemer检验,P>0.05）。结论 病理标本中五种结核病原学检测技术检出率均与取材方法无关,提倡早期对病灶精准穿刺行X-pert、CTB检查以利于疾病的早期诊断和治疗。     

经皮肺穿刺活检＋组织培养在菌阴肺结核诊断中的价值

目的探讨电视透视或CT导引下经皮肺穿刺在菌阴肺结核诊断中的应用价值。方法 65例临床诊断菌阴肺结核的患者,行CT平扫＋增强后,在电视透视或CT导引下行经皮肺部病灶细针穿刺活检,活检组织分别送病理检查及结核分枝杆菌组织培养,统计病灶穿刺的准确性,活检标本的病理、组织培养结果。结果 65例穿刺均取得活检组织,穿刺成功率达100%,病理诊断符合结核49例,穿刺标本组织培养出结核分枝杆菌32例;病理＋组织培养诊断肺结核：准确性为83.1%,敏感性为96.4%,特异性为100%。结论在电视透视或CT导引下行经皮肺穿刺活检,获得病理、乃至细菌学结果,准确性、敏感性、特异性高,并发症低,是诊断菌阴肺结核的有较手段。     

不同抗结核时长对手术标本中不同病原学阳性率影响

目的 探讨不同抗结核时长的手术病理标本5种病原学检测技术阳性率差异及临床意义。方法 对2017年在武汉市肺科医院外科经规范抗结核共282例肺外结核患者按手术取材前抗结核时间不同分为 0~<7 d、7~<14 d、14~<28 d、28~<60 d和≥60 d共5组,对各组采用抗酸染色涂片（AFB）、实时荧光定量PCR（TB-DNA）、RNA恒温扩增实时荧光检测（SAT-TB）、GeneX-pert MTB/RIF (X-pert)、结核培养（CTB）等5种方法进行病原学检查,并对结果进行分析。结果 以临床诊断为标准,282例手术标本病原学总阳性率为89.36%（252/282）,X-pert、TB-DNA、SAT-TB、CTB和AFB阳性率分别为89.36%、78.01%、39.72%、15.25%和14.18%;以CTB为金标准,SAT-TB的阴性预测值为92.35%(157/170);X-pert与CTB判定RFP耐药吻合率为100.00%。组间相同检查比较：CTB在0~<28 d内阳性率无明显差异,但均显著高于≥60 d患者（P<0.001）,其余4种方法 各时间段内比较均无明显差异。组内不同检查间比较： X-pert阳性率在各组内均显著高于AFB、SAT-TB、CTB（P<0.001）,但与TB-DNA比较无统计学差异;TB-DNA各组内均显著高于AFB、CTB、SAT-TB（P<0.05）;各组内CTB与AFB均无统计学差异（P>0.05）;28 d后CTB阳性率均明显低于SAT-TB（P<0.001）。结论 不同抗结核时长的手术病理组织标本中5种病原学检测技术阳性率差异较大,规范抗结核0~28 d内常规送检X-pert、CTB有利于结核病的诊断和治疗,X-pert、TB-DNA、SAT-TB、AFB阳性均不宜作为疗效评估的单一指标,而SAT-TB可作为CTB阴性的预测指标。     

基因X-pert MTB/RIF与病理检查在胸壁结核诊断中的联合应用

目的 探讨基因X-pert MTB/RIF与病理检查的联合应用对胸壁结核的诊断价值。方法 回顾性分析2018年1月~2021年1月在浙江大学医学院附属杭州市胸科医院因胸壁肿块接受超声引导下穿刺活检的患者78例,所有病例均经超声引导下穿刺活检后标本送病理及基因 X-pert检测,以临床诊断为金标准,评估不同检查方法对胸壁结核的诊断效能。结果 78例标本中最终临床诊断结核64例,肿瘤11例,炎性包块2例,未能明确诊断1例。基因X-pert检测与病理学联合应用的结核诊断准确率为89.7%,高于病理学(75.6%)和基因X-pert检测(61.5%)(χ２=5.419和16.839,P值均＜0.05)。结论 基因X-pert检测联合病理学检查对胸壁结核有较高的诊断价值。     

