淋巴结结核脓液中结核分枝杆菌的培养和药敏

目的：利用淋巴结穿刺和手术切除的淋巴结脓液进行结核菌的培养和药敏实验，寻求提高结核菌培养阳性率的方法以及淋巴结核菌的耐药性分析。方法：将穿刺和采取的脓液分别用直接接种法和2％H2SO4处理法接种于改良罗氏培养基上，观察生长情况，对生长的结核菌进行药敏实验。结果：用2％H2SO4处理法接种的脓液标本阳性率明显高于直接接种法。药敏实验敏感23例，敏感率54．8％，耐药19例。耐药率45．2％，耐药率较高。结论：利用2％H2S04处理可以提高结核分枝杆菌培养的阳性率。淋巴结核结核分枝杆菌培养的药敏情况说明，产生耐药的原因主要与用药不规范、化疗措施不得力有关。应加强规范管理；在一线药物耐药的情况下，应注意二、三线药物的应用。     

结核分枝杆菌耐药性分析

目的:回顾性分析结核分枝杆菌耐药状况。方法:分析分离培养出并使用噻吩-2羧基肼(TCH)和对硝基苯甲酸(PNB)进行分型确认的127株结核分枝杆菌药物敏感试验结果,包括异烟肼(H)、利福平(R)、链霉素(S)、乙胺丁醇(E)、吡嗪酰胺(Z)、力克肺疾(D)、氧氟沙星(O)、丙硫乙烟胺(TH)、卷曲霉素(C)、对氨基水杨酸钠(P)、丁胺卡那(AK)。11种药物采用绝对浓度法进行药物敏感性检测。结果:127株结核分枝杆菌中,R耐药率最高,高浓度药物耐药达74%、C耐药率最低,高浓度药物耐药率为3.9%;HR联合耐药率为67.7%,HRS联合耐药率为52%,CThZ联合耐药率为9.4%,同时对7种药物耐药的耐药率为39.4%,同时对11种药物的耐药率为11%。结论:结核分枝杆菌耐药情况已很严重,需要更严格的执行结核病预防和治疗。     

淋巴结结核脓液中结核分枝杆菌的培养和药敏

目的利用淋巴结穿刺和手术切除的淋巴结脓液进行结核菌的培养和药敏实验,寻求提高结核菌培养阳性率的方法以及淋巴结核菌的耐药性分析.方法将穿刺和采取的脓液分别用直接接种法和2%H2SO4处理法接种于改良罗氏培养基上,观察生长情况,对生长的结核菌进行药敏实验.结果用2%H2SO4处理法接种的脓液标本阳性率明显高于直接接种法.药敏实验敏感23例,敏感率54.8%,耐药19例,耐药率45.2%,耐药率较高.结论利用2%H2SO4处理可以提高结核分枝杆菌培养的阳性率.淋巴结核结核分枝杆菌培养的药敏情况说明,产生耐药的原因主要与用药不规范、化疗措施不得力有关.应加强规范管理;在一线药物耐药的情况下,应注意二、三线药物的应用.     

结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌3种鉴定方法的比较

目的评估MPB64免疫胶体金法、PNB试验和Xpert MTB/RIF在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)和非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacterium,NTM)鉴定中的应用价值。方法收集2017年5～11月在重庆市公共卫生医疗救治中心就诊经分枝杆菌菌种鉴定(PCR-反向点杂交法)诊断的肺结核或疑似肺结核病人BACTEC MGIT960培养阳性标本178份,分别用MPB64胶体金法、PNB试验和Xpert MTB/RIF鉴定MTB和NTM,以PCR-反向点杂交法的鉴定结果为金标准,比较3种方法的敏感度和特异度。结果 PCR-反向点杂交法鉴定结果为154株MTB,6株MTB与NTM混合感染,18株NTM。PNB试验、Xpert MTB/RIF试验、胶体金试验鉴定MTB的敏感度分别为96. 1%、100. 0%、96. 7%,3种方法的敏感度差异有统计学意义(P <0. 05); PNB试验、Xpert MTB/RIF试验、胶体金试验鉴定MTB的特异度分别为88. 8%、100. 0%、100. 0%,检测结果特...     

