分泌抗风疹病毒McAb杂交瘤细胞株的建立及其初步应用

建立七株分泌抗风疹病毒(RV)McAb杂交瘤细胞株,其中1种McAb经辣根过氧化物酶(HRP)标记后用于检测组织培养中的RV,可在细胞病变(CPE)尚未出现时,清楚地分辨感染细胞和正常细胞。用该McAb可检出1/4单位的血凝素,敏感性高于多克隆血清,可望用于临床,诊断RV感染。     

分泌抗人IgMμ链McAb杂交瘤细胞株的建立

本文从正常人（HBSAg阴性）血清中分离纯化人IgM，以此作为抗原免疫BALB／C小鼠，根据kohler和Milstein杂交瘤细胞建株原理，采用本室建立的常规方法，将免疫脾细胞和小鼠SP2／0骨髓瘤细胞进行融合，建立了分泌抗人IgMμ链单克隆抗体杂交瘤细胞株。经过间接ELISA双向琼脂扩散试验及封闭试验等方法证实，所分泌的抗体为抗人IgMμ链McAb，其中3A4、3D32株杂交瘤细胞经反复冻存、复苏及多次传代，均能分泌高效价抗体，且为IgG1亚类。本实验结果为抗人IgM鼠队嵌合抗体基因的构建奠定了基础。     

分泌抗人IgMμ链McAb杂交瘤细胞株的建立

本文从正常人血清中分离纯化人ＩｇＭ，以此作为抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，根据ｋｏｈｌｅｒ和Ｍｉｌｓｔｅｉｎ杂交瘤细胞建株原理，采用本室建立的常规方法，将免疫脾细胞和小鼠ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，建立了分泌抗人ＩｇＭμ单克隆抗体杂交瘤细胞株。经过间接ＥＬＩＳＡ双向琼脂扩散试验及封闭试验等方法证实，所分泌的抗体抗人ＩｇＭμ链ＭｃＡｂ，其中３Ａ４，３Ｄ３２株杂交瘤细胞经反复冻存，复苏及多次传匀能分泌高     

分泌抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用人甲胎蛋白(AFP)免疫BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得两株分泌抗人AFP单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株(G2和G10)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液和小鼠腹水的特异性抗体效价,分别为2～4×10~(-3)和10~(-6)～10~(-7)。两株杂交瘤细胞染色体的众数为104～108条。经体外连续传代及冻存半年复苏后,仍具有分泌抗体能力,说明其性能稳定。两株所分泌的抗体,均属IgGl型。     

分泌抗人CRP单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

<正> C反应蛋白(CRP)是一种急性相蛋白质,正常情况下在血清中仅微量存在,而在急性感染、组织损伤、心肌梗塞、移植排斥反应、肿瘤播散等急性期可呈千倍升高,测定血清中的CRP含量及动态变化,对于疾病的诊断、鉴别诊断、预告估计和指导治疗均有重要意义。 1984年我们用经亲和层折提纯的人CRP免疫Bald/c小鼠,经3次免疫后取其脾     

分泌抗人IgG单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

应用人ＩｇＧ免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾脏与ＳＰ２／０小鼠骨髓瘤细胞在ＰＥＧ作用下融合，经３次克隆化后获得五株抗人ＩｇＧ单克隆抗体的杂交瘤细胞，用被动血凝法和ＥＬＩＳＡ检测培养上清滴度为２￣４，用琼脂双扩散法证明此单克隆抗体只与人ＩｇＧ发生反应，产生透明沉淀线。经ＩｇＧ亚类血清鉴定，其单克隆抗体均属ＩｇＧ－Ｇ１亚类抗体。五株杂交瘤细胞在液氮保存数月，经反复复苏培养，不改变其分泌抗体的性能。     

建立分泌抗猪精液抑制素杂交瘤细胞株及其McAb的研究

用猪精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，获得３株分泌抗猪精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为２Ｄ、５Ｄ和６Ｇ，其分泌的抗体均为ＩｇＧ１型，不与大鼠ＬＨ、ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应。杂交瘤细胞染色体平均为８５～１００条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定分泌特异性抗体。     

分泌抗人喉癌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及临床意义

用喉癌抗原免疫疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选获得４株分泌抗人喉癌单克隆抗体的杂交瘤细胞株，均收集到腹水型ＭｃＡｂ，并验证其滴度高，纯化效果好，特异性强。     

分泌抗人喉癌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及临床意义

用喉癌抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选获得４株分泌抗人喉癌单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，均收集到腹水型ＭｃＡｂ，并验证其滴度高，纯化效果好，特异性强。用其中３株ＭｃＡｂ混合，对１２４例喉癌及４０例正常人血清予以检测，结果喉癌患者血清中喉癌相关抗原水平明显高于对照组，Ｐ＜０．０１，且随病情的加重，喉癌相关抗原水平呈上升趋势。故本室建立的抗人喉癌混合ＭｃＡｂ可作为一种较为理想的肿瘤标记物，为喉癌的诊断、病情监测、预后判定提供了一种敏感、特异的测试手段。     

