高效液相色谱法测定鹿茸血酒中嘌呤类物质

目的 建立鹿茸血酒中嘌呤类物质的高效液相色谱分析方法.方法 用高氯酸水解过滤制备测试样,以0.02mol/LKH2PO4-H3PO4的缓冲溶液(pH=4.00)为流动相,试样流经Eclipse XDB-C18反相色谱柱,在流速为1.00 ml/min、检测紫外波长为254.4 nm、柱温为25℃时的条件下,用高效液相色谱法(HPLC)分析测定鹿茸血酒中的嘌呤类物质(鸟嘌呤、腺嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤、5'-鸟苷酸和5'-腺苷酸).结果 嘌呤类物质(鸟嘌呤、腺嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤、5'-鸟苷酸和5'-腺苷酸)在0.1～50 mg/L浓度范围内,线性关系良好(r≥0.995).方法的最低检出限(LOQ)和定量限(LOD):鸟嘌呤为2.42 mg/L和7.26 mg/L、腺嘌呤为4.01 mg/L和12.03 mg/L、黄嘌呤为1.04 mg/L和3.12 mg/L、次黄嘌呤为1.99 mg/L和5.97 mg/L、5'-鸟苷酸为1.54 mg/L和4.62 mg/L、5'-腺苷酸为1.10 mg/L和3.30 mg/L,各组份精密度(n=10)为3.9％～4.9％,加标回收率:5'-腺苷酸(5'-AMP)为95.0％～101.0％、5'-鸟苷酸(5'-GMP)为93.5％～99.3％、腺嘌呤为93.8％～101.8％,鸟嘌呤为94.9％～101.0％,黄嘌呤为92.0％～99.5％,次黄嘌呤为92.6％～99.6％.结论 该方法具有操作高效,快速,准确的特点,适用于鹿茸血酒中嘌呤类物质的定量测定.     

常见饮品中嘌呤含量的测定

本文通过高效液相色谱法测定饮品中嘌呤(鸟嘌呤、腺嘌呤、黄嘌呤、次黄嘌呤)含量,指导痛风病人健康膳食。研究采用优化后的样品前处理条件对常见饮品进行前处理,高效液相色谱法测定其嘌呤含量。结果显示不同饮品中嘌呤含量有较大差异,啤酒均含4种嘌呤,且鸟嘌呤含量最高,果汁类饮品含少量嘌呤,碳酸类饮品不含嘌呤。饮品中4种嘌呤含量分布规律为:鸟嘌呤>腺嘌呤>黄嘌呤>次黄嘌呤。因此不同饮品中嘌呤含量差异较大,啤酒较高,而果汁和碳酸类饮料较低。     

超高效液相色谱法测定中式菜肴中4种嘌呤

目的 建立超高效液相色谱测定中式菜肴中黄嘌呤、次黄嘌呤、鸟嘌呤和腺嘌呤的方法，了解北京常见中式菜肴中嘌呤的分布情况。方法 菜肴样品经4%高氯酸水溶液水解，用KOH溶液调节pH至8.4,经过滤后采用Shim-pack GIST C₁₈-AQ色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.9μm)分离，254 nm波长下进行测定。结果 4种嘌呤的线性范围为1～100μg/mL,相关系数(r²)均大于0.999,在高、中、低3个水平加标回收率为87.5%～95.9%,相对标准偏差<6%(n=6)。方法检出限为0.19～0.36μg/g,定量限为0.62～1.20μg/g。80道中式菜肴中4种嘌呤的含量为1.43～237.32 mg/100 g,黄嘌呤含量最低，鸟嘌呤、腺嘌呤、次黄嘌呤含量接近，分布特征不同。结论 本方法简便稳定，准确灵敏，适用于中式菜肴中4种嘌呤的测定。     

超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定乳粉类产品中核苷和核苷酸的含量

目的建立超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定乳粉类产品中5种核苷(腺嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷、胞嘧啶核苷、尿嘧啶核苷、次黄嘌呤核苷)和5种核苷酸(胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸,腺嘌呤核苷酸、次黄嘌呤核苷酸和鸟嘌呤核苷酸)含量的方法。方法样品用温水溶解,经25%乙酸溶液沉淀蛋白后离心,使用T3柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)为分析柱,以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液作为流动相,梯度洗脱分离。质谱采用正离子模式,多反应监测模式进行检测,用外标法定量。结果 5种核苷和5种核苷酸在10 min内达到基线分离。次黄嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷酸在10~1000 ng/m L浓度范围内,其余检测物在5~1000 ng/m L浓度范围内线性关系良好。方法检出限为0.002~0.150 mg/kg,加标回收率为89%~121%,相对标准偏差为0.91%~8.84%(n=6)。结论该方法快速准确、灵敏度高、前处理简单,能够快速测定婴幼儿配方奶粉中5种核苷和5种核苷酸的含量。     

