急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因c—myc的表达

研究急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达及临床意义。方法采用蛋白质免疫印渍和单克隆抗体免疫细胞化学染色方法检测３０例ＡＮＬＬ细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达。结果１９例表达阳性，阳性率为６３％。ＡＮＬＬ中白血病细胞的阳性细胞百分率为２９％－９６％，ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中表达水平不一样；ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关，和患者年龄，性别，外周血白细胞计数。     

P-gp在急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

目的探讨P-糖蛋白（P-gp）在急性淋巴细胞白血病的表达，评估P-gp与急性淋巴细胞白血病预后的关系。方法用流式细胞仪，采用直接免疫荧光法，检测40例急性淋巴细胞白血病患者抗P-gp单克隆抗体UIC2及CD3、CD5、CD7、CD10、CD19、CD13、CD14、CD33、CD34的表达，被检患者外周血或骨髓中幼稚细胞数≥50％，并设非耐药细胞系K562为阴性对照。结果40例ALL患者中16例P-gp表达阳性，P-gp阳性表达率为40％。髓系抗原表达阳性者P-gp阳性率为33．3％，髓系抗原表达阴性者P-gp阳性率为45．5％，P〉0．05。4例急性T淋巴细胞白血病CD7表达阳性，且P-gp表达皆阳性。P-gp阳性组16例患者中10例治疗有效，P-gp阴性组24例中20例治疗有效，P-gp表达阳性者中3例6个月内复发。结论急性淋巴细胞白血病P-gp阳性表达率为40％；P-gp表达与髓系抗原表达无相关性，与CD7表达有关；P-gp表达阳性与急性淋巴细胞白血病化疗效果有相关性，P-gp表达阳性者易早期复发。     

白血病患者骨髓细胞中载脂蛋白E的表达

目的：探讨白血病患者骨髓细胞中载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ） 的表达。方法：应用免疫组化ＳＰ法检测正常人骨髓细胞及白血病患者骨髓细胞ＡｐｏＥ的表达,正常人骨髓涂片６ 例,急性淋巴细胞性白血病１３ 例,急性髓性细胞白血病２９ 例。结果：ＡｐｏＥ在所检正常人骨髓涂片中均表达（ 着色程度＋ ～《） ,骨髓细胞表达阳性率为２０％ ±４％ 。急性淋巴细胞白血病原始细胞中不表达ＡｐｏＥ,急性髓性细胞白血病原始细胞不同程度表达ＡｐｏＥ,其中急性粒细胞白血病部分分化型着色＋ ,原始细胞表达阳性率为７０％ ±３２ ％ ,急性早幼粒细胞白血病着色《～》,阳性率８９％ ±４ ％ ,急性粒单细胞白血病着色（＋ ～《）,阳性率５０％ ±３％ ,急性单核细胞白血病着色《,阳性率１５ ％ ±４ ％ 。结论：ＡｐｏＥ可作为鉴别髓性和淋巴细胞白血病的一项指标     

急性白血病的抗原表达及其临床意义

目的：探讨成人急性白血病（AL）的抗原表达及其临床意义。方法：采用直接免疫荧光法标记，流式细胞仪检测分析69例AL的免疫表型，结果：（1）29例成人急性淋巴细胞白血病（ALL）髓系抗原阳性表达率为30％，其中CD13为20．7％，CD33为10．3％，T－ALL和B－AL 系抗表达无显著性差异（P＝0．367）；CD34表达阳性的ALL髓系抗原表达率明显高于CD34表达阴性的ALL髓系抗原表达率（77．8％vs13.3%,P=0.036);ALL髓系抗原阳性表达的CR率明显低于髓系抗原阴性表达的CR率（33．3%vs80%,P=0.0203);(2)40例急性髓性白血病（AML）淋系抗原表达率为30％，其中CD7为15％，CD19为12．5％，CD2为2．5％，CD7主要分布在M1，M2亚型中，CD34阳性AML的淋系抗原表达率明显高于CD34阴性AML的淋系抗原表达率（61．1％vs4.5%,P=0.000125);AML淋系抗原阳性表达的CR率低于淋系抗原阴性表达的CR率，但差异无显著性（50％vs 71.4%,P=0.126)，结论：成人AL的抗原错译表达率约为30％，CD34阳性AL的抗原错译表达率明显高于CD34阴性AL的抗原错译表达率，有抗原错译表达的AL的CR率低于无抗原错译表达的AL和CR率。     

