胰岛素对大鼠载脂蛋白AⅠ、CⅡ和CⅢ基因表达的影响

我们观察到高糖膳食可引起大鼠血浆甘油三酯和胰岛素水平升高,cAMP含量下降,同时引起大鼠肝脏和小肠载脂蛋白(apo)AⅠ、CⅡ和CⅢ mRNA相对含量下降。这些改变提示胰岛素可能在高糖膳食对     

高糖及高脂膳食对血浆载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅠ、CⅡ、CⅢ及E的影响

作者对高糖及高脂膳食对正常人(10人)及内源性高甘油三酯血症者(10人)血浆载脂蛋白(apo)AⅠ、AⅡ、B100、CⅠ、CⅡ、CⅢ及E含量的影响进行了观察。高糖膳食中糖(主要为淀粉)、脂肪及蛋白质分别占总热量的80％、5％及15％;高脂膳食为40％、45％及15％;正常膳食为60％、25％及15％。结果表明,摄取高糖膳食后,apoAⅠ、B100、CⅠ、CⅡ、CⅢ及E轻度下降,apoAⅡ增加。摄取高脂膳食后,血浆apoB100、AⅠ、CⅡ及CⅢ轻度增加,apoCⅠ及E轻度下降,而apoAⅡ无改变。膳食引起的血浆apo的这些改变可能在血脂代谢中发挥调节作用。     

载脂蛋白AⅠ、CⅡ和CⅢmRNA在大鼠组织中的分布

用人载脂蛋白(apo)AI、CⅡ和CⅢ cDNA作探针,经RNA斑点杂交分析说明大鼠肝脏、小肠、脑和肾脏组织均有apo AⅠ、CⅡ和CⅢ mRNA分布。     

高糖膳食对大鼠肝实质及非实质细胞VLDL HDL及载脂蛋白CⅢ受体的影响

对高糖膳食诱发的内源性高甘油三酯血症大鼠肝脏VLDL、HDL及载脂蛋白(apo)CⅢ的受体功能进行了研究。发现肝非实质细胞VLDL受体存在下降调节机理;VLDL及HDL的受体除了受血浆脂蛋白浓度的下降或上升调节外,还可能与apoCⅢ受体活性的增加有关。     

142例冠心病患者血脂及载脂蛋白AⅠ、B100、CⅠ、CⅡ及CⅢ的研究

对成都地区142例冠心病患者及64例年龄相当的正常人的血脂及载脂蛋白(apo)AⅠ、B100、CⅠ、CⅡ及CⅢ进行了分析。结果表明,患者血清甘油三酯显著升高(P<0.001),高密度脂蛋白胆固醇显著下降(P<0.001),胆固醇除陈旧性心肌梗塞组略有增加外,余未见改变,apoAⅠ及apoC Ⅱ显著下降(P<0.01或P<0.001),apoB100升高(P<0.01或P<0.001),apoCⅢ轻度升高。作者结合成都地区膳食及Ⅳ型高脂血症发生率高的特点对所得结果进行了讨论。     

运动对高脂血症大鼠肝脏胰岛素受体底物-2表达的影响

目的观察高脂血症大鼠运动后肝脏胰岛素受体底物-2(IRS-2)的变化,探讨IRS-2在运动改善大鼠糖脂代谢中的作用。方法将26只Wistar大鼠分为正常对照组(9只)、高脂膳食组(9只)和高脂膳食 60 min运动组(运动组,8只)。测定各组大鼠肝脏IRS-2 mRNA及蛋白表达的变化。结果①高脂膳食组的三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)显著高于正常对照组和运动组(P值均<0.05),运动组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著高于高脂膳食组(P<0.05)。②高脂膳食组大鼠肝脏IRS-2 mRNA及蛋白表达水平显著低于正常对照组和运动组(P值分别<0.01、0.05)。结论高脂饮食在导致大鼠血糖、血脂代谢异常的同时,能降低大鼠肝脏IRS-2的表达,而运动能够增加大鼠肝脏IRS-2的表达,运动对血糖和血脂的改善作用可能与IRS-2的表达增加有关。     

