自身免疫性甲状腺病Th1／Th2细胞因子平衡的偏离

目的探讨自身免疫性甲状腺病中Graves病和桥本甲状腺炎患者外周血Th1／Th2细胞因子平衡偏离的方向。方法应用酶联免疫吸附法分别检测50例Graves病患者，20例桥本甲状腺炎患者和20例健康献血者外周血γ干扰素（IFN-γ）和白介素-4（IL-4）。以IFN—γ/IL-4作为反映Th1/Th2细胞因子的指标。结果与正常对照组对比，Graves病和桥本甲状腺炎患者外周血IFN-γ无明显变化（P〉0．05），IL-4明显下降（P〈0．01），而IFN—γ/IL-4比值升高（P〈0．05）。结论自身免疫性甲状腺病中Graves病和桥本甲状腺炎外周血Th1/Th2细胞因子平衡显现Th2细胞因子低下型，而Th1／Th2相对升高。     

慢性重型乙型肝炎Th1／Th2平衡状态与预后关系的研究

目的研究慢性重型乙型肝炎Th1／Th2类细胞因子的水平及其对预后的影响。方法采集112例慢性重型乙型肝炎患者外周血,以30例慢性乙型肝炎（CHB）患者和30名健康体检者作为对照,应用ELISA法检测IL-4和IFN-γ水平,荧光PCR法检测HBVDNA载量,分析重型肝炎患者不同分期细胞因子水平以及与HBVDNA载量及短期预后的关系。结果慢性重型乙型肝炎患者外周血IL-4、IFN-γ水平和Th1／Th2比值明显高于CHB患者和健康体检者（z值分别为8．968,10．004和26．067,P值分别为0．009,0．007和0．000）;晚期重型肝炎患者的IL-4水平明显高于早、中期患者（z值分别为3．672和3．158,P值分别为0．000和0．002）,但Th1／Th2比值低于早、中期患者（Z值分别为3．161和2．166,P值分别为0．002和0．030）;不同HBVDNA复制水平的重型肝炎患者IL4、IFN-γ及Th1／Th2比值差异无统计学意义（z值分别为4．431,2．626和0．140,P值分别为0．219,0．403和0．987）;但患者外周血IL4浓度越高,12周的病死率越高。结论Th1／Th2失衡导致重型肝炎的发生,随着病情加重,Th1／Th2比值下降,提示短期预后不良。     

血栓痔病人外周血Th1／Th2分析

为探讨血栓痔发病与T淋巴细胞活化及释放的Th1／Th2细胞因子失衡状态的关系,对32例血栓痔（实验组）和30例健康人（对照组）的外周血单个核细胞（PBMC）,经PMA诱导培养后,用流式细胞术测定CD3^＋标记T细胞内自细胞介素-4（IL-4）和干扰素-γ（IFN-γ）含量和CD8^-标记T细胞内IL-4和IFN-γ的含量,进行比较分析,从而估计Th1／Th2细胞的漂移状态。结果显示,实验组的IL-4和IFN-γ含量均显著高于对照组（P〈0．001）;且实验组IL-4^＋含量高于IFN-γ含量（P〈0．05）。结果表明,血栓痔病人发病时,体内的T淋巴细胞免疫系统被激活,且以Th2细胞为主,这种Th1／Th2细胞因子失衡可能在血栓痔发病过程中起到重要作用。     