恶性血液病患者CD54表达及其与临床特征、疗效的关系

目的 探讨细胞间黏附分子－1（CD54）在恶性血液病的表达。方法 用免疫荧光方法检测19例急性髓系白血病，34例急性淋巴细胞白血病，10例慢性粒细胞白血病，15例多发性骨髓瘤，21例非霍奇金淋巴瘤和16例正常人骨髓单个核细胞表达CD54。结果 （1）除多发性骨髓瘤，慢性凿细胞性白血病外，急性髓性白血病细胞，非霍奇金淋巴瘤，急性淋巴细胞白血病患骨髓单个核细胞表面CD54表达低于正常人。（2）CD54在急性早幼粒细胞白血病（M3）表达高于在其它类型急性髓系白血病细胞表达，在T－急性淋巴细胞白血病表达明显低于B－急性淋巴细胞白血病表达。（3）高白细胞数，中枢神经系统白血病，脾肿大表达水平下降（P＜0．05）。（4）CD54的表达在急性淋巴细胞白血病完全缓解组明显高于未缓解组，P＜0．01。随着病情缓解CD54表达可升至正常范围。结论 不同的恶性血液病，黏附分子CD54表达不同，并与细胞类型，临床特征及疗效有关。     

成人急性白血病患者骨髓细胞NG2表达的检测

目的：检测成人急性白血病细胞中ＮＧ２的表达,了解其与临床表现、免疫表型及疗效的关系。方法：用流式细胞仪－间接免疫荧光标记法检测６２例成人急性髓细胞白血病（ａｄｕｌｔ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ,ＡＭＬ）和２４例急性淋巴细胞白血病（ａｃｕｔｅ ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ,ＡＬＬ）患骨髓细胞膜表面人类小鼠硫酸透明质酸糖蛋白ＮＧ２同源物的表达。结果：在１９．３５％的ＡＭＬ和４．１７％的ＡＬＬ中此抗原表达阳性。阳性与对照在临床特征和血象方面无差异。但在ＡＭＬ中与ＦＡＢ分型有一定的相关性,以Ｍ０、Ｍ１为多。ＮＧ２阳性更易表达ＣＤ９和ＣＤ１３,而缓解率较低（Ｐ＝０．０８）。结论：ＮＧ２多表达于早期的造血干／祖细胞,与预后似乎有一定的关系。     

急性白血病细胞中原癌基因c－myc的表达

目的探讨原癌基因ｃ－ｍｙｃ在急性白血病中的表达及意义。方法应用免疫印渍及免疫细胞化学染色技术检测ｃ－ｍｙｃ原癌基因在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中的表达，以ＨＬ６０细胞作为阳性对照，正常人外周血淋巴细胞作为阴性对照，参照Ｇｒｅｉｌ等（１９８９）所建立的方法对ｃ－ｍｙｃ在急性白血病细胞中的表达进行定量，并对实验数据进行ｔ检验及相关分析。结果ｃ－ｍｙｃ在ＡＬＬ和ＡＮＬＬ中均有表达，阳性率分别为５０％和６３％，ＡＬＬ和ＡＮＬＬ病人白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ表达差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中的表达水平并不一样，部分病人同一病例在不同白血病细胞上ｃ－ｍｙｃ蛋白分布和表达不同。ＡＬＬ和ＡＮＬＬ白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关（分别ｒ＝０．８８，Ｐ＜０．０１，及ｒ＝０．８，Ｐ＜０．０１），和患者年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板计数均无相关性。结论ｃ－ｍｙｃ在ＡＬＬ和ＡＮＬＬ中表达差异无显著性，急性白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ的表达与患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关。ｃ－ｍｙｃ表达高的患者，治疗效果较差。ｃ－ｍｙｃ在急性白血     

