针灸对佐剂性关节炎大鼠痛反应和β-内啡肽含量的影响

目的:探索针灸治疗RA在抗炎镇痛、免疫调节方面的β-Ep机制。方法:以佐剂性关节炎(AA)大鼠为模型,用艾灸和电针两种方法,观察大鼠痛反应的变化,并以放射免疫方法检测血浆、炎症组织中β-Ep含量。结果:AA大鼠痛阈降低,炎症组织中β-Ep含量升高,治疗后痛阈升高,血浆及炎症组织中β-Ep含量升高,且两者结合疗效明显好于单针单灸组。结论:针灸可以通过增加血浆及炎症组织中β-Ep含量实现对AA大鼠外周镇痛效应和免疫调节作用。神阙穴应作为提高机体免疫功能的有效穴,在RA的治疗中被广泛应用。     

针刺对大鼠β—内啡肽含量的影响

采用核团微穿刺和放免技术,检测针刺对大鼠β-内啡肽(B-Ep)含量。结果表明,针刺可致下丘脑室旁核(PVN)、视上核(SON)和中脑导水管周围灰质(PAG)内β-Ep含量显著降低,垂体后叶和脊髓腰段内含量升高,外侧视前区、垂体前叶和血浆内含量无明显变化。提示β-Ep参与针刺镇痛可能通过PVN、SON、PA G和脊髓等神经结构实现的。     

电针对足底切口痛大鼠下丘脑及脊髓β-内啡肽的影响

目的:观察电针对足底切口痛大鼠痛阈、下丘脑和脊髓内β-内啡肽(β-EP)、中缝背核(DRN)内5-羟色胺(5-HT)的影响,探讨电针对足底切口痛大鼠的镇痛作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、电针穴位组、电针非穴位组,每组8只。采用足底切口复制痛模型。电针穴位组选取右侧"足三里""昆仑"穴,电针非穴位组选择两穴位旁开3mm非穴位处,每天电针1次,每次20min,治疗3次。观察各组大鼠痛阈变化,采用酶联免疫分析法、免疫组化法测定下丘脑、脊髓内β-EP以及DRN内5-HT的表达水平。结果:模型组大鼠机械痛阈及热痛阈均较正常组明显降低(P0.05);下丘脑β-EP含量较正常组明显升高,β-EP阳性细胞数明显增多(P0.05);DRN内5-HT表达水平较正常组明显升高(P0.05)。治疗后,电针穴位组大鼠的机械痛阈和热痛阈明显高于模型组和电针非穴位组(P0.05);下丘脑β-EP含量和阳性细胞数较模型组与电针非穴位组明显升高(P0.05);DRN内5-HT表达水平较模型组和电针非穴位组明显升高(P0.05)。各组脊髓内β-EP含量的变化差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针对大鼠足底切口疼痛的镇痛作用可能是通过提高下丘脑β-EP含量进而激活DRN内5-HT的表达介导。     

不同频率电针对急性佐剂性关节炎大鼠痛反应和组织中β-内啡肽含量的影响

本实验观察不同频率 (5 Hz、1 0 0 Hz)电针对急性佐剂性关节炎大鼠压力 -缩肢阈及下丘脑、垂体、肾上腺、腰髓 β-内啡肽含量的影响。结果发现 :两种频率电针在升高关节炎大鼠痛阈的同时 ,亦可明显升高下丘脑 β-内啡肽含量 ,说明下丘脑 β-内啡肽参与关节炎大鼠针刺镇痛作用。     

不同频率电针对急性佐剂性关节炎大鼠痛反应和组织中β—内啡肽含？…

本实验观察不同频率（５Ｈｚ、１００Ｈｚ）电针对急性佐性关节炎大鼠压力－缩肢阈及下丘脑、垂体、肾上腺、腰髓－β内啡肽含量的影响。结果发现：两种频率电针在升高关节炎痛阈的同时，亦可明显升高下丘脑β－内啡肽含量，说明下丘脑β－内啡肽参与关节炎大鼠针刺镇痛作用。     

