c-cbl在急性非淋巴细胞白血病细胞中的表达及临床意义

目的 探讨急性非淋巴细胞白血病(ANLL)细胞c-chl基冈表达及临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测47例ANLL患者c-cbl基因mRNA表达水甲,以20名健康人为正常对照.结果 c-cbl mRNA在初发ANLL患者中的表达较正常对照组明显降低(P<0.05);治疗缓解后表达明显升高(P<0.05).在初治ANLL患者中,c-cbl mRNA表达阳性的患告完全缓解率低于表达阴性的患者(P<0.05).结论 在ANLL的细胞中,c-cbl基因表达降低;c-chl基因低表达患者治疗后的完全缓解率低,预后不良.     

尾型同源盒基因在成人急性淋巴细胞白血病中表达及临床意义

本研究旨在探讨同源盒基因CDX1,CDX2和CDX4在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及其临床意义.急性淋巴细胞白血病骨髓或外周血标本51份,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CDX1,CDX2和CDX4在成人急性淋巴细胞白血病患者和14例正常对照组中的表达情况.结果表明,在14例健康成人中未见CDX1,CDX2和CDX4表达,15例缓解期急性淋巴细胞白血病患者中未见CDX1,CDX2和CDX4表达,在初治ALL患者中CDX2的表达率为60.8%,而在治疗缓解后其表达率明显下降(p<0.05);在复发组患者中CDX2表达率又升高(81.8%);CDX2表达与疾病危险分组相关,高危组CDX2阳性率为91.7%,高于标危组45.7%(p<0.05);CDX1和CDX4在初治及复发成人ALL中皆无表达.在初治和复发的成人ALL患者中CDX2表达阳性患者的完全缓解率(CR)低于表达阴性的患者(p<0.05);CDX2表达阳性患者的中位生存时间短于阴性表达的患者.结论:CDX2表达和成人ALL的发病、复发相关,CDX1和CDX4表达与成人ALL发病及复发无相关性;CDX2表达阳性的患者完全缓解率低,预后不良;CDX2可作为成人急性淋巴细胞白血病的发病、复发及预后判断的指标之一.     

c-IAP2与Smac基因在白血病中的表达及其临床意义

为了研究c-IAP2及其拮抗素Smac基因在白血病中的表达及对成人急性白血病（AL）患者的预后意义，采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测103例白血病患者c-IAP2、Smac的mRNA表达水平，20名健康人为正常对照，K562、Kg-1a细胞株为阳性对照。结果表明：c-IAP2、Smac在初治AL中的表达较正常对照组明显升高，两者的表达为高度正相关，治疗缓解后c-IAP2、Smac的表达明显下降，与初治AL组有明显差异（P〈0．05），复发后c-IAP2、Smac基因的表达又复升高。c-IAP2 mRNA和Smac mRNA在慢性粒细胞性白血病慢性期（CML-CP）组的表达率和表达水平均高于正常对照组，但无统计学意义（P〉0．05）。在初治AL患者中，c-IAP2、Smac表达阳性的患者缓解率均低于表达阴性的患者。结论：c-IAP2 mRNA、Smac mRNA过度表达和急性白血病的发病呈正相关；c-IAP2、Smac高表达的患者完全缓解率低，预后不良；c-IAP2、Smac可作为急性白血病的发病、复发及预后判断的指标之一。     

急性淋巴细胞白血病患者骨髓细胞中CCL2 mRNA的表达

背景：临床工作中希望能够根据骨髓CCL2表达对急性淋巴细胞白血病患者进行危险分层和预后判断。目的：观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓细胞中CCL2 mRNA的表达情况。方法：初诊50例急性淋巴细胞白血病患者为实验组,30例非血液肿瘤患者为对照组。初诊急性淋巴细胞白血病患者化疗2个疗程后按疗效分为完全缓解组43例,未完全缓解组7例。实验抽取研究对象骨髓5mL,采用半定量聚合酶链反应法检测CCL2 mRNA表达。结果与结论：①初诊急性淋巴细胞白血病组CCL2 mRNA表达水平明显高于对照组（P〈0.05）;完全缓解组CCL2 mRNA水平明显低于未完全缓解组（P〈0.01）;完全缓解组治疗后CCL2 mRNA表达水平明显低于治疗前（P〈0.01）。未完全缓解组治疗2个疗程后CCL2 mRNA表达水平无明显下降（P〉0.05）。②前B-急性淋巴细胞白血病患者骨髓CCL2 mRNA表达水平明显高于普通B及T系急性淋巴细胞白血病患者（P〈0.05）。初诊时白细胞≥50×10^9L^-1急性淋巴细胞白血病患者CCL2 mRNA表达水平明显高于白细胞〈10×10^9L^-1及10×10^9L^-1≤白细胞〈50×10^9L^-1组（P〈0.05）,10×10^9L^-1≤白细胞〈50×10^9L^-1组明显高于白细胞〈10×10^9L^-1组（P〈0.01）。结果表明急性淋巴细胞白血病患者骨髓细胞能分泌CCL2,骨髓CCL2 mRNA表达水平与患者初诊时的白细胞计数及免疫分型有一定的关系,在一定程度上能反映患者的近期疗效。     

