骨折愈合过程中低氧诱导因子-1α的表达及其调节作用

能和刺激血管新生而参与调节骨折的愈合.     

急性白血病骨髓组织中低氧诱导因子-1α表达与血管生成关系的研究

目的:了解低氧诱导因子(H IF)-1α在急性白血病骨髓组织中的表达水平,探讨其与骨髓内血管生成的关系。方法:应用改良的乙二醇甲基丙烯酸酯(GMA)塑料包埋法进行骨髓活检组织制片,采用EnV ison免疫组化二步法检测对照10例和20例初诊急性白血病骨髓组织中H IF-1α表达水平及微血管密度(MVD)。结果:20例急性白血病骨髓组织中H IF-1α蛋白低、中等、较高和高水平表达分别为1、5、6和8例;对照组10例中等、较高水平表达分别为7和3例,两组差异显著(P<0.05)。初诊急性白血病骨髓内MVD在40倍镜下为8.50±3.92,较对照组(4.71±1.53)明显增高(P<0.05)。急性白血病骨髓组织中H IF-1α蛋白表达水平与MVD具有相关性(r=0.578,P<0.05)。结论:H IF-1α在急性白血病骨髓组织中表达水平明显升高,可能对骨髓内异常新生血管生成起一定的调节作用。     

妊娠高血压综合征胎盘滋养细胞中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达

目的探讨HIF-1α在妊娠高血压综合征及正常妊娠胎盘滋养细胞中的表达异同,及其与硫酸镁治疗及妊高征分组的关系.方法分别取妊高征胎盘及正常妊娠胎盘各20例,免疫组化SABC法检测各组中HIF-1α的表达.计算机辅助图像分析,t检验对比结果.结果 20例妊高征胎盘中HIF-1α的分析值为5.719±0.591,而20例正常妊娠胎盘中HIF-1α的值为3.102±0.581,两组间有显著差异(P<0.001),HIF-1α在妊高征轻、中、重组间无显著差异(P>0.05),在硫酸镁治疗前后无显著差异(P>0.05).结论妊高征胎盘滋养细胞中HIF-1α表达明显增高,提示其可能参与了妊高征滋养细胞浅着床的过程.     

肺癌组织中MTA1,HDAC1,HIF-1α蛋白表达的相关性研究

目的：探讨肺癌组织中转移相关蛋白1（MTA1）,组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）,低氧诱导因子（HIF-1α）蛋白表达三者之间的相互关系.方法：采用免疫组织化学染色方法检测59例肺癌组织中MTA1,HDAC1及HIF-1α的表达情况,并分析三者之间的相关性.结果：MTA1蛋白的表达与HIF-1α的表达呈显著正相关（r=0.418,P〈0.05）,且HIF-1α表达与MTA1/HDAC1染色水平明显相关.结论：HIF-1α,MTA1/HDAC1复合物在人类肺癌的发展中有重要意义.HIF-1α和HDAC1/MTA1可能是针对这种致死性疾病而发展的新治疗方式的一个有前途的靶点.     

骨折愈合过程中低氧诱导因子-1α的表达及其调节作用

目的 探讨骨折愈合过程中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其调节作用.方法 建立小鼠胫骨骨折模型,骨折后1、3、7、14、21、28 d取材,应用X线摄片、Micro-CT和四环素荧光双标记技术,观测骨痂组织的演变和新骨形成状况;采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学方法 ,检测骨痂组织细胞HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和成骨性标志物(Runx2和ALP)的表达状况,分析HIF-1α与骨折愈合进程的关系.结果 在早期骨痂组织中,募集于骨折处的细胞以及由此演化的成骨细胞、软骨细胞及骨细胞在低氧环境中均表达HIF-1α.骨折后第7天,HIF-1α阳性细胞百分率达到峰值,持续高表达7 d后逐渐下降,骨折后第28天基本恢复至骨折前水平;细胞VEGF表达特征的变化与HIF-1α的表现相似;早期骨痂细胞的骨形成功能活跃,骨痂体积较大,至骨折后14 d达到峰值后随骨改建的发生而逐步减小,骨痂矿化沉积主要发生于骨折愈合的中晚期(14～28 d).结论 骨折愈合过程中,参与骨折愈合的细胞属低氧感应细胞并表达HIF-1α;HIF-1α可调节细胞自身的状态,通过调控早期骨痂细胞的功能和刺激血管新生而参与调节骨折的愈合.     