不同糖油比例高脂饲料建立高脂血症大鼠模型的比较

目的 探讨不同糖油比例高脂饲料建立高脂血症大鼠模型的效果.方法 将40只大鼠分为空白对照组和3个高脂饲料(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ)组,每组10只,分别喂饲全价饲料和3种不同糖油比例的高脂饲料,共6周,每周定时称量体质量和检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C).结果 3种配方的高脂饲料对大鼠体质量增长均无明显影响(P＞0.05).各配方组每周的大鼠血清TC含量、LDL-C含量及TC/HDL-C比值均高于空白对照组(P＜0.05或P＜0.01).高脂饲料Ⅱ组每周的大鼠血清TG含量均高于空白对照组(P＜0.01或P＜0.05),高脂饲料Ⅰ组大鼠第1～4周的血清TG含量高于空白对照组(P＜0.01或P＜0.05),高脂饲料Ⅲ组大鼠血清TG含量除第2周高于空白对照组外其余各周与空白对照组均无统计学差-(P＞0.05).结论 高脂饲料Ⅰ和高脂饲料Ⅱ均能快速稳定建立混合型高脂血症大鼠模型,高脂饲料Ⅱ效果更优;高脂饲料Ⅲ仅适用于建立高胆固醇血症大鼠模型.     

高糖状态下心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达变化的观察

目的探讨高糖对大鼠心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取心肌成纤维细胞,采用正常糖(5.5mmol/L,对照组)和高糖(25mmol/L,高糖组)干预。用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白水平的变化。结果与对照组比较,高糖刺激12h可使心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达增加,Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA表达在12h升高,在24h达高峰,Ⅰ型前胶原mRNA升高幅度高于Ⅲ型前胶原mRNA;高糖刺激48h可使Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,Ⅰ型胶原蛋白升高幅度高于Ⅲ型胶原。结论高糖可促进大鼠心肌成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原。     

链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型探讨

目的探讨链脲佐菌素(STZ)配合不同饮食建立糖尿病模型的方法,并对模型大鼠学习记忆能力进行考察,为糖尿病的深入研究及药物开发提供可靠的模型。方法雄性SD大鼠70只,随机分为7组,分别为空白对照组(Ⅰ)；高糖高脂膳食组(Ⅱ)；0周STZ (30 mg/kg) + 高糖高脂膳食组(Ⅲ)；0周STZ (30 mg/kg) + 常规膳食组(Ⅳ)；6周STZ (20 mg/kg) + 高糖高脂膳食组(Ⅴ)；6周STZ (25 mg/kg) + 高糖高脂膳食组(Ⅵ)；6周STZ (30 mg/kg) + 高糖高脂膳食组(Ⅶ)。采用尾静脉注射STZ配合不同饮食制备糖尿病模型,动态监测模型大鼠血糖的变化,生化方法检测大鼠血脂的改变,放免法检测模型大鼠血清胰岛素、胰高血糖素。Morris水迷宫检测不同造模型条件对大鼠空间学习记忆能力的影响。结果与对照组比较,Ⅲ组大鼠于注射72 h后血糖升高明显(P<0.01),至注射第2周血糖升高达顶点(P<0.01),以后逐渐降低,至观察第10周,血糖维持在15 mmol/L(P<0.05)。IV组大鼠于注射72 h后血糖升高,以后迅速降低,至观察第10周,血糖降低至正常水平。Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组大鼠于注射72 h后显著升高,此后呈波浪式变化；随着注射剂量增加,降低程度减慢。高糖高脂饲料喂养10周后,各组大鼠CHO,TG,LDL-C均增加；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组大鼠血清INS水平较对照组增高,除IV外,各组胰高血糖素均高于对照组。水迷宫试验结果显示,Ⅶ组潜伏期延长,与对照组比较,具有统计学意义。结论STZ (30 mg/kg) 配合高糖高脂膳食能够快速、稳定的建立糖尿病大鼠模型,高糖高脂膳食组6周后尾静脉注射STZ (30 mg/kg) 制备模型,血糖升高显著,血清胰岛素水平降低明显,倾向于1型糖尿病模型。     

