ErbB2受体在糖尿病心肌病大鼠中表达和磷酸化的改变

目的探讨糖尿病心肌病大鼠心肌中ErbB2受体表达和磷酸化的改变。方法选取8周龄雄性SD大鼠36只。按电脑随机数法分为：4周糖尿病组、4周对照组、12周糖尿病组、12周对照组。腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导糖尿病模型。分别在诱导糖尿病后第4、12周测定大鼠心脏质量,计算心脏质量/体质量,采用心脏超声评估大鼠心功能;采用Masson染色方法观察大鼠心肌间质纤维化程度并计算心肌胶原容积分数（collagen volume fraction,CVF）;采用实时聚合酶链反应（PCR）方法检测大鼠心肌组织ErbB2受体mRNA的表达水平;采用蛋白免疫印记法（Western-blot）检测大鼠心肌组织ErbB2受体蛋白磷酸化水平。结果与同期对照组相比,第4,12周糖尿病组心脏质量/体质量均明显增高,差异有统计学意义[（3.41±0.12）mg/g vs.（2.32±0.22）mg/g,P〈0.01;（3.72±0.38）mg/g vs.（2.39±0.0.26）mg/g,P〈0.01]。第4,12周糖尿病组心肌CVF均明显高于同期对照组,差异有统计学意义[4.48%±0.21%vs.2.79%±0.36%,P〈0.01;15.29%±0.67%vs.3.01%±0.13%,P〈0.01]。4周糖尿病组的左心室收缩末内径、左心室射血分数、心肌组织ErbB2受体mRNA表达和蛋白磷酸化水平与4周对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。12周糖尿病组左心室收缩末内径大于12周对照组,差异有统计学意义[（3.570±0.232）mm vs.（3.060±0.376）mm,P〈0.05]。12周糖尿病组左心室射血分数小于12周对照组,差异有统计学意义[72.5%±3.81%vs.82.6%±2.97%,P〈0.01]。与12周对照组比较,12周糖尿病组心肌组织ErbB2受体mRNA表达显著减少,差异有统计学意义（0.73±0.22vs.1.05±0.33,P〈0.01],ErbB2受体蛋白磷酸化水平也显著减少（0.87±0.01vs.0.95±0.02,P〈0.01）。结论糖尿病大鼠心肌组织中ErbB2受体mRNA表达和蛋白磷酸化水平的下调参与了糖尿病心肌病的发展。     

吸烟对大鼠骨骼肌胰岛素受体底物2基因表达的影响

应用RT-PCR和免疫组化检测被动吸烟大鼠骨骼肌胰岛素受体底物2(IRS-2)mRNA和蛋白表达变化,结果显示吸烟使正常组、高脂饲养组大鼠骨骼肌IRS-2 mRNA(0.27±0.02 vs 0.41±0.25,0.40±0.04 vs 0.51±0.02)及蛋白(2.91±0.42 vs 4.90±0.29,2.43 vs 0.36±3.80+0.30)表达显著降低(均P<0.01).糖尿病吸烟组大鼠与对照组则差异无统计学意义(P>0.05),提示IRS-2基因表达的变化可能在吸烟致大鼠胰岛素抵抗发生机制中起一定的作用.     

血管生成素样蛋白2在糖尿病大鼠肾脏中的表达及其干预研究

目的观察厄贝沙坦对血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)在糖尿病大鼠肾脏中表达的影响及作用机制。方法 50只SD雄性大鼠随机分为正常对照(NC)组10只和实验组40只。实验组给予高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素建立T2DM大鼠模型,最终建模成功30只,随机分为糖尿病(DM)组15只和厄贝沙坦(DI)组15只。分别检测8周和12周时体重(BW)、BP、肾重(KW)、血糖、血肌酐(Scr)、BUN、24hUAlb水平。镜下观察肾组织病理改变,免疫组织化学染色法、RT-PCR检测肾组织ANGPTL2mRNA及蛋白表达的变化。结果 DM组24hUAlb水平高于DI组和NC组[8周:(7.43±0.36)vs(5.27±0.22)vs(0.74±0.06)mg/24h;12周:(7.84±0.32)vs(5.11±0.14)vs(0.74±0.08)mg/24h,P<0.05];DM组8周和12周ANGPTL2mRNA的表达水平较NC和DI组升高(P<0.05)。结论 ANGPTL2在糖尿病大鼠肾脏的表达量逐渐升高,而厄贝沙坦可降低其表达。     