Th1/Th17细胞在肺部感染中的作用

目的：观察Th1、Th17型细胞因子在肺部感染性疾病中的动态变化,深入探讨机体抵抗肺部感染的免疫机制,为肺部感染性疾病的特异性诊治提供实验依据。方法：收集临床肺部感染患者血清、外周血淋巴细胞样本,分别用ELISA方法检测血清中Th1型细胞因子（IFN-γ）及Th17型细胞因子白细胞介素-17（IL-17）的表达水平,用FACS检测外周血中CD4＋IFN-γ＋Th1及CD4＋IL-17＋Th17细胞的比例变化,同时用Realtime-PCR方法检测外周血中Th17型细胞因子IL-17在基因水平的表达变化。以上指标的检测均以临床公认的CRP水平的变化作为参考。结果：ELISA结果显示,肺部感染患者血清IFN-γ的水平较健康对照组显著升高,动态检测结果显示IFN-γ变化水平与反映临床疾病状态的CRP出现显著的相关性。而IL-17的表达在不同的疾病过程未出现显著的变化。FACS及Real-time-PCR结果均显示CD4＋IFN-γ＋Th1的活性变化与疾病状态相关,而CD4＋IL-17＋Th17细胞在肺部感染不同阶段未出现显著的变化。结论：相对于Th17细胞而言,Th1细胞在机体防御肺部感染的过程中发挥更为关键的作用。Th17细胞在该类感染性疾病中的作用尚需进一步探讨。     

原发性肝癌病人Th1/Th2的漂移研究

目的研究原发性肝癌(PHC)病人Th1／Th2的漂移。方法以IFN-γ和IL-2代表Th1类细胞因子，IL-4和IL-10代表Th2类细胞因子，以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测39例原发性肝癌病人外周血单个核细胞(PBMC)及11例癌组织和癌旁组织中Th1／Th2类细胞因子mRNA的表达，以6例健康人作为对照。结果39例PHC病人PBMC中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期肝癌Th1型细胞因子表达率分别为5／7、20／26、0／6，Th2型细胞因子表达率分别为0／7、2／26、5／6。11例癌组织和癌旁组织的Th1／Th2状态与其PBMC呈正相关(癌组织和PBMC，rs=0．8101，P=0．0025；癌旁组织和PBMC，rs=0．7698，P=0．0056)。结论Ⅰ期和Ⅱ期PHC病人PBMC中Th1类细胞因子强势表达，Ⅲ期PHC病人PBMC以Th2类细胞因子表达为主。癌组织和癌旁组织的Th1／Th2状态与其PBMC是一致的。     

慢性特发性荨麻疹患者外周血T及Th淋巴细胞亚群的表达

目的：探讨慢性特发性荨麻疹患者外周血T及辅助性T淋巴细胞（Th）亚群的表达及其在慢性特发性荨麻疹发病机制中的作用。方法：采用流式细胞术检测经四色荧光抗体染色的慢性特发性荨麻疹患者及正常对照外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数及CD4^＋／IFN-γ’（Th1）、CD4^＋／IL-4^＋（Th2）细胞含量。结果：慢性特发性荨麻疹组外周血CD3^＋T淋巴细胞数无明显变化、CD4^＋T淋巴细胞数、CD8^＋T淋巴细胞数均降低;CD4^＋／CD8^＋比值增高,差异有统计学意义（P〈0．01）。慢性特发性荨麻疹患者外周血Th1细胞含量、Th1／Th2比值均明显低于正常对照组（P〈0．01,P〈0．05）,Th2细胞含量高于正常对照组（P〈0．01）。结论：慢性特发性荨麻疹患者外周血存在着T及Th淋巴细胞亚群分化失衡,这可能为慢性特发性荨麻疹发病的机制之一。     

