荧光偏振免疫法测定环孢素A全血浓度结果分析

采用荧光偏振免疫法（ＦＰＩＡ）测定肾移植受者环孢素Ａ（ＣｓＡ）全血谷浓度，结果发现食物、性别、肝脏功能等均是影响ＣｓＡ全血谷浓度的重要因素；从免疫抑制效果看，术后３个月、３～６个月、６个月以上的理想稳态血浓范围分别为２００～３８０ｎｇ·ｍｌ－１、１５０～３３０ｎｇ·ｍｌ－１和１００～２５０ｎｇ·ｍｌ－１。     

心脏移植术1例的环孢菌素A全血浓度监测

介绍１例终末期扩张型心肌病患者完成同种异体原位心脏移植术后,进行环孢菌素Ａ（ＣｓＡ）全血浓度监测。用ＣｓＡ、强的松和硫唑嘌呤行免疫抑制治疗,采用荧光偏振免疫分析法（ＦＰＩＡ）测定ＣｓＡ全血谷浓度。结果表明采用小剂量联合用药,术后９个月ＣｓＡ的稳态全血谷浓度维持在５０～２５０ｎｇ／ｍｌ范围内可行,并探讨了药物的相互作用。     

肝功能对环孢素血药浓度影响的监测

６０位肾移植术后病人的１０８份ＣｓＡ血样用特异性单克隆（ＭＡＦＰＩＡ）和非特异性多克隆荧光免疫偏振分析法（ＰＡＦＰＩＡ）进行测定。结合肝脏功能与术后时间，观察药物浓度的变化。ＭＡＦＰＩＡ和ＰＡＦ－ＰＩＡ两种检测方法之间有线性关系（ｒ＝０．８９２６），二者的测得值具统计学非常显著性差异。肝功能异常的患者ＰＡＦＰＩＡ／ＭＡＦＰＩＡ比值以及回归曲线参数与肝功能正常的患者相比有明显差异，表明肝功能异常的患者ＣｓＡ的代谢产物在体内蓄积而使得检测结果偏高。术后时间对药物浓度变化有一定的作用。术后近期（１０ｄ内）与术后３～７ｗｋ服用等同剂量的ＣｓＡ，血药浓度有明显差异，说明对于肾移植术后服用ＣｓＡ的患者，应持续、定期地进行药物浓度的监测。     

肾移植患者应用环孢素的有效血药浓度范围

环孢素Ａ(ＣｓＡ)为肾移植术后一种有效的免疫抑制剂 ,我国已总结出不少合理应用ＣｓＡ的经验。本文收集了有关文献 ,并进行归纳综述。1　监测方法1.1　常用监测方法　ＣｓＡ的常用检测方法有放免法(ＲＩＡ) ,荧光偏振免疫法 (ＦＰＩＡ ,此法可采用非特异性多克隆抗体 (ＰＣ)或特异性单克隆抗体 (ＭＡｂ)试剂盒 ) ,特异性ＦＰＩ Ａ法与高效液相色谱法 (ＨＰＬＣ)、特异性放免法 (ＲＩＡ)同属ＣｓＡ特异性测定法 ,能够专一检测ＣｓＡ原型药浓度。1.2　不同方法测定结果的相关性　不同方法测定ＣｓＡ结果不尽相同。肾移植患者ＦＰＩＡ(ＭＡｂ)…     

影响环孢素A血药浓度的因素分析

应用荧光偏振免疫法（ＦＰＩＡ）测定２５例尸肾移植后患者全血环孢素Ａ（ＣｓＡ）浓度。结果合用酮康唑．西咪替丁后ＣｓＡ血浓度增高２．２１和１．６８倍，肝功能异常患者ＣｓＡ血浓度比正常组高１．６６倍。另外血中有凝血块也是影响原因之一。     

影响环孢素A血药浓度的因素分析

应用荧光偏振免疫法（ＦＰＩＡ）测定２５例尸肾移植后患者全血环孢素Ａ（ＣｓＡ）浓度。结合合用酮康唑，西咪替丁后ＣｓＡ血浓度增高２．２１和１．６８倍，肝功能异常患者ＣｓＡ血浓度比正常组高１．６６倍，另外血中有凝血块也是影响原因之一。     