缬沙坦对糖尿病大鼠klotho蛋白及氧化应激影响的研究

目的探讨缬沙坦对糖尿病大鼠肾脏klotho蛋白(KL)和氧化应激的影响。方法糖尿病大鼠随机分为糖尿病(DM)组和缬沙坦干预(VA)组,另设对照(NC)组,每组20只。VA组予缬沙坦55mg/(kg·d)灌胃,NC组及DM组予等量生理盐水灌胃,于4周及12周测定大鼠肾功能、血清KL、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,免疫组织化学测定肾脏KL的表达水平。结果与NC组比较,DM组4周和12周时KL含量降低[(4.39±0.35)vs(3.73±0.69)ng/ml,(4.16±0.28)vs(3.30±0.37)ng/ml],SOD活性降低[(1.87±0.84)vs(1.69±0.29)U/ml,(1.79±0.48)vs(1.50±0.26)U/ml],8-OHdG增加[(2.74±0.11)vs(3.32±0.91)ng/ml,(2.86±0.28)vs(3.21±0.25)ng/ml](P0.05);与DM组比较,VA组上述指标亦改善,差异有统计学意义(P0.05)。结论糖尿病大鼠KL的表达降低,缬沙坦可提高糖尿病大鼠肾脏KL的表达,抑制氧化应激反应。     

戒烟对吸烟致敏大鼠气道5-脂氧合酶及其mRNA表达的影响

目的 通过研究戒烟对吸烟致敏大鼠气道5-脂氧合酶（5-LO）及其mRNA表达的影响,探讨吸烟及戒烟对支气管哮喘（简称哮喘）气道炎症的影响,为吸烟哮喘患者戒烟及治疗提供依据.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、致敏组、吸烟组及戒烟组,每组10只.后3组应用卵白蛋白（OVA）致敏并长期（8周）吸入激发,制备哮喘模型;在激发第3周开始,将吸烟致敏组及戒烟致敏组大鼠置于自制熏箱内进行被动吸烟,吸烟时间为20周,戒烟时间为10周.采用免疫组织化学及原位杂交法检测各组大鼠气道5-LO蛋白及其mRNA的表达.结果 ①吸烟组气道5-LO蛋白的表达（32.58±2.78）及戒烟组气道5-LO蛋白的表达（26.36±2.34）明显高于致敏组（21.65±2.12）和对照组（15.38±1.68）,差异有统计学意义（P值均＜0.01）;戒烟组较吸烟组表达降低,差异有统计学意义（P＜0.01）;致敏组高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）.②吸烟组气道5-LO mRNA的表达（34.68±2.90）及戒烟组气道5-LO mRNA的表达（27.16±2.38）均高于致敏组（23.55±2.28）和对照组（15.78±1.72）,差异有统计学意义（P值均＜0.01）;戒烟组较吸烟组表达降低,差异有统计学意义（P＜0.01）;致敏组高于对照组,差异有统计学意义（P ＜0.01）.结论 吸烟可使致敏大鼠气道5-LO及mRNA表达增多,加重气道炎症.戒烟后其表达均有所下降,提示戒烟可减轻气道炎症,是防止哮喘发作的有效措施.     

