肾气丸对膝骨性关节炎模型大鼠炎症因子和软骨基质的影响

【目的】探讨肾气丸对膝骨性关节炎的治疗作用和机制。【方法】采用膝关节腔内注射木瓜蛋白酶方法建立膝骨性关节炎大鼠模型,将造模成功的27只大鼠随机分为模型组、中药组和西药组,每组各9只,另取正常大鼠10只为正常组。中药组给予肾气丸水煎剂11.55 g·kg-1·d-1灌胃,西药组给予氨基葡萄糖生理盐水溶液157.5 g·kg-1·d-1灌胃,正常组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃,灌胃8周。8周后测量大鼠的膝关节宽度、膝关节被动活动度、滑膜厚度、压痛阈值、热痛阈值,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测关节液中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素9(IL-9)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、Ⅱ型胶原、雌二醇(E2)含量。【结果】与正常组比较,模型组大鼠的膝关节宽度和滑膜厚度增加,膝关节被动活动度、压痛阈值、热痛阈值减小,关节液中的TNF-α、IL-1β、IL-9、MMP-3、MMP-9含量升高,Ⅱ型胶原、E2含量降低(均P 0.05);与模型组比较,中药组、西药组大鼠的膝关节宽度和滑膜厚度减小(P 0.05),膝关节被动活动度、压痛阈值、热痛阈值增加,关节液中的TNF-α、IL-1β、IL-9、MMP-3、MMP-9含量降低,Ⅱ型胶原、E2含量升高(均P 0.05),且2个治疗组比较,差异无统计学意义(P 0.05)。【结论】肾气丸可以抑制膝骨性关节炎大鼠关节内炎症反应,抑制关节软骨降解,修复软骨损伤,改善膝关节功能。     

六味骨痹汤对兔骨关节炎滑膜组织的影响及与软骨修复的相关性研究

【目的】通过观察六味骨痹汤对骨关节炎(OA)模型兔关节液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)含量,滑膜、关节软骨形态及软骨Ⅱ型胶原蛋白表达的影响,探讨其对OA滑膜组织的修复作用及与关节软骨修复的相关性。【方法】将32只新西兰兔随机分为正常组、模型组、六味骨痹汤组和硫酸氨基葡萄糖组,每组8只。采用木瓜蛋白酶关节注射法建立兔OA模型。成功造模后,前2组每日给予10 mL生理盐水灌胃,后2组每日分别对应给予六味骨痹汤(剂量为3.8 g·kg-1·d-1)及硫酸氨基葡萄糖胶囊(剂量为77.0 mg·kg-1·d-1)灌胃。给药6周后,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测各组实验兔关节液中TNF-α、IL-1β、MMP-13含量,按照Krenn标准及改良Mankin’s法分别对滑膜炎症程度及软骨损伤程度进行评分,并评价软骨标本中Ⅱ型胶原蛋白表达情况,最后分析关节滑膜炎症程度与软骨修复的相关性。【结果】六味骨痹汤组和硫酸氨基葡萄糖组关节液中TNF-α、IL-1β、MMP-13含量,滑膜炎症Krenn评分,关节软骨Mankin’s评分均较模型组显著降低(P0.01),Ⅱ型胶原蛋白表达评分显著升高(P0.05);2给药组组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。各组滑膜炎症的缓解与软骨的修复程度成较强的正相关性。【结论】六味骨痹汤对兔OA模型滑膜炎症有缓解作用,并且这种改变与Ⅱ型胶原蛋白高表达及OA软骨的修复程度相关。本研究明确了补肝肾、强筋骨类方药治疗OA滑膜炎的疗效及与软骨修复的相关性,也为中药治疗滑膜炎及软骨损伤性疾病提供数据支持及新的思路。     