Gene Xpert MTB/RIF检测在结核性胸膜炎诊断及利福平耐药检测中的应用价值

目的探讨Gene Xpert MTB/RIF检测(简称Xpert检测)在结核性胸膜炎诊断及利福平耐药检测中的应用价值。方法回顾性分析2016年7月1日至2018年7月31日在西安市胸科医院外科就诊的86例初步诊断为结核性胸膜炎患者和同期34例诊断为非结核胸膜炎患者的胸腔积液标本,分别行抗酸染色、BACTEC MGIT 960液体快速培养、荧光定量PCR和Xpert检测,对比4种方法检测结核分枝杆菌的敏感度、特异度、符合率等指标。对不同方法获取的胸腔积液标本行Xpert检测,评估不同获取标本方法对Xpert检测结核分枝杆菌效能的影响。以BACTEC MGIT 960液体快速培养药敏试验结果为金标准,分析Xpert检测利福平耐药的效能。结果结核性胸腔积液Xpert检测阳性率较其他三种检测方法阳性率高,差异有显著统计学意义(P<0.01);胸腔积液Xpert检测的敏感度、特异度、符合率、阳性预测值及阴性预测值分别为65.1%、100.0%、75.0%、100.0%、53.1%,相对于其他3种方法,Xpert检测符合率、敏感度最高,与抗酸染色和BACTECMGIT960液体快速培养比较差...     

结核感染T淋巴细胞实验和Xpert MTB/RIF检测在糖尿病并发菌阴性肺结核患者诊断中的价值

目的:探讨结核感染T淋巴细胞实验(T-SPOT.TB)与Xpert MTB/RIF检测方法在糖尿病并发菌阴性肺结核(TB)患者快速诊断中的应用价值。方法:收集糖尿病并发肺结核患者263例,对其进行结核抗体(TB-AB),T-SPOT.TB和Gen-Xpert MTB/RIF检测。根据痰细菌学诊断结果,将患者分为糖尿病并发菌阳肺结核组和糖尿病并发菌阴肺结核组,比较三种检测方法对肺结核检出阳性率的差异以及三种方法联用后检测阳性率的变化。结果:糖尿病并发菌阳肺结核111例(42.20%),糖尿病并发菌阴肺结核152例(57.80%)。263例患者中,TB-AB、T-SPOT.TB和Gen-XpertMTB/RIF的阳性率分别为61.98%(163/263)、84.41%(222/263),和71.48%(188/263),三种方法TB阳性率比较差异具有统计学意义(χ~2=33.544,P=0.000)。152例糖尿病并发菌阴组患者中,TB-AB、T-SPOT.TB和Gen-XpertMTB/RIF的阳性率分别为59.87%(72/152)、80.92%(123/152)和67.11%(102/152)。菌阳组与菌阴组之间三种检测方法的阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。三种方法在不同性别和年龄段患者中检测阳性率差异无统计学意义。T-SPOT.TB与TB-AB或XpertMTB/RIF联用,糖尿病并发菌阴组阳性率均达到90%以上,而三种联用时菌阴组检测阳性率则达到94.73%。结论:T-SPOT.TB和Gen-Xpert MTB/RIF方法的检出阳性率较高,在糖尿病并发菌阴性肺结核患者的快速诊断中具有应用价值。     

淋球菌在尿液及尿道分泌物中的检查比较

淋球菌为严格人体寄生菌。女性有淋病性阴道炎或子宫颈炎；男性发生尿道炎、前列腺炎及附睾炎．故本菌可存在于淋病患者的泌尿生殖道中，可呆取病人尿液及尿道分泌物作涂片及培养检查．     