不同针法对佐剂性关节炎大鼠下丘脑镇痛效应比较

目的对电针、毫针、刺血和穴位注射的镇痛效应及下丘脑镇痛机制进行比较研究。方法以佐剂性关节炎大鼠为炎症痛模型,以“昆仑”为穴位,采用电针、毫针、刺血、穴位注射,以放免、原位杂交等为检测方法,观察了痛阈、炎症局部肿胀度、下丘脑β-内啡肽(β—EP)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量、下丘脑前阿黑皮素(DOMC)mRNA表达等指标。结果4种针法均可使痛阈升高,尤以电针、穴注升高明显;均可使炎症局部肿胀减轻,各组间疗效无明显差异;电针、毫针可提高下丘脑β-EP含量,以电针作用最强;穴注可提高下丘脑ACTH含量;电针、毫针可增强下丘脑POMCmRNA表达。结论电针、毫针、刺血、穴注对炎症痛均有镇痛作用,以电针、穴注疗效较好。在下丘脑水平,电针、毫针可能通过提高下丘脑β—EP含量、增强下丘脑POMCmRNA表达达到镇痛作用;穴注可能通过提高下丘脑ACTH含量达到镇痛作用。刺血可能通过下丘脑β—EP、ACTH以外的途径实现其镇痛效应。     

九气拈痛胶囊对雌性痛经大鼠血浆β-内啡肽的影响

目的：探讨九气拈痛胶囊治疗原发性痛经的作用机制。方法：用阿司匹林、月月舒作对照,通过对催产素所致大鼠子宫剧烈收缩（模拟痛经症）的影响,以大鼠血浆β－内啡肽（β－EP）的变化为观测指标。结果：九气拈痛胶囊能明显抑制催产素诱发大鼠扭体反应次数（P＜0．01）,具有镇痛作用;模型组大鼠血浆β－EP水平明显低于正常组（P＜0．01）,经九气拈痛胶囊治疗后,血浆β－EP水平升高,与模型组相比,差异具有显著性（P＜0．01）,与正常组、对照组相比,差异无显著性（P＞0．05）。结论：九气拈痛胶囊有改善大鼠血浆中β－EP的作用。     

电针镇痛后效应与脑干5—HT、下丘脑β—EP含量的关系

目的：探讨电针镇痛后效应的中枢机制。方法：以急性佐剂性关节炎（AA）大鼠作为炎症痛模型,以“昆仑”穴为电针穴位,以放免、荧光测定为检测方法,观察了炎症局部痛阈、脑干5-羟色胺（5-HT）含量、下丘脑β-内啡肽（β-EP）含量。结果：电针能提高AA大鼠痛阈并能维持60min以上;提高下丘脑β-EP含量并维持30min以上;提高脑干5-HT含量并维持此效应30min以上。结论：提示电针镇痛后效应有其客观的中枢机制。     

电针抗大鼠创伤痛免疫抑制效应的实验研究

目的 :进一步探索在创伤中电针镇痛和免疫调节的 β -Ep机制。方法 :以创伤大鼠为模型 ,同时外周注射阿片受体拮抗剂纳络酮 ,观测电针镇痛和免疫调节的不同效应。并且以放射免疫法检测下丘脑、垂体、血液、伤口周围组织的 β -Ep含量变化。结果 :电针可极明显降低血中 β -Ep含量 ,同时提高伤口周围组织 β -Ep。结论 :在创伤中电针镇痛的机理在于电针一方面提高伤口周围组织 β-Ep的含量 ,另一方面可能加强伤口周围组织 β-Ep的受体表达     

针刺对炎症痛大鼠痛阈及下丘脑Gi蛋白表达的影响

目的：观察电针（EA）治疗对佐剂性关节炎（AA）大鼠腰椎夹脊穴的镇痛效果,及下丘脑抑制性G蛋白（Gi）含量的变化,以初步探讨针刺镇痛的细胞信号转导机制。方法：24只大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,分别给予干预措施。用行为学痛阈法观察大鼠痛阈的变化;运用免疫印迹法（Westernblot）检测下丘脑Gi蛋白的变化。结果：EA夹脊穴提高了炎症痛大鼠的痛阈,降低了下丘脑Gi蛋白的表达。结论：炎症痛的产生发展可能与大鼠下丘脑G蛋白信号传导系统功能障碍有关,针刺镇痛介导的G蛋白信号通路可能是治疗炎症痛关节炎的重要机制之一。     

