血液筛查中核酸检测技术降低HBV感染风险的研究

目的 通过对HBsAg阴性和HBV DNA阳性献血者的血液标本探讨抗-HBs和抗-HBc分布情况,分析潜在HBV感染的风险。方法 收集2017年1月—2019年12月邯郸地区无偿献血者263 631份血液样品,采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)方法检测,ELISA检测无反应性或单试剂反应性的标本进行8混1核酸检测,将最终判定HBV DNA阳性的标本,再次进行罗氏核酸检测和化学发光检测,并对所得结果进行对比分析。结果 68例HBV DNA阳性中,1992年前后出生HBV(含HBsAg和HBV DNA)阳性献血者人数构成比差异有统计学意义(χ²=37.113,P<0.05);抗-HBs阳性组共16例,构成比为23.53%,低于抗-HBs阴性组,差异有统计学意义(χ²=27.812,P<0.05);抗-HBs阳性合并抗-HBc阳性例数最多(11例),不同血清学模式构成比不同。结论 核酸检测技术可检出为无抗-HBs或低抗-HBs水平的血液,最大程度降低了因输血传播HBV...     

酶联免疫吸附试验对乙型肝炎表面抗原阴性献血者核酸筛查及降低输血传播乙型肝炎病毒效果分析

目的了解本地区酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝表面抗原(HBs Ag)结果呈阴性献血者经核酸检测技术(NAT)复检情况及对降低输血传播乙型肝炎病毒(HBV)的效果。方法应用两种不同厂家ELISA检测试剂对36 459例献血者标本进行HBs Ag筛查,ELISA检测结果呈阴性标本应用上海浩源血液筛查系统行核酸检测,对NAT结果为阳性的标本行乙肝两对半检测。结果采用ELISA法检测36 459例标本中,HBs Ag阳性112例;36 347例阴性样本经NAT检测,检出阳性39例,阳性检出率为0.11%;39例阳性患者中成功随访9例,其中乙型肝炎窗口期感染2例,隐匿性感染7例。结论血站应用ELISA联合NAT开展血液筛查检测,能有效降低HBV经输血传播的风险,提高血液安全性。     

HBsAg阴性HBV DNA阳性献血者HBV感染类型的相关研究

目的分析化学发光法和PCR技术检测无偿献血者乙肝表面抗原(HBsAg)阴性HBV DNA阳性样本的感染类型。方法选取邯郸市中心血站2019年1-6月留取的HBsAg阴性或单试剂阳性合并华益美核酸定性检测(nucleic acid qualitative detection, NAT)阳性的献血者样本39份,进行罗氏核酸定性、化学发光(Chemiluminescence analysis, CLIA)及核酸定量补充实验,并对实验结果进行分析。结果在53 489份献血者样本中,经ELISA初筛检测后,去除双试剂HBsAg阳性20份之后,双试剂HBsAg阴性和单试剂HBsAg阳性的共计53 469份(占比99.96%)样本进入核酸检测流程,得到华益美检测HBV DNA阳性39份。其中含有乙肝核心抗体(HBcAb)的血清学模式为29份,占比74.36%,核酸定量结果均小于200 IU/ml,为隐匿性感染;仅乙肝表面抗体(HBsAb)阳性的血清学模式有2份,核酸定量结果均小于200 IU/ml为携带HBsAb隐匿性HBV感染的特殊形式;全阴的血清学模式有8份,成功追踪4份,Z1/Z2和Z4均发生血清学指标转阳,判定为窗口期感染,Z3样本HBsAb转阳核酸转阴,提示为窗口期感染转为急性感染恢复期。结论 PCR技术在保障血液安全上突显了较好的检测效能,检出的NAT阳性样本大多是OBI和窗口期感染。     