氨氯地平对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨苯磺酸氨氯地平对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的影响.方法 21只SD雄性大鼠分为3组:正常对照组(对照组,n=6)喂以普通饲料;余15只大鼠高糖高脂膳食喂养6周后,一次性腹腔内注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)30 mg/kg;2周后血糖升高≥16 mmol/L者成模,共12只,再随机分为糖尿病组(糖尿病组,n=6)和糖尿病大鼠应用苯磺酸氨氯地平治疗组(治疗组,1 mg/kg·d, n=6).12周后光镜观察各组肾脏病理改变;流式细胞术检测大鼠肾组织细胞凋亡率;检测各组内生肌酐清除率(Ccr)和24 h尿白蛋白的排泄率(Uaer).结果 12周后,糖尿病组大鼠肾小球细胞外基质增生,部分肾小管轻度萎缩或管腔扩张,上皮细胞肿胀,胞浆内可见脂肪空泡变性,但治疗组较糖尿病组病变减轻;糖尿病大鼠较正常组的肾细胞凋亡率明显升高,氨氯地平能明显降低肾细胞凋亡率[对照组(13.8±1.3)% vs糖尿病组(26.5±2.7)% vs治疗组(20.0±2.0)%,P<0.05],增加肌酐清除率[对照组(0.110±0.020) vs糖尿病组(0.021±0.001) vs治疗组(0.065±0.004)mL/min,P<0.05],降低蛋白排泄率[对照组(0.081±0.001) vs糖尿病组(0.150±0.004) vs治疗组(0.07±0.01)mg/24 h,P<0.05].结论 苯磺酸氨氯地平可减轻糖尿病大鼠肾脏病理损害,减少糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡,可使Ccr下降减轻、Uaer排泄减少,以达肾脏的保护作用.     

金黄益胆颗粒对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中ICAM-1、TGF-β1表达的影响

目的:探讨金黄益胆颗粒对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织中细胞间黏附分子1(ICAM-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法:清洁级SD♂大鼠54只,随机分为对照组、模型组、治疗组,每组18只,各组又分为2h组、6h组及12h组3个时间段组,每个时间段组6只大鼠.5%牛磺胆酸钠逆行注射建立SAP大鼠动物模型.行胰腺组织镜下病理评分,免疫组织化学SP两步法检测胰腺组织中ICAM-1、TGF-β1蛋白的表达.结果:Schmidt胰腺组织镜下评分显示,与模型组比较,造模后6h、12h,治疗组大鼠胰腺组织的病理损害程度明显减轻(10.33±0.82vs14.00±0.63,P=0.000;9.67±0.82vs15.33±0.52,P=0.000).治疗组12h后ICAM-1阳性细胞表达明显减少(3.67±0.76vs6.40±0.72,P=0.000).治疗组6h和12h后TGF-β1表达明显增强(3.77±0.78vs0.60±1.00;5.17±1.42vs2.23±1.01,均P=0.000).结论:金黄益胆颗粒能够降低ICAM-1的表达,升高TGF-β1的表达,显著改善早期SAP大鼠胰腺...     

不同吸烟量对大鼠气道上皮细胞中细胞问黏附分子1表达的影响

目的 通过研究不同吸烟量、不同吸烟持续时间吸烟及戒烟对大鼠气道上皮细胞中细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA及其蛋白水平表达的影响,探讨吸烟和戒烟与慢性阻塞性肺疾病气道炎症的关系.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、长期大量吸烟组、长期小量吸烟组、短期大量吸烟组、长期大量吸烟后戒烟组,每组各8只,用原位杂交法及免疫组织化学法检测ICAM-1 mRNA及其蛋白在各组大鼠气道上皮细胞中的表达.结果 与对照组ICAM-1 mRNA及其蛋白(1.45±0.98,8.83±0.77)水平比较,长期大量吸烟组(6.93±1.44,19.22±0.22)、短期大量吸烟组(2.92±0.67,12.91±1.31)、长期小量吸烟组(4.76±0.68,14.03±2.39)、长期大量吸烟后戒烟组(4.84±0.94,14.95±1.82)表达均明显升高,以长期大量吸烟组最为显著,差异均具有统计学意义(P＜0.05).与长期大量吸烟组相比,长期小量吸烟组、短期大量吸烟组、长期大量吸烟后戒烟组ICAM-1 mRNA及其蛋白水平均低于长期大量吸烟组,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 吸烟引起大鼠气道上皮细胞ICAM-1 mRNA及其蛋白的表达水平升高,并随吸烟时间和量的增加其表达增加,戒烟后其表达可下降.提示戒烟可减轻气道炎症,是预防慢性阻塞性肺疾病的有效措施.     