急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达

背景：据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。目的：观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。方法：50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病。同期选择27例非恶性血液病患者作为对照。取肝素抗凝的骨髓液2～4mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达。结果与结论：50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组（P〈0.05）,急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病（P〈0.05）。动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达。结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达。     

急性白血病病人黏着斑激酶的表达及临床意义

目的观察黏着斑激酶（FAK）在急性白血病（AL）病人白血病细胞中的表达及临床意义。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测50例AL病人白血病细胞FAK mRNA的表达水平,以10例健康人作为正常对照。收集病人骨髓细胞,用24h常规培养方法制备染色体,采用R显带技术分析其染色体核型。结果正常对照组FAK mRNA阳性表达率为20.0%,AL病人为66.0%,差异有显著性（χ2=5.49,P〈0.05）。其中急性淋巴细胞白血病（ALL）和急性非淋巴细胞白血病（ANLL）病人FAK mRNA阳性表达率和表达水平均高于正常对照组（P=0.04,χ2=4.44,t=7.98、5.60,P〈0.05）,但ALL和ANLL比较差异无显著性（P〉0.05）。初诊和复发AL病人白血病细胞FAK mRNA阳性表达率和表达水平比较差异无显著性（P〉0.05）,但均高于正常对照组（χ2=9.38,P=0.02,t=8.79、7.58,P〈0.05）。缓解组病人FAK mRNA阳性表达率和表达水平明显低于初诊组和复发组（χ2=10.26,P=0.02,t=4.43、7.82,P〈0.05）,与正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）。AL病人异常核型检出组FAK mRNA的表达率和表达水平均明显高于未检出组（χ2=5.82,t=6.72,P〈0.05）。结论 FAK mRNA在AL中存在较高的表达,且与疾病的转归相关,可能为白血病的治疗提供新靶点。     

SALIA及BMI-1在急性白血病中的表达

本研究旨在探讨SALL4及BMI-1基因在急性白血病患者中的表达及其临床意义。运用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）半定量检测62例急性白血病患者和10例对照者（非恶性血液病患者）骨髓细胞中SALL4及BMI-1的mRNA的表达水平。结果表明：①SALL4mRNA在除M3及T—ALL外的急性白血病中均高表达，在髓系白血病中表达显著高于B淋巴细胞白血病（P=0．022，〈0．05）；在对照者中9例不表达，1例低表达；②SALL4 mRNA在初治AL中表达较对照组明显增高，完全缓解组的表达明显下降，与初治组有显著差异（P〈0．05）；复发组的表达也明显增高，且略高于初治组患者（P=0．414）；③BMI-1除在M3型中也高表达外与SALL4的表达规律一致，两者表达呈显著正相关（r=0．684，P〈0．01）。结论：SALIA及BMI-1在急性白血病中异常高表达，影响白血病的发生和发展，它可作为急性白血病的发病、复发及预后判断的可能指标。     