环丝氨酸联合利福平和异烟肼对耐药结核分枝杆菌体外作用效果的研究

目的 检测环丝氨酸（DCS）联合利福平和异烟肼对耐药结核分枝杆菌体外作用效果的研究。方法 采用微孔板Alamar blue法测定38株临床分离株对DCS、利福平及异烟肼的最小抑菌浓度（MIC）,使用棋盘稀释法检测DSC与利福平和异烟肼的体外联合作用,计算分级抑菌浓度指数（FICI）判定联合效应。结果 DSC与利福平联用后,7株菌株（18.4%）表现为协同作用,24株菌株（63.2%）的联用MIC降低数个浓度梯度;DSC与异烟肼联用后,5株菌株（13.2%）表现为协同作用,22株菌株（57.9%）的联用MIC降低数个浓度梯度;两种联合药物方案均没有发现拮抗效应;DSC与利福平和异烟肼联用后MIC50和MIC90均降低。结论 DSC与利福平和异烟肼联用均能不同程度地降低临床耐药株的耐药性,采用DCS联合用药有利于耐药结核病患者的治疗。     

结核分枝杆菌复合群及耐药基因突变检测试剂盒诊断结核分枝杆菌耐药效果研究

目的 评价结核分枝杆菌复合群及耐药基因突变检测试剂盒（GenoType MTBDRplus VER2.0,简称MTBDRplus 2.0）检测利福平和异烟肼耐药的灵敏度和特异度等效能指标,为提高结核分枝杆菌耐药性检测水平提供依据。方法 收集2022年1—12月云南省32个县（市、区）级结核病定点治疗医院分离培养的阳性菌株,经MTBDRplus 2.0检出结核分枝杆菌880株,进行最低抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）法药敏试验检测。结果 以MIC法为金标准,MTBDRplus 2.0检测异烟肼耐药的灵敏度为67.69%,特异度为98.40%,阳性预测值为77.19%,阴性预测值为97.45%,MTBDRplus 2.0和MIC法检测异烟肼耐药结果一致性中等,Kappa为0.701(P<0.001);检测利福平耐药的灵敏度为87.80%,特异度为99.40%,阳性预测值为87.80%,阴性预测值为99.40%,MTBDRplus 2.0和MIC法检测利福平耐药结果一致性较好,Kappa为0.872(P<0.001)。MTBDR...     

结核分枝杆菌蛋白芯片检测对结核病诊断的价值

目的探讨结核分枝杆菌IgG抗体的检测及其临床应用价值。方法应用蛋白芯片识别仪分析结核病人血清中结核菌蛋白16Kda和38Kda以及脂阿拉伯甘露糖（LAM）抗体含量,同时与ELISA法进行比较,判断其敏感性、特异性和总符合率。结果结核蛋白芯片检测的敏感性和特异性分别为68.96%、81.11%,而ELISA法检测的敏感性和特异性分别为61.81%、85.56%。两者检测的总符率为73.90%,两种方法的敏感性差异具有显著性（χ2=4.1,P〈0.05）。结论结核蛋白芯片检测对肺结核及肺外结核病人具有较好的诊断价值,可作为结核病的血清学辅助诊断之一。     

结核分枝杆菌疫苗研究进展

结核病是一种人畜共患的慢性消耗性疾病,发病率和病死率很高.近年来,全球结核病疫情呈上升趋势.结核病再度肆虐与获得性免疫缺陷综合征(艾滋病)的广泛传播、耐药菌株的出现、人群流动增加、城市化发展、社区人口密度增加等因素有关.有关结核病的研究与日俱增,其中有关结核病的免疫学和疫苗的研究是这一领域的热点.近年来由于结核分枝杆菌基因组序列的研究,明确了与疫苗有关的新型结核分枝杆菌抗原.本文就结核分枝杆菌的有效抗原、机体抗结核细胞免疫特点及结核菌疫苗研究的进展作一综述.     