平衡针对大鼠镇痛作用的实验研究

目的探讨平衡针对大鼠下肢痛镇痛作用规律及机制,为临床上平衡针治疗各种痛症提供可靠的实验依据。方法将48只SD健康雄性大鼠按随机数字表分为治疗组28只和对照组20只。对照组采用空白对照,治疗组采用热刺痛仪使大鼠后肢足底部致痛,观察平衡针刺"踝痛穴"的不同时段大鼠耐痛阈以及下丘脑和血清-EP、5-HT、Ach含量的变化。结果治疗组治疗后血清中-EP和Ach含量、下丘脑中5-HT含量及耐痛阈明显提高,下丘脑中-EP含量明显降低,与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论平衡针可以激活机体内源性镇痛系统的功能,通过中枢和外周的全身性广泛的调节,发挥快速和持续性镇痛效应。     

白香丹胶囊对经前期综合征肝气逆证大鼠下丘脑GABA_ARβ_2亚基分布及表达的影响

目的:研究白香丹胶囊对经前期综合征(PMS)肝气逆证模型大鼠下丘脑γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)β2亚基蛋白分布和蛋白、mRNA表达的影响及PMS肝气逆证发病中枢机制。方法:以免疫荧光技术(IF)、蛋白印迹技术(Western blot)、半定量逆转录多聚合酶链式反应(半定量RT-PCR)依次检测大鼠下丘脑GABAARβ2亚基蛋白的分布模式,蛋白、mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,肝气逆组大鼠下丘脑GABAARβ2亚基主要分布在下丘脑组织的边缘,蛋白、mRNA表达水平显著升高;造模同时给予白香丹胶囊后,受体蛋白在下丘脑中均匀分布而趋于正常,蛋白、mRNA表达水平有不同程度的降低。结论:GABAARβ2亚基蛋白分布异常,蛋白、mRNA表达上调可能是PMS肝气逆证发病中枢机制之一,白香丹胶囊可以对上述异常变化起纠正作用。     

菊藤胶囊对应激大鼠血浆及肾上腺皮质血管紧张素Ⅱ水平的影响

目的探讨中药复方菊藤胶囊对慢性应激性高血压大鼠血压、血浆及肾上腺组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的影响。方法大鼠随机分为模型组、菊藤胶囊高剂量组、菊藤胶囊中剂量组、菊藤胶囊低剂量组、卡托普利组、正常对照组;除正常对照组外,其余五组均采用低频低压交流电间断电击法。电击大鼠足底28d,制作应激性高血压模型,同时各组均加入不同的干预。应用经尾动脉测量血压和心率,酶联免疫吸附法检测大鼠血浆AngⅡ,免疫组织化学法检测肾上腺AngⅡ。观察菊藤胶囊不同剂量组、卡托普利组对应激致大鼠血压及相关指标的影响。结果与正常对照组相比,模型组大鼠血压和血浆AngⅡ含量明显升高（P〈0.01）,AngⅡ在肾上腺皮质表达增强（P〈0.01）;与模型组相比,菊藤胶囊高、中剂量组均能抑制应激大鼠的血压及血浆AngⅡ含量的升高（P〈0.01）,同时降低AngⅡ在肾上腺皮质的表达（P〈0.01）。结论菊藤胶囊能够降低应激性高血压大鼠的血压,其机理可能是通过抑制血浆及肾上腺组织中AngⅡ的含量的升高实现的。     

消风Ⅱ号胶囊对佐剂性关节炎大鼠炎性组织中前列腺素E2及一氧化氮含量的影响

目的 通过观察消风Ⅱ号胶囊对佐剂性关节炎(AA)大鼠炎性组织中前列腺素E2(PGE2)及一氧化氮(N0)含量的影响,探讨其治疗类风湿关节灸作用机理.方法 将AA大鼠随机分为模型组及消风Ⅱ号胶囊低(188 mg/kg)、高剂量组(375 mg/kg),同时设正常组.致炎第7日开始灌胃给予药物,灌胃剂量为1.0 mL/100 g体质量,模型组给予等体积的蒸馏水,连续21d.给药结束后次日处死大鼠,测量从大鼠炎性组织中PGE2及NO含量.结果 消风Ⅱ号胶囊低、高剂量组均可抑制大鼠非佐剂注射侧炎性组织中PGE2的生物合成,抑制率分别为41.2％和33.6％,抑制大鼠佐剂注射侧炎性组织中NO含量,抑制率分别为39.9％和29.7％,与模型组相比,差异有统计学意义(P＜0.001,P＜0.01).结论 消风Ⅱ号胶囊抗关节炎作用通过抑制PGE2和NO的合成或释放,使局部炎性组织中PGE2及NO含量下降而发挥作用.     