高效液相色谱法同时测定肉类食品中的嘌呤和尿酸

目的建立同时测定肉类食品中4种嘌呤(腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤)和尿酸的高效液相色谱分析方法,并对常见肉类食品中的含量进行测定。方法样品用10%(V/V)高氯酸在沸水浴中水解60min,调节pH至4,离心,上清液过膜,以7×10-3mol/L KH2PO4-H3PO4(pH 4.0)为流动相,选用Agilent ZORBAXEclipse XDB-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱进行色谱分离,流速1.0ml/min,柱温25℃,检测波长254nm。结果各组分在相应检测浓度范围内与其响应值呈良好的线性关系(r>0.9999);方法回收率在90.0%～107.5%,相对标准偏差在1.7%～13.3%之间。几种肉类食品中除含有4种嘌呤外,同时还含有尿酸(133.7～86.2μg/g),尿酸约占嘌呤和尿酸总量的7%。鸡肉中嘌呤总含量[(1759.3±64.6)μg/g]高于兔肉、羊肉、猪肉和牛肉(1440～1000μg/g)。结论该方法用于肉类食品嘌呤检测简便快速,准确可靠。     

豆类中4种嘌呤的高效液相色谱测定法

目的:建立豆类中嘌呤含量测定的高效液相色谱法(HPLC)。方法:采用10%(v/v)高氯酸溶液在100℃水浴中水解样品60 min,样品液调节pH值,过滤后,进行色谱分析。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(250×4.6 mm,5μm),柱温25℃,流动相为0.007 mol/L KH2PO4(pH=4.0),流速1.0 ml/min,紫外检测器254 nm处检测,进样量为20μl。结果:在0.1 mg/L～25 mg/L的浓度范围内,各嘌呤的响应峰面积与浓度呈良好线性相关,r>0.9997,相对标准偏差<8.74%,样品加标回收率为85.9%～104.3%。结论:该方法测定豆类中嘌呤含量,具有简便快速、结果准确可靠、重现性好等优点。不同豆类的嘌呤总含量在58.2～158.1 mg/100 g之间。     

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定火锅添加剂中的6种重金属

目的:建立一种用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定火锅添加剂中多种重金属方法。方法:样品经过微波消解前处理,经ICP-MS特征波长定性扫描后,分别选取51.9Cr、62.9Cu、74.9As、89.9Zr、110.9Cd、207.9Pb同位素的波长对样品进行定量测定。结果:用本方法相关系数可达0.9999,相对标准偏差为0.53%～2.91%,回收率在91.0%～103.3%之间,六种金属Cr、Cu、As、Zr、Cd、Pb的方法检出限依次为0.0008 mg/L、0.0005 mg/L、0.0005 mg/L、0.0005 mg/L、0.0002 mg/L和0.0006 mg/L。结论:该法能同时测定火锅添加剂中多种重金属,回收率高,重现性好,检测限低,可满足火锅添加剂实际样品的检测需求。     

梯度淋洗离子色谱法测定乳与乳制品中硫氰酸根

目的采用Ionpac AS19色谱柱,建立一种大体积进样,电导检测乳制品中硫氰酸根的梯度淋洗离子色谱法。方法样品加入乙腈沉淀蛋白,冷冻离心,上清液通过RP柱去脂肪,经0.22μm微孔滤膜净化后直接进样。结果低浓度样品检测方法的线性范围0.025~0.50 mg/L,r=0.9999;高浓度样品检测方法的线性范围0.50~5.0 mg/L,r=0.9996。相对标准偏差0.25%~3.40%,平均加标回收率91.3%~97.6%。方法的检出限为0.003 mg/L(0.06 mg/kg),定量限为0.01 mg/L(0.20 mg/kg)。结论该方法灵敏度好、检出限低,适用于乳与乳制品中硫氰酸根含量的测定。     

用BrdU法检测外周血淋巴细胞hprt突变的方法学探讨

目的　探索用 5 -溴脱氧尿嘧啶 (5 bromodeoxyuridine,BrdU)法检测次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因 (hypoxanthine guaninephosphoribosytransferasegene,hprt)突变的操作程序。 方法　用正交设计法就BrdU法的最佳检测条件进行了探讨。结果　本研究所得的最佳操作程序是 :将血样放入 4℃冰箱中冷藏2 4h ;培养基中 6 巯基鸟嘌呤 (6 thioguanine ,6 TG)最终浓度为 1×10 -4mol/L ;BrdU最终浓度用1× 10 -4mol/L ;加入BrdU后培养时间为 16h ;Giemsa染液浓度为 4 % ;染色时间为 15min。结论　BrdU法是一种较好的检测hprt突变的方法。     