三种快速实验室检测技术在儿童结核性脑膜炎早期诊断中的价值

目的评价三种快速实验室检测技术对儿童结核性脑膜炎的早期诊断价值。方法收集沈阳市胸科医院2017年6月～2019年12月收治的疑诊儿童结核性脑膜炎病例52例,分别进行血T-SPOT.TB、脑脊液LAMP和脑脊液Xpert MTB/RIF检测。结果采用SPSS18.0软件进行统计分析,计算三种检测方法在诊断结核性脑膜炎的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、一致率。结果在52例患者中,血T-SPOT.TB诊断结核性脑膜炎的敏感度为93.75%,特异度8.33%,阳性预测值31.25%,阴性预测值75.00%,一致率34.62%。脑脊液LAMP诊断结核性脑膜炎的敏感度为81.25%,特异度75.00%,阳性预测值59.09%,阴性预测值90.00%,一致率76.92%。脑脊液Xpert MTB/RIF诊断结核性脑膜炎的敏感度为87.50%,特异度88.89%,阳性预测值77.78%,阴性预测值94.12%,一致率88.46%。结论血T-Spot、脑脊液LAMP和脑脊液Xpert MTB/RIF检测对儿童结核性脑膜炎的早期诊断具有一定的价值,值得临床推广。     

定期气道分泌物培养指导VAP抗生素治疗的评价

目的评价常规对气道分泌物进行定期细菌培养,提前获取病原学资料,用于指导呼吸机相关性肺炎（VAP）抗生素治疗的价值。方法对2007年3月至2010年3月接受机械通气时间超过48h的247例患者进行定期气道分泌物细菌培养,如果患者有潜在VAP则行经纤维支气管镜肺泡灌洗（BAL）进行诊断,并根据前一次定期培养结果指导抗生素使用,直至获得BAL培养结果。此后,再根据BAL培养结果调整抗生素治疗方案,并评价先前抗生素治疗的合理性。结果 247例患者中,经定期呼吸道分泌物细菌培养,54例患者被怀疑VAP,经BAL细菌培养,36例患者被诊断为VAP,其中早发型10例,迟发型26例。36例VAP中31例BAL细菌培养结果与前一次定期分泌物培养结果一致。在可评价的病例中,根据定期呼吸道分泌物细菌培养结果使用抗生素治疗,准确合理（91.4%,95%CI83%～100%）。11例疑似VAP患者避免了不必要的抗生素治疗。结论定期气道分泌物细菌培养结果能够及时准确地指导VAP的抗生素治疗。     

GeneXpert MTB/RIF在检测系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用

目的 评价GeneXpert MTB/RIF系统在诊断系统性自身免疫病（SAD）合并肺结核（MTB）患者中的应用价值。方法 对临床诊断和影像学检查确诊的350例系统性自身免疫病合并肺结核患者和50例系统性自身免疫病非结核对照组患者的痰标本进行GeneXpert MTB/RIF检测,评价GeneXpert MTB/RIF诊断性能,并与结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法等比较,判断优劣以及半定量检测结核菌的效能。以结核菌液体药敏法为标准,分析GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度。结果 GeneXpert MTB/RIF、结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法4种方法检测的灵敏度分别为95.14%、84.00%、89.71%和56.86%,特异度分别为100.00%,92.00%,84.00%,100.00%。GeneXpert MTB/RIF系统灵敏度与T-SPOT比较差异无统计学意义（χ² =4.21,P>0.05）,高于抗酸涂片染色法（χ² =36.60,P<0.05）。GeneXpert MTB/RIF检测利福平(RIF)耐药性的灵敏度为86.00%,特异度为90.56%。结论 GeneXpert MTB/RIF与传统的MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸涂片染色法等联合,可显著提高合并肺结核系统性自身免疫病结核病的检出率。     