短期吸烟对糖尿病大鼠血脂水平的影响

高糖高脂喂养联合链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,给予8或12周被动吸烟,检测大鼠血脂变化.结果 显示糖尿病吸烟组总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、空腹胰岛素、游离脂肪酸升高,高密度脂蛋白胆同醇下降(均P<0.05).停止吸烟4周后总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、空腹胰岛素、游离脂肪酸下降(均P<0.01),与糖尿病对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05).提示吸烟可能与血脂紊乱及胰岛素抵抗之间有密切的联系,而戒烟在一定程度上可逆转吸烟带来的危害.     

氨氯地平对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的探讨苯磺酸氨氯地平对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的影响。方法 21只 SD 雄性大鼠分为3组:正常对照组(对照组,n=6)喂以普通饲料;余15只大鼠高糖高脂膳食喂养6周后,一次性腹腔内注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)30 mg/kg;2周后血糖升高≥16 mmol/L 者成模,共12只,再随机分为糖尿病组(糖尿病组,n=6)和糖尿病大鼠应用苯磺酸氨氯地平治疗组(治疗组,1 mg/kg·d,n=6)。12周后光镜观察各组。肾脏病理改变;流式细胞术检测大鼠。肾组织细胞凋亡率;检测各组内生肌酐清除率(Ccr)和24 h 尿白蛋白的排泄率(Uaer)。结果 12周后,糖尿病组大鼠肾小球细胞外基质增生,部分。肾小管轻度萎缩或管腔扩张,上皮细胞肿胀,胞浆内可见脂肪空泡变性,但治疗组较糖尿病组病变减轻;糖尿病大鼠较正常组的肾细胞凋亡率明显升高,氨氯地平能明显降低肾细胞凋亡率[对照组(13.8±1.3)% vs 糖尿病组(26.5±2.7)%vs 治疗组(20.0±2.0)%,P<0.05],增加肌酐清除率[对照组(0.110±0.020)vs 糖尿病组(0.021±0.001)vs 治疗组(0.0...     

吸烟所致肺气肿模型大鼠戒烟后肺病理及炎性介质的变化

目的 探讨吸烟所致肺气肿模型大鼠在戒烟后肺组织病理及炎性介质表达变化规律.方法 选用Wistar雄性大鼠80只,随机分为非吸烟正常对照组及吸烟所致肺气肿模型戒烟0 d、1 w、2 w、4 w、6 w、8 w、12 w组.采用酶联免疫吸附方法测定各组大鼠血清中IL-8的蛋白质含量,S-P免疫组化学方法检测肺组织NF-кB p65的表达,并光镜观察HE染色切片、对大鼠气道炎症进行病理学评分.结果 肺气肿大鼠模型成功复制:肺组织HE染色切片,光镜下观察,其病理变化与人类肺气肿相似;肺气肿各时相戒烟组大鼠血清IL-8浓度、肺组织NF-кB的表达及病理评分较未吸烟正常对照组明显升高(P<0.05);肺气肿各相邻时相戒烟组间比较,各检测指标有上升趋势,戒烟12 w组大鼠血清中IL-8的蛋白质含量、肺组织NF-кB p65 的表达、气道炎症的病理学评分均较戒烟0天组明显升高(P<0.05).结论 吸烟所致肺气肿模型大鼠形成后,其气道炎症在戒烟后12周内仍可见持续加重.     