再探结核分枝杆菌及结核病

结核杆菌属于分枝杆菌属，是专性需氧菌。由于细胞壁含大量蜡质和疏水性阿拉伯-半乳聚糖-分枝菌酶，难以用革兰染色着色，为抗酸阳性菌。通常寄生在细胞内，是一种兼性胞内寄生的人类致病菌，可引起结核病。结核菌是分枝杆菌属中对人类致病的主要病原菌，其中以人型结核菌感染发病率最高，占结核患者的90％左右，其次为牛型和非洲型结核菌。     

结核分枝杆菌感染的动物模型

复制结核分枝杆菌（MTB）感染的动物模型是进行结核病研究的基础。本文分别对小鼠、豚鼠、兔和非人灵长类结核（TB）模型的特点及其应用进行综述，由于潜伏性感染是结核病的重要特征，因此慢性持续性感染模型是TB动物模型研究的重点。     

结核杆菌抗原对中性粒细胞自发性凋亡的抑制作用

目的: 探讨结核杆菌抗原(Mtb-Ag)对体外培养中性粒细胞自发性凋亡的影响。方法: 取健康成人外周血分离中性粒细胞,加Mtb-Ag培养24 h,或用Mek抑制剂PD98059预处理30 min后,Wright-Giemsa染色形态学方法和Annexin-V染色流式细胞术观察细胞凋亡。结果: 与中性粒细胞体外培养24 h后自发凋亡(55±10)%相比,加入Mtb-Ag (1.125 mg/ml)后,中性粒细胞自发凋亡率(31±3)%明显降低(P<0.01);Mek抑制剂PD98059(50μmol/L)可阻断Mtb-Ag的抑制凋亡作用(P<0.01)。结论: Mtb-Ag对中性粒细胞自发性凋亡有抑制作用,这一作用可能涉及Mek-Erk途径。     

结核分枝杆菌感染控制在结核病预防中的作用分析

目的 探讨和分析结核分枝杆菌感染控制在结核病预防中的临床应用价值。方法 选择2014年6月～2016年6月期间医院所分离的168株结核分枝杆菌作为临床研究对象,并分别对本研究中结核分枝杆菌的来源情况和耐药情况进行统计和分析,并由此制定相应的感染控制措施。结果 168株结核分枝杆菌来源于痰液132株,占78.57%(132/168);胸腹水21株,占12.50%(21/168);血液9株,占5.36%(9/168);尿液6株,占3.57%(6/168)。168株结核分枝杆菌对抗结核药物均敏感的101株,占率60.12%(101/168),对抗结核药物耐药的67株,占率39.88%(67/168)。结核分枝杆菌对异烟肼32.74%(55/168)、利福平30.36%(51/168)单药耐药的比率,以及对异烟肼+利福平24.40%(41/168)耐多药的比率均呈现出较高的耐药率,耐药率均处于20%以上。结论 加强对结核分枝杆菌来源及耐药情况的监测,并采取针对性的控制措施对于结核病的预防意义深远而重大。     

结核分枝杆菌L型感染对结核病患者痰菌阴转率的影响

目的分析深圳市罗湖辖区结核病患者结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis,MTB）及其L型（MTB—L）的感染状况,探讨MTB—L感染对结核病患者痰菌阴转率的影响。方法采用抗酸染色法检测辖区内2010—2011年收治的960例结核病确诊患者（初治916例、复治44例）的痰液标本并分析其治疗期间MTB和MTB—L的阳性检出率。计算结核病痰菌涂阳患者2、3月末痰菌阴转率,比较MTB阳性、MTB＋MTB．L阳性以及MTB．L阳性患者痰菌阴转率的差异。结果916例初治患者中MTB阳性患者411例、MTB＋MTB．L阳性患者130例、MTB-L阳性患者129例,初治结核病患者中MTB阳性患者2、3月末痰菌阴转率（90．3％、99．5％）均分别高于MTB＋MTB-L阳性患者（46．9％、89．2％）及MTB-L阳性患者（45．7％、89．1％）,差异均有统计学意义（Pl〈0．05）;而MTB＋MTB-L阳性患者2、3月末痰菌阴转率与MTB-L阳性患者比较差异均无统计学意义（尸〉0．05）。44例复治结核病患者中MTB阳性患者12例、MTB＋MTB-L阳性患者19例、MTB-L阳性患者13例,MTB阳性患者2月末痰菌阴转率（83．3％）分别高于MTB＋MTB-L阳性患者（42．1％）及MTB．L阳性患者（38．5％）,差异均有统计学意义（P〈0．05）;MTB阳性患者3月末痰菌阴转率（91．7％）分别略高于MTB＋MTB-L阳性患者（73．7％）及MTB-L阳性患者（76．9％）,但差异均无统计学意义（P〉O．05）;MTB＋MTB-L阳性患者2、3月末痰菌阴转率与MTB-L阳性患者比较差异均无统计学意义（尸〉0．05）。结论MTB-L感染可能是结核病患者痰菌阴转率低的重要原因．加强MTB-L感染监测是当前结核病防控的重要策略之一．     