壮医药线点灸对脾虚大鼠脑-肠轴β-内啡肽的影响

目的 :探讨壮医药线点灸对实验性脾虚大鼠下丘脑、胃、小肠、血浆 (脑 -肠轴 )β-EP含量的影响。方法 :采用耗气破气加饥饱失常法对 12 0只 Wistar大鼠进行脾虚造模 ,模型动物随机分为壮医药线点灸治疗组、空线点灸对照组、中药四君子汤治疗对照组和模型自然恢复组。并设立正常健康对照。治疗前后采用放射免疫分析法检测脑 -肠轴上述四个部位的 β-EP水平。结果 :脾虚大鼠血浆和下丘脑内 β-EP的含量显著低于同期正常对照组 ,而胃和小肠组织 β-EP水平则明显高于正常对照组 ,P<0 .0 1。壮医药线点灸治疗后血浆和下丘脑内β-EP含量上升 ,而胃和小肠组织内β-EP水平下降 ,治疗前后比较差异有显著性 ,P均 <0 .0 5。结论 :壮医药线点灸对脾虚大鼠脑 -肠轴紊乱的 β-EP水平有调整作用。     

Analgesic effect of different moxibustion durations in rheumatoid arthritis rats

Objective

To observe the influence of different moxibustion durations on hypothalamic pro-opiomelanocortin (POMC) and prodynorphin (PDYN) mRNA expressions and plasma β-endorphin (β-EP) content in rheumatoid arthritis (RA) rats, to understand the mechanism of moxibustion analgesia and its dose-effect relationship.

Methods

Twelve male Wistar rats were randomly selected from 48 male Wistar rats as a normal control group. The RA model was created by raising rats in a windy (blowing with electric fan), cold (6°C ± 2°C), and wet (80%-90% humidity) environment for 20 days, 12 h each day. This was followed by injection of Freund's complete adjuvant (0.15 mL) into the ankle. Then, rats were randomly divided into a model group, moxibustion group I, and moxibustion group II, with 12 rats in each group. In moxibustion groups I and II, moxibustion was given at Shenshu (BL 23) and Zusanli (ST 36) for 20 and 40 min, respectively, once daily for 15 days. Hypothalamic POMC and PDYN mRNA expression levels and plasma β-EP content were determined.

Results

Compared with the normal group, the pressure pain threshold decreased, while the hypothalamic POMC and PDYN mRNA expression levels and plasma β-EP content increased in the moxibustion groups (P<0.01). Compared with the model group, the pressure pain threshold, hypothalamic POMC and PDYN mRNA expression levels and plasma β-EP content in the moxibustion groups increased significantly (P<0.01). Compared the moxibustion group I, the pain threshold, hypothalamic POMC and PDYN mRNA expression levels and plasma β-EP content in moxibustion group II significantly increased (P<0.01).

Conclusion

Moxibustion has an analgesic effect and increases hypothalamic POMC and PDYN mRNA expression levels and plasma β-EP content in RA rats. The analgesic effect in moxibustion group II is better than that in moxibustion group I.     

CaM/CaMKⅡ在肠易激综合征大鼠脑肠互动中的表达及大建中汤干预效应研究＊

目的研究大建中汤对肠易激综合征(Irritable bowel syndrome,IBS)内脏痛大鼠脑肠互动中钙调蛋白(Calmodulin,CaM)信号通路关键基因表达及大建中汤干预作用。方法 IBS内脏痛将采用母婴分离、鸡卵清白蛋白腹腔注射、乙酸灌肠等方法制备,大鼠随机分为正常对照组(生理盐水),模型组(生理盐水),大建中汤高、中、低剂量(2.16、1.08、0.62 g·kg^-1)治疗组,匹维溴铵(13.39mg·kg^-1)对照组。每组8只,连续灌胃14天。评估大鼠内脏敏感性采用腹壁撤退反应(Abdominal withdrawal reflex,AWR);采用HE染色方法观察各组大鼠结肠黏膜形态;采用Western Blot、RT-PCR等技术分别检测大鼠下丘脑、结肠CaM和CaMKⅡ表达水平,同时探讨大建中汤对IBS内脏痛大鼠的干预效应机制。结果与正常组比较,模型组60、40、2.0 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)压力下AWR评分明显升高,下丘脑、结肠组织中CaM和CaMKⅡ表达升高(P <0.01);与模型组比较,大建中汤高剂量组(40、2.0 mmHg压力),大建中汤中剂量组(60、40、2.0 mmHg压力)的AWR评分降低(P <0.05),结肠、下丘脑组织中CaM和CaMKⅡ表达明显降低(P <0.01)。结论脑肠互动中CaM信号传导通路关键基因CaM、钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)与IBS内脏痛有关,大建中汤通过影响其表达对肠易激综合征内脏痛起到干预作用。     