三七总皂甙对实验性骨折愈合过程中低氧诱导因子-1αmRNA表达的影响

目的:探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在骨折愈合过程中的表达及三七总皂甙(total saponins of panax notoginseng,PNS)的干预作用。方法:在36只雄性SD大鼠左桡骨形成骨折模型,后随机分成对照组和PNS组,予以PNS100mg/kg/d腹腔内注射,对照组予以等量盐水。在骨折后7,14,21天X线观察骨折愈合及骨痂形成情况;HE染色了解骨痂形成情况;RT-PCR方法检测骨痂组织HIF-1αmRNA的表达。结果:X线显示PNS组骨痂形成明显加快,HE染色显示骨折断端成骨细胞数目及骨痂增多;对照组HIF-1αmRNA7天表达较低、14天达峰值、21天下降;PNS组7天、14天时点表达高于对照组(P0.05),21天低于对照组P0.05)。结论:PNS可上调骨折愈合过程中骨痂组织HIF-1α的表达,改善骨折部位的血供,促进骨折愈合。     

肿瘤组织内活性氧与乏氧诱导因子-1α的研究进展

氧是需氧生物必不可少的基本物质,需氧细胞在物质能量过程中,如果氧未被完全还原成水,可产生氧自由基,这些氧自由基可转变成一些非自由基氧活性物质,由于功能上的相似性,这些物质被统称为活性氧（reactive oxygen species, ROS）,ROS对细胞功能如生长、转化、凋亡、癌变和衰老发挥重要的作用。     

低氧诱导因子1α在膀胱移行细胞癌中表达及其临床意义

目的观察低氧诱导因子1α(HIF1α)在膀胱移行细胞癌中的表达及其与膀胱癌分级、复发的关系。方法采用免疫组织化学染色CD34观察肿瘤组织中微血管密度(MVD)以及血管内皮生长因子(VEGF)、HIF1α的表达情况。结果G1级、G2级、G3级膀胱癌中HIF1α阳性率分别为27.8%、40%、63.2%,G1级与G3级膀胱癌间差异有统计学意义(P<0.05);膀胱癌复发组及未复发组HIF1α阳性率分别为61.5%、30.6%(P<0.05);G1级、G2级、G3级膀胱癌中VEGF阳性率分别为50%、48%、68.4%,差异无统计学意义(P>0.05);膀胱癌复发组及未复发组VEGF阳性率分别为76.9%、38.9%(P<0.05)。G1级、G2级、G3级膀胱癌MDV分别为44.3±11.6、53.5±10.6、71.9±15.3,G1级与G3级膀胱癌间差异有统计学意义(P<0.05);膀胱癌复发组及未复发组MDV分别为41.7±10.9、77.2±15.3(P<0.05)。结论膀胱癌HIF1α表达与肿瘤分级复发相关,对膀胱癌复发有预测价值。     

谷胱甘肽及其相关酶系统与肿瘤多药耐药的关系

谷胱甘肽 ( GSH)及其相关酶是人体重要的解毒酶。本世纪五十年代发现细胞内 GSH含量的减低能够增加癌症病人对电离辐射的敏感性 ,在七十年代末观察到 GSH含量的增加与对 DNA损伤性药物的耐药关系 ,后来许多体内外实验研究表明 GSH及其相关酶与烷化剂耐药有关。谷胱甘肽硫转移酶( GSTs)是由五类基因编码的超基因家族 ,包括四类胞液同功酶π、μ、θ、α和一类膜结合微粒体 ,不同胞液同功酶之间有 40 %的同源性[1] 。膜结合微粒体主要存在于肝内质网 ,与胞液同功酶没有明显的同源性 [2 ] 。 GSTs能够催化还原型 GSH分子中的巯基攻击…     

