桑皮止咳颗粒剂止咳化痰作用动物研究

目的:观察桑皮止咳颗粒剂对小鼠咳嗽、咳痰症状的干预作用。方法:分别应用氨水引咳法和酚红祛痰法对小鼠进行造模。将咳嗽、咳痰两种模型的小鼠分别给予不同剂量桑皮止咳颗粒剂。并检测连续给药后小鼠的咳嗽潜伏期、咳嗽次数及气道灌洗液吸光度。结果:桑皮止咳颗粒剂可以明显延长小鼠咳嗽潜伏期(P0.05),减少咳嗽发生次数(P0.05),同时使气道灌洗液吸光度明显降低(P0.05)。结论:桑皮止咳颗粒剂具有一定的止咳化痰作用。     

连花清瘟颗粒抗呼吸道合胞病毒感染BALB/c小鼠的药效作用研究

【目的】观察连花清瘟颗粒体内抗呼吸道合胞病毒(RSV)感染的药效作用。【方法】采用BALB/c小鼠RSV感染模型,通过观察小鼠体质量变化、肺病毒滴度、肺内炎症因子m RNA表达及肺组织病理变化评价药物的体内抗病毒药效。【结果】连花清瘟颗粒高剂量组可显著降低RSV感染小鼠肺内病毒滴度(P0.05)。连花清瘟高、低剂量组可显著降低RSV感染小鼠肺内炎症因子白细胞介素IL-6,IL-1βm RNA的表达量(P0.01);肺组织病理检查结果显示:连花清瘟颗粒高、低各剂量组均可以缓解病毒所致肺组织病理性炎症。【结论】连花清瘟颗粒可有效抑制RSV感染小鼠肺内病毒滴度,对小鼠病毒性肺炎具有一定的改善作用。     

呼吸道合胞病毒感染大鼠气道神经营养因子水平与气道神经可塑性研究

目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染SD大鼠肺内神经营养因子水平的变化,及其与气道神经可塑性改变和气道高反应性间的关系.方法 1～2周龄SD幼鼠共20只,随机分为正常对照组和RSV感染组,每组10只.RSV感染组采用每周1次RSV滴鼻法制作RSV感染模型.第8周进行气道阻力测定,留取左肺行HE染色观察肺部病理学变化,免疫组织化学染色检测气道突触囊泡素(SYN)和神经丝(NF)的表达,原位杂交法检测肺组织RSV RNA.EUSA法检测肺组织中神经营养因子[神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养因子3(NT3)及神经营养因子4(NT4)]水平.结果 RSV感染组大鼠肺组织内可见大量炎症细胞浸润,原位杂交显示肺间质细胞中有明显的RSV RNA阳性信号,表明模型建立成功.RSV感染组气道反应性显著增高,气道感觉神经元SYN及NF的表达显著增高,肺部NGF及BDNF水平较对照组明显增高(P<0.05),而NT3及NT4水平与对照组无显著差异(P>0.05).NGF及BDNF浓度与气道SYN表达呈正相关(r1=0.892,r2=0.995,P<0.05),与NF表达呈正相关(r1=0.949,r2=0.936,P<0.05),与气道反应性也呈正相关(r1=0.929,r2=0.910,P<0.05).结论 RSV感染后肺部NGF、BDNF水平增高,并与气道神经可塑性变化和气道高反应性密切相关.     

苏黄止咳胶囊对咳嗽变异性哮喘豚鼠模型疗效的实验研究

【目的】观察苏黄止咳胶囊对咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)豚鼠模型的疗效,探讨苏黄止咳胶囊的作用机制。【方法】将50只豚鼠随机分成正常对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组及苏黄止咳胶囊高、低剂量组,复制CVA豚鼠模型,检测各组豚鼠咳嗽反应、肺组织病理学、支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞百分率及血清中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ig E的水平变化。【结果】与正常对照组比较,模型对照组豚鼠咳嗽次数显著增多(P0.05);与模型对照组比较,苏黄高剂量组咳嗽次数显著减少(P0.05)。与正常对照组比较,模型对照组BALF中嗜酸性粒细胞百分率显著上升(P0.05);3个治疗组嗜酸性粒细胞百分率均较模型组显著降低(P0.05)。治疗组肺组织病理改变较模型对照组减轻。与正常对照组比较,模型对照组血清中IL-4、TNF-α、Ig E水平显著升高(P0.05);与模型对照组比较,醋酸泼尼松组血清中IL-4、TNF-α水平显著下降,苏黄高剂量组血清中TNF-α、Ig E水平显著下降(P0.05)。【结论】苏黄止咳胶囊可能通过降低血清中TNF-α和Ig E的水平,改善CVA豚鼠的咳嗽症状、气道炎症及肺组织病理变化,从而达到治疗CVA的目的。     