蠲痹历节清方对大鼠痛风性关节炎关节肿胀指数和滑膜组织中炎症因子的影响

目的 观察蠲痹历节清方对大鼠痛风性关节炎关节肿胀指数和滑膜组织中炎症因子的影响,探讨蠲痹历节清方治疗痛风性关节炎的潜在机制。方法 48只雄性SD大鼠随机分为A（正常对照）、B（模型对照）、C（蠲痹历节清方治疗）和D（阳性对照）4组,每组12只。除A组（空白对照）外,其余3组均采用局部尿酸钠盐关节腔注射的方法建立大鼠痛风性关节炎膝关节模型,A、B组予以生理盐水灌胃,C组予以蠲痹历节清方灌胃,D组予以依托考昔灌胃。观察造模前、后不同时相点测量大鼠膝关节周径,并计算出膝关节肿胀指数;采用ELISA法检测大鼠膝关节滑膜组织中的TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2和TGF-β的含量。结果 与A组比较,B组（模型组）大鼠的膝关节肿胀指数和滑膜组织中炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2）含量明显升高（P＜0.05）,而TGF-β含量明显减少（P＜0.05）。与B组（模型组）比较,C组（蠲痹历节清方治疗组）大鼠膝关节肿胀指数明显较低（P＜0.05）,且滑膜组织中炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2）含量明显低于C组（P＜0.05）,而抗炎因子TGF-β含量明显高于C组（P＜0.05）。结论 蠲痹历节清方能够有效缓解痛风性关节炎大鼠膝关节炎性肿胀,其作用机制可能与抑制局部组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2的合成、释放,同时增加局部组织中抗炎因子TGF-β的含量有关。     

沙参麦冬汤加味对糖尿病大鼠胰岛素抵抗、炎症反应和氧化应激反应的影响

【目的】观察沙参麦冬汤加味对糖尿病大鼠胰岛素抵抗、炎症反应和氧化应激反应的影响。【方法】将40只大鼠随机分为空白组、模型组、中药组和西药组,每组10只。除空白组外,其余3组均采用链脲佐菌素腹腔注射结合高脂高糖饮食法建立糖尿病模型。中药组给予沙参麦冬汤加味(剂量为9.4 g·kg-1·d-1)灌胃,西药组给予罗格列酮(4.0 mg·kg-1·d-1)灌胃,空白组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃,给药时间为8周。造模结束后,称大鼠体质量,采用全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG);酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、胰岛素(Fins)水平;血糖仪检测空腹血糖(FBG);亲和色谱法检测糖化血红蛋白(HbA1c);胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=FBG×Fins/22.5。【结果】与空白组比较,模型组TC、TG、FBG、Fins、HOMA-IR、HbA1c、TNF-α、IL-1β、IL-6、hs-CRP、MDA水平明显升高,大鼠体质量及SOD、CAT水平明显降低;与模型组比较,中药组TC、TG、FBG、Fins、HOMA-IR、HbA1c、TNF-ɑ、IL-1β、IL-6、hsCRP、MDA水平明显降低,大鼠体质量及SOD、CAT水平明显升高。【结论】沙参麦冬汤加味具有降糖作用,其机制可能与减轻胰岛素抵抗、抑制炎症反应和氧化应激反应有关。     

痹痛康丸对胶原性关节炎大鼠IL-1β的影响

【目的】观察痹痛康丸对胶原性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)大鼠踝关节滑膜白细胞介素1β(IL-1β)的影响,探讨其治疗作用机制。【方法】建立II型胶原加完全弗氏佐剂诱导的大鼠CIA模型,70只Wistar大鼠随机分为7组,分别为痹痛康丸低、中、高剂量组[0.3、3、30 g.(kg.d)-1],尪痹冲剂组3.g(kg.d)-1,甲氨蝶呤片组1.2 mg.(kg.w)-1,以上各组药物溶解于2 ml生理盐水中,1次/d,连续灌胃给药4周。空白对照组及模型组灌服生理盐水2 ml/只。8周后处死大鼠,观察右踝关节滑膜病理改变情况及关节滑膜中IL-1β蛋白表达量的变化。【结果】各用药组除痹痛康丸低剂量组外滑膜组织的病理改变均有不同程度的减轻,IL-1β蛋白的表达量较模型组降低(P<0.05)。【结论】痹痛康丸能有效降低CIA大鼠滑膜炎程度,防止骨破坏或关节重构,有免疫调节作用。     

