CCK-8调节LPS诱导大鼠血管平滑肌细胞iNOS表达的分子机制

目的观察硫酸化八肽胆囊收缩素(CCK-8)对体外脂多糖(LPS)诱导大鼠胸主动脉平滑肌细胞(TASMCs) iNOS表达的影响,探讨CCK的受体介导效应,以揭示CCK-8抗休克作用的分子机制。方法采用贴块法培养大鼠TASMCs,经LPs、CCK-8、CR-1409、CR-2945、CCK LPS、CCK LPs CR-1409、CCK LPS CR-2945及溶剂孵育细胞16 h,RT-PCR技术检测细胞浆iNOs mRNA的表达；Western blot技术检测胞浆iNOS蛋白表达,以光密度值表示其相对含量。结果LPS(0．1mg/L)可诱导TASMCs iNOS mRNA及蛋白的表达上调(P＜0．01)；而CCK-8(10~(-8)mol/L)可抑制LPS的诱导作用(P＜0．01)；预先给子CCK-AR特异性拮抗药CR-1409(10~(-5)mol/L)、CCK-BR特异性拮抗药CR-2945(10~(-5) mol/L),均可部分拮抗CCK-8的这种抑制作用,其中CR-1409的拮抗作用略高于CR-2945：CCK-8、CR-1409、CR- 2945单独作用与对照组相比差异无统计学意义(P＞0．05)。结论CCK-8受体介导了其对LPS诱导的胸主动脉平滑肌细胞iNOs的表达的抑制,且CCK-AR的作用略高于CCK-BR,此为CCK-8抗内毒素休克作用的受体机制。     

核因子—κB及Toll样受体4介导脂多糖诱导内皮细胞单层通透性增高

目的：探讨核因子—κB(nuclear factor-kappa B，NF—κB)及Toll样受体4(Toll—like receptor 4，TLR4)在脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)诱导的内皮细胞单层通透性增高中的作用。方法：采用免疫荧光法及改良Boydon小室测定LPS对人脐静脉内皮细胞株ECV-304的单层细胞通透性及其F—肌动蛋白分布的影响；以免疫组织化学染色及RT—PCR法检测LPS刺激细胞NF—κB活化后的核转位及TLR4 mRNA的表达。结果：LPS作用ECV—304 1h后，免疫组织化学染色证实NF—κB活化后发生核转位；LPS以一定的剂量—时间依赖方式上调TLR4 mRNA的表达，ECV—304单层通透性也随之增加。结论：NF—κB及TLR4可能在LPS诱导内皮细胞单层损伤导致通透性增高过程中发挥重要作用。     

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导肺动脉内皮细胞凋亡的抑制作用

目的：探讨八肽胆囊收缩素（CCK－8）对脂多糖（LPS）诱导培养的肺动脉内皮细胞（BPAEC）凋亡的影响。方法：培养的BPAEC用LPS、CCK－8、CCK－8非特异性受体阻断剂丙谷胺分别或共同处理后,继续培养24小时。用流式细胞术和核荧光染色方法检测细胞凋亡,用生物化学方法检测培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）活性和丙二醛（MDA）含量,用流式细胞术定量检测过氧亚硝基阴离子（ONOO^-)含量。结果：LPS可诱导BPAEC凋亡和坏死明显增多,培养上清中MDA含量增高;CCK－8抑制BPAEC凋亡和MDA含量的增高,此作用为CCK－8受体非特异性阻断剂丙谷胺翻转;CCK－8可抑制LPS诱导BPAEC生成ONOO^-增多;CCK－8和丙谷胺对LPS诱导的BPAEC坏死无明显影响。结论：CCK－8可抑制LPS诱导的BPAEC凋亡,此作用由其受体介导,并与CCK－8的抗氧化功能有关。     