阴离子色谱-脉冲安培检测法测定啤酒中的氨基酸

[目的]建立啤酒中氨基酸的高效阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法测定.[方法]样品用去离子水稀释后经滤膜过滤直接进样,采用梯度洗脱、阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法测定啤酒中的氨基酸.[结果]5种品牌的啤酒氨基酸平均含量为773.54 mg/L,其中氨基酸含量最高的为1 040.72 mg/L,最低的为532.77 mg/L.[结论]不同原料、不同酿造方式使啤酒中的氨基酸含量各不相同;利用阴离子交换色谱分离-脉冲安培检测法测定啤酒中的氨基酸,样品前处理简单,方法适用性宽,测定重复性好,灵敏度高,定性定量准确,结果满意.     

蔬菜中类黄酮物质的高效液相色谱测定法

目的:建立蔬菜中类黄酮的高效液相色谱测定方法。方法:摸索优化水解、萃取条件,建立高效液相色谱测定方法,并对天津市售30种蔬菜中槲皮素、杨梅黄酮、玉米黄酮、坎二菲醇、芹菜配基的含量进行测定。结果:所建立的高效液相色谱法变异系数范围为2.8%～6.5%,回收率范围为90.2%～108.4%,槲皮素、玉米黄酮、坎二菲醇检测下限为0.4mg/L,杨梅黄酮、芹菜配基为0.8mg/L。30种蔬菜中29种检测出了槲皮素,含量在7.55～0.60mg/100g鲜重范围,5种检测出芹菜配基,7种检测出玉米黄酮,8种检测出杨梅黄酮,而坎二菲醇在30种蔬菜中均未检出;藕、洋葱、豆角、西红柿、芹菜等蔬菜的类黄酮含量较高。结论:本研究建立的方法可靠,并具有较高的准确度和精密度。所测定的蔬菜中类黄酮物质的组成和含量差异较大,槲皮素为主要的类黄酮。     

同位素稀释-气相色谱串联质谱法测定啤酒中4种亚硝胺类化合物

目的 建立啤酒中4种N-亚硝胺类化合物（N-亚硝基二甲胺、N-亚硝基二乙胺、N-亚硝基二丙胺、N-亚硝基二苯胺）的同位素稀释固相萃取-气相色谱串联质谱测定方法。 方法 样品经活性炭固相萃取小柱富集、二氯甲烷洗脱,洗脱液经氮吹浓缩定容后,采用INNOWAX毛细管色谱柱分离,多反应监测（MRM）模式检测,同位素稀释内标法定量。 结果 各物质在5 μg/L~200 μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9995。方法的检出限为0.03-0.10 μg/L,定量限为0.10~0.33 μg/L。不同水平的加标回收率为72.1%~100.3%,相对标准偏差为1.5%~9.5%（n=6）。 结论 该方法操作简单,灵敏度和准确度高,适用于啤酒中4种N-亚硝胺类化合物的测定。     

离子色谱法同时测定饮用水中七种阴离子的含量

目的:建立同时测定饮用水中7种无机阴离子含量的测定方法。方法:样品用0.2μm滤膜过滤后直接进样,离子色谱法同时测定氟化物、氯化物、亚硝酸盐氮、溴化物、硝酸盐、硫酸盐和磷酸盐。色谱柱为:IonPac AS19型阴离子交换色谱柱(4 mm×250 mm i.d)和IonPac AG19保护柱;检测方式为:抑制型电导检测器。结果:本法相关性好(r>0.9993),精密度高(RSD%<3.0),样品加标回收率为95.0%～103.7%,检出限分别为:F-:0.0015 mg/L;Cl-:0.0010 mg/L;NO2--N:0.0019 mg/L;SO42-:0.0012 mg/L;Br-:0.0018 mg/L;NO3-:0.0013 mg/L;HPO24-:0.0023 mg/L。结论:该方法操作简单、快速、准确、线性范围广,可满足大批量水样检测分析要求。     