宣痹健膝汤治疗膝骨性关节炎

目的:观察宣痹健膝汤治疗膝骨性关节炎的临床疗效,及其对关节液白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、一氧化氮(nitrogenmonoxidum,NO)水平的影响。方法:将116例患者按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组58例。对照组采用西医常规方法治疗,治疗组在西医常规治疗基础上加用宣痹健膝汤治疗。观察两组患者的临床症状评分,采集关节液测定相关指标,同时对比临床疗效和并发症情况。结果:对照组有效率77. 59%低于治疗组的91. 38%,差异有统计学意义(P 0. 05);与治疗前比较,两组患者治疗后视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)、美国西部Ontario和McMaster大学骨关节炎指数(the western Ontario and McMaster universities osteoarthritis index,WOMAC)量表评分均降低,Lyshom评分升高,关节液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-1β及超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)水平降低,TGF-β1水平升高,关节液中NO、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平降低,超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)水平升高,关节液中基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)水平降低,差异均有统计学意义(P 0. 05);与对照组比较,治疗组治疗后VAS、WOMAC量表评分较低,Lyshom评分较高,关节液TNF-α、IL-1β及Hs-CRP水平较低,TGF-β1水平较高,关节液NO、MDA水平较低,SOD水平较高,关节液MMP-3、MMP-9和MMP-13水平较低,差异均有统计学意义(P 0. 05)。结论:宣痹健膝汤治疗膝骨性关节炎疗效显著,可以降低关节液IL-1β、NO水平。     

柴白温胆汤对动脉粥样硬化大鼠内皮功能及MMP-9/TIMP-1的影响

【目的】探讨柴白温胆汤对动脉粥样硬化大鼠内皮功能及MMP-9/TIMP-1的影响。【方法】将45只大鼠分为正常组(N=10)、造模组(N=35)。采用维生素D3腹腔注射联合高脂喂养方法建立AS模型(时间为8周)。造模结束后,从造模组抽取5只大鼠取腹主动脉组织进行光镜和电镜检查以判断造模是否成功,再将剩余的30只大鼠随机分为模型组、他汀组、柴白温胆汤组,每组10只。他汀组给予阿托伐他汀钙片(剂量为0.6 mg·kg-1·d-1)灌胃,柴白温胆汤组给予柴白温胆汤(剂量为16 g·kg-1·d-1)灌胃,正常组和模型组每天给予等体积的生理盐水进行灌胃。共给药4周。给药结束后,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测各组大鼠血清一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1),血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)的水平。【结果】本研究成功复制动脉粥样硬化大鼠模型。与正常组比较,模型组大鼠血清ET-1、TXB2、MMP-9水平明显升高(P 0.05),NO、6-keto-PGF1α、TIMP-1水平明显降低(P 0.05);与模型组比较,柴白温胆汤组大鼠血清ET-1、TXB2、MMP-9水平明显降低(P 0.05),NO、6-keto-PGF1α、TIMP-1水平明显升高(P 0.05)。【结论】柴白温胆汤可调控动脉粥样硬化大鼠内皮功能及MMP-9/TIMP-1的平衡。     