急性髓细胞白血病中p27kip1的表达及临床意义

目的探讨急性髓细胞白血病中p27kip1的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测37例急性髓细胞白血病及10例正常对照者骨髓中p27kip1蛋白的表达情况,并结合临床病历资料进行分析。结果p27kip1蛋白在急性髓细胞白血病的阳性表达率为29．7％,正常对照组表达率为70．0％,二者比较差异有显著性（P〈0．05）;在34例接受化疗的急性髓细胞白血病中,p27kip1阳性表达组化疗后的缓解率（81．8％）高于p27kip1表达阴性组的缓解率（43．5％）,差异有显著性（P〈0．05）。结论p27kip1在急性髓细胞白血病患者中存在异常表达,且其蛋白的表达水平可能会影响化疗疗效。     

巢式PCR检测WT1在白血病患者中的表达及其临床意义

应用巢式逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）测定K562细胞株及75例白血病患者及10名正常人WT1基因的表达。并同时测定mdr1的表达。检测结果为K562细胞株高表达,急性髓性白血病（AML）30例中19例,急性淋巴细胞白血病（ALL）13例中10例,慢性粒细胞白血病（CML）共17例,其中加速及急变期3例、慢性期14例中8例,WT1表达为阳性,10例正常人及7例缓解期患者WT1表达均为阴性;且WT1阳性患者完全缓解率（CR）低于表达阴性者（分别为65％和88％,P＜0.05）。此结果说明WT1在白血病患者中高表达,可作为检测白血病微小残留病的标记基因,WT1的阳性表达者化疗后CR率低,且其与白血病的病程发展可能有关,WT1与mdr1无明显相关性。     

白血病患者治前骨髓塑料包埋切片c-myc原癌基因表达的初步研究

目的 探讨急、慢性白血病治疗前骨髓塑料包埋切片内ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达的变化。方法 使用冷丙酮固定结合简易三步塑懈体系,观察了２２例急、慢性白血病患者骨髓活检ＧＭＡ地切片内白血病细胞ｃ－ｍｙｃ表达的检测结果。结果 急性髓系白血病（ＡＭＬ）时,１９％￣６９％白血病细胞内含有ｃ－ｍｙｃ蛋白,其含是在每例患者中多变。比较之下,治前的急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和慢性髓系白血病（ＣＭＬ）慢性期中就罕有检出     

急性白血病类胰蛋白酶与血管内皮生长因子的相关研究

目的探讨类胰蛋白酶在急性白血病血管新生中的作用及类胰蛋白酶与血管内皮生长因子（VEGF）之间的相关性。方法应用免疫细胞化学方法检测74例急性白血病患者白血病细胞的类胰蛋白酶及VEGF的表达情况。结果62例急性髓细胞白血病中19例患者的白血病细胞类胰蛋白酶表达为阳性（30．6％），50例VEGF表达阳性（80．6％）。12例急性淋巴细胞白血病患者中类胰蛋白酶表达均为阴性，4例VEGF表达阳性（33．3％）。结论类胰蛋白酶可以作为急性髓系白血病的特异性标记物，它可能参与了急性髓细胞白血病M2亚型的血管新生过程。     

急性髓细胞性白血病病人TCRζ链基因表达特点

目的建立实时定量PCR方法检测TCRξ链表达水平的方法，了解急性髓细胞性白血病病人外周血TCRξ链基因表达水平。方法采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测31例急性髓细胞性白血病患者（M1型6例，M2型15例，M3型10例）和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRξ链表达情况，以β2微球蛋白基因（β2M）作为内参，根据相对定量公式2^-△△α计算急性髓细胞性白血病患者与正常人TCRξ链表达差异倍数。结果与正常人相比，急性髓细胞性白血病患者TCRξ链表达特点可以分为表达缺失（16％）、表达下降（26％）和表达上升（58％）三种情况。而三种不同亚型急性髓细胞性白血病之间的TCRξ链表达模式相似。结论本研究成功建立了SYBR Green Ⅰ荧光实时定量PCR和相关定量分析TCRξ链表达水平技术，并首先报道了急性髓细胞性自血病病人TCRξ链表达水平的变化。     