Evaluation of the Xpert MTB/RIF assay for diagnosis of tuberculosis and rifampin resistance in county-level laboratories in Hunan province, China

Background The Xpert MTB/RIF showed high sensitivity and specificity in previous studies carried out in different epidemiological and geographical settings and patient populations in high-burden tuberculosis （TB） countries.However,there were little data obtained by validation or demonstration study of the assay in China.In this study,the performance of Xpert MTB/RIF was investigated in two county-level laboratories in Hunan Province,China.Methods Consecutive patients with suspected pulmonary tuberculosis （PTB） and suspicion for multidrug-resistant tuberculosis （MDR-TB） were enrolled.For each patient suspected to have PTB,three sputum specimens （one spot sputum,one night sputum,and one morning sputum） were collected and each sputum was tested with smear microscopy,L（o）wenstein-Jensen （LJ） culture,and Xpert MTB/RIF test.For comparison across subgroups and testing methods,95％ confidence intervals were calculated.All analyses were done with SPSS 16.0,and P ＜0.05 was regarded as significant.Results For case detection,the sensitivity of Xpert MTB/RIF was 100％ for smear-and culture-positive TB and 88.6％ for smear-negative and culture-positive TB; the overall sensitivity was 94.5％ for all culture-positive patients.The specificity was 99.8％.The sensitivity of Xpert MTB/RIF assay was 22.0％ in clinical TB patients and the specificity reached 100.0％ in the group of patients who are infected with nontuberculous mycobacteria.For the detection of rifampin resistance,the sensitivity of MTB/RIF RIF-resistance detection was 92.9％,and the specificity was 98.7％.Of the 26 Xpert MTB/RIF-positive and RIF-resistant patients confirmed by LJ proportion tests,20 （76.9％） patients were infected by MDR-TB.Conclusions The Xpert MTB/RIF assay is a highly sensitive and specific method for diagnosis of TB and RIF resistance,which will enable it to have the potential to be used in county-level laboratories and lead to the reduction of the infectious pool and improvements in TB control in China.Furt     

Xpert 技术对痰液和纤支镜洗液标本中结核分枝杆菌检测价值

目的 评价GeneXpert MTB/RIF（Xpert）技术在肺结核病实验室诊断中的应用价值。方法 收集2018年1月—12月苏州市第五人民医院收治的疑似肺结核患者标本566份,其中痰标本421份,纤支镜洗液145份,分别采用Xpert 法、荧光定量PCR法、痰涂片抗酸染色法、结核培养法进行检测,收集数据,分析比较Xpert 技术在检测结核分枝杆菌时的敏感度和特异度,并与结核培养结果做比较,评价Xpert技术的检测效能。结果 对痰标本的检测,Xpert 技术、荧光定量PCR法、痰涂片法、结核培养法检测的阳性率分别为36.8%、24.0%、19.0%、32.1%;对纤支镜洗液标本的检测,四种检测方法的阳性率分别为54.5%、33.1%、12.4%、41.4%,可见Xpert 技术的阳性检出率明显高于其他三种检测方法。以培养法作为金标准,Xpert 方法检测痰标本的敏感性和特异性分别为77.0%和82.2%,阳性预测值和阴性预测值分别为67.1%和88.3%,符合率为80.5%,Kappa值为0.57。Xpert 方法检测纤支镜洗液标本的敏感性和特异性分别为93.3%和72.9%,阳性预测值和阴性预测值分别为70.9%和93.9%,符合率为81.4%,Kappa值为0.633。结论 Xpert 技术在检测结核分枝杆菌时具有较高的敏感性和特异性,能显著提高结核病的诊断效率,在肺结核的早期诊断、早期治疗等方面具有较高的临床应用价值。     