低氧诱导因子-1α和表皮生长因子受体在肺癌中表达的相关性研究

目的:研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和表皮生长因子受体(EGFR)在肺癌中表达的相关性及其与临床、病理和预后之间的关系,指导肺癌的靶向治疗.方法:用免疫组化方法检测88例肺癌手术标本中的HIF-1α和EGFR表达,分析HIF-1α和EGFR在肺癌组织中表达的相关性及其与临床、病理及生存期之间的关系.结果:HIF-1α和EGFR在女性肺癌中的表达均高于男性(P<0.05),HIF-1α和EGFR在不吸烟和吸烟小于400年支组中的表达均高于吸烟大于400年支组(P<0.05);HIF-1α和EGFR在肺癌中的表达与患者临床、病理和生存期及淋巴结转移均无关(P>0.05);HIF-1α和EGFR在肺癌组织中的表达具有正相关(P<0.05),HIF-1α联合表达阳性组的生存期低于HIF-1α(+)/EGFR(-)、HIF-1α(-)/EGFR(+)和HIF-1α(-)/EGFR(-)组.结论:HIF-1α和EGFR在肺癌组织中的表达具有正相关,HIF-1α,EGFR的联合阳性表达与肺癌的预后相关.     

低氧对人肺腺癌细胞SPCA-1低氧诱导因子-1α和低氧诱导因子-2α的差异性调控作用

目的探讨低氧对肺腺癌细胞SPCA-1低氧诱导因子-lα(HIF-lα)和低氧诱导因子-2α(HIF-2α)的差异性调控作用及其原因。方法体外培养肺腺癌细胞系SPCA-1细胞在常氧、低氧条件下培养不同时间,采用RT-PCR和Western blot检测低氧对HIF-2α和HIF-lα基因的激活作用。通过加入线粒体活性氧族阻断剂观察低氧对HIF-2α和HIF-lα蛋白表达的影响,探讨其表达调控的机制。结果正常氧条件下,SPCA-1整细胞提取物和细胞核提取物中,HIF-1α几乎不表达,HIF-2α在整细胞提取物中有少量表达,但在细胞核提取物中无明显表达。经低氧(0.5%O2)处理4 h后,HIF-2α和HIF-1α蛋白均明显增多;HIF-2α和HIF-1α蛋白与细胞浓度、氧浓度有关;HIF-1α蛋白在低氧4 h后增加,6 h后显著降低,而HIF-2α蛋白低氧4 h增加后并保持于此水平。HIF-1αmRNA水平在低氧6～12 h时降低,而HIF-2αmRNA表达持续升高;经线粒体活性氧族阻断剂鱼藤酮、二亚苯基碘鎓和粘噻唑菌醇处理4 h后,HIF-2α和HIF-lα蛋白水平明显降低。结论低氧可在肺腺癌细胞诱导HIF-1...     

缺氧诱导因子-1α在肿瘤中的表达研究进展

<正>国际肿瘤研究机构编制的《全球肿瘤发病率和死亡率估计》中报道,2018年全球有1 810万新发癌症病例和960万癌症死亡病例,其中肺癌是最常见的诊断癌症(占总病例的11.6%),是癌症死亡的主要原因(占总癌症死亡的18.4%).在男性中发病率和死亡率排在首位的肿瘤是肺癌,其次是前列腺癌、结直肠癌、肝癌、胃癌;在女性中乳腺癌是最常见的肿瘤,其次是结直肠癌、肺癌、宫颈癌[1].肿瘤的治疗方法主要有手术治疗、放疗、化疗、分子靶向药物治疗和免疫治     