骨髓移植患者环孢环血药浓度的HPLC和PAFPIA法的比较

建立了一种专一性测定骨髓移植（ＢＭＴ）患者全血环孢素（Ｃｓ）主药浓度的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法，并与非专一性测定Ｃｓ主药及代谢物二者总浓度的多抗荧光偏振免疫（ＰＡＦＰＩＡ）法比较，两者测定值，经ｔ检验具统计学极显著性差异；经相关与回归分析，呈线性关系，方程为：ＹＦＡＦＰＩＡ＝２．５９ＸＨＰＬＣ＋３７．３５，ｒ＝０．９２４７，ｎ＝５３。建议：监测ＢＭＴ患者Ｃｓ时，既要采用ＰＡＦＰＩＡ法，又要采用Ｈ     

血清肿瘤标记物检测在诊断胆道良,恶性疾患的应用价值研究

目的 对血清癌胚抗原（ＣＥＡ）、甲脂蛋白（ＡＦＰ）、血清铁蛋白（ＳＦ）、β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）肿瘤标记物进行检测,探讨其在胆道良、恶性疾患中的诊断价值。方法 放射免疫检测法（ＲＩＡ）结果 对照组６４例、良性组６０例和恶性组３６例进行检测,血清ＣＥＡ、ＳＦ、和β２－ＭＧ浓度恶性组（分别为１８．８４、２３５．９４ｎｇ／ｍｌ及６．８４ｎｇ／ｍｌ较良性组（９．０６、１６９．４９ｎｇ／ｍｌ,３．３９ｎ     

再生障碍性贫血患者环孢素A血药浓度测定方法的比较

目的：寻找在监测再生障碍性贫血（再障）患者环孢素Ａ（ＣｓＡ）浓度时高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法和多克隆荧光偏振免疫（ＰＦＰＩＡ）法两者之间的差异和相关性。方法：建立一种特异性测定再障患者血清服药后全血中ＣｓＡ原药的ＨＰＬＣ法，并与非特异性测定ＣｓＡ原药及其代谢物总浓度的Ｐ〈０．０１，经相关与回归分析呈线性关系，方程为：ＹＦＦＰＬＡ＝２．４７ＸＨＰＬＣ＋６９．５２，ｒ＝０．９１２４，ｎ＝３８，（Ｐ〈０     

放射免疫法测定睾丸移植病人环孢素浓度和药物动力学研究

用瑞士山德士（ＳＡＮＤＯＺ）出品的环孢素Ａ（ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ，ＣｓＡ）的放射免疫（ＲＩＡ）测定药盒，通过液体闪烁仪对口服ＣｓＡ的两例睾丸移植患者分别进行了服药３ｄ（达稳态）后的１２ｈ内ＣｓＡ全血浓度测定及药动学研究，并追踪监测了调整剂量后的全血浓度。其峰浓度（Ｃｍａｘ）分别为２２４．０ｎｇ／ｍｌ及２１５．２ｎｇ／ｍｌ，达峰时间（Ｔｍａｘ）分别为４ｈ及３．５ｈ；口服ＣｓＡ后在１２ｈ内其药时曲线为二房室模型，Ｔ１／２α分别为１．５４ｈ及２．５７ｈ，Ｔ１／２β分别为６０．４ｈ及１３．０４ｈ。     

肾移植病人术后环孢素A血药浓度监测的意义

对３０例同种异体肾移植病人术后进行１２０次全血环孢素Ａ（ＣｓＡ）监测结果提示：在应用三联免疫抑制疗法中，未发生急性排斥反应和肾中毒的ＣｓＡ浓度值均在３００ｎｇ·ｍｌ－１上下波动。急性排斥反应ＣｓＡ浓度偏低，低于２００ｎｇ·ｍｌ－１，肾中毒较未发生肾中毒的ＣｓＡ浓度值高，但不能提出适宜的治疗窗上限。ＣｓＡ个体差异大，给药应个体化     