金振口服液治疗呼吸道合胞病毒感染引起咳嗽的作用机制研究

目的探讨金振口服液治疗呼吸道合胞病毒感染幼年豚鼠咳嗽的作用及其机制。方法选取幼年豚鼠,随机分为空白组、模型组、磷酸苯丙哌林组、金振口服液(1.3、2.6g/kg)组。除空白组外,每鼠用10~(6.29) TCID_(50) mL~(-1)滴度的呼吸道合胞病毒(RSV)溶液滴鼻造模,空白组给予等体积无病毒DMEM溶液,次日起各给药组连续给药7d。第8天用枸橼酸引咳法检测豚鼠5min内咳嗽次数与咳嗽潜伏期,计数肺泡灌洗液中白细胞总数,ELISA法检测肺泡灌洗液中TNF?α、IL-4、IL-13含量,HE染色进行肺组织学检查,免疫组织化学染色法检测支气管中神经生长因子(NGF)、P物质(SP)、神经肽受体1(NK-1)的表达,Western blot法检测肺组织中NGF、NK-1的表达。结果金振口服液能够抑制RSV感染导致的豚鼠咳嗽次数增多,下调肺泡灌洗液中白细胞总数及TNF?α、IL-4、IL-13的含量,改善肺组织的炎性浸润,降低支气管NGF、SP和NK-1及肺组织NGF和SP的表达。结论金振口服液能改善RSV感染引起的病毒性咳嗽,其机制可能与减少气道炎性反应,降低神经源性介质,调节咳嗽敏感性有关。     

祛风宣肺方对咳嗽高敏感性豚鼠神经源性炎症的作用及机制研究

目的探讨祛风宣肺方对咳嗽高敏感性豚鼠神经源性炎症的作用及机制。方法 48只豚鼠随机分为正常组、模型组、辣椒平组及祛风宣肺方组,每组12只。采用环磷酰胺、卵蛋白和氢氧化铝制备咳嗽高敏感豚鼠模型。造模成功后正常组及模型组予生理盐水灌胃;辣椒平组予瞬时受体电位阳离子通道V1(TRPV1)抑制剂辣椒平腹腔注射(1μmol/kg),每日1次;祛风宣肺方组予祛风宣肺方灌胃(5 g/kg),每日1次。给药7 d后辣椒素雾化测定各组豚鼠的咳嗽次数,肺功能仪检测不同浓度氯化乙酰胆碱激发下豚鼠的气道阻力,HE染色法观察各组豚鼠肺组织的病理变化,RT-PCR法测定各组豚鼠肺组织中TRPV1、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)的基因表达。结果与正常组比较,模型组咳嗽次数,气道阻力,肺组织TRPV1、SP、CGRP基因表达增加(P0.05);与模型组比较,祛风宣肺方组、辣椒平组豚鼠咳嗽次数,气道阻力,肺组织TRPV1、SP、CGRP基因表达降低(P0.05);祛风宣肺方组肺组织TRPV1、SP、CGRP基因表达低于辣椒平组,差异有统计学意义(P0.01)。与正常组比较,模型组肺组织结构破坏及炎症反应明显,辣椒平组及祛风宣肺方组肺组织结构较模型组改善,炎症水平降低。结论祛风宣肺方可降低咳嗽高敏感豚鼠的气道敏感性,其作用机制可能与抑制TRPV1进而减轻气道神经源性炎症有关。     