低氧诱导因子1α在骨肉瘤中的表达及其与血管生成的相关性

目的:探讨低氧诱导因子1α(HIF-1α)在骨肉瘤中的表达及其与肿瘤血管生成的关系.方法:低氧及模拟低氧条件下体外培养MG-63骨肉瘤细胞,另外收集30例骨肉瘤组织石蜡标本及20例新鲜冷冻骨肉瘤组织标本,采用RT-PCR、Western印迹、ELISA及免疫组织化学等方法,分别检测骨肉瘤细胞及组织中HIF-1α及其靶基因血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA及蛋白表达,并计算微血管密度(MVD).结果:在低氧及模拟低氧条件下,MG-63骨肉瘤细胞HIF-1α的mRNA表达无明显变化,但蛋白表达明显增加,而VEGF的mRNA、蛋白表达都增加(P＜0.05).20例新鲜骨肉瘤组织中HIF-1α mRNA总表达率为90%,VEGF mRNA总表达率为100%,均明显高于瘤旁组织(P＜0.05).HIF-1α、VEGF蛋白在骨肉瘤石蜡组织中阳性表达率分别为86.7%、93.3%,明显高于瘤旁组织的6.7%、26.7%(P＜0.05).Spearman等级相关分析HIF-1α蛋白表达与MVD明显相关(P=0.005,r=0.767),VEGF蛋白表达与MVD正相关(P＜0.002,r=0.701).结论:骨肉瘤中存在HIF-1α的高表达,可能与肿瘤血管生成相关;HIF-1α高表达可能提示骨肉瘤患者预后不良.     

低氧诱导因子-1α的基因克隆

目的克隆低氧诱导因子-lα(HIF-1α)cDNA,为进一步研究HIF-1α基因在肿瘤基因治疗中的作用提供依据。方法从健康成人外周血液中提取总的RNA,利用特异性引物,用两步法进行RT-PCR扩增出约2500 bp的HIF-1αcDNA,与T载体连接后转化感受态细胞DH5α,建立HIF-1α的cDNA克隆。结果RT-PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,可见一条清晰特异扩增带,长2500 bp;cDNA经酶切鉴定证实为人低氧诱导因子1α基因。结论成功克隆HIF-lαcDNA,为进一步研究HIF-1α奠定了基础。     

宫颈癌乏氧诱导因子-1α和谷胱甘肽-S-转酶-π的表达及与化疗药物耐药性关系的研究

目的 观察乏氧诱导因子-1 α(HIF-1 α)和谷胱甘肽-S-转酶-π(GST-π)在宫颈癌中的表达,探讨其与化疗药物敏感性的关系.方法 应用MTT法对71例未经化疗的宫颈癌患者行体外化疗药物阿霉素、卡铂、紫杉醇5-氟尿嘧啶和顺铂的敏感性检测,并用免疫组织化学方法对HIF-1 α和GST-π在宫颈癌中的表达进行检测,将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析.结果 71例宫颈癌患者对紫杉醇(TAXOL)、顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)和卡铂(CBP)的耐药率分别为38.03％(27例)、53.50％(38例)、54.93％(39例)、26.80％(19例)和47.90％(34例).腺癌耐药例数多于鳞癌,但两者差异无统计学意义(P＞0.05).HIF-1 α和GST-π在71例宫颈癌患者中阳性率分别为56.34％(40/71)和57.75％ (41/71),HIF-1 α和GST-π在腺癌中的阳性率高于鳞癌,但两者差异无统计学意义(P＞0.05).HIF-1α和GST-π在宫颈癌中的表达呈明显相关,P ＜0.05.HIF-1α和GST-π的表达与化疗药物敏感性之间均存在明显相关(P＜0.05).结论 HIF-1 α和GST-π可能共同参与介导宫颈癌的多药耐药,两者在宫颈癌中的阳性表达及共表达可作为预测宫颈癌患者多药耐药的指标之一.     

低氧诱导因子-1α在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的 研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α).在不同病理级别人脑胶质瘤中的表达情况,探讨其与病理级别问的关系.方法 收集67例人脑胶质瘤标本以及10例行内减压术切除的正常脑组织标本,采用免疫组织化学方法研究HIF-1α在不同病理级别胶质瘤及正常脑组织中的表达情况.结果 HIF-1α阳性表达率在Ⅲ、Ⅳ胶质瘤中显著高于Ⅱ级胶质瘤,分别为72.7%、80.0%、36.0%,在正常脑组织中未见阳性表达,随着病理级别的增高,HIF-1α的表达阳性强度也相应增加(r=0.518).结论 HIF-1α在人脑胶质瘤中存在高度表达,其阳性表达率及表达阳性强度随着病理级别增加而上升.     