八肽缩胆囊素对脂多糖诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氮合酶表达变化的抑制作用

目的探讨八肽缩胆囊素（CCK-8）对脂多糖（LPS）诱导血管内皮细胞诱生型一氧化氯合酶（iNOS）表达变化的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304细胞。用0．01、0．1和1mg／L LPS处理2～24h，用生理盐水、10mol／LCCK-8和0．1mg／L LPS＋10^-8、10^-7、10^-8mol／L CCK-8处理16h；用比色法检测培养液中一氧化氮（NO）含量、细胞NOS活性，免疫细胞化学及蛋白质免疫印迹法检测iNOS蛋白表达。结果与生理盐水处理的对照组比较，LPS诱导培养液NO含量增多、细胞NOS活性增高、iNOS蛋白表达上调；CCK-8剂量依赣性抑制LPS的上述效应。而单独作用对iNOS蛋白表达、NOS活性和NO含量均无明显影响。结论CCK-8可以明显抑制LPS引起ECV-304细胞iNOS蛋白表达上调。减少NO生成。     

MODS大鼠外周血单个核细胞内核因子-κB和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ的表达

目的探讨多器官功能障碍综合征（MODS）大鼠外周血单个核细胞（PBMC）内核因子-κB（NF—κB）和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ（PPARγ）的表达及相互关系。方法健康雄性SD大鼠40只，随机分为四组（每组10只），正常对照组，脂多糖（LPS）刺激组，罗格列酮（ROSI）预处理组，选择性拮抗剂2-氯-5-硝基苯胺（GW9662）预处理组。免疫细胞化学法检测PBMC内PPARγ、NF—κB p65的表达活性，并进行图像分析。结果（1）在正常组大鼠PBMC内NF-κB p65、PPARγ表达均较少。LPS刺激组NF—κB p65表达与正常组比较显著增加（P〈0．01）；PPARγ表达稍有增高，与正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。ROSI组NF-κB p65表达与LPS刺激组比较显著降低（P〈0．01）；PPARγ表达与LPS刺激组比较显著增加（P〈0．01）。GW9662组NF—κB p65表达与LPS刺激组比较差异无统计学意义（P〉0．05）；PPARγ表达显著降低，与正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）相关分析结果表明，PBMC内NF-κB和PPARγ活性变化在LPS刺激组、ROSI组、GW9662组呈显著负相关（LPS刺激组：r=-0．916，P〈0．01；ROSI组：r=-0．605，P〈0．05；GW9662组：r=-0．961，P〈0．01）。在正常对照组无明显相关性（r=0．185，P〉0．05）。结论PPA脚可能是通过抑制NF—κB的活性而对MODS大鼠起保护作用。     

核因子-κB及Toll样受体4介导脂多糖诱导内皮细胞单层通透性增高

目的:探讨核因子-κB(nuclearfactor-kappaB,NF-κB)及Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的内皮细胞单层通透性增高中的作用。方法:采用免疫荧光法及改良Boydon小室测定LPS对人脐静脉内皮细胞株ECV-304的单层细胞通透性及其F-肌动蛋白分布的影响;以免疫组织化学染色及RT-PCR法检测LPS刺激细胞NF-κB活化后的核转位及TLR4mRNA的表达。结果:LPS作用ECV-3041h后,免疫组织化学染色证实NF-κB活化后发生核转位;LPS以一定的剂量-时间依赖方式上调TLR4mRNA的表达,ECV-304单层通透性也随之增加。结论:NF-κB及TLR4可能在LPS诱导内皮细胞单层损伤导致通透性增高过程中发挥重要作用。     