戒烟对吸烟大鼠气道上皮细胞核因子κB、基质金属蛋白酶9及金属蛋白酶组织抑制物1表达的影响

目的 通过研究吸烟及戒烟大鼠气道上皮细胞核因子κB(NF-κB)、细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)及细胞金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)mRNA及蛋白质的表达水平,探讨吸烟及戒烟对慢性阻塞性肺疾病气道炎症和气道重塑的影响.方法 雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照组、吸烟组和戒烟组,每组8只.分别采用原位杂交和免疫组织化学的方法检测各组大鼠气道上皮细胞中NF-κB、MMP-9及TIMP-1 mRNA及蛋白的表达水平.结果 ①与对照组(0.29±0.06,0.29±0.06)相比,吸烟组(0.45±0.04,0.41±0.03)、戒烟组(0.40±0.05,0.37±0.03)NF-κB mRNA和蛋白表达水平均增高(P值均＜0.05);与吸烟组相比,戒烟组NF-κB mRNA和蛋白表达水平降低(P值均＜0.05).②与对照组(0.30±0.06,0.30±0.06)相比,吸烟组(0.52±0.03,0.51±0.07)、戒烟组(0.38±0.03,0.33±0.02)MMP-9 mRNA和蛋白表达水平均增高(P值均＜0.05);与吸烟组相比,戒烟组MMP-9mRNA和蛋白表达水平均降低(P值均＜0.05).③与对照组(0.26±0.04,0.26±0.04)相比,吸烟组(0.49±0.05,0.37±0.03)、戒烟组(0.42±0.04,0.35±0.03)TIMP-1 mRNA和蛋白表达水平均增高(P值均＜0.05);与吸烟组相比,戒烟组TIMP-1 mRNA和蛋白表达水平降低(P值均＜0.05).④与对照组(1.00±0.02,1.00±0.02)相比,吸烟组(1.07±0.14,l.37±0.19)MMP-9/TIMP-1 mRNA和蛋白表达值大于1(P值均＜0.05),而戒烟组(0.92±0.13,0.94±0.10)MMP-9/TIMP-1 mRNA和蛋白表达值小于1(P值均＜0.05).⑤各组NF-κB和MMP-9的mRNA及蛋白的表达呈正相关(r值分别为0.87和0.66,P值均＜0.05).结论 吸烟大鼠气道上皮细胞NF-κB、MMP-9和TIMP-1 m-RNA及蛋白的表达水平升高,并且MMP-9/TIMP-1大于1,戒烟后NF-κB、MMP-9和TIMP-1的表达有所下降,且MMP-9/TIMP-1小于1,提示吸烟可以引起气道上皮的炎症和重塑,戒烟可以减轻气道炎症和重塑.     

戒烟对大鼠血清瘦素、脂联素等炎症因子的影响

目的 通过研究戒烟对大鼠血清瘦素、脂联素、白介素6(IL-6)及C反应蛋白(CRP)水平的影响,探讨瘦素和脂联素等炎症因子在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病炎症反应中的作用.方法 雄性Wistar大鼠30只,随机分为吸烟组、戒烟组及对照组,每组各10只.吸烟组每次吸烟10支,每天吸烟2次,每周吸烟6 d,共吸烟20周;戒烟组为吸烟20周后戒烟10周.采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清瘦素、脂联素及CRP水平,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清IL-6水平.结果 ①与对照组[(128.00±13.25) ng/L]比较,吸烟组[(56.23±8.64)ng/L]及戒烟组[(60.36±7.42)ng/L]血清瘦素水平均降低(P值均<0.05);戒烟组与吸烟组比较差异无统计学意义.②与对照组L(0.369±0.032)μg/L]比较,吸烟组[0.322±0.045)μg/L]血清脂联素水平降低(P<0.05),而戒烟组L(0.333±0.059)μg/L]与对照组、吸烟组比较差异无统计学意义.③与对照组[(23.94±4.44)ng/L]比较,吸烟组[(39.67±3.13)ng/L]及戒烟组[(34.27±7.01)ng/L]血清IL-6水平均升高(P值均<0.05);戒烟组较吸烟组水平降低(P<0.05).④与对照组[(494.49±124.44)μg/L]比较,吸烟组[(809.50±141.66)μg/L]及戒烟组[(632.60±182.85)μg/L]血清CRP水平均升高(P值均<0.05);戒烟组较吸烟组水平降低(P<0.05).⑤脂联素水平分别与IL-6和CRP呈负相关(γ值分别为-0.198、-0.489,P值均<0.05);IL-6水平与CRP呈止相关(γ=0.598,P<0.05).结论吸烟可使大鼠血清瘦素与脂联素水平下降,IL-6与CRP水平升高;戒烟后,瘦素、脂联素水平呈上升趋势,IL-6和CRP水平则相应下降.此外,脂联素水平分别与IL-6和CRP呈负相关.提示瘦素、脂联素等炎症因子可能参与吸烟所致慢性阻塞性肺疾病的炎症反应.     