哮喘及呼吸道合胞病毒感染小鼠的神经生长因子、白血病抑制因子的表达及地塞米松的影响

目的探讨神经生长因子(NGF)、白血病抑制因子(LIF)在支气管哮喘小鼠及呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠的表达,两者是否存在相同的神经源性机制,寻找治疗哮喘的新靶点。方法100只健康Balb/c纯系小鼠随机分为5组:正常对照组,RSV组,哮喘组,哮喘合并RSV组,地塞米松组。HE染色观察肺组织病理变化,RT-PCR技术进行肺组织NGF mRNA及LIF mRNA的定量分析,免疫组织化学方法检测NGF蛋白及LIF蛋白。结果 RSV组镜下可见肺泡隔增宽,肺泡上皮肿胀,间质水肿。哮喘组及哮喘合并RSV组小鼠肺泡间隔增宽,支气管管腔变小,管壁增厚,小血管、细支气管及肺泡周围可见大量炎症性细胞,上述改变哮喘合并RSV组较哮喘组表现明显,而地塞米松组较RSV组表现减轻,正常对照组无炎症细胞浸润。各组均有NGF mRNA及LIF mRNA、NGF蛋白及LIF蛋白表达,哮喘合并RSV组表达最强,哮喘组及RSV组均较正常对照组表达增多,地塞米松组较RSV组表达减少。结论 RSV感染时肺组织NGF及LIF表达有所增加,合并哮喘时表达显著增加,地塞米松干预对NGF及LIF的表达均有一定的抑制作用。     

呼吸道合胞病毒感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力的观察

【】 目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染加重哮喘模型小鼠气道炎症及气道阻力变化的影响。方法 6～8周龄雄性BalB/c小鼠30只,每组10只,随机分为空白组、OVA组(哮喘模型组)、OVA/RSV组(RSV+哮喘模型组)3组。OVA组用卵清蛋白(OVA)致敏和激发;OVA/RSV组在OVA 致敏后,隔日用RSV滴鼻,连续3次,复制急性病毒感染哮喘模型;空白组予等量PBS。末次激发24h后,用小鼠动物呼吸机(Buxco RC系统)检测小鼠气道反应性;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学分析;留取肺组织,进行HE染色、PAS染色、VG染色,观察肺组织炎症反应。结果 OVA组肺功能和BALF嗜酸粒细胞比例(EOS％)与正常组相比差异有显著性 (P<0.05);OVA/RSV组肺功能和BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS％) 与正常组相比有极显著性差异(P<0.01);OVA/RSV组气道反应性及BALF中嗜酸粒细胞比例(EOS％)与哮喘组相比差异有显著性 (P<0.05)。OVA组小鼠肺组织有炎性细胞浸润,气道可见粘液分泌物,气道周围可见胶原增生。OVA/RSV组小鼠肺组织有明显炎性细胞浸润,肺泡腔明显狭窄,毛细血管扩张充血,气道可见明显粘液分泌物,气道周围胶原增生明显。结论 呼吸道合胞病毒感染能明显增加重哮喘模型小鼠肺部组织炎症反应同时气道阻力明显增高。     

祛风止咳方对咳嗽敏感性增高豚鼠模型TRPV1通路的影响

目的 观察祛风止咳方对咳嗽敏感性增高豚鼠模型TRPV1通路表达的影响,探讨其干预喉源性咳嗽的作用机制。方法 采用卵蛋白腹腔注射致敏,结合烟熏的方法制备喉源性咳嗽(咳嗽敏感性增高豚鼠)模型,随机分为空白组、模型组、激动剂组(祛风止咳方+辣椒素)、中药组(祛风止咳方)、对照组(美敏伪麻溶液)。观察各组给药前后咳嗽次数变化,HE染色观察咽喉黏膜、气管黏膜、肺组织形态结构变化,ELISA法检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-10、IgE表达,咽喉、气管黏膜中瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经激肽A(NKA)、P物质(SP)表达水平,Western blot法检测延髓咳嗽中枢IL-1β、TRPV1、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经生长因子(NGF)的表达。结果 与空白组比较,模型组咳嗽敏感性显著增高(P<0.01),咽喉、气管黏膜、肺组织可见黏膜下水肿、炎细胞浸润,嗜酸性粒细胞计数增加,血清IL-1β、IgE表达升高(P<0.01),IL-10表达降低(P<0.01),咽喉、气管黏膜的TRPV1、NKA、CGRP、SP含量增加(P...     