八肽缩胆囊素受体在血管内皮细胞中的表达及脂多糖的影响

目的 观察八肽缩胆囊素受体(CCK-R)mRNA在人脐静脉内皮细胞株ECV-304中的表达,并探讨内毒素脂多糖(LPS)对CCK-AR、CCK-BR mRNA表达的影响.方法 培养人脐静脉内皮细胞株ECV-304,以LPS 0.01、0.1、1、10 mg/L孵育ECV-304 2 h或用1 mg/L LPS孵育ECV-304 0.5、2、6、12 h,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CCK-AR、CCK-BR的mRNA表达,并对扩增产物的特异性进行测序分析.结果 与空白对照组比较,0.01、0.1及1 mg/L LPS孵育细胞2 h可剂量依赖性引起CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达明显升高(P均<0.05),其中0.01 mg/L LPS诱导CCK-AR mRNA效应不明显,但可明显诱导CCK-BR mRNA表达;与1 mg/L LPS组比较,10 mg/L LPS孵育细胞2 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达未继续出现明显升高(P均>0.05).与空白对照组比较,1 mg/L LPS孵育细胞0.5～2 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达呈时间依赖性升高(P均<0.05);与LPS孵育2 h比较,1 mg/L LPS孵育细胞6 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达明显下降,但仍高于空白对照组(P均<0.05);与LPS孵育6 h比较,1 mg/L LPS孵育细胞12 h CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达进一步降低(P均<0.05),且与空白对照组比较已无显著差异(P均>0.05).结论 CCK-AR与CCK-BR的mRNA在ECV-304中均有表达;LPS可诱导CCK-AR及CCK-BR的mRNA表达上调.     

八肽胆囊收缩素对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κB活性变化的影响及其受体机制

目的:观察硫酸化八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)对肿瘤坏死因子α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κB的影响,以及CCK-A/B受体是否参与这一过程。方法:实验于2003-02/2004-02在河北医科大学法医学教研室分子生物学实验室完成。取大鼠滑膜细胞株RSC-364经肿瘤坏死因子α(10 μg/L)、sCCK-8(10-8,10-7,10-6 mol/L)、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或联合应用孵育:①孵育3h,用反转录-聚合酶链反应技术检测细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达。②孵育1h,用电泳迁移率检测核因子κB相对活性。③孵育30 min,用Western blot检测胞浆IκB蛋白表达的相对水平。结果:①细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达:RSC-364细胞固有表达CCK-A/B受体,肿瘤坏死因子α(10 μg/L)可使CCK-A受体和CCK-B受体mRNA的表达分别上调148%和173%(P<0.01)。肿瘤坏死因子α和CCK-8(10-8～10-6 mol/L)联合孵育细胞,CCK-A受体和CCK-B受体mRNA表达与肿瘤坏死因子α组相比分别增高47%,56%,30%和57%,13%,24%(P<0.05,0.01)。②核因子κB相对活性:肿瘤坏死因子α组明显高于对照组(294.45±36.48,0,P<0.01);肿瘤坏死因子α CCK-810-8,10-7,10-6 mol/L组高于肿瘤坏死因子α组(470.69±56.76,489.37±64.95,558.90±74.15,P<0.05,0.01);CCK-8的作用可被丙谷胺减弱(400.79±39.06)。③IκB蛋白表达的相对水平:肿瘤坏死因子α组明显低于对照组(139.43±30.76,220.79±34.58,P<0.01),肿瘤坏死因子α CCK-810-8,10-7,10-6 mol/L组低于肿瘤坏死因子α组(95.26±8.54,84.15±8.77,63.28±16.13,P<0.05),并可被丙谷胺所抑制(137.22±20.33,P<0.01)。结论:CCK-8对肿瘤坏死因子α诱导的RSC-364核因子κB活性具有正向调节作用,并能降低IκBα蛋白水平,提示CCK-8在类风湿性关节炎发病过程中可能具有调控作用,此作用可能通过滑膜细胞上的CCK受体实现。     

八肽胆囊收缩素对肿瘤坏死因子α诱导的大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κΒ活性变化的影响及其受体机制