人羊水间充质干细胞对乙型肝炎肝衰竭患者外周血Th1／Th2的体外调节

目的探讨人羊水间充质干细胞（human amniotie fluid—derived mesenchymal stem cells,h-AFMsc）对乙型肝炎肝衰竭患者外周血Th1／Th2的体外调节作用。方法选择2011年2—5月中山大学附属第三医院6例乙型肝炎肝衰竭患者和6名健康志愿者,提取外周血单个核细胞（peripheral blood mononuelear cells,PBMC）,同时从孕妇中期羊水中提取h-AFMSC。将h-AFMSC分别与乙型肝炎肝衰竭患者和健康捐献者的PBMC共培养72h,乙型肝炎肝衰竭患者和健康捐献者的PBMC单独培养组作为对照。应用流式细胞仪检测共培养前后不同组PBMCIFNγ（Th1）和IL-4（Th2）的变化情况,计算Th1／Th2比值。对共培养前后数据进行Mauchly球形检验,P〉0．1满足球形假设检验则采用重复测量方差分析。结果共培养72h,乙型肝炎肝衰竭患者PBMC与h—AFMSC共培养组的Th1细胞比例与其PBMC单独培养组比较无明显差异（F=0．82,P〉0．05）,但Th2细胞比例明显下降（F=10．24,P〈0．05）,从而导致Th1／Th2比值显著上升（F=17．28,P〈0．01）。健康捐献者PBMC与h-AFMSC共培养组的Th1、Th2和Th1／Th2比值与其PBMC单独培养组比较差异均不明显（F值分别为0．54、0．68和0．74,P值均〉0．05）。结论h-AFMSC对乙型肝炎肝衰竭患者的Th1／Th2有体外调节作用,具有作为移植种子来源移植治疗乙型肝炎肝衰竭的可能性。     

慢性非细菌性前列腺炎辅助性T细胞亚群分化及其对炎症的影响

目的：了解慢性非细菌性前列腺炎（CP）前列腺液（EPS）中Th类细胞亚群分化及其和局部炎症的关系。方法：对47例CP患者（CP组）,根据炎症程度分成Ⅰ组（轻度炎症）26例和Ⅱ组（重度炎症）21例;另以16例健康者为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫法法检测各组EPS中Th1类细胞因子（IFN-γ）、Th2类细胞因子（IL-4）水平,以及Th1／Th2比值（IFN-γ／IL-4）。结果：与对照组比较,CP组IFN-γ、IFN-γ／IL-4明显升高（P〈0．05）,IL-4水平无明显变化;其中,Ⅰ组IL-4水平无明显变化,而Ⅱ组IL-4水平显著性下调（P〈0．05）;Ⅱ组和Ⅰ组IFN-γ水平均明显上调（P〈0．05）,但此两组间水平无显著性差别;Ⅱ组IFN-γ／IL-4明显高于Ⅰ组（P〈0．05）。结论：CP患者Th1细胞分化占优势,以细胞免疫反应为主;Th1的极化可能是导致前列腺局部炎症发展原因之一。     

Th1/Th2平衡在高容量血液滤过防治多脏器功能衰竭中的变化及意义

目的探讨多脏器功能衰竭（MODS）发病机制及高容量血液滤过（HVHF）防治MODS的依据。方法采用2次打击法建立猪MODS模型，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4含量变化；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定脾脏IFN-γ、IL-4mRNA水平及辅助T细胞特异性转录因子T-bet和GATA-3mRNA的含量变化。结果HVHF组MODS发生率为20％，显著低于MODS组88．9％（P〈0．01）；血清IFN-γ和IL-4浓度显著低于MODS组（P〈0．05），处死前IFN-γ／IL-4比值明显高于MODS组（P〈0．01）；脾脏IFN-γ和IL-4 mRNA表达量较MODS组明显下降（P〈0．05），IFN-γ/IL-4 mRNA比值明显高于MODS组（P〈0．05）；脾脏GATA3mRNA表达量低于MODS组（P〈0．01），T—bet mRNA表达量下降，差异无统计学意义（P〉0．05），T-bet／GATA3比值显著高于MODS组（P〈0．01）。结论Th1向Th2漂移可能是MODS发生的本质原因之一，HVHF能够在一定程度上遏止Th1向Th2漂移的发生。     