高效液相色谱法快速测定辣椒酱中的苏丹红

目的研究一种快速高效的测定辣椒酱中4种苏丹红染料的HPLC检测方法。方法取2.5g样品用乙腈在35℃温浴振荡提取30min,滤膜过滤,提取液用旋转蒸发仪浓缩,用乙腈定容至10mL,进样。采用短色谱柱（Zobax C18150×2.1mm 5μm）,低流速（0.3ml/min）,单一成分流动相（乙腈）及单一波长（506nm）,对4种苏丹红染料进行分离。结果 4种苏丹红染料在色谱柱上用5min即可全部分离,苏丹红Ⅰ-Ⅳ的最低检出限分别为5.4、6.3、3.9、4.2μg/kg,线性范围为0.01～5mg/L,相关系数r^2均大于0.999,低、中、高浓度加标回收率为98.4～101%。结论本文方法具有样品处理方法简单、检测速度快、灵敏度高的优点,可用于大批量辣椒酱样品的检测任务。     

尿中s-羟乙基半胱氨酸的OPA自动柱前衍生高效液相色谱法测定

目的：建立尿中s-羟乙基半胱氨酸的OPA自动性前衍生高效液相色谱法测定方法。方法：尿液经Sep-Pak C18小柱富集和纯化，样液中s-羟乙基半胱氨酸在HP1050高效液相色谱仪自动进样器中使用邻苯二甲醛（OPA）自动衍生，经Lichrospher 100RP-18e色谱柱分离，用DAD检测器在338nm波长下测定吸收值。结果：s-羟乙基半胱氨酸浓度范围0.0mmol/L-0.5mmol/L的校准曲线相关系数为0．9999，方法检出限为0．002mmol/L；s-羟乙基半胱氨酸浓度0．05mmol/L,0.30mmol/L,0.50mmol/L组内相对标准偏差（RSD）分别为1．67％、1．02％和1．40％（n=6);不同日期测定组间相对标准偏差（RSD）分别为4．78％、3．82％和3．74％（n=6)。尿中加标0．10mmol/L,0.30mmol/L的回收率分别为90％、93％。结论：方法线性好，精密度和回收率高，操作简便，自动化程度高，可用于测定尿中s-羟乙基半胱氨酸。     

鲜乳及乳粉中L-羟脯氨酸的柱前衍生高效液相色谱测定法

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱测定鲜乳及乳粉中L-羟脯氨酸方法。方法样品经酸水解,采用异硫氰酸苯酯(PITC)与水解液中的L-羟脯氨酸衍生,以C18柱分离,紫外检测器254 nm波长下检测。结果在2～10 mg/L范围内,L-羟脯氨酸质量浓度与峰面积具有良好的线性关系,样品加标平均回收率为95.0%～100.3%,方法精密度为0.4%～4.0%。鲜乳的检出限为2.0 mg/kg,乳粉的检出限为14 mg/kg。结论该方法易于操作、稳定、准确,适用于鲜乳及乳粉中L-羟脯氨酸检测。     

Simple and Sensitive Method for Determination of Imidacloprid Residue in Soil and Water by HPLC

A rapid, sensitive and reliable HPLC method was developed and validated for the determination of imidacloprid residue in water at different pH and in soil. Quantification was performed by reversed phase HPLC system equipped with UV detector. The limit of quantification (LOQ) was found to be 0.02 mg/kg in soil and 0.02 mg/L in water. The limit of detection (LOD) was 0.006 mg/kg in soil and 0.006 mg/L in water. Recoveries for imidacloprid were 95.18%, 94.66%, 95.27% and 94.78% in black, red, sandy loam and clay soils, respectively. Recoveries for imidacloprid from water were 96.86%, 86.14%, and 92.34% at pH values of 4, 7, and 9, respectively.     

高铬酵母的制备及其有机铬含量的研究

目的 :　通过在培养基中添加无机铬化合物的方法制备有机铬含量较高的高铬酵母 ,并对高铬酵母中总铬和有机铬的含量进行分析。方法 :　以麦芽汁为培养基 ,啤酒酵母菌接种量为 1 0 % ,Cr Cl3的添加浓度为 2 0 .0 mg/L,2 8℃ ,培养 48h。结果 :　所得高铬酵母中的总铬和有机铬含量可分别达到 2 60 .2μg/g和 2 1 6.0μg/g;紫外光谱分析 ,高铬酵母在 2 60 nm处有特征吸收峰 ;红外光谱分析 ,高铬酵母在 478cm- 1 (波数 )处有特征吸收峰 ;用氨基酸自动分析仪对高铬酵母中的 1 7种氨基酸含量进行分析 ,证实高铬酵母中的氨基酸含量大多高于普通酵母 ,尤其是赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等人体必需氨基酸的含量明显提高。结论 :　通过该法可以制备有机铬含量及营养价值较高的高铬酵母