吗啡对大鼠肝脏蛋白质及核酸分解代谢关键酶基因表达的影响

目的：阐明在转录水平上吗啡对大鼠肝脏谷氨酸脱氢酶（GLDH）及腺苷脱氨酶（ADA）的影响。 方法：50只清洁级成年雌性Wistar大鼠,体重（200±20）g,随机分为5组：生理盐水对照组（对照组）、3 d吗啡组（吗啡Ⅰ组）、7 d吗啡组（吗啡Ⅱ组）、自然停药3 d组（停药Ⅰ组）及自然停药7 d组（停药Ⅱ组）,每组10只。各组动物分别于实验结束次日早8：30处死,采集肝脏组织并提取肝脏总RNA,以看家基因β-肌动蛋白（β-actin）为内参对照,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法分析吗啡给药及停药后大鼠蛋白质分解代谢酶GLDH和核酸分解代谢酶ADA基因表达的变化。 结果：吗啡Ⅰ、Ⅱ组及停药Ⅰ、Ⅱ组大鼠肝脏GLDH mRNA含量分别为对照组的1.02、1.09、1.16及1.46倍,吗啡给药大鼠肝脏中GLDH基因表达随给药时间延长而持续增强,自然停药一定时间内大鼠肝脏中GLDH mRNA含量仍持续增高;吗啡Ⅰ、Ⅱ组及停药Ⅰ、Ⅱ组大鼠肝脏ADA mRNA含量分别为对照组的2.65、1.89、1.18及0.87倍,吗啡Ⅰ、Ⅱ组大鼠肝脏ADA的基因表达均比对照组明显增高,自然停药后大鼠肝脏ADA表达逐渐下降,停药7 d时下降至接近对照组水平。结论：吗啡可以诱导大鼠肝脏GLDH及ADA基因的表达。     

吗啡对培养大鼠胶质细胞瘤C6细胞增殖的抑制作用

目的:探讨吗啡对神经系统细胞的影响及作用机理.方法:应用基因克隆技术克隆大鼠增殖细胞核抗原(PCNA)的cDNA基因片段,并应用逆转录PCR技术研究了吗啡对大鼠胶质细胞瘤C6细胞PCNA基因表达的影响.结果:0.1、1.0 mg.L-1 吗啡作用于大鼠C6细胞24 h后,PCNA mRNA相对含量明显下降,且剂量越高PCNA mRNA相对含量越低.结论:吗啡对正常生长的大鼠C6细胞的增殖具有一定的抑制作用,其机理可能是通过抑制大鼠C6细胞PCNA的转录过程,使PCNA转录水平降低,从而抑制细胞核酸合成代谢.     

银杏叶提取物对肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原及TIMP-1 mRNA、MMP-1mRNA表达的影响

目的观察银杏叶提取物对肝纤维化大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原及TIMP-1 mRNA、MMP-1 mRNA表达的影响,并探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法 30只大鼠随机分为3组(对照组,模型组和治疗组),每组各10只。A组为正常对照组,不做特殊处理,B、C两组制备大鼠肝纤维化模型,同时C组给予银杏叶提取物治疗;采用免疫组化和RT-PCR方法分别检测3组大鼠肝脏组织Ⅰ、Ⅲ型胶原及TIMP-1 mRNA、MMP-1 mRNA的表达情况。结果模型组及治疗组肝脏组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平明显高于对照组(P<0.01),经银杏叶提取物(GbE)灌胃处理后,治疗组肝脏组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平明显低于模型组(P<0.01);模型组及治疗组肝脏组织TIMP-1 mRNA、MMP-1 mRNA表达水平较对照组均显著增高(P<0.01),且治疗组TIMP-1mRNA表达水平明显低于模型组(P<0.01),治疗组MMP-1 mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.01)。结论银杏叶提取物可能通过抑制TIMP-1表达和提高MMP-1 表达而促进Ⅰ、Ⅲ型胶原降解并发挥抗肝纤维化的作用。     

不同膳食对大鼠血糖和脂质代谢的影响

雄性ＳＤ大鼠给予高脂肪膳食，高胆固醇膳食，高糖膳食，高蛋白膳食１５天后，测定血糖和脂质含量，结果显示：高脂肪膳食引起脂肪肝，在血清和肝脏甘油三酯（ＴＧ）增加的同时，使血清总胆固醇（ＴＣ），高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ），低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）和血糖都显著增高，尤其是血糖增加最明显，高胆固醇膳食和肝脏中的ＴＣ，ＴＧ，ＨＤＬ－Ｃ，ＬＤＬ－Ｃ和血糖均明显增加，尤以血和肝脏中的胆固醇和血ＬＤＬ     