128例肺结核患者结核分枝杆菌耐药情况

目的 了解唐山市肺结核患者的流行病学情况,分析患者痰液中临床菌株的耐药情况,为结核病尤其是耐药性结核病的防控提供基础依据。方法 问卷调查法收集研究对象的基本资料,调查内容包括年龄、性别、身高、体重、烟酒习惯、受教育程度、职业、初复治情况、服药情况等。经痰培养,分离患者的结核分枝杆菌后接种到改良罗氏培养基中进行培养,采用银科分枝杆菌药敏检测试剂盒对菌株进行药敏检测。对所得结果进行描述性统计分析。结果 128例患者,平均年龄(52.59±18.12)岁,男、女性比为3∶1,以初中以下文化程度居多,农民和工人所占比例为73.44%,BMI比值属于偏瘦的占43.75%,初治患者占83.59%。临床分离菌株耐药株占82.81%。耐药率前三位的药物分别为阿莫西林（49.22%）、氯法齐明（32.03%）和对氨基水杨酸（29.69%）,一线抗结核药物耐药株占36.72%,二线抗结核药物耐药株75.78%。结论 唐山市肺结核患者流行病学分布和全国平均水平相近,但耐药率偏高,尤其是二线抗结核药物耐药率远高于平均水平。     

结核分枝杆菌致病机制及结核病新型诊断技术研究

结核分枝杆菌(Mtb)是重要的全球性致病菌,引起的结核病是世界上致死率最高的传染病之一.据世界卫生组织报告,全球每年有约200万人死于结核病,其中98％的死亡都发生在发展中国家,如南非、印度和中国等.我们课题组通过基础研究与临床需求的紧密结合,在Mtb的进化和致病机制研究以及结核病诊断和药敏快速检测新方法的建立等方面都取得了较大的进展.     

结核杆菌体内诱导基因的筛选及初步分析

目的筛选结核杆菌在人体内诱导表达的基因,进而作为候选的免疫及药物分子新靶位。方法构建结核杆菌基因组表达文库,应用体内诱导的抗原技术,用吸收过的结核患者血清筛选文库,对阳性克隆测序得到开放阅读框（ORF）。结果实验共确定了51个ORF。按照功能分为8类：毒力、解毒及调节相关基因1个,细胞壁与细胞处理相关基因13个,中间代谢和呼吸相关基因11个,脂类代谢基因7个,信号通路基因2个,PE／PPE蛋白家族基因3个,保守假设蛋白基因12个,与牛型分支杆菌同源的保守假设蛋白基因2个。结论应用体内诱导抗原技术可以筛选到结核杆菌进入人体后诱导表达的基因,其中部分基因可以作为结核病预防、诊断和治疗研究的候选靶位。     

结核分枝杆菌痰培养阳性肺结核患者对一线抗结核药耐多药情况分析

目的:分析初治和复治结核分枝杆菌痰培养阳性的肺结核患者对4种一线抗结核药的耐多药(MDR)情况,了解抗结核药耐药现状和形势。方法:选取结核分枝杆菌痰培养阳性患者395例,按中国防痨协会《结核病诊断细菌学检验规程》的要求进行菌种鉴别试验。采用WHO推荐比例法对阳性分离菌株进行药物敏感性检测,计算每种一线药的耐药率及4种一线药的MDR情况。计算初、复治患者的MDR率。结果:4种一线抗结核药物耐药率顺位依次为链霉素(93/395,23.5%),异烟肼(88/395,22.3%),利福平(58/395,14.7%),乙胺丁醇(23/395,5.8%)。初治和复治组患者耐药均以耐链霉素和异烟肼为主,且耐药顺位一致,复治组患者利福平耐药率(17.4%)高于初治组(6.9%)(χ²=6.714,P=0.010)。至少同时对异烟肼和利福平耐药者33例,总MDR率为8.4%,复治患者MDR率(10.2%)高于初治患者MDR率(2.9%)(χ²=5.263,P=0.022)。初、复治组患者MDR形式均以同时耐异烟肼、利福平和链霉素为主,分别为2例(2.0%)和13例(4.4%)。结论:结核分枝菌痰培养阳性肺结核患者耐药频度顺位依次为链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇。复治组患者利福平耐药率、MDR率均高于初治组。初、复治组耐多药形式均以同时耐异烟肼、利福平和链霉素为主。     