目的观察硫酸化八肽胆囊收缩素(cholecystokinin octapeptide,CCK-8)对肿瘤坏死因子α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364核因子κB的影响,以及CCK-A/B受体是否参与这一过程.方法实验于2003-02/2004-02在河北医科大学法医学教研室分子生物学实验室完成.取大鼠滑膜细胞株RSC-364经肿瘤坏死因子α(10μg/L)、sCCK-8(10-8,10-7,10-6mol/L)、CCK受体拮抗剂丙谷胺及溶剂单独或联合应用孵育①孵育3 h,用反转录-聚合酶链反应技术检测细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达.②孵育1 h,用电泳迁移率检测核因子κB相对活性.③孵育30 min,用Western blot检测胞浆IκB蛋白表达的相对水平.结果①细胞CCK-A受体及CCK-B受体mRNA的表达RSC-364细胞固有表达CCK-A/B受体,肿瘤坏死因子α(10 μg/L)可使CCK-A受体和CCK-B受体mRNA的表达分别上调148%和173%(P＜0.01).肿瘤坏死因子α和CCK-8(10-810-6 mol/L)联合孵育细胞,CCK-A受体和CCK-B受体mRNA表达与肿瘤坏死因子α组相比分别增高47%,56%,30%和57%,13%,24%(P＜0.05,0.01).②核因子κB相对活性肿瘤坏死因子α组明显高于对照组(294.45±36.48,0,P＜0.01);肿瘤坏死因子α+CCK-8 10-8,10-7,10-6 mol/L组高于肿瘤坏死因子α组(470.69±56.76,489.37±64.95,558.90±74.15,P＜0.05,0.01);CCK-8的作用可被丙谷胺减弱(400.79±39.06).③IκB蛋白表达的相对水平肿瘤坏死因子α组明显低于对照组(139.43±30.76,220.79±34.58,P＜0.01),肿瘤坏死因子α+CCK-8 10-8,10-7,10-6 mol/L组低于肿瘤坏死因子α组(95.26±8.54,84.15±8.77,63.28±16 13,P＜0.05),并可被丙谷胺所抑制(137.22±20.33,P＜0.01).结论CCK-8对肿瘤坏死因子α诱导的RSC-364核因子κB活性具有正向调节作用,并能降低IκBα蛋白水平,提示CCK-8在类风湿性关节炎发病过程中可能具有调控作用,此作用可能通过滑膜细胞上的CCK受体实现.     

基于TLR4-NF-κB信号通路的槐果碱改善人支气管上皮细胞炎症和黏液高分泌的机制

目的 基于TLR4-NF-κB信号通路探讨槐果碱（SC）体外抗炎作用及其抗哮喘的潜在效应机制。方法 采用脂多糖（LPS）刺激人支气管上皮细胞NCI-H292诱导体外炎症模型，给予不同浓度SC进行治疗。采用MTT法筛选LPS和SC对NCI-H292细胞的安全浓度；设Control组、LPS组（10μg/mL LPS）、SC组（10μg/mL LPS+不同浓度SC）,ELISA法检测细胞中黏蛋白5AC(MUC5AC)的表达和上清液中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)的分泌情况；RT-PCR法检测细胞中MUC5AC、IL-6、IL-8、髓样分化因子（MyD88）和核因子-κB(NF-κB p65)mRNA的表达；Western blot方法检测细胞中Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)、磷酸化p38(p-p38)和磷酸化p65(p-p65)以及细胞核内NF-κB p65的蛋白表达。结果 MTT结果显示，LPS和SC分别在0～10μg/mL、0～40μg/mL浓度范围内对细胞活力无影响；ELISA结果表明，与Control组相比，LPS组细...     

交感神经递质去甲肾上腺素对肝细胞内核转录因子活化的调控

目的了解交感神经递质去甲肾上腺素对肝细胞内核转录因子NFκB p50/p65及其配体IκBα的表达变化的调控。方法应用终浓度为10μmol/L的去甲肾上腺素作用于Wistar大鼠原代培养肝细胞,作用时相点为5、15、30和60 min。收集细胞提取细胞核蛋白,采用EMSA法检测NFκB p50/p65的变化。同样以Western blotting法进行IκBα含量的检测。结果由EMSA电泳图像中可见NE作用5分钟时即可见到有NFκB p50/p65明显活化,并随时间增强而活化逐渐明显。计算灰度面积值在5 min后各测得值均较对照组明显增高(P<0.01)。NE作用肝细胞5 min后,IκBα表达量明显减少,刺激30~60min时只能检测到其微量表达(P<0.01)。结论NE可导致内皮细胞NFκB p50/p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NFκB,诱导肝细胞分泌细胞因子。     

