荧光定量PCR诊断HCMV病毒感染的阈值建立

人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）在我国１０岁以下儿童的感染率（抗ＨＣＭＶ－－ＩｇＧ阳性率）超过９５％。当机体抵抗力低下时，ＨＣＭＶ可引起多种组织的感染甚至危及生命。多聚酶链反应可作为ＨＣＭＶ感染早期快速的检测手段，但由于该病毒潜伏感染的特点（多为肾脏），正常健康人的尿液内亦有少量的ＨＣＭＶ，一般定性ＰＣＲ可能存在一定的假阳性。因此我们采用荧光标记探针，以Ｔａｐｍａｎ技术对尿液中ＨＣＭＶ基因进行定量检测，观     

巨细胞病毒即刻早期基因mRNA检测方法的建立

目的建立快速简便的逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）方法检测人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）即刻早期（ＩＥ）基因ｍＲＮＡ。方法设计合成跨越ＨＣＭＶＩＥ基因内含子区的一对引物，分别用ＲＴＰＣＲ和ＰＣＲ技术扩增ＨＣＭＶｍＲＮＡ和ＤＮＡ，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定阳性产物。结果ＨＣＭＶＩＥ基因ｍＲＮＡ表达在感染后６小时即可出现，并持续到感染后至少９６小时，ＲＴＰＣＲ检测的最低敏感性为１００ｆｇ总ＲＮＡ，其他病毒和细胞ＲＮＡ不能被扩增。结论ＲＴＰＣＲ技术检测ＨＣＭＶｍＲＮＡ敏感、特异，有望应用于临床作为ＨＣＭＶ活动性感染的早期诊断方法     

逆转录套式ＰＣＲ检测丙型肝炎病毒感染者ＨＣＶ ＲＮＡ

目的　探讨人血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ与血清ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体联合检测对丙型肝炎的诊断价值。方法对以ＥＬＩＳＡ方法检测所得的４６例ＨＣＶ—ＩｇＧ阳性的标本用逆转录套式聚合酶锭反应（ＲＴ—ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ，同时用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中ＨＣＶ—ＩｇＭ。结果血清中有１７例ＨＣＶ　ＲＮＡ阳性和６例ＨＣＶ—ＩｇＭ阳性，而ＰＢＭＣ中有１９例ＨＣＶＲＮＡ阳性。结论血清中ＨＣＶ—ＩｇＭ可作为丙型肝炎的初筛诊断，ＨＣＶ—ＩｇＭ可作为ＨＣＶ近期感染的指标，但二者均不能准确反映病毒在体内的存在情况，而套式ＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ可直接反映ＨＣＶ在体内的活动情况，其中ＰＢＭＣ中检测ＨＣＶＲＮＡ的阳性率高于血清，提示ＨＣＶ可能在ＰＢＭＣ中潜伏乃至复制。     

45例肝硬化、40例原发性肝瘤患者HBV、HCV感染的血清学调查

４５例肝硬化、４０例原发性肝瘤患者ＨＢＶ、ＨＣＶ感染的血清学调查陈国芳王嵩（宜兴市张渚人民医院，江苏宜兴２１４２３１）对苏南丘陵山区４５例肝硬化、４０例肝癌患者进行乙肝二对半（ＨＢＶＭ）和抗－ＨＣＶ测定，结果该８５例肝病患者血清检测ＨＢＶＭ阳性者７２...     

用逆转录聚合酶链反应法检测人巨细胞病毒晚期mRNA

人类ＨＣＭＶ感染非常普遍，在成人可达８０％～９６７４％［１］，而只有活动性感染才可导致病理性损害。因此建立一个快速、准确、敏感的ＨＣＭＶ活动性感染的检测方法，对ＨＣＭＶ感染的诊断和治疗具有重要意义。我们采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）方法，通过检测...     

巨细胞病毒感染实验室检查的临床意义

１ 引 言 巨细胞病毒感染是由人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）引起。当ＨＣＭＶ侵入人体后，不论是在宿主体内复制还是在体内潜伏，均称为巨细胸病毒（ＣＭＶ）感染。ＣＭＶ感染大多在幼年时期发生。据我国１项资料显示，１岁至３岁组幼儿ＣＭＶ感染率８３．２％，４岁至７岁组８３．７％，８岁至１４岁组为８７．３％，成人组高达９５％。国外资料显示：ＨＣＭＶ感染无季节性，受年龄、地理环境、文化背景、经济状况和生育状况的影响。发达国家中、上阶层ＣＭＶ感染率为４０％至 ６０％，下层为 ８０％以上，而发展中国家则达 ９５％以上。婴儿可…     