脑痛立停胶囊对偏头痛模型小鼠脑及血浆神经递质含量的影响

目的:探讨脑痛立停胶囊治疗偏头痛的作用机理。方法:建立利血平化低5-羟色胺(5-HT)小鼠偏头痛模型,给与脑痛立停胶囊灌胃治疗7天,以复方羊角胶囊为对照药物。电化学法测定小鼠血浆和脑组织5-HT等单胺递质的含量。结果:利血平化低5-HT偏头痛模型小鼠血浆及脑组织5-HT、多巴胺(DA)的含量明显降低,脑组织去甲肾上腺素(NE)和高香草酸(HVA)含量也明显降低。脑痛立停胶囊可提高模型小鼠血浆和脑组织5-HT、DA和脑组织NE的含量,作用强度与复方羊角胶囊相似。结论:脑痛立停胶囊可以提高偏头痛模型小鼠血浆及脑组织5-HT、DA和脑组织NE的含量,以调整脑部血管舒缩功能,改善脑部血液循环,调节中枢神经痛调制机能。通过以上机制发挥治疗偏头痛的作用。     

元胡止痛胶囊对偏头痛小鼠脑及血浆神经递质含量的影响

目的:探讨元胡止痛胶囊治疗偏头痛的疗效及作用机理。方法:建立利血平化低5-羟色胺(5-HT)小鼠偏头痛模型,给予元胡止痛胶囊灌胃治疗5天,以佐米曲普坦为西药阳性对照药物,正天丸为中药阳性对照药物。酶联免疫分析法测定小鼠血浆和脑组织中5-HT、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)的含量。结果:利血平化低5-HT偏头痛模型小鼠血浆及脑组织5-HT含量明显降低,脑组织中DA含量明显升高。元胡止痛胶囊可提高模型小鼠血浆和脑组织5-HT的含量,降低脑组织DA的含量,对NE无明显影响。结论:元胡止痛胶囊可以提高偏头痛模型小鼠血浆及脑组织5-HT的含量,降低脑组织DA的含量,以调整脑部血管舒缩功能,调节中枢神经痛调制机能,减弱神经性炎症。通过以上机制发挥治疗偏头痛的作用。     

舒痛安汤对吗啡依赖大鼠镇痛及生殖功能的影响

目的观察舒痛安汤对吗啡依赖大鼠镇痛及生殖功能的影响，探讨其作用机理。方法建立吗啡依赖模型大鼠，采用放免法观察舒痛安汤对吗啡依赖大鼠下丘脑和血浆β-内啡肽（β-EP）、结状神经节和孤束核P物质（SP）以及血清内分泌激素的变化。结果吗啡依赖大鼠下丘脑β-EP的含量均较正常大鼠降低，舒痛安汤高剂量组可增高下丘脑D-EP含量（P〈0．01），舒痛安汤中、高剂量组可增高血浆β-EP含量（P〈0．01，P〈0．05）；吗啡依赖大鼠结状神经节和孤束核SP含量升高，舒痛安汤高剂量组可降低结状神经节和孤束核SP的含量（P〈0．01，P〈0．05）。吗啡依赖雌性大鼠血清卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）、泌乳素（PRL）均低于正常对照组，舒痛安汤中、高剂量组均可增高血清FSH、E2、PRL含量（P〈0．01，P〈0．05）；吗啡依赖大鼠睾丸酮（T）含量显著降低（P〈0．01），舒痛安汤中、高剂量组均可增高雄性大鼠血清T含量（P〈0．01），而对大鼠血清黄体生成素、PRL含量无显著影响。结论舒痛安汤可能通过改善吗啡依赖大鼠下丘脑-垂体-肾上腺的变化，消除戒断症状，从而达到治疗目的。