分泌抗人早期T细胞单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

以胎儿胸腺细胞免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术产生了两种单克隆抗体，分别命名为ＳＭＵ１３、ＳＭＵ１４。初步鉴定的结果表明，１）ＳＭＵ１３，ＳＭＵ１４是抗早期Ｔ淋巴细胞的单克隆抗体，但与浆细胞也发生反应；（２）两株单抗的特性，反应谱与ＣＤ３８抗原相似；（３）ＳＭＵ１３，ＳＭＵ１４在白血病免疫学分型中可以明确判断白血病细胞的来源，具有结合补体的能力，在急性Ｔ淋巴细胞白血病的治疗中可发挥     

分泌抗人早期T细胞单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

以胎儿胸腺细胞免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术产生了两种单克隆抗体，分别命名为ＳＭＵ１３、ＳＭＵ１４。初步鉴定的结果表明，（１）ＳＭＵ１３、ＳＭＵ１４是抗早期Ｔ淋巴细胞的单克隆抗体，但与浆细胞也发生反应；（２）两株单抗的特性、反应谱与ＣＤ３８抗原相似；（３）ＳＭＵ１３、ＳＭＵ１４在白血病免疫学分型中可以明确判断白血病细胞的来源，具有结合补体的能力，在急性Ｔ淋巴细胞白血病的治疗中可发挥重要作用     

建立分泌抗猪精液抑制素杂交瘤细胞株及其McAb的研究

用猪精液抑制素免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠的脾细胞与ＮＳ－１小鼠髓瘤细胞融合，获得３株分泌抗猪精液抑制素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为２Ｄ、５Ｄ和６Ｇ，其分泌的抗体均为ＩｇＧ１型，不与大鼠ＬＨ、ＦＳＨ和ＰＲＬ产生交叉反应，杂交瘤细胞染色体平均为８５－１００条。细胞经反复冻存、复苏和传代，仍稳定分泌特异性抗体。     

分泌小鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

采用活体内生长ＳＰ２／０骨髓细胞为融合伙伴,用ＳＰ２／０细胞与甲胎蛋白免疫的ＢＡＬＡ／Ｃ小鼠脾细胞进行融合,建立了２株稳定分泌抗ＡＦＰ单克隆抗体的小鼠杂交瘤株。冻存两年后复苏,仍稳定地分泌特异抗体。培养上清的抗体效价达１０＾－３,腹水效价达１０＾－６,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４识别抗原表位不同,ＨＭＡ２１５和ＨＭＡ６４均属于小鼠ＩｇＧ１亚类。     

抗人肺腺癌杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

用人肺腺癌细胞株AGZ—83a常规免疫BALB/C小鼠,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2／0融合,获得一稳定分泌抗人肺腺癌单克隆抗体（McAb）的杂交癌细胞林──—QMC－WL99。制备并纯化了小鼠腹水抗体,腹水效价为5.5X106,亚型鉴定为IgG1。免疫组化结果显示QMC－WL99单抗的特异性较高,与肺腺癌有较好选择反应性,与正常组织无交及反应。该单克隆抗体的亲和常数为7.25×1010M－1,液氮冻再后复苏,杂交瘤细胞株QMC－WL99分泌抗体的能力不受影响。     

分泌抗人A型红细胞单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用人A型红细胞作为抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS-1进行细胞杂交。从五批细胞融合中选取五个克隆细胞株,其中一株命名C_(11)细胞株,经七次克隆化培养,体外传代培养达八个多月,生长良好,继续分泌单克隆抗体。其单克隆抗体与不同血型红细胞(凝集法)和正常人外周血T、B淋巴细胞以及三个正常人B淋巴母细胞系补体依赖微量细胞毒方法作交叉试验,结果C_(11)细胞株产生的单克隆抗体只对A型红细胞发生反应与淋巴细胞抗原亦无交叉反应。     

分泌抗人IgG重链单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

应用人IgG免疫的BALB/C小鼠脾细胞与NS-1鼠骨髓瘤细胞在聚乙二醇1000作用下融合,并经克隆后获得了4株抗人IgGMcAb的杂交瘤细胞(1B3,2D5,2A4,2B6)。用ELISA和被动血凝方法测定培养物上清,含有较高滴度的抗体含量。用琼脂免疫双扩散方法,证明它仅与人IgG发生反应,产生透明沉淀线。被动血凝抑制试验,抑制效价与所加的     

分泌抗人IgMμ链单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

本文采用杂交瘤技术建立了6株分泌抗人IgMμ链单克隆抗体的杂交瘤细胞株.经琼脂糖双扩散试验、双扩散和ELISA封闭试验,以及免疫电泳等方法证实,所分泌的抗体具有抗人IgMμ链特异性.其中4株分泌IgG_1亚类、2株分泌IgG_2a亚类抗体.经一年多的反复冻存和复苏,这6株细胞均能稳定分泌高效价抗体.     

分泌抗人纤维连结素的单克隆抗体杂交瘤细胞株建立

国外中临床中早巳开展血浆纤维连结素测定,并用作严重感染、创伤,器官功能衰竭的诊断与预后的判断指标。国内只有上海、成都等地少数单位开展此项研究工作。南京军区总医院临床免疫科武建国于1984年底研究建立了检测血浆纤维连结素的实验方法和抗血清的制备,检查了180名供血员血浆中纤维连结素含量,其值平均为23.1±4.6mg/dl(X±SD)。检查肠瘘、肝硬化、癌肿、胶原疾病等338例病人证明,在严重感染、创伤、弥漫性血管内凝血、多系统器官衰竭、营养不