应用PCR方法检测精液人类巨细胞病毒与优生优育关系的研究

介绍一种应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）对人类精液进行人类巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）检测的方法。结果表明：在提高人口素质方面，精液标本的ＨＣＭＶ检测是防止胎儿宫内感染进而导致先天畸形最有效的方法。它可鉴定男方在要求生育时是否带有ＨＣＭＶ。此技术具有特异性强、快速、简便等优点，如果将其推广应用到围产保健及监测妊娠前的ＨＣＭＶ感染、婚前检查、精子库供精者的筛选，将对优生优育起巨大的推动作用。     

新生儿人巨细胞病毒性肝炎48例临床研究

新生儿人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）性肝炎是在新生儿肝炎综合征中最常见的一种。在我国育龄妇女中，血清抗ＨＣＭＶＩｇＭ阳性率高达９４７％～９６３％［１］。新生儿可经垂直传播而被感染，临床上常表现为ＨＣＭＶ肝炎。为了提高新生儿ＨＣＭＶ肝炎的诊治水平，本文...     

急性心肌梗塞后心率的相关维

急性心肌梗塞后心率的相关维刘芳魏建西刘树清王增春（河北石家庄白求恩国际和平医院，石家庄０５００８２）各种研究显示心率变异（Ｈｅａｒｔｒａｔｅｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ，ＨＲＶ）减低与急性心肌梗塞的预后有关。近年来心率变异分析作为无创、定量评价自主神经功能...     

测定慢性阻塞性肺疾病患者HCT、MCV、MCH、MCHC的临床意义

测定慢性阻塞性肺疾病患者ＨＣＴ、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ的临床意义郑爱菊，田炜宁对我院４９例慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）患者红细胞压积（ＨＣＴ）、红细胞平均体积（ＭＣＶ）、红细胞平均血红蛋白（ＭＣＨ）和红细胞平均血红蛋白浓度（ＭＣＨＣ）测定结果报告如...     

巨细胞病毒对人骨髓粒-巨噬系祖细胞生长的影响

目的探讨人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）对人骨髓粒巨噬系祖细胞集落（ＣＦＵＧＭ）是否有直接抑制作用。方法采用造血祖细胞体外培养技术,研究病毒株ＨＣＭＶＡＤ１６９对ＣＦＵＧＭ生长的影响,用原位聚合酶链反应（ＩＳＰＣＲ）技术检测ＣＦＵＧＭ的细胞内ＨＣＭＶＡＤ１６９ＤＮＡ。结果高浓度ＨＣＭＶＡＤ１６９（２×１０６ｐｆｕ／ｍｌ和２×１０５ｐｆｕ／ｍｌ）在体外能明显抑制ＣＦＵＧＭ的生长（Ｐ＜０．０１）,而低浓度（２×１０４ｐｆｕ／ｍｌ）ＨＣＭＶＡＤ１６９则无此作用,ＨＣＭＶＡＤ１６９对骨髓ＣＦＵＧＭ的抑制作用因其浓度的不同而有差异;经ＩＳＰＣＲ检测发现在ＣＦＵＧＭ的细胞核中存在ＨＣＭＶＡＤ１６９ＤＮＡ。结论ＣＦＵＧＭ是ＨＣＭＶＡＤ１６９的宿主细胞之一,ＨＣＭＶＡＤ１６９对骨髓ＣＦＵＧＭ生长的抑制作用与其对ＣＦＵＧＭ的直接感染有关。     

丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１），经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析证实这些融合蛋白具有ＨＣＶ的特异抗原活性，提示这些融合蛋白可用于ＨＣＶ感染的临床诊断和发病机理的研究。     

人巨细胞病毒糖蛋白gp52的原核表达及初步应用

目的探讨以表达人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）中抗原性较强的蛋白片断代替全病毒抗原建立ＨＣＭＶＩｇＭ检测试剂盒的可行性。方法以聚合酶链反应扩增ＨＣＭＶ聚合酶辅助糖蛋白（ｇｐ５２）的有效抗原基因序列，导入带有高效转录启动子ｐＴｒｃ和６个串联组氨酸的原核表达载体ｐＴｒｃＨｉｓ，在大肠杆菌中表达，经金属鏊和亲和层析（ＩＭＡＣ）法纯化后，用酶联免疫吸附法检测新生儿血清，并与全病毒抗原检测进行比较。结果重组ｇｐ５２占大肠杆菌总蛋白的４０％，ＩＭＡＣ纯化后纯度达９４．５％。在４３份疑似ＨＣＭＶ感染的新生儿血清中阳性检出率为５１．２％，而用全病毒抗原检测阳性率只有２５．９％。结论ＨＣＭＶｇｐ５２蛋白具有良好的抗原性，可用于建立新一代的检测试剂盒。     

