自动化动力学内毒素试验测定小鼠血浆中高浓度细菌脂多糖

目的应用自动化动力学内毒素试验，测定小鼠血浆中高浓度的细菌内毒素（脂多糖，ＬＰＳ）。方法人工配制含高浓度Ｅ．ｃｏｌｉＯ５５∶Ｂ５ＬＰＳ的血浆样本，比较碱处理、高倍稀释及二者相结合的方法去除血浆抑制物对应用自动化动力学内毒素试验测定ＬＰＳ的回收率的影响。结果无论在小鼠血浆样本稀释前或稀释后加碱试剂处理，ＬＰＳ回收率极低乃至无法测定。仅用高倍稀释法而不用碱处理可使小鼠血浆和人血浆中ＬＰＳ回收率分别达约８０％和５０％。结论用自动化动力学内毒素试验测定小鼠血浆中高浓度脂多糖时，标本若经碱处理将大大降低回收率，而仅用高倍稀释法效果满意。     

血浆肿瘤坏死因子消退后鲎抗脂多糖因子的抗内毒素休克作用

目的 探讨鲎抗脂多糖因子（ＬＡＬＦ）对晚期内素血症小鼠的保护作用豚其血浆肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）水平的关系。方法 用腹腔注射半数致死量的细菌脂多糖（ＬＰＳ）的小鼠内毒素血症模型，检测血浆ＴＮＦ和ＬＰＳ的动态变化，并分别在ＬＰＳ攻击后４，１０和２４ｈ静脉给予ＬＡＬＦ，比较小鼠存活率与生理盐水（ＮＳ）对照处理的区别。结果ＬＰＳ腹腔注射４ｈ后血浆ＬＰＳ达峰，ＴＮＦ已基本衰退，但此时及更晚时间（ＬＰＳ攻击后     

一氧化氮在小鼠肝损伤中的作用

研究一氧化氮（ＮＯ）在小鼠肝损伤中的作用。方法以卡介苗（ＢＣＧ）加大肠杆菌内毒素（ＬＰＳ）诱导免疫性肝损伤来研究ＮＯ在肝损伤中的作用。结果给小鼠单独注射ＢＣＧ可引起小鼠血浆中ＮＯ水平轻微升高及肝脏轻微损伤。注射ＢＣＧ１２天后，由静脉注射微量ＬＰＳ，可导致血浆ＮＯ显著升高，并伴随严重的肝损伤。ＮＯ合成酶抑制剂——单甲基精氨酸（ＮＭＭＡ）在显著抑制ＢＣＧ＋ＬＰＳ诱导的血浆ＮＯ升高的同时，加重肝损伤的程度。ＮＭＭＡ的这种作用可被ＮＯ合成酶底物——左旋精氨酸部分逆转。结论ＮＯ参与了ＢＣＧ＋ＬＰＳ诱导的肝损伤，且呈现一种保护作用。     

iNOS与内毒素血症中淋巴循环的关系

目的：研究内毒素血症中诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）对大鼠肠系膜淋巴管微循环动力学的影响。方法：给大鼠注入脂多糖（ＬＰＳ）和Ｓ－甲基异硫脲（ＳＭＴ），用倒置显微镜和图像处理系统观察及测量大鼠淋巴管的口径和运动频率，用免疫组化染色法观察ｉＮＯＳ在大鼠淋巴管的表达。结果：ＬＰＳ组肠系膜淋巴管口径比正常扩大，运动频率降低，ｉＮＯＳ阳性细胞增多。而ＬＰＳ＋ＳＭＴ组的淋巴管口径和运动频率未见明显变化，ｉＮＯＳ阳性细胞较ＬＰＳ组显著降低。结论：ｉＮＯＳ过量表达影响了淋巴循环；ＳＭＴ可通过抑制ｉＮＯＳ的活性而对内毒素血症期间的淋巴管起保护作用。     

实验性中暑兔血浆内毒素与血液学指标的变化

目的 探讨兔中暑时血浆内毒素（ＬＰＳ）浓度与血液学指标的变化及其特点。方法在干球温度４２℃、湿球温度３５℃、相对湿度６０％条件下,测定了２４只热暴露兔随机分为肛温维持４３℃组和肛温持续上升组,分别测定其白细胞、红细胞、血小板以及血浆内毒素（ＬＰＳ）浓度。结果（１）肛温维持组与持上升组血 ＬＰＳ浓度分别由实验前的０．１３９、０．１３１ｎｇ／ｍｌ升至０．２８５、０．２４９ｎｇ／ｍｌ;（２）两组动物休克     