血液净化治疗多器官功能障碍综合征引起Th1/Th2漂移的研究

目的研究连续性血液净化治疗（CBP）对多器官功能障碍综合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）患者循环Th1／Th2的影响及其引起Th1／Th2漂移的机制。方法18例多器官功能障碍综合征患者行CBP治疗。采用中心静脉留置单针双腔导管建立血管通路，采用连续性血液净化系统进行前稀释连续性静脉-静脉血液透析滤过（CVVHDF）。治疗前及治疗后24、48、72h采血检测Th1／Th2，同时检测血液中IL4和IFN-1浓度。结果MODS患者经CBP治疗后，Thl表达逐渐增加，而Th2表达逐渐下降，IFN-γ和IL-4的浓度均下降；Th1／Th2和IFN-γ／IL-4比值随治疗时间的增加升高；Th1／Th2和IFN-γ/IL-4比值呈正相关。结论CBP治疗可能可改善MODS患者的Th1／Th2平衡漂移，可能与改善机体内IFN-γ/IL-4比值有很大的相关性。     

Th1/Th2细胞因子在深静脉血栓形成中的变化规律

目的：研究深静脉血栓形成（DVT）中Th1/Th2细胞因子的变化规律。方法：选取DVT患者66例,按病程分为1~3 d组、4~7 d组、8~15 d组和16~30 d组,观察Th1/Th2相关因子TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10水平。结果：DVT患者TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10均较对照组明显升高,1~3 d组、4~7 d组的IFN-γ/IL-4比值较对照组升高,8~15 d组和16~30 d组IFN-γ/IL-4比值较对照组降低。结论：DVT中存在Th1/Th2的分化失衡,Th1/Th2细胞因子可以作为临床病情评估和疗效评价的指标。     

脾动脉缩窄对门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达及Th1/Th2平衡的影响

目的 观察脾动脉缩窄对肝硬化门静脉高压大鼠脾脏iNOS、Th1/Th2型细胞因子表达的影响,并探讨机制.方法 肝硬化门静脉高压大鼠随机分3组(n=10):假手术组(SOG)、脾动脉缩窄术组(SAC)和脾动脉结扎术组(SAL);正常大鼠10只行假手术作为对照组(NCG).免疫组化法测脾脏iNOS表达,RT-PCR法测脾脏IFN-γ、IL-4mRNA表达,对iNOS与IFN-γ、IL-4表达量作相关分析.结果 SOG脾脏iNOS明显高于NCG(P＜0.01),SAC和SAL明显低于SOG(P＜0.01).SOG脾脏IFN-γmRNA和IFN-γ/IL-4明显低于NCG(P＜0.01),IL-4mRNA明显高于NCG(P＜0.01);SAC脾脏IFN-γmRNA高于SOG(P＜0.05),SAC和SAL脾脏IL-4mRNA低于SOG(P＜0.05),而IFN-γ/IL-4高于SOG(P＜0.05).iNOS与IFN-γ负相关(r=-0.672,P＜0.01),与IL-4正相关(r=0.634,P＜0.01).结论 脾动脉缩窄术后门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达降低,IFN-γ/IL-4升高,脾脏Th1/Th2失衡改善可能与术后iNOS表达降低有关.     

氩氦刀冷冻消融治疗兔VX2肾癌外周血细胞因子的变化

目的研究冷冻消融治疗兔VX2肿瘤后外周血细胞因子的变化。方法建立兔VX2肾癌模型,将38只荷瘤兔随机分为：冷冻消融组（A组）,根治性肾切除组（B组）,肿瘤对照组（C组）,应用酶联免疫吸附试验法测定治疗前、治疗后21d外周血Th1型细胞因子（IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞因子（IL-4、IL-6）浓度的变化。结果治疗后21d组间组内比较显示：冷冻消融组外周血IFN-γ、TNF-α浓度和IFN-γ／／IL-4比值明显升高,IL-6明显降低,与治疗前差异存在统计学意义（P〈0．05）,IL-4与治疗前相比差异无统计学意义（P〉0．05）;冷冻消融组外周血IFN-γ／、IL-4、IL-6浓度和IFN-γ／IL-4比值与肿瘤对照组相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）;与根治肾切除组相比,冷冻消融组TNF—α浓度明显升高,IL-6明显降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）,两组IFN-γ／、IL-4浓度差异无统计学意义（P〉0．05）。结论冷冻消融冶疗肾癌可使外周血IFN-γ／、TNF-α、IFN-γ／IL-4比值升高,IL-6浓度降低,增强机体的抗肿瘤免疫功能。     