高效液相色谱法及荧光偏振免疫法测定环孢素A血药浓度的比较

本文建立了特异性测定全血中环孢素Ａ（ＣｓＡ）的高效液相法（ＨＰＬＣ），并与荧光偏振免疫法（ＦＰＩＡ）比较，结果提示两法相关性好，回归方程ＦＰＩＡ值＝７５．６８＋２．６８ＸＨＰＬＣ值（Ｎ＝９４），ｒ＝０．９０５（Ｐ＜０．００１），ＨＰＬＣ法测定的是ＣｓＡ主药和代谢物，ＦＰＩＡ／ＨＰＬＣ值＞３．提示患者体内ＣｓＡ代谢物积蓄，肝功能异常。     

测定全血中环孢素A样品处理方法的优化

目的：探讨提高全血中环孢素Ａ（ＣｓＡ）萃取率的可行性，方法：采用正交设计法优化全血中的ＣｓＡ的萃取条件，并加以考察验证，结果：影响萃取率的主要因素为：盐酸，甲醇，氢氧化钠量及乙醚萃取次数，改变萃取条件可使全血中ＣｓＡ萃取率由７８％提高至９０．１４％，日内日间变异均〈９．０％，线性范围为２５～１６００ｎｇ／ｍｌ，最低检测浓度为１０ｎｇ／ｍｌ。结论：本法能提高全血中ＣｓＡ的萃取率，可广泛用于临床血药浓     

反相高效液相色谱法快速测定环孢菌素A在全血中的药物浓度

建立反相高效液相色谱法测定环孢菌素Ａ（ＣｙＡ）在全血中的血药浓度的方法。色谱条件：以Ｃ８柱为固定相,注动相为乙腈－甲醇－水（５５：２０：２５,Ｖ／Ｖ）,流速０．８ｍｌ／ｍｉｎ,柱温６５℃,紫外检测波长２１４ｎｍ。环孢菌素Ｄ（ＣｙＤ）作内标,以环孢菌素Ａ与Ｄ的峰面积比定量,用单步萃取法提取全血中的环孢菌素Ａ和Ｄ样品。本法线性范围为５０￣２０００ｎｇ／ｍｌ,最低检测浓度为１２．５ｎｇ／ｍｌ。方法回收率     

抗人CD3单抗在体外诱导LAK和TIL增殖的实验研究

目的 观察抗人ＣＤ３单抗（ａＣＤ３ＭｃＡｂ）对单核细胞（ＰＢＭＣ）和肿瘤组织中提取的浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）增殖的影响。方法 将外周血中分离出的ＰＢＭＣ和ＴＩＬ进行扩增培养,同时测定其活性。结果 ａＣＤ３ＭｃＡｂ和白细胞介素－２（ＩＬ－２）的浓度是包被法制备ＣＤ３单克隆抗体激活的杀伤细胞（ＣＤ３ＡＫ）的主要影响因素。经选择ａＣＤ３ＭｃＡｂ的最适蛋白浓度为０．１ｕｇ／ｍｌ,ＩＬ－２为２０Ｕ／ｍｌ。结论     

Inhibitory effect of antisense basic fibroblast growth factor oligonucleotides on proliferation of cultured aortic smooth muscle cells induced by angiotensin Ⅱ in SHR rats

目的：研究转染反义碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）寡核苷酸（ＯＤＮ）对培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）生长的影响．方法：用脂质体介导法将反义ｂＦＧＦＯＤＮ转入ＳＭＣ内，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测ｂＦＧＦ基因表达，并测定［３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入和细胞计数．结果：转染反义ｂＦＧＦＯＤＮ（５μｍｏｌ·Ｌ－１）几乎完全抑制血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ，１μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导增高的ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达和明显抑制ＳＭＣ增殖，在基础状态和ＡｎｇⅡ刺激条件下，［３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入分别被抑制２６５％（Ｐ＜００１）和４２０％（Ｐ＜００１），细胞数分别被抑制１７３％（Ｐ＜００１）和２２２％（Ｐ＜００１）．结论：反义ｂＦＧＦＯＤＮ能有效抑制ＡｎｇⅡ诱导的ｂＦＧＦ基因表达和ＳＭＣ增殖．     