八肽胆囊收缩素对脂多糖攻击小鼠抗炎症细胞因子表达的影响

目的观察脂多糖（LPS）攻击小鼠白细胞介素-4（IL-4）、IL-10的动态变化规律，以及八肽胆囊收缩素（CCK-8）对其表达的影响。方法随机将小鼠分组，每组7只。腹腔注射LPS10mg／kg，于攻击后0、2、4、6和12h检测血清、肺组织IL-4和IL-6表达高峰的时间。对照组腹腔注射生理盐水0．2ml；LPS组腹腔注射LPS10mg／kg；LPS＋CCK-8组在注射LPS前30min腹腔注射CCK-8 60μg／kg；CCK-8组腹腔注射CCK-8 60μg／kg。用酶联免疫吸附法（ELISA）及逆转录-聚合酶链反应（PT—PCR）方法检测各组小鼠血清和肺组织中IL-4、IL-10的含量及其mRNA的表达情况。结果LPS攻击后2h血清及肺组织IL-4、IL-6均显著升高，血清IL-4、IL-6于4h和6h达高峰；肺组织IL-4、IL-6则均于6h达高峰。说明LPS攻击可使小鼠血清及肺组织中IL-4、IL-10的蛋白及mRNA表达均增加；预先注入CCK-8可使IL-4和IL-10的蛋白以及mRNA表达均进一步增加（P均〈O．01）；而单独注射CCK-8对血清、肺组织IL-4、IL-10的表达无明显影响。结论CCK-8可能通过进一步增加LPS攻击小鼠IL-4、IL-10的表达参与抗炎反应过程，从而减轻LPS引起的肺组织炎症反应。     

核因子κB的反义寡核苷酸对肿瘤坏死因子α诱导的血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的：探讨人脐静脉内皮细胞（HUVECs）ECV304细胞株中，核因子κB（NF—κB）的反义寡核苷酸（AODNs）对肿瘤坏死因子α（TNF—α）诱导血管细胞黏附分子（VCAM-1）表达的影响。方法：将培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304分为3组，其中2组用脂质体介导法转染寡核苷酸（ODNs）分别转染AODNs、正义寡核苷酸（SODNs）：另1组（阳性对照组）不转染ODNs。流式细胞仪荧光活细胞计数检测转染效率及NF-κB的表达情况，逆转录-聚合酶链反应、流式细胞仪检测及免疫组织化学染色测定AODNs对TNF—α诱导的VCAM—1表达的影响。结果：脂质体介导的转染方法能将ODNs有效地转染至HUVECs中，且AODNs可有效抑制NF-κB的复制合成。NF—κBP65的AODNs可使TNF—α刺激的人脐静脉内皮VCAM-1mRNA表达下调33．08％，蛋白质水平的表达下调48．27％，并与免疫组织化学染色显示结果一致。结论：NF—κB的AODNs可显著下调NF—κB调控的、与动脉粥样硬化相关的黏附分子表达。     

八肽胆囊收缩素对家兔内毒素休克时主动脉及肺动脉反应性改变的影响

目的 观察八肽胆囊收缩素（CCK-8）对脂多糖（LPS）引起的家兔内毒素休克（ES）时肺循环，体循环血压变化以及离体主动脉，肺动脉反应性变化的影响。方法 健康新西兰大耳白色雄性家兔，体重2.0-2.1kg，乌拉坦静脉麻醉（1g/kg bw)，随机分为5组（每组8只），生理盐水组（对照组）；LPS组；LPS8mg/kgi.v复制家兔ES模型；LPS CCK组：CCK-815μg/kgi.v.15min后注入LPS；LPS 丙谷胺（Pro)组；Pro1mg/kgi.v,15min后注入LPS；CCK组；CCK-815μg/kgi.v，利用多导生理记录仪持续监测肺动脉压（PAP）和平均动脉压（MAP）的变化；5h后放血处死，制备主动脉环（TARs)和肺动脉环（PARs)。应用血管张力测定技术，检测离体主动脉，肺动脉反应性。结果 （1）CCK-8在ES时可部分逆转MAP降低，完全翻转肺PAP增高；而Pro加剧ES的上述效应。（2）在离体实验中，LPS组的PARs对苯肾上腺素（PE）的收缩反应增强，PE（10^8-10^-5mol/L)剂量反应曲线左移；对乙酰胆碱（ACh)内皮依赖性舒张反应降低，ACh(10^-8-10^-5mol/L)剂量反应曲线右移；CCK-8逆转子LPS的上述作用，CCK-8对正常肺动脉舒缩反应无明显影响。在实验条件下，各组的TARs对PE的收缩反应无明显差异。可能与本实验整体观察时间较短有关，对ACh的舒张反应各组有所差异。结论 CCK在整体水平时ES发病时肺循环，体循环血压具有调节作用，并从离体水平揭示了CCK可通过对肺动脉，主动脉反应性改变的影响来调节ES时的肺循环，体循环血压。     