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾组织蛋白激酶C-β表达的影响

目的观察二甲双胍(MET)对T2DM模型SD大鼠肾组织蛋白激酶C-β(PKC-β)mRNA和蛋白表达的影响,探讨MET对糖尿病肾脏疾病(DKD)肾损害的保护机制。方法高脂饲料喂养合并从腹腔注射小剂量STZ建立T2DM大鼠模型。随机分为正常对照组(NC,n=10)及模型组(DM组,n=32)。27只大鼠造模成功后再将其随机分成二甲双胍治疗组(MET,n=8)、格列本脲治疗组(GLY,n=9)及糖尿病对照组(T2DM,n=10)。给药8周后,观察各组HbA_1c、FBG、BUN尿白蛋白排泄和基底膜厚度(GBMT)情况;同时检测肾小球PKC-β蛋白表达和肾组织PKC-β_(mRNA)表达情况。结果 8周末,与NC组比较,T2DM组FBG[(4.45±1.07)vs(15.6±1.56)mmol/L]和HbA_1c[(4.13±0.89)%vs(12.41±0.61)%]升高(P0.05),PKC-β_(IOD)[(22.24±2.39)vs(42.00±4.90)]和PKC-β_(mRNA)[(1.00±0.04)vs(2.16±0.13)]升高(P0.05);与T2DM组比较,MET组PKC-β_(IOD)[(42.00±4.90)vs(27.32±1.71)]和PKC-β_(mRNA)[(2.16±0.13)vs(1.11±0.02)]降低(P0.05);与GLY组比较,MET组PKC-β_(IOD)[(30.73±1.95)vs(27.32±1.71)]和PKC-β_(mRNA)[(1.75±0.02)vs(1.11±0.02)]降低(P0.05)。结论 MET可减轻PKC-β在T2DM大鼠肾组织的高表达,该作用可能是其肾脏保护机制之一。     

金雀异黄素对糖尿病大鼠糖脂代谢及肾脏的影响

目的探讨金雀异黄素(又称染料木黄酮,genistein,Gen)对糖尿病(DM)大鼠血糖、胰岛素敏感性、血脂、肾功能等代谢指标以及肾脏病理的影响。方法雄性SD大鼠45只,分为正常对照组(10只,普通饲料自由饮食)、DM组(4周组,9只;8周组,8只;普通饲料自由饮食)、DM Gen组(4周组,10只;8周组,8只;普通饲料自由饮食 Gen 30 mg.kg-1.d-1)。DM组及DM Gen组均按60 mg/kg的剂量腹腔内注射STZ建立DM模型。于实验4周、8周末禁食12 h,处死部分大鼠取动脉血检测FBG、FIns、血脂及BUN、Cr;取肾脏制作组织切片行HE染色。结果DM 8周大鼠FBG、ISI、TC、TG、BUN、Cr分别为35.2±1.8 mmol/L、-5.83±0.20、2.50±0.61 mmol/L、1.26±0.30 mmol/L、18.4±0.7 mmol/L、70.2±7.8μmol/L,相应DM Gen 8周组的结果分别为18.8±3.4 mmol/L、-5.27±0.47、1.43±0.19 mmol/L、1.11±0.34 mmol/L、10.0±1.7 mmol/L、51.7±4.5μmol/L。Gen可减轻肾小球肥大、肾小管扩张。结论Gen可改善DM大鼠的糖脂代谢紊乱,减轻肾脏组织病理变化,改善肾功能,延缓糖尿病肾病的进展。     