呼吸道合胞病毒感染大鼠脊髓背根节突触囊泡素的表达与气道反应性的关系

目的 研究呼吸道合胞病毒（RSV）感染后大鼠脊髓背根节感觉神经元结构蛋白的表达变化，阐明气道神经可塑性改变的分子机制。方法 1-2周龄SD大鼠共30只，区组随机分为空白对照组、RSV感染组和神经生长因子（NGF）抗体干预组，每组10只。RSV感染组和NGF抗体干预组采用每周1次RSV滴鼻法制作RSV感染模型，NGF抗体干预组先腹膜腔内注射山羊抗大鼠-βNGF抗体，3 h后按照RSV感染组相同的方法进行RSV感染。在第8周进行气道反应性测定，并留取C7-T5脊髓背根节组织，采用免疫组化和RT-PCR检测C7-T5脊髓背根节突触囊泡素的表达。结果 RSV感染组对不同浓度组胺（0.01-0.16 mg/mL）的气道反应性均显著高于空白对照组（P均〈0.05），NGF抗体干预组在≥0.08 mg/mL组胺刺激后气道反应性显著低于RSV感染组，在≥0.04 mg/mL组胺刺激后显著高于正常对照组（P均〈0.05）。RSV感染后突触囊泡素表达较对照组显著升高；NGF抗体干预后突触囊泡素的表达虽低于RSV感染组，但仍高于正常对照组。突触囊泡素mRNA表达亦呈现类似改变。相关分析显示C7-T5脊髓背根节突触囊泡素的蛋白表达与气道反应性呈正相关关系（r=0.813，P〈0.05）。结论 反复RSV感染后脊髓背根节感觉神经元突触囊泡素的表达增高，并与气道反应性增高密切相关。     

固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及CCSP的影响

  目的  研究固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道上皮紧密连接蛋白及Clara细胞分泌蛋白(CCSP)的影响, 探讨其防治缓解期哮喘的可能机制。  方法  联合使用卵清蛋白(OVA)及呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)建立哮喘缓解期小鼠模型, 将36只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、固本防哮饮低剂量组、固本防哮饮中剂量组、固本防哮饮高剂量组和孟鲁司特钠组, 每组6只。模型建立完成后, 固本防哮饮各剂量组分别予不同剂量(12、24、36 g·kg-1)固本防哮饮, 孟鲁司特钠组予2.6 mg·kg-1孟鲁司特钠,各组均灌胃28 d。末次给药后24 h留取样本。使用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠肺组织病理; Western blot、qPCR及免疫组化检测各组小鼠肺组织中闭锁小带蛋白-1(ZO-1)等气道上皮紧密连接蛋白表达; ELISA法检测肺组织及肺泡灌洗液(BALF)中CCSP的表达。  结果  HE染色结果显示, 与正常组相比, 模型组小鼠肺组织中可见明显的炎性细胞浸润(P < 0.01), 固本防哮饮中、高剂量组小鼠肺组织中炎性细胞浸润减少(P < 0.05,P < 0.01);与正常组相比,模型组中ZO-1、闭合蛋白(Occludin)和桥粒芯胶蛋白(Desmocollin)的蛋白表达水平显著降低(P < 0.05,P < 0.01),免疫组化结果显示上述指标蛋白在模型组中表达减少(P < 0.01, P < 0.001)且排列松散, 固本防哮饮各剂量组对上述蛋白表达有不同程度地回调; 同时,模型组中ZO-1、ZO-2、纽带蛋白(Vinculin)、连环蛋白(Catenin) mRNA的表达水平显著降低(P < 0.05,P < 0.01),固本防哮饮高剂量组ZO-1、ZO-2、Vinculin、Catenin mRNA表达水平显著升高(P < 0.05);与正常组相比, 模型组小鼠肺组织及BALF中CCSP的表达显著下降(P < 0.01), 低、高剂量固本防哮饮显著增加肺组织及BALF中CCSP的表达(P < 0.05, P < 0.01)。  结论  固本防哮饮能够上调气道上皮紧密连接蛋白以及CCSP的表达水平, 修复上皮损伤, 恢复上皮屏障功能, 从而防治哮喘。      