RNA干扰介导的核转录因子-κB抑制蛋白激酶α和γ基因沉默对核转录因子-κB信号通路调节作用的影响

目的 观察RNA干扰介导的核转录因子-κB抑制蛋白(IκB)激酶(IKK)α和γ基因沉默对核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的调节作用,进一步阐明其基因调控机制.方法 设计IKKα及IKKγ靶向的小分子干扰RNA(siRNA),合成互补的寡核苷酸链,转染到RAW264.7小鼠巨噬细胞.观察经脂多糖(LPS)刺激后NF-κB的活化、IKKα及IKKγ基因表达的变化、NF-κB p65及p50核移位的变化以及前体蛋白NF-κB p105的表达情况.结果 IKKα及IKKγ基因沉默后,可导致IKKα及IKKγ基因表达出现明显下调,同时NF-κB p65及p50的核移位受到抑制,胞质、胞核中NF-κB p65、p50及p105的表达显著下调,而且能抑制NF-κB p65、p50及p105蛋白的核移位.结论 IKKα及IKKγ两种蛋白激酶参与NF-κB信号通路的调节,不仅能分别在抑制蛋白的泛肽化、组蛋白磷酸化等环节发挥作用,而且还能够通过相互之间的协同作用,弥补其中某种蛋白受到过度抑制时所引起的炎症信号通路的功能障碍.     

创伤小鼠脾细胞核因子κB的表达变化

目的：探讨创伤后不同时间点脾细胞核因子kappa B(NFκB)的DNA结合蛋白和NFκB p65蛋白亚型表达的动态变化。方法：采用小鼠双后肢闭合性砸伤+骨折模型,于创伤后1、4、7日处死动物,分离、纯化脾细胞,提取脾细胞核蛋白。用电泳迁移率改变试验(EMSA）检测NFκB的DNA结合活性;用免疫蛋白印迹法（Western blot）检测NFκB p65蛋白亚型表达。结果：脾细胞NFκB的DNA结合活性在创伤后1、4、7日表达明显增高。NFκB p65蛋白亚型在创伤后1、4、7日表达明显增加。结论：创伤可明显增强脾细胞NFκB的DNA结合活性和p65蛋白亚型的表达。在创伤后淋巴细胞活化及全身炎症反应综合征(SIRS)发生、发展过程中可能起重要作用。     

醒脑静注射液对内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞核转录因子-κB激活和细胞因子产生的影响

目的 探讨内毒素诱导大鼠肺泡巨噬细胞（AMs）核转录因子-κB（NF—κB）的激活和细胞因子的释放以及醒脑静注射液（XNJ）的干预作用。方法 通过支气管肺泡灌洗获取大鼠AMs。先用XNJ（10ml／L）孵育AMs2h后，加入内毒素（10μg／L）分别刺激2、4和6h。用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测AMs中肿瘤坏死因子-α（TNF—α）基因表达水平；用酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养上清液中TNF—α和白细胞介素-8（IL-8）含量；蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测AMs中NF—κB抑制蛋白-α（κB-a）、磷酸化κB-α（IκB—α）和NF—κB的水平变化。结果内毒素能增加AMs中TNF—κ基因表达水平和培养上清液中TNF—α、IL-8的水平，同时能促进IκB—α降解和NF—κB激活。与内毒素组比较，XNJ能减少AMs中TNF—α基因表达水平和培养上清液中TNF—α和IL-8的水平；抑制内毒素诱导的IκB-α降解和NF—κB激活（P均〈0．05）。结论 XNJ通过抑制AMs中IκB-α的降解，减少了NF—κB的激活，减少了内毒素诱导大鼠AMs细胞因子的产生。     