Losartan对高氧致慢性肺疾病新生大鼠肺纤维化的干预作用

目的 研究血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)拮抗剂losartan对高氧致慢性肺疾病(CLD)大鼠模型的影响,从而探讨CLD可能的发病机制.方法 将Wistar新生大鼠生后24 h内随机分为空气组(组Ⅰ)、高氧组(组Ⅱ)、高氧+注射用水组(组Ⅲ)和高氧+losartan组(组Ⅳ).组Ⅱ～组Ⅳ吸入氧浓度为85%～90%,组Ⅲ和组Ⅳ自生后6 d每日分别用注射用水和losartan(5 mg/kg)灌胃至实验结束.各组大鼠分别于生后1、3、7、14和21 d处死.HE、Masson染色观察肺组织病理学、胶原纤维沉积的变化.ELISA和逆转录聚合酶链反应检测肺组织Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)蛋白和mRNA的表达.结果 组Ⅱ新生大鼠肺组织病理学改变为肺泡简单化,肺泡数目减少,终末气腔扩张,次级隔数目减少,肺泡间隔显著增厚.组Ⅳ肺泡间隔变薄,但肺泡腔没有明显缩小,且肺泡次级隔仍较少.在生后14和21 d,与组Ⅰ比较,组Ⅱ蓝色胶原纤维所占比例明显增加.组Ⅳ蓝色胶原纤维所占比例较组Ⅱ减少且排列比较疏松,但仍明显高于组Ⅰ.组Ⅱ～组ⅣCol Ⅰ蛋白和mRNA的含量均随日龄增加逐渐增加(P<0.01).组Ⅳ在14 d时Col Ⅰ蛋白和mRNA的含量较组Ⅱ略有下降(P>0.05),21 d时显著下降(P<0.01),但仍高于组Ⅰ(P<0.05).结论 losartan可以抑制高氧致CLD新生大鼠肺胶原的沉积,但是并不能逆转高氧诱导的新生大鼠肺发育阻滞.losartan不能阻止高氧诱导的CLD的发生.     

非酒精性脂肪肝炎脂质过氧化对前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达的影响

目的探讨大鼠非酒精性脂肪肝炎(NASH)形成过程中脂质过氧化对前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达的影响.方法通过高脂饮食制备大鼠高脂血症性脂肪肝模型,并在第20、22周分批处死,采用半定量RT-PCR检测肝组织前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA的表达,测定血清和肝组织丙二酰二醛(MDA)含量,并行肝组织学改变的观察.结果模型组肝组织出现明显脂肪变性和炎症坏死并伴有程度不同的纤维化,在第22周肝组织前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达模型组明显高于正常对照组(P<0.05).血清和肝脏MDA含量,模型组也显著高于正常对照组(P<0.05).在第22周血清和肝脏中MDA含量与肝组织前胶原ⅠmRNA表达呈正相关(r=0.68,P<0.01;r=0.66,P<0.01),与前胶原Ⅲ mRNA无相关性.结论NASH肝纤维化程度与前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达增强相一致;脂质过氧化反应可能对前胶原Ⅰ表达起重要作用.     

中药复方配伍酪蛋白水解物对自发性高血压大鼠的降压作用及机制

目的考察中药复方(CHC)配伍酪蛋白水解物(CH)对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,并探讨其降压机制。方法将SHR分为模型组、CHC-CH药物低、中、高剂量组和阳性对照组及正常对照组,每天灌胃给药1次,每2周测量各组大鼠血压,连续给药28 d后,检测血清一氧化氮(NO)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素-1(ET-1)含量及肝脏中血管紧张素原(AGT)mRNA的表达水平。结果与模型组比较,CHC-CH中、高剂量组血压显著降低,差异有统计学意义(P0.05),CHC-CH中、高剂量组血清中AngⅡ和ET-1水平显著下降,差异有统计学意义(P0.05),CHC-CH中、高剂量组和阳性对照组血清中NO显著升高,差异有统计学意义(P0.05),CHC-CH中、高剂量组和阳性对照组肝脏AGT的mRNA相对表达量显著下降,差异均有统计学意义(P0.05)。结论中药复方配伍酪蛋白水解物有显著降压作用,其降压的作用机制可能为抑制肝脏AGT mRNA的表达从而减少血管紧张素的生成。     