pig7基因在急性白血病细胞中的表达及其临床意义

目的检测pig7基因在急性白血病（AL）细胞中的表达水平及其临床意义，在基因甲基化调控方面探讨pig7基因表达异常的可能机制。方法应用实时定量逆转录PCR（RT—PCR）方法对138例AL患者、21名正常人骨髓标本以及6个白血病细胞株进行了pig7转录本的检测，并在全反式维甲酸（ATRA）作用下观察NB4细胞分化效应及pig7基因表达情况。进行限制性内切酶分析以鉴定白血病细胞中存在的pig7转录剪接体。通过甲基化特异性PCR（MSP）检测白血病细胞pIg7基因启动子区域是否存在过度甲基化。结果AL进展期（包括初治、复发／难治）患者骨髓细胞pig7 mRNA相对表达水平与正常骨髓细胞相比明显降低（RQ中位数分别为0．62和18．30，P〈0．01），其中急性髓系白血病（AML）与急性淋巴细胞白血病（ALL）差异无统计学意义，而初治组与复发／难治组比较pig7 mRNA水平差异有统计学意义，前者明显高于后者（RQ中位数分别为1．43和0．16，P〈0．05）。pig7低表达患者完全缓解率也较低（P〈0．05）。NB4细胞经ATRA诱导分化后pig7表达水平由1．61±0．72增至44．75±3．93（P〈0．01）。酶切结果提示白血病细胞中仅存在SIMPLE剪接体。在K562、HL-60及Nalm-6细胞pig7启动子区域存在过度甲基化，而U937、NB4和kasumi-1细胞中该区域非甲基化状态占优势。结论pig7基因在AL的表达下调为白血病发病机制的探讨和疗效预测提供了新的思路。     

初诊白血病患者溶血磷脂酸酰基转移酶基因表达研究

本研究旨在检测白血病患者溶血磷脂酸酰基转移酶-β（lysophosphatidic acid acyltransferase β,lpaat β）mRNA的表达水平,为lpaatβ靶向治疗在白血病中的应用提供理论基础。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者lpaatβ mRNA的相对表达水平,分析其在各型白血病中的表达情况。结果,急性白血病（AL）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）;急性髓系白血病（AML）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）,且lpaatβ mRNA的表达水平与外周血白细胞计数（WBC≥20.0×109/L）、白血病细胞CD34表达呈正相关（p〈0.05）,与患者的髓外侵犯无明显相关性（p〉0.05）。除外急性早幼粒细胞白血病（APL）病例之外,lpaatβ mRNA的表达水平与AML患者的化疗敏感性呈负相关（p〈0.05）。慢性髓系白血病（CML）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）。急性淋巴细胞白血病（ALL）患者lpaatβ mRNA的表达与正常对照组相比,差异无统计学意义（p〉0.05）。结论：AML、CML患者均存在着lpaatβ基因的超高表达。AML细胞产生的lpaatβ可能在AML细胞的异常增殖及化疗耐药中起着重要作用。     

Gli1在成人急性淋巴细胞白血病中的表达及意义

目的:探讨Hedgehog信号通路转录因子Gli1在急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患者白血病细胞中的表达及其临床意义。方法:选取确诊的初治ALL 32例,复发ALL 6例,同时选取健康体检者15例作为正常对照。采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测ALL患者及正常对照者骨髓单个核细胞G li1 mRNA的表达水平,比较G li1 mRNA与ALL患者临床参数的关系。结果:G li1 mRNA在初治及复发ALL患者组中的表达较正常对照组明显升高(P0.05)。24例初治ALL诱导化疗后获得完全缓解患者Gli1 mRNA表达水平显著低于化疗前(P0.05),而4例未缓解者的Gli1 mRNA水平较治疗前无明显差异(P0.05)。相关性分析显示,Gli1 mRNA水平与ALL患者外周血白细胞数呈正相关(R=0.725,P0.05)。Western blot检测也发现,初治及复发ALL患者中Gli1蛋白表达较正常对照者显著升高,治疗缓解后Gli1蛋白相对表达量降低(P0.05)。结论:Gli1 mRNA及蛋白在初治和复发ALL患者中高表达,其表达水平变化可能与ALL的疗效及预后有关。     

53例老年急性髓细胞白血病的疗效观察

目的：分析老年急性髓细胞白血病（AML）的临床特点和不同治疗方案的疗效。材料和方法：年龄≥60岁的老年AML患者53例，原发性AML44例和继发性AML9例，AML分别采用亚常规标准剂量蒽环类药物或高三尖杉酯碱联合阿糖胞苷（Ara-C)或小剂量的高三尖杉酯碱和Ara-C作为诱导方案，结果：发病时以发热和贫血症状最多见，以M5亚型常见，颅内出血是导致老年AML早期死亡的最常见的原因。急性髓细胞白血病（AML）总的完全缓解（CR）率43.4%，亚标准剂量方案治疗AML的CR率明显高于小剂量HA的疗效，但继发性AML患者无1例获CR。结论：对原发性AML老年患者尽可能地采用亚标准剂量的诱导治疗方案。     