广州地区乙肝表面抗原单试剂反应性献血者复查结果及其影响因素

目的了解乙肝表面抗原(HBsAg)单试剂反应性献血者的复检情况以及分析相关影响因素。方法以在广州血液中心献血时血液筛查呈核酸检测(NAT)阴性、HBsAg ELISA检测单试剂反应性,且在献血6个月后回本中心进行复查的267名献血者为研究对象,分析其复查的ELISA和NAT结果;通过单因素分析和多因素逻辑回归分析,分析献血者年龄、性别、献血次数、职业以及教育程度与复查结果的关系。结果参加复检的267名献血者中,55名复检不合格(20.6%),其中HBsAg双试剂反应性15名,单试剂反应性33名,双试剂阴性7名(NAT阳性5名,ALT双试剂阳性2名)。单因素和多因素分析表明,影响复检结果的因素有年龄和献血次数:年龄越大,复检不合格率越高(Exp(B)=1.050,P=0.032);初次献血者的复检不合格率显著高于献血2~10次(Exp(B)=0.274,P0.001)以及超过10次的献血者(Exp(B)=0.198,P=0.038)。结论 HBsAg单试剂反应性献血者复检不合格率较低,与献血者年龄和献血次数有关。本研究为固定献血者队伍的建设以及HBsAg单试剂反应性献血者的归队提供科学依据。     

国产核酸检测系统混检及拆分结果对比分析

目的分析对HBs Ag阴性NAT检测HBV阳性标本的混检及拆分结果,评价现有核酸检测系统,讨论邯郸地区核酸检测对降低输血传播HBV的意义。方法对274 012份无偿献血者标本(排除ELISA法初复检公共阳性、ALT阳性等)进行NAT混样和拆分检测后,对部分拆分阳性标本进行重复拆分检测,分析对应检测结果。结果 HBV混检反应率为0. 12%,HBV拆分阳性154份,拆分阳性率为45. 97%。混检及拆分有反应性的标本均集中在39 相似文献   

核酸检测对酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒抗体结果呈灰区及弱反应性标本复检的必要性探讨

目的探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测呈灰区、弱反应性标本采用核酸检测(NAT)的复检情况。方法选取2011年1月‐2016年12月于该院就诊并经ELISA法检测HBsAg、抗-HCV结果呈灰区及弱反应性的标本741例为研究对象,所有研究对象均采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)复检,对两种方法检测结果进行比较。结果 ELISA法检测HBsAg、抗-HCV双试剂灰区标本HBV-DNA、HCV-RNA阳性率均高于单试剂灰区,差异均有统计学意义(P0.05);ELISA检测HBsAg和抗-HCV单试剂、双试剂弱反应性标本NAT检测阳性率比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法检测HBsAg、抗-HCV结果呈灰区、弱反应性标本存在一定的HBV-DNA、HCV-RNA阳性漏检和误诊,NAT检测对于HBV和HCV感染的早期诊断、治疗以及避免医疗纠纷的发生具有重要作用。     

两种方法对乙型肝炎HBc-IgG阳性结果的比较

目的探讨HBV标志物单项抗HBc-IgG（抗-HBc）阳性结果的临床意义。方法对微粒子酶免疫分析（MEIA）检测1 956例,ELISA检测432例住院患者的HBV标志物总抗-HBc阳性率和单项抗-HBc阳性率进行回顾性统计;对MEIA检测的96例单项抗-HBc阳性和134例HBV标志物全阴性住院患者的抗-HBs水平进行分析;对ELISA筛选的68例流行病学意义的单项抗-HBc阳性血清标本采用含10%小牛血清PBS进行稀释后,分别采用ELISA和MEIA检测抗-HBc并进行比较。结果ELISA检测抗-HBc流行病学意义和临床意义的总抗-HBc阳性率及单项抗-HBc阳性率分别为72.1%、16.3%和62.6%、7.6%。MEIA检测抗-HBc的总抗-HBc阳性率及单项抗-HBc阳性率分别为78.1%1、3.2%;MEIA检测HBV标志物单项抗-HBc阳性组和HBV标志物全阴性组的抗-HBs结果,差异有统计学意义（χ^2=86.9,P〈0.001）,ELISA筛选的68例单项抗-HBc阳性标本不同倍数稀释后ELISA和MEIA检测抗-HBc结果提示,未稀释或低倍稀释存在较高的非特异性反应,高倍稀释则存在较高的漏检率。结论不同方法单项抗-HBc阳性率存在一定的差异,单项抗-HBc阳性可作为乙肝病毒感染的依据,但存在一定比例的非特异性反应和假阴性,日常工作中ELISA检测抗-HBc以5-10倍稀释为宜。     