不同检测方法在骨结核诊断中的应用效果比较

目的:比较利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF,简称"Xpert")、荧光PCR熔解曲线法及液体培养方法在骨结核诊断中的应用效果。方法:收集2017年1月至2018年12月期间166例疑似骨结核患者的脓液标本,分别进行分枝杆菌液体培养(MGIT960培养)、Xpert与荧光PCR熔解曲线法检测。以临床综合诊断为标准,对3种检测方法的敏感度和特异度进行比较分析;以液体药敏为金标准,评价Xpert和荧光PCR熔解曲线法检测结核分枝杆菌利福平耐药的敏感度和特异度。结果:Xpert检测的敏感度分别高于荧光PCR熔解曲线法和MGIT960培养法,荧光PCR熔解曲线法的敏感度高于MGIT960培养法,差异有统计学意义(P<0.05);以MGIT960培养为标准,Xpert的敏感度高于荧光PCR熔解曲线法,差异有统计学意义(P<0.05);Xpert与荧光PCR熔解曲线法的特异度比较,差异无统计学意义(P>0.05);以液体药敏为金标准,Xpert和荧光PCR熔解曲线法检测利福平的敏感度和特异度均为80.0%和100%,两种方法与金标准进行一致性检验Kappa值均为0.872。结论:Xpert和荧光PCR熔解曲线法在骨结核诊断中的敏感性和特异度均优于液体培养方法,两种方法各有千秋,可根据实际情况选择。     

五种检测方法在结核病诊断中的应用评价

目的评估涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF法、结核分枝杆菌RNA荧光定量PCR法、结核分枝杆菌DNA荧光定量PCR法在结核病诊断中的应用价值。方法对374例疑似肺结核病患者、120例肺结核患者及70例非结核病患者的痰液标本分别用涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNAPCR、TB-DNA PCR进行结核分枝杆菌检测,将检测结果进行分析和比较。结果涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测374例疑似肺结核病患者痰液标本阳性率分别为6.68%、13.37%、20.05%、19.25%、22.73%,其中XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测阳性率差异无统计学意义(χ2=1.51,P0.05),TB-RNA PCR阳性率高于改良罗氏培养基培养法(χ2=4.75,P0.05),改良罗氏培养基培养法高于涂片抗酸染色法(χ2=9.28,P0.05)。五种方法检测120例肺结核患者及70例非结核病患者的敏感性分别为20.83%、35.00%、50.83%、47.50%、54.17%,特异性分别为100.00%、100.00%、98.57%、100.00%、98.57%。结论 XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR与涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法相比,具有敏感、快速、可定量的特点,可以作为结核病辅助诊断的有效检测方法。     

Xpert MTB/RIF和LPA对肺结核病诊断价值的比较

目的 评价Xpert MTB/RIF和线性探针技术（line probe assay, LPA）对肺结核病的诊断价值。方法 选取2016年1月—2018年3月陕西省结核病防治研究所和汉中市第二人民医院就诊的258例肺结核可疑症状者作为研究对象,应用痰涂片镜检法、固体培养法、Xpert MTB/RIF、LPA对所有研究对象的同一份痰样本进行检测,结合受试者工作特征 (receiver operation characteristic, ROC)曲线进行分析比较。分别以临床诊断和痰涂片镜检+固体培养结果为标准,比较Xpert MTB/RIF和LPA对肺结核病的诊断效能;以固体比例法药敏试验结果标准,比较Xpert MTB/RIF和LPA检测利福平耐药性的效能。结果 在涂阴培阴组中,Xpert MTB/RIF对结核分枝杆菌阳性检出率（20.00%）显著高于LPA阳性检出率（11.03%）,差异有统计学意义（P=0.04）。以临床诊断结果为金标准,Xpert MTB/RIF和LPA的ROC曲线下的面积（area under curve, AUC）分别为0.874、0.846,AUC差异无统计学意义。以痰涂片镜检法、固体培养法结果为标准,Xpert MTB/RIF和LPA的AUC分别为0.882、0.927,AUC差异有统计学意义（P=0.02）。以固体比例法药敏试验结果为标准,Xpert MTB/RIF和LPA检测利福平耐药性的AUC分别为0.889、0.909,AUC差异无统计学意义。结论 Xpert MTB/RIF和LPA对于肺结核病均具有较好的辅助诊断价值,Xpert MTB/RIF对于菌阴肺结核有更高的阳性检出率。     