2型糖尿病大鼠胸主动脉上大电导钙激活钾通道α、β_1亚基蛋白及mRNA的变化

目的探讨不同病程T2DM大鼠胸主动脉上大电导钙激活通道(BKCa)蛋白及mRNA表达的变化。方法 60只大鼠被随机分成对照(Con)组10只和模型(M)组50只。Con组予常规饲养,M组采用高脂高糖饮食且腹腔注射小剂量STZ建立T2DM大鼠模型。免疫印记法和RT-PCR测定胸主动脉BKCa通道α,β1亚单位的蛋白和mRNA表达水平。结果 8周、12周M组BKCaα亚单位蛋白在胸主动脉中的表达为(0.942±0.324)和(0.925±0.521);BKCaɑ亚单位mRNA表达为(0.93±0.03)和(0.92±0.07)。(2)8周、12周M组BKCaβ1亚单位蛋白在胸主动脉中的表达为(0.452±0.25)和(0.401±0.34);BKCaβ1亚单位mRNA表达为(0.56±0.19)和(0.43±0.06)。与Con组比较,8周、12周M组β1亚单位蛋白和mRNA表达降低(P0.05)。结论 T2DM大鼠大血管上BKCa通道β1亚单位蛋白及mRNA的表达在8周及12周降低。     

塞来昔布对大鼠重症急性胰腺炎的治疗作用

目的:探讨塞来昔布对大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)治疗效果及机制.方法:SD大鼠共135只,其中75只随机平均分为SAP组,低剂量及高剂量塞来昔布组,观察其生存率;60只SD大鼠随机平均分为对照组(假手术组),SAP组,低剂量及高剂量塞来昔布组.胆胰管内注射牛磺胆酸钠溶液造模,ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-6的表达;RT-PCR检测胰腺组织COX-2 mRNA的表达;HE染色、胰腺组织半定量积分评价胰腺病理学改变.结果:塞来昔布可降低大鼠SAP的病理损害积分,高剂量组在造模后的24 h可显著减低组织水肿(2.28±0.30 vs 2.73±0.22,P<0.05);在12和24 h均可显著降低腺泡坏死(2.03±0.15vs 2.48±0.24,2.09±0.10 vs 2.65±0.25,均p<0.05)及炎性细胞浸润(1.80±0.22 vs 2.51±0.17,1.57±0.26 vs 2.20±0.22,均p<0.05).造模后COX-2 mRNA表达及TNF-α、IL-1β及IL-6产生增加.塞来昔布治疗组上述检测指标明显低于SAP组(均P<0.05),且随塞来昔布剂量的增加其抑制作用逐渐增强.塞来昔布高剂量治疗组可显著提高大鼠SAP的生存率(16%vs 52%,P<0.05).结论:塞来昔布可能通过抑制TNF-α、IL-1β及IL-6的表达,改善胰腺局部病理改变及预后.     

下丘脑STAT3在非酒精性脂肪性肝病大鼠发病中的作用及降脂颗粒的干预

目的:观察非酒精性脂肪肝大鼠下丘脑STAT3蛋白表达和组成性激活的改变,以及中药降脂颗粒对其干预作用.方法:高脂饲料制备非酒精性脂肪肝大鼠模型,待造模成功后将大鼠随机分为模型对照组(n=10)、辛伐他汀组(n=10)、降脂颗粒组(n=10),每日进行ig药物干预,4 wk,并设空白对照组(n=8).比色法检测血清TG、TC;HE染色观察观察肝组织脂肪变和炎症;Western blot检测下丘脑磷酸化STAT3蛋白表达,EMSA检测下丘脑STAT3的组成性激活状态.结果:磷酸化STAT3蛋白表达及其组成性激活在非酒精性脂肪肝大鼠均明显降低,降脂颗粒用药组及辛伐他汀组能下调大鼠血清TG(0.54±0.09 mmol/L,0.68±0.08 mmol/Lvs 0.84±0.09 mmol/L,均P<0.05)、TC(1.85±0.31 mmol/L,2.08±0.30 mmol/L vs 2.84±0.30mmol/L,均P<0.05)水平,减轻肝脂肪变(2.26±0.52,2.57±0.67 vs 3.10±0.57,均P<0.05)和炎症程度(0.68±0.67,0.95±0.6 vs 1.52±0.71,均P<0.05);上调下丘脑组织磷酸化STAT3蛋白表达及其组成性激活.结论:STAT3在非酒精性脂肪肝大鼠下丘脑组织表达和激活明显下降,中药降脂颗粒对非酒精性脂肪肝有很好的治疗作用,并可上调STAT3的表达和组成性激活.     