明党参多糖对NF—kB结合活性的影响

目的：观察明党参多糖对转录活化核蛋白因子ＮＦ－ｋＢ结合活性的影响。方法：在内毒素（ＬＰＳ）诱导Ｊ７４４．ａ．１小鼠的巨噬细胞析，可诱生出同的ＮＦ－ｋＢ活性，分别采用ＬＰＳ先刺激，ＬＰＳ后刺激和ＬＰＳ与明党参多糖同时刺激等３种方法对其处理，并分离核蛋白，行聚丙酰凝胶电泳及光密度扫描定量分析。结果：发现明党参多糖在３种情况下均可降低ＬＰＳ刺激所致的ＮＦ－ｋＢ结合活性。结论：明党参多糖要显著降低ＬＰＳ刺     

乳果糖对肝硬化大鼠血浆内毒素（LPS）肿瘤坏死因子（TNF）及血清ALT的影 …

探讨乳果糖对肝硬化大鼠血浆内毒素、肿瘤坏死因子及血清ＡＴＬ的影响。方法：将四氯化碳注射于ＳＤ大鼠皮下，诱导肝硬化伴腹水动物模型。 该鼠随机分为肝硬化模型组、乳果糖治疗组，检测各组和正常的血浆ＬＰＳ，ＴＮＦ及血清ＡＬＴ水平。结论乳果糖能通过降低血浆ＬＰＳ来显著低于ＴＮＦ，对肝脏有保护作用。     

灯盏花素注射液中细菌内毒素动态比浊法测定的研究

目的：应用动态比浊法鲎试验定量测定灯盏花素注射液中的细菌内毒素含量，方法：通过对样品中定量添加标准内毒素的干扰试验，检测其回收率应在50％－200％范围。结果：将样品进行1／12稀释可以有效地消除其对鲎试验的干扰，结论：动态比浊法鲎试验可以高效地测定样品中的细菌内毒素含量。     

杀菌性／通透性增加蛋白模拟肽小鼠体内拮抗内毒素作用的研究

目的：观察杀菌性／通透性增加蛋白（ＢＰＩ）模拟肽对内毒素（ＬＰＳ）攻击所致小鼠死亡的保护作用。方法：以一个ＬＤ５０的ＬＰＳ（２０ｍｇ·ｋｇ－１）静脉注射攻击小鼠，分别于ＬＰＳ攻击后２０ｓ内静脉注射不同剂量的ＢＰＩ模拟肽；于ＬＰＳ攻击前及攻击后不同时间内分别静脉注射５ｍｇ·ｋｇ－１和１０ｍｇ·ｋｇ－１的ＢＰＩ模拟肽，以观察ＢＰＩ模拟肽对ＬＰＳ攻击所致小鼠死亡的保护作用、ＢＰＩ模拟肽对ＬＰＳ攻击小鼠死亡保护作用的时效关系及ＢＰＩ模拟肽对ＬＰＳ攻击小鼠死亡的预防作用。结果：ＢＰＩ模拟肽对ＬＰＳ所致小鼠死亡有明显的保护作用及预防作用，并有一定的量效关系及时效关系。结论：ＢＰＩ模拟肽，不仅保留了ＢＰＩ特异性中和ＬＰＳ的特性，而且对ＬＰＳ攻击小鼠具有更强的保护作用     

磷脂酶A_2抑制剂的研究──粉防己碱对U937细胞磷脂酶A_2和前列腺素生成的影响

探讨粉防己碱对培养的Ｕ９３７细胞中花生四烯酸瀑布系统产生前列腺素的影响。以Ｕ９３７细胞株为模型,加入内毒素（ＬＰＳ）处理,以及粉防己碱预处理后再加入ＬＰＳ处理,观察Ⅱ－型磷脂酶Ａ２（Ⅱ—ＰＬＡ２）、胞液型磷脂酶Ａ２－（ｃＰＬＡ２）和环氧合酶－２（ＣＯＸ—２）以及前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的变化。结果发现ＬＰＳ可刺激Ｕ９３７细胞中Ⅱ－ＰＬＡ２、ｃＰＬＡ２和ＣＯＸ—２以及ＰＧＥ２的产生增加,粉防己碱则可不同程度地抑制它们的增高。粉防己碱具有降低内毒素引发的Ⅱ—ＰＬＡ２、ｃＰＬＡ２和ＣＯＸ—２以及ＰＧＥ２产生的作用。     