银翘柴桂颗粒体内抗甲Ⅰ型流感病毒作用研究

【目的】观察银翘柴桂颗粒的体内抗甲Ⅰ型流感病毒作用。【方法】选用NIH小鼠,随机分为正常组,模型组,阳性对照药组(利巴韦林,100 mg·kg-1·d-1),银翘柴桂颗粒高、中、低剂量组(剂量分别为6、3、1.5 g·kg-1·d-1);建立甲Ⅰ型流感病毒鼠肺适应株FM1人工感染NIH小鼠模型,以肺湿干比率、死亡保护率及肺组织病理变化为主要评价指标,观察银翘柴桂颗粒对感染甲Ⅰ型流感病毒鼠肺适应株FM1小鼠的防治效果。【结果】模型组小鼠肺湿干比率和死亡率显著升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P0.01),肺组织出现明显炎性病变;银翘柴桂颗粒高、中、低剂量组均可显著降低模型小鼠肺湿干比率和死亡率,与模型组比较差异均有统计学意义(P0.05或P0.01),并可改善感染小鼠的肺组织炎性病变,作用与阳性对照药利巴韦林相仿。【结论】银翘柴桂颗粒具有一定的体内抗甲Ⅰ型流感病毒作用。     

加味六安煎对咳嗽变异性哮喘大鼠模型气道重塑的影响

目的观察咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)大鼠模型咳嗽次数、气道炎症、肺组织气道重塑病理变化及加味六安煎对其干预后的影响,探讨加味六安煎治疗咳嗽变异性哮喘的作用机制,为临床治疗提供依据。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、CVA模型组、孟鲁司特钠组、加味六安煎低、中、高剂量组。以卵蛋白、氢氧化铝致敏并吸入卵蛋白激发法复制咳嗽变异性哮喘大鼠模型,观察各组大鼠咳嗽次数、肺组织的炎性细胞浸润、胶原沉积(胶原面积及胶原容积分数)程度。结果(1)与正常对照组比较,CVA模型组咳嗽次数明显增多(P<0.05),与模型组比较,各治疗组咳嗽次数明显减少,其中加味六安煎高剂量组咳嗽次数减少最明显(P<0.05);(2)与正常对照组比较,CVA模型组镜下可见肺组织炎性细胞浸润、充血、水肿;与CVA模型组比较,各治疗组肺组织炎性细胞减少,充血、水肿程度减轻;(3)胶原面积:与正常对照组比较,CVA模型组胶原面积增加(P<0.05),各治疗组比较,加味六安煎高剂量组胶原面积减少最明显(P<0.01),加味六安煎各剂量组与孟鲁司特钠组比较组间差异无统计学意义(P>0.05);(4)胶原容积分数:与正常对照组比较,CVA模型组胶原容积分数增加(P<0.05),各治疗组比较,加味六安煎高剂量组胶原容积分数降低最明显(P<0.01),加味六安煎各剂量组与孟鲁司特钠组比较,组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论加味六安煎可以有效减少CVA大鼠的咳嗽次数,其作用机制可能是通过减轻肺组织炎性细胞浸润、充血、水肿,减少气道胶原沉积从而达到干预CVA大鼠气道重塑的目的。     

补气开窍法对APP/PS1双转基因小鼠认知能力和β-淀粉样肽42的影响

【目的】探讨补气开窍法对APP/PS1双转基因小鼠认知能力和β-淀粉样肽42(Aβ42)的影响及其自噬机制。【方法】将56只APP/PS1双转基因小鼠随机分为4组,雌雄各半,每组14只,即模型组、人参总皂苷组(剂量为75 mg/kg)、石菖蒲挥发油组(剂量为15 mg/kg)、补气开窍方组(剂量为石菖蒲挥发油15 mg/kg+人参总皂苷75 mg/kg)。另设正常组,C57BL/6品系的正常小鼠14只,雌雄各半。各组灌胃给药,模型组和正常组用等体积的蒸馏水代替,给药30 d。末次给药结束1 h后,先将各组小鼠进行行为学检测(水迷宫实验,避暗实验和跳台实验),再麻醉各组小鼠,其中4只灌注固定后的全脑用于免疫组织化学法检测Aβ42,其余小鼠在冰上迅速取出海马用于检测Aβ42,流式细胞术检测磷酸化的哺乳动物雷帕霉素蛋白(p-m TOR)和自噬相关基因(Beclin-1)。【结果】与正常组比较,模型组水迷宫实验的潜伏期显著延长(P0.01),避暗实验和跳台实验的潜伏期显著缩短(P0.01),Aβ42含量和Beclin-1表达显著增加(P0.01),p-m TOR表达显著减少(P0.01);与模型组、人参总皂苷组、石菖蒲挥发油组比较,补气开窍方组的水迷宫实验的潜伏期显著缩短(P0.05),避暗实验和跳台实验的潜伏期显著延长(P0.05),水迷宫实验、避暗实验和跳台实验的错误次数显著减少(P0.05),Aβ42含量显著减少(P0.05),此外,与模型组比较,补气开窍方组的p-m TOR表达显著增加(P0.05),Beclin-1表达显著减少(P0.05)。【结论】人参总皂苷联合石菖蒲挥发油具有改善APP/PS1双转基因模型小鼠的认知能力,减少Aβ42表达和调节自噬作用,且优于单独使用人参总皂苷组或石菖蒲挥发油组。     