小鼠椎体发育中低氧诱导因子-1α的表达

目的探讨低氧诱导因子-1α(H IF-1α)在小鼠椎体发育过程中的表达。方法动态观察小鼠椎体发育的演变过程;应用逆转录-聚合酶链反应检测H IF-1α在各发育时段的表达。结果胚胎第13.5天(E13.5)时,软骨性脊柱形成,可检测到H IF-1α的mRNA表达;E14.5时,H IF-1α的表达水平达高峰(P<0.05);E15.5时,椎体内形成小的骨化核,之后逐渐增大形成初级骨化中心,并向头尾两端延伸,H IF-1α仍高表达,其后快速降至低水平。结论椎体发育表现为软骨内成骨过程,存在低氧环境,伴随H IF-1αmRNA的规律性表达,这可能与椎体软骨内骨化过程启动有关。     

小鼠椎体发育中低氧诱导因子-1α的表达

目的探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在小鼠椎体发育过程中的表达.方法动态观察小鼠椎体发育的演变过程;应用逆转录-聚合酶链反应检测HIF-1α在各发育时段的表达.结果胚胎第13.5天(E13.5)时,软骨性脊柱形成,可检测到HIF-1α的mRNA表达;E14.5时,HIF-1α的表达水平达高峰(P＜0.05);E15.5时,椎体内形成小的骨化核,之后逐渐增大形成初级骨化中心,并向头尾两端延伸,HIF-1α仍高表达,其后快速降至低水平.结论椎体发育表现为软骨内成骨过程,存在低氧环境,伴随HIF-1αmRNA的规律性表达,这可能与椎体软骨内骨化过程启动有关.     

多药耐药相关蛋白基因在非小细胞肺癌中的表达

探讨多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因表达与非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）多药耐药（ＭＤＲ）发生的关系。采用半定量逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和免疫组织化学染色方法，结合体外化疗药敏实验，检测３２例ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰ基因表达水平和对９种化疗药物敏感性。结果：ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰｍＲＮＡ表达阳性率为７１．９％，癌旁肺组织中为１０％；ＭＲＰ蛋白表达阳性率为６５．６％，在肿瘤细胞胞膜和胞浆内均有表达，癌旁肺组织中未见表达；中～高分化癌中ＭＲＰｍＲＮＡ和蛋白表达明显高于低分化癌（Ｐ＜０．０５）；ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰｍＲＮＡ表达和ＭＲＰ蛋白表达呈正相关（ｒ＝０．９７，Ｐ＝０．０００１）。ＮＳＣＬＣ中对长春新碱、足叶乙甙和阿霉素耐药组，其ＭＲＰ蛋白表达率明显高于敏感组（Ｐ＜０．０５）。表明ＭＲＰ基因表达是非小细胞肺癌原发性多药耐药的重要参与因素，它的过度表达通过转录水平和翻译水平调节实现，ＮＳＣＬＣ对长春新碱、足叶乙甙和阿霉素耐药的重要原因是ＭＲＰ蛋白表达，ＭＲＰ基因检测和体外化疗药敏实验对进一步阐明肺癌耐药机理有重要意义     

腺苷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中低氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察腺苷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨腺苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 Sprague-Dawley大鼠72只随机分为假手术组(F组)、腺苷预处理假手术组(AF组)、缺血再灌注组(IR组)、腺苷预处理缺血再灌注组(AR组),每组18例。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。IR组和AR组大鼠于手术前3 d每日腹腔注射1.5 mg·kg-1腺苷(溶于2 mL生理盐水中),F组和AF组大鼠于手术前3 d每日腹腔注射2 mL生理盐水,连续3 d。各组大鼠进行神经功能缺损评分,免疫组织化学方法观察大鼠脑组织中HIF-1α的表达。结果 F组和AF组大鼠术后无神经功能缺损体征,IR组和AR组大鼠再灌注6、12、24 h后均出现明显神经功能缺损体征。IR组和AR组大鼠神经功能缺损评分显著高于F组和AF组,AR组大鼠神经功能缺损评分显著低于IR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AF组大鼠脑组织中HIF-1α的表达与F组比较差异无统计学意义(P>0.05);缺血再灌注后6、12、24 h,IR组大鼠脑组织中HIF-1α的表达显著高于F组和AF组(P<0.01);AR组大鼠脑组织中HIF-1α的表达显著高于IR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论腺苷预处理可增加局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中HIF-1α的表达,从而发挥保护作用。