急性白血病死亡相关蛋白激酶基因启动子的甲基化

目的 研究死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子甲基化和基因表达在初治急性白血病患者中的临床意义.方法 采用MSP方法和RT-PCR方法分别检测60例急性髓系白血病患者、55例急性淋巴细胞白血病患者和17例正常人DAPK基因的甲基化状态及其mRNA的表达,统计学分析各组之间的表达差异.结果 急性淋巴细胞白血病组的DAPK甲基化阳性率(29.1％)高于急性髓细胞白血病组(5％)和正常组(0％)(P＜0.0l25),但甲基化与急性淋巴细胞白血病组患者临床特征无关(P＞0.05).DAPK基因mRNA的表达水平以正常组最高,急性髓细胞白血病组次之,急性淋巴细胞白血病组最低(P=0.000).急性淋巴细胞白血病组患者DAPK mRNA表达与其启动子甲基化呈显著负相关(P＜0.05).结论 DAPK基因启动子在初治急性淋巴细胞白血病患者中甲基化率高于初治急性髓细胞白血病患者和正常人,但与患者临床特征无关.急性淋巴细胞白血病患者DAPK基因表达水平低或不表达可能与其甲基化有关.     

FLAG方案治疗难治性复发性急性髓细胞白血病疗效观察

目的研究FLAG治疗难治性复发性急性髓细胞白血病的疗效。方法31例难治性复发性急性髓细胞白血病分为两组。15例用FLAG方案：氟达拉宾50mg／a，第1—5天，阿糖胞苷1．0／m^2，q12h，第1—5天，G—CSF300μg/d，第一1—5天；16例普通组：分别用DA、HA、MA、EA方案化疗。结果FLAG方案治疗难治性复发性急性髓细胞白血病完全缓解率达46．7％，有效率达60．0％。普通组完全缓解率6．3％，有效率31．3％。结论FLAG方案治疗难治性复发性急性髓细胞白血病有较好的疗效。     

慢粒白血病abl癌基因表达的研究

选择分别位于ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的Ｍｂｃｒｌ第二外显子和ａｂｌ的第二外显子上的两条引物，对１８例慢粒白血病及２例急淋白血病标本进行逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）检测。结果：在１８例包括ｐｈ（＋）和ｐｈ（－）不同病期的慢粒白血病患者血中均检出ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的表达，其中１４例为Ｋ－２８型表达，１例为Ｌ－６型表达，３例为Ｋ－２８型，Ｌ－６型同时表达；２例急淋白血病标本中１例为Ｋ－２８型表达。研究结果表明，１．ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因是慢粒白血病的一个重要分子生物学特征；２．ｐｈ（＋）和ｐｈ（－）慢粒白血病的分子生物学基础相同，即均有ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因；３．至少部分急淋白血病与慢粒白血病有相同的分子生物学基础；４．ｂｃｒ的断裂点位置可能有一定的临床意义，但有待进一步研究；５．同时表达Ｌ－６型和Ｋ－２８型的情况多见于急变区，此现象提示体内可能同时有两类不同嵌合的白血病细胞或白血病急变期ｂｃｒ出现新的重排。     

白血病细胞药敏与多药耐药的临床研究

采用ＭＴＴ法检测６６例患者白血病细胞的药敏，同时采用单抗ＪＳＢ－１，检测白血病细胞Ｐ－１７０的表达，结果表明：Ｐ－１７０表达阳性组药物敏感程度明显低于阴性组（Ｐ＜０．０５）。化疗后Ｐ－１７０表达阳性３６例，其中３２例临床疗效差；１８例Ｐ－１７０表达阴性，其中１３例疗效好。上述结果表明：白血病细胞体外药敏和Ｐ－１７０表达与临床疗效有较好的相关性，总符合率达８３．３％。提示两者同时检测，可更好地指导临床用药。     