ino1反义寡核苷酸对结核分枝杆菌的抑制作用

目的选取合适的靶点，探讨利用反义技术抑制结核杆菌的新方法。方法选取分枝杆菌ino1基因为靶基因，设计并合成3段反义寡核苷酸，将不同浓度的反义寡核苷酸加入细菌的培养液中，观察ino1的mRNA表达情况，结核杆菌分枝硫醇的水平以及结核杆菌的生长情况。结果当反义寡核苷酸的浓度达到20μmol/L时，可以特异性地抑制ino1的表达，此浓度水平时ino1 mRNA的量和对照组的比值为0.67，40μmol/L时的比值则为0.45。分枝硫醇的合成以及分枝杆菌的生长也相应地受到抑制。反义寡核苷酸的浓度为20μmol/L时，分枝杆菌浓度的对数值下降1.3，40μmol/L时下降1.7。结论利用反义技术抑制分枝杆菌是完全可行的，并且ino1可以作为反义寡核苷酸的靶基因。     

耐多药结核分枝杆菌对二线抗结核药物敏感性观察

目的：了解本地区耐多药结核分枝杆菌对二线抗结核药物耐药状况,为治疗耐多药结核病提供参考。方法：收集本院2010年1月~2012年12月来自涂阳肺结核患者的痰培养阳性、经菌种鉴定和一线药物的药物敏感性试验确定为耐多药的结核分枝杆菌株77株,采用绝对浓度法对五种二线抗结核药物：氧氟沙星、对氨基水杨酸、丁胺卡那、卷曲霉素及丙硫异烟胺进行药物敏感性检测,并对耐药状况进行分析。结果：2010~2012年本院培养分离出MDR-MTB77株,其中25株来自初治肺结核患者,52株来自复治肺结核患者,对5种二线药物的总耐药率为72.73%（56/77）,初治耐药率为60.0%(15/25),复治耐药率71.15%（37/52）;XDR-MTB21株占27.27%（21/77）,其中来自初治者1例（4%）,来自复治者20例（38.46%）。MDR-MTB对PAS、AMK、CPM、OFLX、Pto的耐药率分别为 33.77%、14.29%、19.48%、64.94%和24.68%。MDR-MTB对不同组合的二线抗结核药物（OFLX Pto、OFLX CPM Pto、OFLX AMK Pto、OFLX Pto PAS、 CPM PAS OFLX Pto、和AMK PAS OFLX Pto）分别为23.38%、10.39%、5.19%、12.99%、6.49% 和6.49%。结论：无锡地区MDR-MTB对二线抗结核药物耐药性较严重,应加强对MDR-MTB的耐药性监测,合理选择二线抗结核药物治疗MDR-TB。     

初治培阳肺结核患者起始耐药情况分析

目的了解肺结核患者结核分枝杆菌起始耐药情况,制定科学的防治对策。方法采用世界卫生组织制定的结核分枝杆菌耐药监测方案进行结核分枝杆菌耐药监测。使用绝对浓度法对山东省胸科医院住院的1184例培阳肺结核患者的耐药性进行测定。结果 1184例培阳肺结核患者中,全敏感834例(70.44%),耐药350例(29.56%)。其中起始耐药157例(44.86%),复治耐药193例(55.14%)。在起始耐药病例中,单耐药结核病(MonoDR-TB)53例(33.8%),其中耐链霉素的病例最多(38例,24.2%);多耐药结核病(PDR-TB)72例(45.9%);耐多药结核病(MDR-TB)20例(12.7%);广泛耐药结核病(XDR-TB)12例(7.6%);无全耐药结核病(TDR-TB)患者。结论山东省胸科医院住院肺结核患者结核分枝杆菌起始耐药现状十分严重。实现抗结核防治方案的统一管理、全程督导化疗势在必行。