抗凋亡基因survivin在急性白血病细胞表达及其临床意义

目的　探讨急性白血病 (AL)原代细胞survivin基因表达及其与AL疗效的关系。方法　应用RT PCR方法检测 50例初发AL患者survivin基因mRNA表达。结果　AL细胞survivinmRNA阳性率为 82 .0 % (50例中 41例 )。survivinmRNA阳性表达在急性淋巴细胞白血病细胞 (89.5 % )较在急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)细胞 (75 .0 % )稍多见 ,但均高于正常对照组 (33 .3 % ) ,P值分别 <0 .0 1 ,<0 0 5。在 2 2例ANLL患者白血病细胞中 ,survivinmRNA表达阴性者接受 1个疗程化疗后骨髓缓解(BMR)率 (83 .3 % )明显高于阳性者 (2 5 .0 % ,P =0 .0 2 3) ;1 3例ANLL患者接受高三尖杉酯碱和阿糖胞苷联合治疗 ,survivinmRNA阴性表达者BMR率 (1 0 0 .0 % )高于阳性表达者 (2 7.3 % ) ;survivin/ β actin >0 .6者BMR率低。结论　survivin基因在AL细胞高表达 ,可能是导致AL细胞对化疗药物不敏感的原因之一     

Lrp16基因在白血病细胞系及白血病患者骨髓中的表达及其临床意义

本研究分析lrp16基因在白血病细胞系及白血病患者骨髓中的表达,探讨lrp16基因与白血病发生、发展的关系。采用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）技术检测lrp16基因mRNA在4种白血病细胞系及115例白血病患者骨髓中的表达水平,并结合患者临床特征分析lrp16基因在白血病发生、发展中的作用。4种白血病细胞系包括慢性髓系白血病细胞系K562、急性早幼粒细胞白血病细胞系HL-60、急性淋巴细胞白血病细胞系MOLT4及具有单核细胞特征的白血病细胞系U937。结果表明：lrp16基因在K562、HL-60、MOLT4及U9374种细胞系中均表达。lrp16基因在急性髓系白血病患者表达阳性率为38％（16／42）,其中完全缓解者表达阳性率为13％（4／30）,未缓解者为100％（12／12）;在急性淋巴细胞白血病患者表达阳性率为38％（10／26）,其中完全缓解者阳性率为16％（3／18）,未缓解者为87％（7／8）;在慢性髓系白血病患者表达阳性率为36％（9／25）,其中完全缓解者阳性率为20％（4／20）,未缓解者为100％（5／5）;在慢性淋巴细胞白血病患者表达阳性率为31％（7／22）,其中完全缓解者阳性率为11％（2／17）,未缓解者为100％（5／5）。lrp16基因表达在各种白血病亚型之间无差异,但各亚型中完全缓解者与未缓解者之间存在显著差异（P〈0．001）。结论：lrp16基因是一个白血病癌基因,与白血病的发生、发展密切相关,有可能作为临床白血病治疗疗效的评价指标。     

Expression of the granulocyte/macrophage colony-stimulating factor gene in leukemic blast cells from patients with acute non-lymphocytic leukemia

Since granulocyte/macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) has been reported to stimulate the proliferation of clonogenic leukemia cells from patients with acute non-lymphocytic leukemia in vitro, the expression of the GM-CSF gene in primary human leukemic blast cells was studied. T-cell-depleted mononuclear cells in freshly drawn peripheral blood from patients with acute non-lymphocytic leukemia (ANLL) were subjected to the study. The expression of the GM-CSF gene was detected by Northern blotting analysis using [32P]GM-CSF as a probe. The GM-CSF gene was expressed in two out of five cases examined. In both of the patients who showed GM-CSF expression, remission could not be achieved.     

WT1基因在骨髓增生异常综合征及急性白血病患者中的表达

为了研究WT1基因在骨髓增生异常综合征 (MDS)和急性白血病 (AL)患者中的表达及其与临床预后的关系 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测 2 2例MDS和 6 9例AL的WT1mRNA的表达。结果表明 ,WT1mRNA在MDS RA及MDS RAS中低表达 ,阳性率为 10 % (1/10 ) ;在MDS RAEB和MDS RAEB t中高表达 ,阳性率为 91.7% (11/12 ) ,两者差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。WT1mRNA在各型急性白血病中均有表达 ,初发和复发急性白血病中WT1mRNA的阳性率 (6 9% )高于缓解患者 (12 .5 % ) (P <0 .0 1)。初发与复发AL的WT1mRNA的相对表达量无差异 ,而MDS RAEB和RAEB t的表达量低于初发AL患者。WT1mRNA阳性的AML患者的化疗缓解率 (4 1% )低于阴性患者 (78% ) ;WT1基因相对表达量≥ 1的AML患者的CR率 (18% )低于 <1的患者 (5 5 % )。结论 :WT1基因在MDS RAEB和MDS RAEB t中的表达明显高于MDS RA和MDS RAS ,动态监测WT1基因的表达可能有助于监测MDS的病情变化。WT1基因表达与否及表达高低与初发AL的预后有关 ;WT1基因是急性髓细胞白血病的一个独立的预后因素。     