固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道杯状细胞增生与黏液分泌相关基因的调控作用

目的?探讨中药复方固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠气道杯状细胞增生与黏液分泌相关基因IRE1β、SPDEF、AGR2和mCLCA3的影响。方法?结合前期研究采用卵蛋白(OVA)致敏和OVA-呼吸道合胞病毒(RSV)联合诱导激发BALB/c雌性小鼠,建立哮喘缓解期动物模型,随机分为正常组,模型组,固本防哮饮低、中、高剂量组,孟鲁司特钠组及地塞米松组。qPCR法检测肺组织中IRE1β、SPDEF、AGR2和mCLCA3 mRNA表达水平。结果?模型组小鼠肺组织中IRE1β、SPDEF、AGR2 mRNA表达显著高于正常组(P＜0.05),而mCLCA3 mRNA表达显著低于正常组(P＜0.05);固本防哮饮高、中、低剂量组,孟鲁司特钠组及地塞米松组小鼠肺组织中IRE1β、SPDEF、AGR2 mRNA水平较模型组存在不同程度的下降,而固本防哮饮低剂量组和孟鲁司特钠组小鼠肺组织中mCLCA3 mRNA表达显著高于正常组(P＜0.05)。结论?固本防哮饮防治哮喘抑制气道杯状细胞增生和减少黏液分泌的作用机制可能是通过降低IRE1β、SPDEF、AGR2 mRNA表达所致。      

蝉芩颗粒通过下调COX-2抑制TRPV1通道减轻感染后咳嗽大鼠气道神经源性炎症

【目的】观察蝉芩颗粒不同剂量对感染后咳嗽大鼠气道神经源性炎症的作用机制。【方法】将SD大鼠随机分为空白组,模型组,蝉芩颗粒低、中、高剂量组及阿斯美组。除空白组,其他各组采用烟熏结合内毒素滴鼻及辣椒素刺激复制感染后咳嗽模型。造模成功后,各给药组对应灌胃给药,模型组给予等体积生理盐水,每天1次,连续14 d,空白组不做任何处理。以酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中P物质(SP)含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织和背根神经节中环氧化酶2(COX-2)、前列腺素E2受体亚型3(EP3)、瞬时受体电位类香草酸受体亚型1(TRPV1) m RNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测TRPV1通道蛋白表达的影响。【结果】(1)ELISA结果:蝉芩颗粒各剂量组、阿斯美组血清中SP含量较模型组下降(P 0.05)。(2)RT-PCR结果:蝉芩颗粒高剂量组肺组织和背根神经节中COX-2 mRNA表达水平低于模型组(P 0.05);蝉芩颗粒各剂量组、阿斯美组肺组织和背根神经节中EP3 m RNA表达水平低于模型组,但差异无统计学意义(P 0.05);蝉芩颗粒各剂量组、阿斯美组肺组织中TRPV1 m RNA表达水平低于模型组(P 0.01),蝉芩颗粒各剂量组背根神经节中TRPV1 mRNA表达水平低于模型组(P 0.05或P 0.01)。(3)Western Blot结果:蝉芩颗粒各剂量组、阿斯美组肺组织和背根神经节中TRPV1蛋白表达水平低于模型组(P 0.01)。【结论】蝉芩颗粒可减轻感染后咳嗽大鼠气道神经源性炎症,其机制可能与下调COX-2及TRPV1表达、减少速激肽SP的释放有关。     

桑皮止咳方治疗儿童肺郁热型感染后咳嗽的临床探讨

目的桑皮止咳方治疗儿童肺郁热型感染后咳嗽疗效探究。方法回顾本院儿科2017年1月至2017年12月收治儿童肺郁热型感染后咳嗽患者82例。所有患者借助电脑随机表法分两组。对照组予常规西药控制,观察组行桑皮止咳方治疗,对比两组疗效、中医症候评分及复发率差异。结果观察组总有效率高于对照组;各项中医症候积分低于对照组;复发率低于对照组,数据差异有统计学意义(P0.05)。结论桑皮止咳方治疗儿童肺郁热型感染后咳嗽具显著药效。     