动态浊度法测定人参多糖注射液中细菌内毒素的含量

目的：建立测定人参多糖注射液中细菌内毒素含量的方法。方法建立动态浊度法测定细菌内毒素标准曲线,通过测定供试液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,确定样品检测浓度线性范围,并定量测定样品中的细菌内毒素。结果内毒素检测浓度线性范围为0.03125~2.0 EU·mL-1（r＝-0.9989）;样品在稀释36倍及以下时,对试验无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%范围内,样品中的内毒素含量可定量测定。结论动态浊度法可用于人参多糖注射液中细菌内毒素的定量检测。     

高渗盐／甘露醇液对内毒素小鼠脑腺细胞凋亡的保护作用

为探讨高渗盐／甘露醇法（ＨＳＭ）对内毒素诱导小鼠胸腺细胞凋亡的影响，取昆明纯种小白鼠２４只平分为三组，即（１）对照组，腹腔注射生理盐水；（２）内毒素实验组（ＬＰＳ组），腹腔注入内毒素；（３）ＬＰＳ＋ＨＳＭ组，腹腔注入内毒素前后共注ＨＳＭ二次。结果示，第三组胸腺细胞凋亡百分率及ＤＮＡ断裂百分率明显低于第二组（Ｐ〈０．０１），ＤＮＡ断裂碎片中的琼脂糖凝胶电泳未见典型的梯状带。提示ＨＳＭ对内毒素诱导的小     

磷脂酶A2抑制剂的研究：粉防己碱对U937细胞磷脂酶A2和前？…

探讨粉防己碱对培养的Ｕ９３７我花生四烯酸布系统产生前殂朱素的影响。以Ｕ９３７细胞株为模型加入内毒素处理，以及粉防己碱预处理后再加入ＬＰＳ处理，观察Ⅱ－型磷脂酶Ａ２、胞液型磷脂酶Ａ２、和环氧合酶－２以及前列腺素Ｅ２的变化。     

内毒素血症大鼠肠道P物质的变化及意义

目的：探讨Ｐ物质（ＳＰ）在内毒素血症大鼠肠蠕动变化中的作用。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为对照组、内毒素血症（ＬＰＳ）组。①采用活性炭标记法观察内毒素血症状态下肠道传输速率变化;②观察内毒素血症后３、６、１２ｈ大鼠血浆、空肠组织匀浆ＳＰ含量变化及空肠免疫组化ＳＰ阳性神经在肠道分布及内毒素血症后的变化。结果：①内毒素血症后小肠传输速率加速;②内毒素血症后血浆ＳＰ变化不显著,空肠组织ＳＰ含量下降,空肠ＳＰ     

失血性休克对内毒素的增敏作用及其分子机制

目的探讨失血性休克对内毒素的增敏作用及其机制，为失血性休克的治疗提供理论依据。方法采用生化、逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）及细胞原位杂交技术，观察了失血性休克条件下低剂量内毒素的作用及其可能机制，以及大鼠肝、肺、肾组织内脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）ｍＲＮＡ的表达。结果输入脂多糖（ＬＰＳ）后，失血性休克（ＨＳ）＋ＬＰＳ组家兔血压持续显著下降，血浆乳酸、β葡萄糖醛酸酶水平显著升高，与单纯ＬＰＳ或ＨＳ组比差异有显著意义。休克后２４小时，ＨＳ＋ＬＰＳ组动物全部死亡，而其余两组动物存活；ＲＴ－ＰＣＲ结果显示，休克及复苏后，大鼠肝、肺、肾组织内ＬＢＰｍＲＮＡ表达相继增多；细胞原位杂交结果表明，休克及复苏后，小鼠腹腔巨噬细胞内ＣＤ１４ｍＲＮＡ表达也明显增加。结论失血性休克能增敏内毒素的作用，其机制可能与休克上调ＬＢＰ／ＣＤ１４的表达有关。     