大鼠结核性胸膜炎模型及其胸膜的病理学与超微病理学观察

目的 证实结核性胸膜炎大鼠模型的建立方法 ;观察大鼠结核性胸膜炎的胸膜组织形态及超微结构特征,进一步探讨结核性胸膜炎的发病过程及胸液渗出与吸收不平衡的原因.方法 健康雌性Wiser大鼠30只,随机分成2组,对照组6只,模型组24只,复制结核性胸膜炙动物模型;分别于建模后2、4、6 、8、10、12、14、16、18、22、26及30d处死.观察大鼠胸腔内积液特征及胸膜结构变化,并进行病理学及超微病理学观察.结果 模型组24只大鼠成功复制出结核性胸膜炎模型,形成胸腔积液及胸膜结核结节,后期胸膜肥厚粘连.透射电镜观察显示,早期间皮细胞微绒毛减少,细胞膜、细胞质、细胞器损伤,中期间皮细胞逐渐消失,纤维细胞与成纤维细胞增生,后期由增生的胶原纤维替代原有胸膜结构.结论 接种卡介苗5周后向大鼠胸膜腔内注入标准人型结核菌株H37RV结核分枝杆菌悬液,可以建立结核性胸膜炎的动物模型.胸膜间皮细胞的损伤及丢失,影响了胸水的回吸收.胸膜类上皮细胞肉芽肿及纤维组织的增生可能导致淋巴管阻塞,减少了胸水的渗出,同时可能破坏了间皮细胞与淋巴孔之间形成的回吸收通路.     

Xpert®MTB/RIF对我国人群活动性肺结核和利福平耐药肺结核诊断准确性的meta分析

目的: 系统评价结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测方法(Xpert^® Mycobacterium tuberculosis/rifampicin,Xpert ^® MTB/RIF)对中国人群肺结核(活动性肺结核和利福平耐药肺结核)的诊断准确性。方法: 计算机检索SinoMed、CNKI、万方、维普、PubMed、Embase、The Cochrane Library数据库,搜集于中国人群中应用Xpert^®MTB/RIF方法诊断的研究,检索时间限定为2000年1月1日—2017年9月15日。由2名研究者独立筛选文献、提取资料,使用诊断试验准确性研究的偏倚评估工具(Quality Assessment of Diagnostic Accuracy Studies,QUADAS)-2对纳入的研究进行质量评价。采用Stata 13.0软件进行meta分析,使用双变量随机效应模型合并灵敏度与特异度等诊断准确性指标,根据患者类型和样本类型进行亚组分析。结果: 最终共纳入47篇文献,其中英文9篇,中文38篇,发表时间为2014—2017年,样本量范围为31~3 151例,活动性肺结核共纳入40篇文献(42个比较组),合并灵敏度为0.94(95%CI:0.92,0.95),合并特异度为0.87(95%CI:0.84,0.91)。亚组分析显示,对于不同的样本类型,灵敏度无明显差异,但痰液样本的特异度高于支气管灌洗液样本。利福平耐药肺结核共纳入33篇文献(38个比较组),合并灵敏度为0.92(95%CI:0.89,0.94),特异度为0.98(95%CI:0.97,0.99)。Deeks法漏斗图显示,检测活动性肺结核方面可能存在发表偏倚(P=0.08),利福平耐药肺结核方面均不存在发表偏倚(P=0.24)。结论: 使用Xpert^® MTB/RIF方法检测活动性肺结核和利福平耐药肺结核具有较好的灵敏度和特异度,在检测利福平耐药方面具有较好的临床诊断价值。