核酸与酶联免疫同步检测模式在献血者归队中的应用

目的：应用核酸与酶联免疫同步检测模式分析献血者归队情况,探讨献血者归队策略。方法：通过对2016～2021年我市献血者筛查结果中酶联免疫吸附试验（ELISA）单反应性和单核酸反应性但重复检测为非反应性的献血者进行常规ELISA和核酸检测（NAT）单人份归队检测,对不同项目开展补充实验。结果：经过两轮归队检测,ELISA单反应性归队献血者83.7%(36/43)允许归队,单核酸反应性献血者44.4%(12/27)允许归队,其中HCV RNA和HIV RNA允许归队率100%,而HBV DNA允许归队率仅为21.0%(4/19)。结论：初步确定的反应性献血者归队策略有利于维护献血队伍,但由于HBV基因变异比较多样和复杂,为减少OBI的输血感染风险,血站应根据实际情况建立更科学更严密的单核酸反应性归队策略,以保障血液安全。     

HBV相关免疫学指标与核酸检测HBV DNA的关联分析

目的 分析无偿献血者核酸检测HBVDNA反应性样本的相关血清学标志物组合状态.方法 选取邯郸市中心血站2018年1月-2019年2月留取的乙肝表面抗原(HBsAg)阴性、华益美核酸定性检测(nucleic acid testing,NAT)有反应性,经罗氏定性检测确认为反应性的41名献血者作为研究对象.使用化学发光定量...     

不同背景抗—HBs,抗—HBs血清中HBVDNA的PCR研究

为探讨HBV感染后不同背景抗-HBs，抗-HBc的意义，用多聚酶链式反应（PCR）检测HBV感染者血清中HBVDNA。抗-HBs( )病例的HBVDNA检出率显著性低于抗-HBs（一）病例的检出率，支持抗-HBs对机体的保护作用；17.7%单项抗-HBs( )的既往感染者有HBVDNA的存在，说明抗-HBs对HBV的清除受其它因素的影响；单项抗-HBc，抗-HBc/抗-HBs，抗-HBc/HBsAg,HBeAg阳性的病例有不同的HBVDNA检出率，说明不同血清学背景的抗-HBc有不同的HBV复制情况，不同类型的肝炎HBVDNA检出率无显著性差异。     

核酸检测方法在献血员肝炎筛查中的初步应用

目的 将核酸检测方法应用于献血员肝炎筛查，了解某地区血液安全水平和常规血液筛检中两次酶免检测方式的可靠性。方法44份Murex-abbott抗-HCV阳性标本经科华酶免试剂复检后，使用罗氏COBAS Ampliscreen单独检测HCV RNA；486份来自某地区的合格献血标本采用24份标本混合检测的方法，用罗氏COBAS AmpliScreen检测HBV DNA和HCV RNA。结果44份标本用科华酶免试剂复检，结果只有13份标本呈抗-HCV阳性；3份HCVRNA阳性标本中1份为科华试剂检测抗-HCV阴性。486份合格献血标本进行罗氏COBAS AmpliScreen 24份混合形式筛检后，发现3例HBV DNA阳性标本，阳性率为0．62％，未发现其他核酸标记物阳性的标本。结论我国血液筛查的HBsAg检测存在漏检的现象，在常规血液筛检中，NAT检测只能作为酶免抗体检测的一种补充手段，如果NAT能取代我国血液二次酶免筛检中的一次，则能在最大程度上保障血液安全。     

太原市献血者NAT结果分析

目的：分析我站血液病毒核酸检测（NAT）正式启动以来,献血者血液在新的检测模式下的结果。方法2015年5月—2016年4月检验科共接收标本122281份,经丙氨酸转氨酶（ALT）检测合格及酶联免疫法（ELISA）双试剂检测乙肝表面抗原（HBsAg）、丙肝抗体（抗-HCV）、人类免疫缺陷病毒抗体（抗-HIV1/2）、梅毒抗体（抗-TP）呈非反应性标本98153份。用浩源核酸检测系统对非反应性标本进行 HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-1-RNA三项联合NAT检测,采用8人份混样法检测,对反应性的混样池进行拆分检测。结果 NAT检测13411个混样池,检出55个HBV-DNA反应性混样池,混检阳性率为4.10‰;拆分431个标本,结果HBV-DNA反应性标本10份,拆分阳性率为23.20‰;NAT 检测阳性率为0.10‰。结论在血液检测新模式下,NAT和ELISA互相补充,可有效缩短病毒检测“窗口期”及降低隐匿性乙型肝炎病毒感染（OBI）的发生率,保障血液安全。     