急性髓系细胞白血病bcl—2表达水平与预后的关系

采用免疫组化方法测定５８例急性髓系细胞白血病患者抗凋亡基因ｂｃｌ－２蛋白表达水平,分析ｂｃｌ－２基因与临床预后关系。结果表明,高表达ｂｃｌ－２患者,化疗反应差,预后不良,提示ｂｃｌ－２表达水平可作为判断急性髓系细胞白血病预后的重要指标之一。     

白血病患者WT1基因的表达及临床意义

目的：检测白血病患者WT1基因的表达水平，并探讨其与临床的关系。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术，检测58例初治急性白血病（AL）、20例慢性粒细胞白血病（CM）和10例非血液病患者WT1基因的表达。结果：10例非血液病患者WT1基因的表达均呈阴性。58例AL患者44例检测有WT1基因的表达，阳性率为75．9％，其中急性髓性白血病（AML）阳性率为86．4％，急性淋巴细胞白血病（ALL）为42．9％，两者差异有显著性（P＜0．01）；AML治疗前WT1的表达水平与完全缓解（CR）率无相关（P＞0．05），但倾向于WT1基因低表达者有更高的CT率（低表达组CR率为75．0％，高表达组率为34．8％）。CML慢性期WT1的表达水平极低，随临床分期进展水平增高，高表达者预示急变。结论：AL和CML急变期患者WT1基因过度表达，初治AML治疗前WT1的表达水平与疗效无相关，但低表达组CR为75％，高表达组CR为34．8％。     

P-170蛋白过度表达与髓细胞性白血病预后的关系

为探讨髓细胞性白血病（ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ）患者Ｐ－１７０ 蛋白过度表达与预后的关系,用免疫组化ＬＳＡＢ法（ｌａｂｅｌｌｅｄ ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ｂｉｏｔｉｎ ａｓｓａｙ）检测６６ 例急性髓细胞性白血病（ａｃｕｔｅ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ,ＡＭＬ）及２０ 例慢性髓细胞性白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍ ｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍ ｉａ, ＣＭＬ）患者外周血单个核细胞的Ｐ－１７０ 蛋白表达。结果表明,初治组ＡＭＬ患者Ｐ－１７０ 表达率为２６．５％ （９／３４）;难治／复发组为６８．４％ （１３／１９）,比初治组明显增高（Ｐ＜ ０．００５）;完全缓解组为２３．１％ （３／１３）,与初治组差异无显著性。诱导化疗Ｐ－１７０＋ 者完全缓解（ＣＲ）率为２２．２％ （７／９）,Ｐ－１７０－ 者为８０％ （２０／２５）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．００３６）。ＣＭＬ慢性或加速期８ 例患者无１ 例Ｐ－１７０ 表达,急变期患者Ｐ－１７０ 表达率为５０％ （６／１２）,二者差异有显著性（Ｐ＝ ０．０４２）。提示Ｐ－１７０ 蛋白过度表达是髓细胞性白血病化疗耐药和不良预后的标志     

白血病患者体外药敏试验和P-糖蛋白的表达及临床意义

为建立体外预测化疗药物敏感性的试验方法，指导急性白血病化疗方案的设计。对急性白血病患者４２例进行了体外药敏检测（ＭＴＴ法），研究了白血病细胞多药耐药基因Ｐ－糖蛋白（Ｐ－ｇｐ）的表达（ＡＰＡＡＰ法）与白血病化疗疗效的关系。结果显示，药敏试验与临床疗效明显相关，临床总符合率８２．９％，阳性符合率７８．９％，阴性符合率８６．９％。Ｐ－ｇｐ抗原的表达与临床疗效呈负相关，与临床耐药明显相关，阴性组患者缓解率（６７．９％）显著高于阳性组（２８．９％），Ｐ＜０．０５；复发率阳性组显著高于阴性组；Ｐ－ｇｐ的表达复发组患者较初诊组患者高（Ｐ＜０．０５）。提示多药耐药基因Ｐ－ｇｐ的表达和体外化疗药物敏感性的检测是判断临床耐药及指导临床化疗设计的重要指标