产色基质法测定血浆内毒素

应用鲎三肽产色基质法定量测定血浆内毒素,血中主要抑制物可采用稀释加热法或同时加入少量过氯酸消除,但高浓度的盐溶液不能用此法。     

肠缺血─再灌流大鼠肠源性细胞因子TNFα和IL-6表达的变化及其机制

目的：观察肠缺血—再灌流过程中肠源性ＩＮＦα和ＩＬ－６ 表达的规律并探讨介导肠源性细胞因子表达的因素。方法：采用ＲＴ—ＰＣＲ和ＲＩＡ 的方法检测了肠缺血—再灌流过程中小肠组织ＴＮＦα和ＩＬ６ｍ ＲＮＡ表达及其蛋白含量的变化，并测定组织丙二醛（ＭＤＡ）含量及肠静脉血浆ＬＰＳ浓度。结果：正常情况下小肠ＴＮＦα和ＩＬ～６ｍ ＲＮＡ仅有少量表达，肠缺血１ｈ～１．５ｈ，表达已开始增加，再灌流０．５ｈ～１ｈ，表达至峰值，与肠静脉血浆内毒素（ＬＰＳ）浓度及组织丙二醛（ＭＤＡ）含量变化趋势基本一致，但表达增加的高峰略早于血浆ＬＰＳ峰值而晚于组织ＭＤＡ含量的增加。结论：肠缺血—再灌流时，肠道是早期产生炎性细胞因子的重要器官，在诱发ＳＩＲＳ中可能起重要作用；原发的缺氧、氧自由基生成及通过受损肠壁的ＬＰＳ可能均参与介导小肠炎性介质的表达。     

动态比浊法鲎试验定量测定盐酸川芎嗪注射液中细菌内毒素含量

目的：应用动态比浊法鲎试验定量测定盐酸川芎嗪注射液中的细菌内毒素含量。方法：通过对样品中定量添加标准内毒素的干扰试验,检测其回收率应在50％－200％范围。结果：将样品进行1／100稀释可以有效地消除其对鲎试验的干扰。结论：EDS－99细菌内毒素检测仪可以高效地测定样品中的细菌内毒素含量。     

人类新基因eola1全长cDNA序列的克隆

人类基因组计划完成后 ,功能基因和蛋白质组的研究成为当今生命科学研究的热点[1] 。克隆差异表达基因对于深入理解基因功能及阐明重大疾病的发病机制都有极其重要的意义。本文报道了我们最近应用抑制消减杂交 (ＳＳＨ) [2 ] 和ｃＤＮＡ末端扩增技术 (ＲＡＣＥ) [3 ] 从内毒素 (ＬＰＳ)刺激后人脐静脉内皮细胞中克隆一个人类新基因ｅｏｌａ1全长ｃＤＮＡ序列。1　材料和方法1.1　细胞培养和ＬＰＳ处理　　培养人脐静脉内皮细胞系ＥＣＶ3 0 4,分成ＬＰＳ处理组和对照组。ＬＰＳ处理系在培养基中加入ＬＰＳ(0 111∶Ｂ4,10 0ｎｇ/ｍｌ)刺激6ｈ…     

在线血液透析滤过液中细菌内毒素定量法研究

目的 应用动态比浊法鲎实验定量测定血液透析滤过液中的细菌内毒素含量。方法对血液透析滤过液中定量添加标准内毒素进行干扰预试验,将血液透析滤过液原液及稀释成5、10、20倍液,定量添加标准内毒素,其回收率分别为58．17％、106．7％、99．00％和98．79％;从中筛选出最佳的稀释倍数为10倍,进行3个批号血液透析滤过液（040408、040511、040527）正式干扰试验,血液透析滤过液中定量添加标准内毒素,其回收率分别为76．32％、99．00％和96．24％。结果 标准内毒素使用1．00、0．125、0．0156Eu／ml,将血液透析滤过液稀释成10倍,滤过液中定量添加标准内毒素,回收率均为50％-200％,认为血液透析滤过液对试验无干扰作用,可用于样品检查。结论 动态比浊法可以测定血液透析滤过液的细菌内毒素含量。