献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染的流行病学和血清学研究

目的了解广州地区献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的流行病学和血清学情况。方法对广州地区199631例无偿献血者标本同时用ELISA法检测HBsAg、紫外-乳酸脱氢酶法检测ALT、核酸扩增技术(NAT)联合检测HBV/HCV/HIV及HBV单项鉴别试验,对HBsAg阴性HBV DNA阳性者进行随访,用荧光定量PCR检测病毒载量,用ELISA法检测乙肝两对半。结果 199631例标本中共检出104例HBsAg阴性HBV DNA阳性者,经随访有54例为OBI,OBI检出率为0.027%,年龄以46～55岁组检出率最高(P<0.01),外地身份证的献血者检出率高于广州市身份证者(P<0.01),OBI检出率与性别和献血次数无关(P>0.05)。104例HBsAg阴性HBV DNA阳性的标本ALT均正常,病毒载量均<1000IU/ml,平均值为162IU/ml。随访标本中,除6例ALT异常外其余均正常,54例OBI标本病毒载量均<1000IU/ml,平均值为122IU/ml,乙肝两对半中抗-HBc阳性率明显高于其他项目(P<0.01)。结论 HBsAg阴性献血者中存在OBI,有必要在献血者中开展核酸检测。     

68份HBsAg无反应性、HBV-DNA反应性献血者样本的确认分析

目的 评价华益美核酸检测系统对乙肝表面抗原(HBsAg)无反应性性、HBV-DNA反应性献血者的检出效果.方法 对68份HBsAg无反应性、华益美核酸检测HBV-DNA反应性的献血者样本采用Roche Cobas S201核酸检测系统进行复检和核酸定量检测,及HBsAg、HBsAb和HBcAb化学发光检测等补充实验,并...     

ELISA与NAT检测在血液HBV筛查中的关系研究

目的分析ELISA检测与病毒核酸扩增（NAT）检测血液HBV的符合率,探讨这2种方法在血液HBV筛查中的关系。方法选取59483份献血者血液标本,先用国产和进口2种不同的ELISA试剂检测HBsAg,将ELISA检测双试剂阳性、单试剂阳性、阴性的标本进行NAT检测HBVDNA,检测模式为6人份混样检测,混样NAT检测结果阳性的标本再进行单人份拆分NAT检测。观察ELISA与NAT检测血液HBV结果的符合率。结果59483例血液标本中ELISA检测双试剂阳性NAT检测阳性的标本25例,ELISA检测单试剂阳性NAT检测阳性的标本30例,ELISA检测阴性NAT检测阳性120例,ELISA检测双试剂阳性NAT检测阴性的标本6例,ELISA检测单试剂阳性NAT检测阴性的标本38例,ELISA检测阴性NAT检测阴性的标本59264例。ELISA检测双试剂阳性、单试剂阳性与NAT阳性的符合率分别是80.6%和44.1%,总符合率为55.5%。结论在献血者血液HBV筛查中,ELISA检测与NAT检测技术各具优势,互为补充,两者联检对降低HBV输血传播的发生,保障血液安全具有重要作用。     

HIV抗体单试剂反应性献血者的确认及回归策略

目的:探究人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体单试剂反应性献血者的确认及回归策略。方法:选择2014年1月-2016年6月本站献血经两种试剂检测的80 876人次献血者,筛选HIV抗体检测单试剂反应性为146例,屏蔽3~6个月后,对其进行召回,分别留取血液样本后,对其进行复查。结果:召回的146例单试剂反应性献血者经HIV抗体酶联免疫吸附法(ELISA)试剂检测显示,仍表现为单试剂阳性9例,双试剂阳性1例。对双试剂阳性进行检测,显示其为核酸和确证试验均为阳性。结论:对单侧反应性的献血者采用ELISA、NAT检测进行随访,献血者的权益能得到有效保障,减少献血者流失,缓解用血紧张局面。对无偿献血前献血者具体情况征询,并实施血液筛查,对低危固定的无偿献血者建立长期档案,加强检测管理,有效降低血液报废率,保证血液安全。核酸检测有助于提高无偿献血者的血液质量,降低经血传播HIV等病毒的风险,保障临床安全用血;同时,临床应加强两种检测方式的联合应用,最大限度的避免病毒感染漏检现象。     