冷冻消融治疗前列腺癌诱导肿瘤特异性免疫反应

目的:评价经皮冷冻消融治疗局限性前列腺癌前后机体抗肿瘤免疫反应。方法:10例局限性前列腺癌患者行经皮冷冻消融治疗。分别于冷冻治疗前1d、治疗后2周采取外周血,分离外周血单个核细胞(PBMCs)。穿刺活检制备前列腺自身肿瘤和非肿瘤组织溶解物。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清TNF-α、IFN-γ、IL-4、IL-10水平,以IFN-γ/IL-4计算Th1/Th2比值。酶联免疫斑点(ELISPOT)试验检测不同组织溶解物刺激下分泌IFN-γ的T细胞数。以人前列腺癌LNCaP细胞和肾癌GRC-1细胞为靶细胞,乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测细胞毒T淋巴细胞(CTL)特异性杀伤活性。结果:与术前比较,冷冻治疗后TNF-α、IFN-γ明显升高,IL-4、IL-10轻度下降,Th1/Th2比值明显升高(P<0.01)。肿瘤组织溶解物刺激后IFN-γ+T细胞数明显增多(P<0.01)。非肿瘤组织溶解物刺激后,IFN-γ+T细胞数无明显变化。冷冻治疗后细胞毒CTL对人前列腺癌细胞株LNCaP特异杀伤活性明显增强,而对人肾癌细胞株GRC-1无明显杀伤活性。随访3～6个月,仅1例患者肿瘤复发。结论:经皮冷冻治疗前列腺癌可诱导机体产生肿瘤特异性免疫反应。     

308nm准分子激光治疗对白癜风患者外周血Th1/Th2细胞因子的影响

目的：研究308nm准分子激光治疗前后白癜风患者外周血Th1型细胞因子（IFN-γ）和Th2型细胞因子（IL-10）水平,探讨308nm准分子激光治疗白癜风的免疫机制。方法：采用ELISA方法检测25例白癜风患者治疗前后和20例正常对照组外周血IFN-γ和IL-10的水平。结果：IFN-γ水平在各组之间均无统计学差异（P〉0.05）。治疗前白癜风患者外周血IL-10水平与正常对照组相比明显增加,差异有统计学意义（P〈0.05）,治疗后白癜风患者外周血IL-10水平与正常对照组相比明显增加,但是差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：白癜风患者体内Th2型细胞因子占优势,308nm准分子激光可恢复白癜风患者Th1/Th2的平衡状态。     

免疫性血小板减少症脾切除疗效与外周血Th亚群细胞因子表达的关系

目的探讨原发性免疫性血小板减少症（ITP）脾切除血液学疗效与外周血辅助性T细胞（Th）亚群细胞因子的mRNA表达水平的关系。方法采用QuantiGene Plex（QGP）方法,分别检测14例手术有效（R组）和8例手术无效（NR组）的ITP患者腹腔镜脾切除术前后外周血Th1（IL-2、IFN-γ）、Th2（IL-4、IL-5、IL-6、IL-10）、Th3（TGF-β1）、Th17（IL-17）细胞因子的mRNA表达水平的变化。对照组为30例健康体检者。结果术前及术后R组TGF-β1 mRNA的表达水平均明显高于NR组（P值分别为0.001和0.006）及对照组（P值分别为0.001和〈0.001）。术前及术后R组和NR组之间IL-2、IFN-γ与IL-17 mRNA的表达水平差异均无统计学意义。结论脾切除疗效不同的ITP患者TGF-β1的mRNA表达水平存在差异,检测术前TGF-β1的表达水平有助于预测手术疗效。