非酒精性脂肪肝炎脂质过氧化对前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达的影响

目的探讨大鼠非酒精性脂肪肝炎(NASH)形成过程中脂质过氧化对前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达的影响.方法通过高脂饮食制备大鼠高脂血症性脂肪肝模型,并在第20、22周分批处死,采用半定量RT-PCR检测肝组织前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA的表达,测定血清和肝组织丙二酰二醛(MDA)含量,并行肝组织学改变的观察.结果模型组肝组织出现明显脂肪变性和炎症坏死并伴有程度不同的纤维化,在第22周肝组织前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达模型组明显高于正常对照组(P<0.05).血清和肝脏MDA含量,模型组也显著高于正常对照组(P<0.05).在第22周血清和肝脏中MDA含量与肝组织前胶原ⅠmRNA表达呈正相关(r=0.68,P<0.01;r=0.66,P<0.01),与前胶原Ⅲ mRNA无相关性.结论NASH肝纤维化程度与前胶原Ⅰ、Ⅲ mRNA表达增强相一致;脂质过氧化反应可能对前胶原Ⅰ表达起重要作用.     

压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA表达的改变及卡托普利的影响

目的 :观察压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA表达的改变及卡托普利的影响。　方法 :36只大鼠随机分为假手术组、模型组、卡托普利组。建立腹主动脉狭窄所致充血性心力衰竭心肌肥厚大鼠模型 ,观察左室质量指数 (LVMI) ,采用免疫组化染色法观察心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原的改变 ,采用RT PCR观察心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA的表达 ,并采用放免分析法检测血浆和心肌血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )水平。　 结果 :模型组LVMI明显高于假手术组 (P <0 .0 0 1) ,卡托普利组LVWI与模型组比明显下降 (P <0 .0 5 ) ;模型组Ⅰ型胶原较假手术组显著升高 (P <0 .0 1) ,卡托普利组较模型组明显下降 (P <0 .0 5 ) ;模型组Ⅲ型胶原与假手术组比显著升高 (P <0 .0 1) ,卡托普利组较模型组显著下降 (P <0 .0 5 )。模型组Ⅰ型胶原mRNA的表达较假手术组显著升高 (P <0 .0 5 ) ,卡托普利组较模型组明显下降 (P <0 .0 5 ) ;模型组Ⅲ型胶原mRNA的表达较假手术组显著升高 (P <0 .0 5 ) ,卡托普利组较模型组显著下降 (P <0 .0 5 )。模型组血浆AngⅡ和左室心肌AngⅡ水平较假手术组显著升高 (P <0 .0 0 1) ,卡托普利组明显降低血浆AngⅡ (P <0 .0 1)和左室心肌AngⅡ水平 (P <0 .0 0 1)。　 结论 :压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA的表达     

高糖及高脂膳食对血糖、胰岛素及血脂的影响

摄取高糖膳食(占总热量80％)第1、3天及第3、5天后,正常人组及高甘油三脂血症组空腹血浆葡萄糖、胰岛素及甘油三酯(TG)含量明显升高(P<0.05及P<0.01);高甘油三酯血症组血浆总胆固醇(TC)及HDL-C明显下降(P<0.05)。摄取高脂膳食(占总热量45％)后,两组TG于第1天,血浆葡萄糖于第5天轻度下降(P<0.05及P<0.01),TC于第3天明显升高(P<0.01);高脂组HDL-C明显下降(P<0.001),对胰岛素水平无影响。作者认为,为防治我国人民以高糖低脂膳食为特点的高脂血症及动脉粥样硬化,应适当降低膳食中糖占总热量的比例。     

Effects of Insulin on Rat Apolipoprote ns AⅠ, CⅡ and CⅢ Gene Expressions

Sprague-Dawley rats were used to studythe effects of insulin on the apo AⅠ, CⅡ andCⅢ gene expressions. Using ~(32)P-labelled apoAⅠ, CⅡ and CⅢ recombinant DNA as probes,we determined the mRNA amounts of apo AⅠ,CⅡ and CⅢ in the liver and intestine of therats injected with insulin(1.5U/kg weight ofrat) by dot blot hybridization method. Afterinjecting insulin, the mRNA amounts of apo