PCR-微流芯片在血液HBV DNA HCV/HIV RNA筛查中的初步应用

目的探讨在血液筛查中应用PCR-微流芯片技术检测献血者HBV DNA,HCV/HIV RNA的模式及可行性。方法在常规ELISA初、复检全项测定合格基础上,将献血者的血清按5人份×200μL进行汇集,用大容量磁珠法提取样本核酸,PCR-微流芯片检测技术进行扩增和检测。将国家标准质控血清进行系列稀释考评方法的灵敏度和重复性。结果342份(69个汇集池)无偿献血标本中有3份HBsAg(-)HBV DNA( ),HBV DNA阳性率为0.89%,其中1份标本两对半结果全阴性,2份标本抗-HBs( )及抗-HBc( )。PCR-微流芯片法检测HBV DNA、HCV RNA及HIV RNA的95%的灵敏度分别为11.5IU/mL、167.7拷贝/mL和57.9IU/mL结论PCR-微流芯片法具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好特点,可应用于血液HBV DNA HCV/HIV RNA的筛查工作,以进一步提高输血的安全性。     

对血站合格献血员复检HBV HCV阳性率分析

目的：了解我区献血员的管理及筛查情况。方法：随机采集了我区4个盟市血站503份合格献血员血样,并进行了相关调查,采用ELISA法复检。结果：HBsAg阳性率为1.99%（10/503）;抗-HBc阳性率15.90%(80/503);抗-HBs阳性率21.87%(110/503);抗-HCV阳性率2.19%(11/503),其中HBV、HCV双重感染的8例,HBsAg、抗-HBc双阳性3例。对抗-HBc、抗-HBs双阳性以及单纯阳性者经PCR法检测HBVDNA均为阴性。结论：说明我区血站管理及对献血员筛查工作还存在着一定的漏洞,献血员筛查抗-HBc对预防输血后乙肝无多大价值,应把重点放在选用灵敏度高的试剂进行筛查。     

HBV DNA测定对HBsAg阴性慢性乙型肝炎的临床意义

目的探讨HBV DNA对测定对HBsAg阴性慢性乙型肝炎（隐匿性乙型肝炎）的临床意义。方法对83例HBsAg阴性的慢性乙型肝炎HBV感染患者用酶联免疫检测法检测HBVM（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc）,同时采用PCR技术对血清HBV DNA进行定量分析。对照组为同期经典的慢性乙型肝炎患者。结果83例HBsAg阴性慢性乙型肝炎患者中,HBV DNA阳性率为28.9%,单独抗-HBs阳性的慢性肝炎组HBV DNA阳性率为27.3%,抗-HBe,抗-HBc并存者HBV DNA阳性率为24%,抗-HBs、抗-HBe及抗-HBc三者阳性的慢性乙型肝炎患者HBV DNA阳性率为35%。单一的抗-HBc阳性的慢性乙型肝炎组HBV DNA阳性率为25%,HBeAg、抗-HBc阳性者HBV DNA阳性率为66.7%。结论HBsAg阴性HBV感染仍是我国原因不明肝病的主要原因之一,也是乙型肝炎疫苗接种无应答的原因之一,临床应重视这种低水平的HBV复制,以免造成宫内输血及肝移植后HBV感染。     

贵阳地区无偿献血人群HCV筛查的结果分析

目的 比较献血人群抗-HCV反应性、HCV核酸检测结果及HCV重组免疫印迹试验(RIBA)确证实验结果.方法 对2013年10月至2015年3月采集的无偿献血者血液标本,采用2个不同厂家的国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测和1个进口核酸检测试剂及配套检测系统对HCV进行筛查,对抗-HCV呈反应性或/和NAT检测阳性标本进行RIBA,将2种ELISA试剂检测反应性的结果与核酸检测结果、RIBA确证实验结果进行分析与比较.结果 共检测133 959例无偿献血者标本,其中覆盖核酸检测结果的标本113 380例,抗-HCV检测呈反应性标本比例0.19％(252/133 959),NAT检测阳性共27例,阳性检出的比例0.02％(27/113 380);HCV反应性标本经RIBA确证实验确证阳性的比例19.8％(50/252)、阴性的比例54.8％(138/252)、不确定的比例25.4％(64/252);27例核酸检测阳性的标本均为ELISA检测双试剂反应性和确证实验阳性;2家ELISA试剂检测结果、RIBA确证实验结果和核酸检测结果差异有统计学意义(P＜0.05).结论 选用2次ELISA+1次核酸检测的检测策略更为安全;针对较高比例的假阳性标本,应建立献血者跟踪随访制度,最大限度地保留献血人群.