海洋硫酸多糖DPS对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

本文采用碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和白介素－１（ＩＬ－１）氘诱导的大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖模型,以ＭＴＴ法观察了海洋硫酸多糖ＤＰＳ对ＶＳＭＣ增殖的影响。大鼠血管平滑肌细胞在ＤＰＳ浓度为０．００１μｇ／ｍｌ～１００μｇ／ｍｌ的２液中孵育２４ｈ后,分别加入ｂＦＧＦ（５０ｍｇ／ｍｌ）或ＩＬ－１（５０Ｕ／ＭＬ）再孵育２４ｈ,用ＭＴＴ法测定海洋硫酸多糖ＤＰＳ对ＶＳＭＣ增殖的影响。结果表明,     

HPLC测定8－CL－CAMP血药浓度的方法研究

本文介绍用反相ＨＰＬＣ法测定兔血清及人血清中８－ＣＬ－ＣＡＭＰ的浓度。以化合物ＣＡＭＰ［Ⅱ］为内标，血样用甲醇作蛋白沉淀剂，使用ＫｅｓｈｅｎｇＯＤＳＣ_（１８）（４．６ｍｍ＝×２５０ｍｍ，１０μｍ）色谱柱，流动相为０．０２ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾－甲醇（９２∶８），检测波长为２５９ｎｍ，药［Ⅰ］和内标［Ⅱ］峰的分离度好。保留时间分别为３６ｍｉｎ和２２ｍｉｎ，血药浓度的线性范围在１００～１０００ｎｇ／ｍｌ，最小检测浓度为５０ｎｇ／ｍｌ。此方法简便、灵敏度高。     

紧移植患者血浆可溶性白介素—2受体水平的监测及临床意义

以荧光偏振免疫法和ＥＬＩＳＡ分别测定肾移植患者全血环孢素（ＣｓＡ）浓度和血浆可溶性白介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平。稳定移植组、排斥反应组和ＣｓＡ毒性组的ＳＩＬ－２Ｒ均与正常对照组者有明显差异（Ｐ＜０．０１）；稳定移植组与排斥反应相差异显著（Ｐ＜０．０１），而与ＣｓＡ毒性组无明显差异（Ｐ＞０．０５）。全血ＣｓＡ浓度与ｓＩＬ－２Ｒ，水平无明显相关关系。提示ＳＩＬ－２Ｒ是鉴别肾移植患者排斥反应或Ｃｓ     

高效液相色谱法测定生物样品中两性霉素B

两性霉素Ｂ（ＡＭＢ）常用于内脏或全身真菌感染的治疗。由于ＡＭＢ对肝、肾等有较大毒性，应监测血浆中ＡＭＢ的浓度，以便调整其用量。我们采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ），在μ－ＢｏｎｄａｐａｋＣ１８柱（３．９ｍｍ×３００ｍｍ，１０μｍ）上，以０．０５ｍｏｌ／ＬＥＤＴＡ－２Ｎａ溶液－乙腈（１∶１）为流动相；流速为１．４ｍｌ／ｍｉｎ；检测波长为４０５ｎｍ，测定了血浆、脑脊液中ＡＭＢ浓度。ＡＭＢ血浆中最小检出量为０．０２μｇ／ｍｌ。血浆中ＡＭＢ提取率＞８７％。日内精密度在５．０１％～６．２８％之间，日间精密度血样＜７．８６％，ＣＳＦ＜５．９８％。血浆中ＡＭＢ浓度在０．０５～２．０μｇ／ｍｌ范围内有良好线性关系。方法回收率为９９．０４％±３．９０％。该法用于１例曲霉菌全身感染者ＡＭＢ血药浓度测定，为制定给药方案提供了依据。