健脾益肺Ⅱ号对熏烟联合脂多糖诱导大鼠炎症因子及金属蛋白酶表达的影响

[目的]通过观察健脾益肺Ⅱ号对熏烟联合脂多糖诱导的大鼠肺组织基质转化生长因子β1(TGF-β1)、金属蛋白酶-9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素(IL-8)表达的影响,以探讨健脾益肺Ⅱ号协调气道损伤、修复平衡以及减少气道重构的作用机制,从而阐明该方防治慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道损伤的可能作用机制。[方法]将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、健脾益肺Ⅱ号低剂量组、健脾益肺Ⅱ号高剂量组、泼尼松组。以熏烟联合脂多糖(LPS)的方法建立大鼠肺部损伤模型,给予相应药物干预,观察记录大鼠一般状况,至实验结束,采用免疫组化法比较各组大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1的表达水平,采用ELISA法检测大鼠肺组织及血清中TGF-β1的水平变化以及肺组织中TNF-α和IL-8水平的变化。[结果]模型组大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1以及MMP-9/TIMP-1的相对表达明显高于正常对照组(P0.05或P0.01);健脾益肺Ⅱ号高剂量组和泼尼松组大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1以及MMP-9/TIMP-1的相对表达明显低于模型组(P0.05或P0.01);模型组大鼠肺组织及血液中TNF-α、IL-8、TGF-β1含量均比正常对照组显著升高(P0.01),各给药组经过药物的干预后,其含量明显降低(P0.01或P0.05)。[结论]健脾益肺Ⅱ号方可通过降低模型动物肺组织MMP-9/TIMP-1相对表达量,下调血清中TGF-β1的水平,降低肺组织中TGF-β、TNF-α和IL-8的释放水平,减少肺组织反复的损伤与修复过程,从而起到减缓气道重构的作用。     

川芎嗪对大鼠肠粘连组织MMP-9、TIMP-1和细胞因子表达的影响

目的:观察川芎嗪对肠粘连模型大鼠粘连肠组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达及血清白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及转化生长因子(TGF-β)水平的影响,探讨川芎嗪预防肠粘连作用机制。方法:72只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、假手术组、手术组及川芎嗪组,每组18只。正常对照组不行手术,假手术组仅行腹腔开关术,川芎嗪组术后每天腹腔注射川芎嗪溶液10mL(净含川芎嗪约0.1g),其余三组注射等量生理盐水。各组于术后第2、7、14天取血,肉眼观察肠粘连的程度分级;酶联免疫吸附法测定血清细胞因子IL-1、TNF-α、TGF-β。免疫组织化学染色加图像分析法观测MMP-9及TIMP-1表达。结果:手术组及川芎嗪组肠粘连程度显著增加(P<0.05),与手术组比较,川芎嗪组肠粘连程度明显减轻(P<0.05)。与手术组比较,川芎嗪组IL-1、TNF-α及TGF-β水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。术后2天,与手术组比较,川芎嗪组肠组织MMP-9表达显著降低(P<0.05),TIMP-1未见明显改变(P>0.05)。术后7天及14天,川芎嗪组肠组织TIMP-1表达较手术组有显著增高(P<0.05),MMP-9无明显改变(P>0.05)。结论:川芎嗪可能通过影响血细胞因子IL-1β、TNF-α和TGF-β1水平及肠组织MMP-9和TIMP-1表达,一定程度上抑制大鼠肠粘连。     

依那普利对博来霉素致大鼠肺纤维化的影响

目的探讨依那普利对博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织中细胞因子和肺纤维化的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、低剂量依那普利组、中剂量依那普利组、高剂量依那普利组和泼尼松对照组,每组10只。博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型。对各组大鼠进行肺泡炎、肺纤维化半定量评分,检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子-β1(TGF-β1)、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素(IL)-1、IL-2、IL-4和IL-6含量,肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)含量,BALF和血清中间质金属蛋白酶(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的浓度,以及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)m-RNA的表达。结果依那普利剂量依赖性地降低博来霉素诱导的肺纤维化大鼠的肺纤维化评分和肺泡炎评分(P<0.05);降低大鼠BALF中TGF-β1、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6的含量(P<0.05),并升高INF-γ含量(P<0.05);升高肺组织中SOD含量(P<0.05),并降低MDA和HYP含量(P<0.05);降低血清及BLAF中MMP-9、TMP-1的含量,降低MMP-9/TMP-1值(P<0.05);降低肺组织TNF-αm-RNA的表达(P<0.05)。结论依那普利可以有效抑制博来霉素诱导的大鼠肺纤维化。