三种鼠管状属线虫的同工酶电泳比较分析

采用薄层等电聚焦和聚丙烯酰胺凝聚电泳方法对隐藏管状线虫、尿管状线虫、地鼠管状线虫的6种同工酶比较研究结果表明：三种线虫的同工酶谱除了存在位置相同的酶带外，还有明显的差异，表现出各自种的特征，通过对电泳数据的聚类分析，根据相似系数绘制成三种线虫同工酶谱关系树状图，表明隐藏管状线虫与地鼠管状线虫的亲缘关系较近。     

碳酸氢铵体外杀灭日本血吸虫虫卵的实验观察

目的观察碳酸氢铵体外杀灭日本血吸虫虫卵的药效。方法以碳酸氢铵作为实验组,以敌百虫作为阳性对照组,以清水作为空白对照组。在室温下用不同浓度的农用碳酸氢铵,作用于一定数量的含有日本血吸虫虫卵的小鼠粪便和肠道组织。观察不同时间、不同碳酸氢铵浓度下虫卵的孵化情况。结果在室温下农用碳酸氢铵在200mg/L浓度时浸泡含有日本血吸虫虫卵的小鼠粪便和肠道组织,12h、24h日本血吸虫虫卵的孵化率为0。200mg/L的碳酸氢铵体外持效观察7天内均能有效抑制和杀灭虫卵。结论碳酸氢铵体外在200mg/L时有明显抑制和杀灭日本血吸虫虫卵的作用。     

615系小鼠的四翼无刺线虫和鼠管状线虫感染

本文报道了615系小鼠四翼无刺线虫和鼠管状线虫感染:在两个小鼠群体中,前者的感染率90.5％(57/63)和22.6％(7/31);后者感染率27.9％(17/61)和56.7％(17/30)。在12只剖检鼠内检获四翼无刺线虫成、童虫6,875条,鼠管状线虫成、童虫1,733条。结果表明615系小鼠对这两种线虫易感,且可反复再感染。     

日本血吸虫成虫在体外培养中产卵和虫卵发育成熟的影响因素研究

在无血清８４１培养基中分别添加胸腺嘧啶核苷、乌氨酸、强的松龙和胰蛋白胨，可促进日本血吸虫产卵。经１５天的观察证实在８４１培养基中添加上述成份组成的８９１培养基比８４１培养基产量高，畸卵率低和产卵高峰持时间长。成虫最初２４ｈ内产出的虫卵体外培养至第１５天，ＲＰＭＩ１６４０培养基，无血清８４１２基８４１培养基和８９１培养基上成熟期虫卵物百分比依次为１１．６±４．７，１８．７±５．６，２８．４±８３．和     

猪囊尾蚴“体外孵化”及头节外部形态观察

本文介绍了猪囊尾蚴“体外孵化”的方法，将孵化出的猪肉绦虫“幼虫”制作成整体装片，在光学显镜下认真观察了其头节的外部形态。     

鼠旋毛虫肌幼虫的分离与体外培养

目的探讨旋毛虫幼虫在宿主体外培养的情况。方法将从小鼠肌肉分离、纯化的旋毛虫幼虫,接种于含20%小牛血清的RPMI1640和M199作为培养液,在37℃、5%CO2的CO2培养箱中培养。结果旋毛虫幼虫能在体外合适培养液中存活较长时间。但虫体无明显增大。结论旋毛虫的幼虫能在体外较长时间生存,但生长和发育还需要其他刺激因子。     

次氯酸钠法孵化猪带绦虫卵的观察

目的:观察次氯酸钠作用下猪带绦虫卵的孵化过程.方法:以1.0%次氯酸钠溶液孵化猪带绦虫虫卵,以显微镜进行动态观察.结果:猪带绦虫虫卵胚膜被溶解,六钩蚴逸出.结论:次氯酸钠法孵化猪带绦虫卵的本质是溶解猪带绦虫虫卵胚膜.     

中国实验动物中鼠管状线虫的分子鉴定和感染调查

目的对鼠管状线虫进行分子鉴定和感染调查,为国家标准的修订提供参考依据。方法 923批5199只SPF动物(包括:1批5只猴,3批25只小型猪,28批55只兔,13批248只地鼠,37批198只豚鼠,93批459只大鼠,742批4179只小鼠,5批25只鸡和1批5只鸭)和145批1389只清洁动物(包括:1批3只兔,4批31只地鼠,16批157只豚鼠,32批268只大鼠和92批930只小鼠)来自全国50个不同的厂家。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术结合形态学鉴定方法,进行鼠管状线虫感染筛查。应用多重PCR和测序技术,鉴定分离的鼠管状线虫ITS(内转录间隔区)、28S rRNA(28S核糖体RNA)、nad1(NADH脱氢酶亚单位1)和cox1(细胞色素C过氧化物酶亚基1)基因,从分子水平上确证鼠管状线虫感染。结果应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,从动物中检出鼠管状线虫的虫卵、幼虫和成虫。根据鼠管状线虫的卵细胞、幼虫、雌雄成虫的大小和形态来鉴定虫种。应用多重PCR测序技术,能从分离的单个鼠管状线虫的虫卵、幼虫和成虫中鉴定出ITS、28S rRNA、nad1和cox1基因,与其他不同种属的寄生虫无交叉反应。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,从5199份SPF和1389份清洁动物样本中分别检出鼠管状线虫阳性样本285份和135份。应用多重PCR和测序技术,鉴定证明这些阳性样本中确实含有鼠管状线虫特异性的DNA。测序结果显示,不同动物分离的鼠管状线虫的ITS、28S rRNA、nad1和cox1部分基因序列核苷酸相似性达100%。SPF和清洁动物的鼠管状线虫感染率分别为5.5%(285/5199)和9.7%(135/1389)。结论应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术联合多重PCR测序技术能够快速精准检测鉴定出鼠管状线虫。鼠管状线虫的人兽共患本质可以视作为公共卫生的一个预警。良好的动物质量控制对保护人类身体健康和保障人民用药安全具有重要作用。本研究对中国SPF和清洁动物的鼠管状线虫进行了分子鉴定和感染调查。     