蝉芩颗粒调控NGF-ERK1/2信号通路对PM2.5致大鼠气道神经源性炎症的影响

【目的】观察蝉芩颗粒调控神经生长因子(NGF)—细胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)信号通路对PM2.5所致大鼠气道神经源性炎症的影响。【方法】采用PM2.5气道滴注染毒大鼠模型,将40只SD大鼠随机分为5组,即盐水对照组,PM2.5组,蝉芩颗粒低、中、高剂量组,每组8只。盐水对照组、PM2.5组予生理盐水灌胃2周,蝉芩颗粒低、中、高剂量组分别给予剂量为4.42、9.36、12.78 g·kg~(-1)·d~(-1)的蝉芩颗粒灌胃2周。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠肺组织和背根神经节NGF、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(pERK1/2)、ERK1/2、磷酸化丝裂原细胞外激酶1/2(p-MEK1/2)、丝裂原细胞外激酶1/2(MEK1/2)蛋白表达。采用免疫组化法检测肺组织NGF、P物质(SP)、SP受体(NK-1R)蛋白表达。【结果】(1)Western-blot结果:与盐水对照组比较,PM2.5组肺组织及背根神经节中NGF、pERK1/2、pMEK1/2蛋白表达升高(P0.05或P0.01)。与PM2.5组比较,蝉芩颗粒中、高剂量组大鼠肺组织及背根神经节中NGF、pERK1/2、pMEK1/2蛋白表达降低(P0.05或P0.01)。(2)免疫组化结果:与盐水对照组比较,PM2.5组大鼠肺组织NGF、NK-1R表达升高(P0.01);与PM2.5组比较,蝉芩颗粒各剂量组的大鼠肺组织中的NGF、NK-1R表达降低(P0.01)。【结论】蝉芩颗粒可通过NGF-ERK1/2信号通路减少下游速激肽的释放,从而减轻PM2.5所致大鼠气道神经源性炎症。     

桑皮止咳方治疗儿童肺郁热型感染后咳嗽临床疗效观察

目的:观察桑皮止咳方治疗儿童肺郁热型感染后咳嗽的临床疗效。方法:将在门诊收集的100例感染后咳嗽的患儿随机分成2组,即治疗组和对照组,每组50例。对照组采用口服西药白三烯受体拮抗剂进行治疗,治疗组给予桑皮止咳方口服治疗,两组均连续治疗14 d后进行疗效统计。结果:治疗组总有效率为90%,对照组总有效率为64%,两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:桑皮止咳方对儿童肺郁热型感染后咳嗽有明显的疗效。     

加味过敏煎对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用

【目的】探讨加味过敏煎对哮喘小鼠气道炎症的影响。【方法】选用BALB/c雌性小鼠60只,按随机数字表法分为6组,分别为空白对照组(空白组),模型对照组(模型组),地塞米松阳性对照组(地塞米松组,剂量为1.25 mg·kg-1·d-1),加味过敏煎高、中、低剂量组(中药高、中、低剂量组,剂量分别为27.2、13.6、6.8 g·kg-1·d-1),每组10只。采用卵白蛋白(OVA)致敏、雾化方法复制小鼠哮喘模型。各组于末次激发24 h后,取外周血进行白细胞总数及分类计数;右肺组织切片,苏木精—伊红(HE)染色观察各组肺组织病理学改变并进行评分。【结果】与正常对照组比较,模型组外周血中白细胞总数、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞均显著升高(P0.05或P0.01),肺组织病变程度严重(P0.01)。与模型组比较,中药高、中剂量组白细胞总数、嗜酸粒细胞数量显著减少(P0.05或P0.01)。中药高剂量组的淋巴细胞、中性粒细胞显著减少,差异均有统计学意义(P0.05)。HE染色显示:中药高、中剂量组能使肺组织中细支气管、血管周围的嗜酸性粒细胞浸润得到控制(P0.01),减轻支气管周围炎性病变程度。【结论】加味过敏煎对哮喘小鼠气道炎症具有一定抑制作用。