蛋白激酶B抑制剂对糖尿病大鼠视网膜血管新生和炎症反应抑制作用的研究

目的研究蛋白激酶B(Akt)抑制剂抑制DR大鼠视网膜血管新生与炎症反应,以减轻DR大鼠视网膜病变的作用机制。方法 54只无眼部疾病SD大鼠随机分为正常对照组(NC,n=18),其余大鼠采用腹腔注射STZ建立DR模型后,随机分为DR组和Akt抑制剂组(Akt组),经干预后,DR组最终入组13只,Akt组最终入组12只。眼部解剖后对视网膜组织进行检测,评估Akt抑制剂对血管新生和炎症的影响。Western blot法检测磷酸化Akt(p-Akt)、血管内皮生长因子α(VEGF-α)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)和磷酸化p38(p-p38)的蛋白表达水平,HE染色法观察视网膜整体形态及视神经节细胞数目,免疫组织化学法检测VEGF-α表达,ELISA法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)。结果与NC组比较,DR组视网膜组织中p-Akt、VEGF-α、p-p38和p-NF-κB p65的蛋白表达升高[(0.23±0.04)vs(0.75±0.05),(0.41±0.04)vs(4.82±0.61),(0.21±0.03)vs(0.83±0.11),(0.08±0.03)vs(0.32±0.04),P0.01];DR组视网膜组织中VEGF-α表达、TNF-α和IL-1β含量均升高[(22.35±1.75)%vs(80.23±4.16)%,(202.78±23.54)vs(1578.49±123.46)pg/ml,(48.54±11.79)vs(923.42±42.63)pg/ml,P0.01]。与DR组比较,Akt组视网膜厚度增加、视网膜神经节细胞数目增多[(39.83±1.64)vs(43.94±2.05)μm,(48±7)vs(63±9)个,P0.01],VEGFα表达、TNF-α和IL-1β含量均降低[(80.23±4.16)%vs(39.46±3.78)%,(1578.49±123.46)vs(763.45±47.78)pg/ml,(923.42±42.63)vs(315.59±56.79)pg/ml,P0.01]。结论 Akt抑制剂可能通过抑制视网膜血管新生与炎性反应,以减轻大鼠DR发展。     

大黄素对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2及金属蛋白酶组织抑制剂-2表达的影响

目的探讨大黄素对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)/金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响。方法实验大鼠随机分为健康对照(NC)组、糖尿病模型(DM)组及大黄素治疗(DM+Emodin)组(40mg/kg),各12只。至36周时处死所有大鼠,收集血、尿标本,检测生化指标和24hUAlb;取肾组织标本,采用RT-PCR和Western blot检测相关mRNA及蛋白。结果 36周时,与NC组比较,DM组和DM+Emodin组血糖[(6.44±0.83)vs(33.11±3.02),(32.39±2.78)mmol/L]、HbA1c[(5.6±0.6)%vs(18.0±3.2)%,(20.1±3.3)%]、SBP[(108±9)vs(131±14),(131±8)mmHg]、肾重/体重比[(5.3±0.6)vs(11.5±1.0),(10.4±1.3)]、eGFR[(5.9±1.2)vs(12.9±2.2),(11.2±1.2)ml/(min·173m2)]及UAlb[(3.3±1.8)vs(52.8±30.1),(26.6±10.5)mg/24h]升高(P0.001),DM+Emtin组肾重/体重比、eGFR及UAlb均低于DM组(P0.05或P0.01)。与DM组比较,DM+Emodin组MMP-2 mRNA[(1.43±0.36)vs(1.13±0.19),P0.05]、TIMP-2 mRNA[(1.70±0.27)vs(1.23±0.18),P0.001]上调现象被抑制,且MMP-2[(2.45±0.24)vs(2.98±0.55),P0.01]、TIMP-2[(2.07±0.30)vs(1.59±0.37),P0.001]蛋白表达水平下调。结论大黄素可以减少糖尿病大鼠肾组织中MMP-2/TIMP-2表达,减少蛋白尿,可能延缓DN进展。