粪类圆线虫重症感染者的虫卵与虫体的检测

目的对福建省北部一重症感染粪类圆线虫病例的虫卵与虫体进行形态与大小的检测。方法取患者的胃粘膜病理切片、胃肠呕吐物、引流物、尿液在显微镜下观测并摄影。结果在上述标本中检及粪类圆线虫的虫卵、杆状蚴、丝状蚴与雌成虫。虫卵的大小,长为70.42μm,宽44.24μm,卵内含胎胚或幼虫;卵有单个的,也有成串的。因直接与间接自身感染,虫卵、杆状蚴及丝状蚴数量成千累万。成虫均为雌虫,平均体长2236.55μm,宽27.25μm,尾端钝并稍膨大,服阿苯哒唑400mg/d后,排出雌虫累以千计。结论寄生人体的粪类圆线虫的虫卵大小为70.42μm×44.24μm;雌虫食道长,占体长1/3,尾端形状钝并稍膨大;未发现雄成虫。上述结果纠正了有关文献虫卵大小为50～58μm×30～34μm;雌虫食道占虫体2/3、尾部尖及曾在人体发现雄虫的错误。     

幼鼠和老龄鼠尾胶原体外纤维化的形态学比较

目的:通过观察幼鼠和老龄鼠尾胶原体外的纤维化过程以及幼鼠、老龄鼠腰椎松质骨胶原纤维形态学的变化,探讨年龄对胶原纤维化的影响.方法:取2周、20月的鼠尾肌腱各5g,分别利用稀醋酸进行胶原的提取,提取出的胶原低温冻干.取2周龄和20月龄的鼠尾胶原各15 mg,分成3组,每组5 mg,在4℃下分别熔解于10 mmol·L-1...     

人卵泡液对体外培养鼠胚发育的影响

昆明种雌鼠经孕马血清促性腺激素（ＰＳＭＧ）和人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）超数排卵，与雄鼠交配后在注射ＨＣＧ４２ｈ获得晚期２－细胞鼠胚．置Ｈａｍ′ｓＦ~（１０）为主的培养液中，发育到囊胚的平均比率为６２．０％。实验组培养液中加入５％，１０％，１５％（Ｖ／Ｖ）人卵泡液，囊胚比率为２３．７％（Ｐ＜０．０５），１９．５％（Ｐ＜０．０５），１７．８％（Ｐ＜０．０５）。不同浓度卵泡液组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明：（１）２－细胞晚期鼠胚体外培养结果稳定，适宜作人胚胎及卵子体外培养条件的质量监控。（２）人卵泡液抑制鼠胚体外发育，且这种抑制与卵泡液浓度无关。     

曼氏迭宫绦虫虫卵孵化影响因素

目的 本研究探讨实验室条件下环境因素对曼氏迭宫绦虫虫卵孵化的影响,筛选有利因素,以提高曼氏迭宫绦虫虫卵孵化率.方法 在其他条件不变的情况下,分别研究自来水中的残留氯气、虫卵在粪便内滞留时间、不同的外部温度、长时间光照和摇晃孵育体系对孵育体系内虫卵孵化率的影响.结果 室温下,虫卵在自来水、脱氯水和去离子水中20 d的孵化...     

影响体外鼠胚试验标准化的要素分析

不孕症已成为影响人类生殖健康的全球性问题,作为治疗不孕症的一种重要治疗手段,辅助生殖技术经过几十年的发展已经获得长足进步。辅助生殖技术用医疗器械产业快速发展,对此类产品进行风险管理,制定相应的安全性评价检测方法已势在必行。2016年行业标准YY/T 1434-2016《人类体外辅助生殖技术用医疗器械体外鼠胚试验》已经发布,本文就体外鼠胚试验中的关键节点和试验体系要素进行简要综述。     