Chfr基因在急性白血病骨髓细胞中表达的研究

为了探讨急性白血病（AL）患者骨髓细胞中有丝分裂早期检查点Chfr基因的表达及其意义，对46例初诊未治疗的AL患者骨髓单个核细胞，用RT—PCR和免疫组织化学的方法检测Chfr基因mRNA及蛋白的表达，并与正常人骨髓单个核细胞进行对照。结果表明：免疫组织化学和RT—PCR分析显示。28例急性髓细胞白血病（AML）中的15例，18例急性淋巴细胞白血病（ALL）中的13例骨髓单个核细胞Chfr基因mRNA和蛋白的表达与正常对照相比显著下降，同时Chfr基因表达异常病例染色体检查存在核型异常。结论：急性白血病骨髓细胞有丝分裂检查点Chfr基因表达受损，可能在白血病发病中具有重要作用。     

B7-H1基因在白血病细胞中的表达及其临床意义

本研究通过检测B7-H1基因在多种白血病细胞中的表达水平,探讨其临床意义。采用SYBR GreenⅠ实时定量PCR法检测9株白血病细胞系、4株IFN-γ体外诱导后的白血病细胞系,59例原代急性白血病细胞、10例原代白血病细胞诱导生成的树突状细胞(DC)以及2株实体肿瘤细胞系,10例正常人骨髓单个核细胞中B7-H1mRNA的表达水平,并对59例急性白血病患者的治疗反应与其白血病细胞中B7-H1基因表达水平之间的相关性进行了分析。结果显示:B7-H1 mRNA在白血病细胞系、原代急性白血病细胞中的表达水平较低,在IFN-γ体外诱导后的白血病细胞系、原代白血病细胞诱导生成的DC中的表达水平明显上调,在化疗后未获完全缓解(CR)的患者白血病细胞中B7-H1 mRNA表达水平明显高于化疗后获得CR的患者。结论:B7-H1基因在白血病细胞中的表达水平较低,但在某些因素作用下其表达水平明显上调。白血病细胞中B7-H1基因表达水平与患者的治疗反应有显著相关性。     

抑癌基因pten在骨髓增生异常综合征及急性髓系白血病的表达

为了研究pten基因在骨髓增生异常综合征（MDS）、急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其意义，采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫印迹杂交（Western blot）方法检测Jurkat细胞株、35例MDS、45例AML及20例正常人骨髓有核细胞中pten mRNA及其蛋白的表达。结果表明：pten mRNA在阴性对照Jurkat细胞株不表达。MDS组的阳性表达率（77．1％）低于正常对照组（90．0％），但差异无统计学意义（P〉0．05）；AML组阳性表达率（60．0％）低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；MDS—RAEB组阳性表达率（70．0％）低于MDS—RCMD组（86．7％），初发／复发AML组阳性表达率（53．3％）低于完全缓解AML组（73．3％），但差异均无统计学意义（p〉0．05）。对各组pten mRNA相对表达量分析发现，MDS及AML组均明显低于正常对照组（P〈0．005）；MDS-RAEB组低于MDS-RCMD组（P〈0．05）；初诊／复发的AML组明显低于完全缓解的AML组（P〈0．001）；MDS组与AML组相比，差异无统计学意义（p〉0．05）。PTEN蛋白表达阳性率在MDS组（65．7％）及AML组（54．8％）均低于正常对照组（90％）（P〈0．05）；MDS—RCMD组（80．O％）与MDS—RAEB组（55．0％）相比，阳性表达率均无统计学意义（P〉O．05），但初诊／复发的AML组（44．4％）与完全缓解的AML组（73．3％）相比，差异有统计学意义（p〈0．05）。结论：pten mRNA在MDS、AML中表达完全缺失并不多见，但表达强度较正常人明显减弱。PTEN蛋白在MDS、AML中阳性表达率低于正常人，且与mRNA表达水平不一致。pten基因的表达异常参与了MDS及AML的发病。