存活蛋白和NF—κB在外周T细胞性淋巴瘤中的表达和意义

本研究旨在探讨存活蛋白和NF—κB在外周T细胞性淋巴瘤中的表达及意义。应用免疫组织化学法检测26例外周T细胞性淋巴瘤组织中存活蛋白和NF—κB的表达，30例良性淋巴组织反应增生被选作对照组。结果发现，外周T细胞性淋巴瘤患者中有21例存活蛋白表达阳性，阳性率为80．8％；17例NF—κB表达阳性，阳性率为65．4％。与对照组相比，具有显著性差异（p〈0．01）。实验组中，存活蛋白阳性率与NF—κB阳性率呈正相关。结论：存活蛋白和NF—κB在外周T细胞性淋巴瘤组织中广泛表达，对肿瘤细胞的促增殖和抑凋亡发挥着重要的作用。     

艾司洛尔对脓毒症大鼠腹腔巨噬细胞保护作用的研究北大核心CSCD

目的 探讨艾司洛尔对内毒素刺激大鼠腹腔巨噬细胞的保护作用及其相关机制。方法对大鼠腹腔巨噬细胞进行体外培养,根据研究需要分三组,分别为正常组、脂多糖（LPS）刺激组、艾司洛尔租、艾司洛尔与脂多糖（LPS）共同刺激组。结果 LPS刺激组中TNF-α mRNA与蛋白水平的表达明显高于正常组（P〈0.01）,艾司洛尔与LPS共同刺激组中TNF-α的表达明显低于LPS刺激组（P〈0.01）。LPS刺激组中β1-AR的表达水平显著高于正常组（P〈0.01）,艾司洛尔组β1-AR的表达水平少于正常组（P〈0.05）,而共同刺激组中β1-AR的表达水平较LPS刺激组减少（P〉0.01）。与正常组比,LPS刺激组中p65的表达明显增多（P〈0.01）,而共同刺激组中p65的表达明显低于LPS刺激组（P〈0.05）。LPS刺激组中NFκβ/DNA结合力明显高于正常组（P〈0.01）,与LPS刺激组相比,艾司洛尔组与共同刺激组中NFκβ/DNA结合力受到显著抑制,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 艾司洛尔对LPS诱导大鼠腹腔巨噬细胞中TNF-α表达的减少可能通过对β1受体调控作用NFκB通路实现。     

纳洛酮与甲基泼尼松龙联用对急性肺损伤大鼠肺组织核转录因子-κB表达的影响

目的探讨联合应用甲基泼尼松龙和纳洛酮对内毒素(LPS)所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子κB(NFκB)表达的作用。方法建立大鼠LPS吸入性ALI模型(LPS3mg/kg气管内注射)。85只大鼠随机分为5组:生理盐水对照组,LPS损伤组,甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙),纳洛酮组(LPS+纳洛酮),联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+纳洛酮)。采用放射免疫法检测大鼠血清白细胞介素8(IL8)水平,并应用免疫组化法观察肺组织NF-κBp65蛋白表达的变化。结果经气道吸入LPS可致大鼠发生ALI。ALI大鼠肺组织NFκBp65蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01),IL-8水平亦明显增高(P<0.05或P<0.01),单用甲基泼尼松龙或纳洛酮组肺组织NF-κBp65蛋白表达率及IL-8水平均较LPS损伤组明显降低,以联合用药组更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论联合应用甲基泼尼松龙和纳洛酮可降低LPS吸入性ALI大鼠血清IL-8升高,并显著抑制肺组织NF-κBp65蛋白表达。