C_（57）BL／6鼠日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿模型特性初步研究

本实验对所建虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）致敏和未致敏Ｃ５７ＢＬ／６鼠日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿模型特性进行初步探讨，并与Ｃ５７ＢＬ／６鼠自然感染模型进行比较。结果显示：１．经脾注射活卵诱发小鼠肝虫卵肉芽肿方法可行，２．ＳＥＡ致敏组肝虫卵肉芽肿形成过程及细胞组成基本与自然感染组相似，但发展速度较快；３．ＳＥＡ致敏组和自然感染组各期虫卵肉芽肿内ＩｇＧ抗体均呈阳性。从而证明，所建ＳＥＡ致敏Ｃ５７ＢＬ／６鼠日本血吸虫病肝虫卵肉芽肿模型对于肝虫卵肉芽肿防治研究确有价值。     

三种管状属（Syphacia）蛲虫卵盖扫描电镜比较

扫描电镜下，隐藏管状线虫及地鼠管状线虫卵的亚端部各具一境界清晰的卵盖，前者卵盖表面光滑，后者卵盖表面可见数条纵行嵴．明显的为卵壳表面嵴的断裂，嵴间低各区具微孔．盖两侧及亚端都尚有数目不等的较大微孔。鼠管状线虫卵无境界清晰的卵盖，在卵的一极．相当于卵盖区的卵壳表面凸凹不平，似丘状起伏的粗糙区即幼虫孵出区。     

减毒鼠伤寒沙门菌作基因递呈载体的体外试验

目的　体外情况下验证鼠伤寒沙门菌作为基因递呈载体 ,将基因转染入真核细胞的能力 .方法　构建增强绿色荧光蛋白 (EGFP)真核表达载体 pc DNA3.1(+) / EGFP,将重组 pc DNA3.1(+) / EGFP质粒和 pc DNA3.1(+)空载体用电穿孔法分别转入减毒鼠伤寒沙门菌 .分别用 2种重组细菌体外情况下感染小鼠腹腔灌洗巨噬细胞 ,培养 4 8h后 ,流式细胞仪检测两组小鼠巨噬细胞荧光强度 ,验证鼠伤寒沙门菌作为基因递呈载体的能力 .结果　成功构建了 pc DNA3.1(+) /EGFP重组鼠伤寒沙门菌 ;感染细胞培养 4 8h后 ,流式细胞仪检测表明 pc DNA3.1(+) / EGFP重组减毒鼠伤寒沙门菌感染的小鼠巨噬细胞荧光细胞百分比为 4 0 .6 % ,荧光强度为0 .92 7,均明显高于对照组 (分别为 3.8% ,0 .345 ,P<0 .0 1) .结论　减毒鼠伤寒沙门菌是一种有效的基因递呈工具 ,可将外源基因转入真核细胞并在其中表达 ,为进一步应用其研制口服 DNA疫苗奠定了基础 .     

鼠动脉内皮细胞的培养和鉴定

目的：建立体外培养原代鼠动脉内皮细胞（RAEC）的方法,并对培养的细胞进行鉴定,为研究血管疾病打下基础。方法：组织块法分离RAEC,用含胎牛血清的M199营养液培养。相差显微镜、电镜、免疫组化ABC方法进行鉴定。结果：分离的RAEC体外培养一周左右可成长单层,光镜下为扁平多角形,呈铺路石子状排列。电镜可见内皮细胞特性。免疫染色Ⅳ因子相关抗原阳性。结论：所培养的细胞为RAEC。     

体外自发性搏动乳鼠原代心肌细胞的分离培养及超微结构

目的：通过对sD乳鼠体外自发性搏动的心肌细胞（CMs）分离培养,并观察其超微结构,以了解心肌干细胞的特性。方法：用体外分离、纯化培养sD乳鼠自发性搏动的心肌细胞,应用倒置显微镜及透射电镜观察其形态结构与超微结构,并进行心肌特异性标志troponinI（cTnI）的免疫细胞化学鉴定。结果：体外分离、纯化培养出心肌细胞,细胞具有自发性搏动特性,表达心肌特异性抗体TropninI。电镜下可见细胞内出现肌丝样结构及z线结构,细胞普遍存在肌小节,细胞间有闰盘连接;部分细胞表面有大量微绒毛,细胞器丰富,可见内质网、线粒体。结论：体外可分离培养扩增出自律性搏动的CMs,这些细胞表现增殖活跃,具有千细胞的增殖旺盛特性。     

体外传代选择对鼠衣原体质粒缺失株培养特性的影响

目的探讨传代选择对鼠衣原体质粒缺失株CMUT3菌株培养特性的影响及其相应机制。方法采用"无辅助感染"和"辅助感染"交替方式体外传代培养CMUT3菌株,而后观察传代菌株和亲代感染细胞时的吸附效率以及对离心因素的依赖性,并利用下一代测序技术对传代菌株CMUT3G40和亲代CMUT3G0进行全基因组测序分析。结果传代菌株CMUT3G40在感染He La细胞时对离心因素依赖性降低,吸附试验表明CMUT3G40菌株对细胞的吸附能力增强;比较基因组学分析结果表明CMUT3G40菌株与亲代CMUT3G0在tc0237基因存在差异,TC0237Q117E错义突变出现于CMUT3G40菌株基因组(CMUT3G40,99.7%;CMUT3G0,0%)。结论通过体外传代培养CMUT3菌株可获得吸附能力增强的菌株,该表型与传代选择所致的TC0237Q117E密切相关。