肝癌患者庚型肝炎病毒感染血清学研究

采用抗－ＨＧＶ酶联免疫试验（ＥＩＡ）对１６０例肝细胞癌（ＨＣＣ）和１３０人健康人群进行了检测，结果抗－ＨＧＶ阳性率分别为１４．３８％和２．３１％，表明在不同人群中存在庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染；ＨＣＣ患者抗－ＨＧＶ阳性率明显高于健康人群，显示ＨＧＶ感染与ＨＣＣ发生有关；同时在抗－ＨＧＶ阳性ＨＣＣ患者中ＨＢＶ感染率高达８２．６１％，提示ＨＧＶ和ＨＢＶ重叠感染可增加ＨＣＣ的发生.     

巨细胞病毒即刻早期及晚期基因片段的检测

自巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＡＤ１６９株感染细胞中提取的ＤＮＡ，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，在自行设计及合成的两对特异性引物引导下，成功地扩增出口ＣＭＶ即刻早期（ＩＥ）及晚期（Ｌ）基因片段，摸索了最佳Ｔａｑ酶、Ｍｇ￣（２＋）浓度及退火温度的反应条件，并建立了同一体系中同时检测ＨＣＭＶＩＥ及Ｌ基因片段的方法。初步应用该方法检测了１２例肾移植患者尿标本及１０例动脉粥样硬化标本中ＨＣＭＶＩＥ及Ｌ基因，结果ＩＥ阳性率分别为８％及２０％，Ｌ基因阳性率为３３％及５０％，未见有假阳性及假阴性结果的出现，表明该方法具有较好的特异性及灵敏度，可广泛地应用于临床ＨＣＭＶ的诊断。     

无明显HIV感染证据的特发性CD＿4＋T淋巴细胞减少免疫缺陷症

无明显ＨＩＶ感染证据的特发性ＣＤ＿４＋Ｔ淋巴细胞减少免疫缺陷症｜｜（Ｈ．ＤＤ，ｅｔａｌ，ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ，１９９３；３２８：３８０）人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）是获得性免疫缺陷综合征（ＡＩＤＳ）病原体，会感染或耗尽ＣＤ４＋Ｔ淋巴细胞。无明显ＨＴＶ感染...     

HCV感染基因型病毒复制程度与肝病关系的研究

采用限制性内切酶Ｓａｕ３Ａｌ和ＨａｅⅢ对５４例ＲＴ－ＰＣＲ法ＨＣＶＲＮＡ阳性的５＇ＮＣ区扩增产物进行酶切分型；ＰＣＲ滴定法半定量分析ＨＣＶＲＮＡ含量。结果显示４种酶切类型：ＨＣＶⅠ型感染３．７％（２／５４），ＨＣＶⅡ型感染７７．８％（４２／５４），ＨＣＶⅢ、Ⅳ型感染１１．１％（６／５４），ＨＣＶⅠ、Ⅱ／Ⅲ、Ⅳ型混合感染７．４％（４／５４），ＨＣＶⅡ型感染阳性率在ＡＨ、ＣＡＨ、ＬＣ三组间无显著差异（     

125例地中海贫血杂合子临床血液学分析

目的对１２５例不同类型的地中海贫血（地贫）杂合子进行临床血液学分析。方法用Ｃｏｕｌｔｅｒ血球计数仪测定分析对象末梢血红细胞平均容量（ＭＣＶ）和红细胞平均血红蛋白（ＭＣＨ）。用醋纤薄膜电泳比色法及１分钟碱变性法分别测得ＨｂＡ２和ＨｂＦ含量。结果所有地贫杂合子的ＭＣＶ、ＭＣＨ明显小于正常值（Ｐ＜０．００１），符合小细胞低色素性贫血，同时发现不同的β地贫突变类型，其ＭＣＶ也存在差异，β０突变杂合子ＭＣＶ低于β＋突变杂合子（Ｐ＜０．０３）。结论ＭＣＶ和ＭＣＨ的测定不仅可为地贫的临床诊断提供依据，而且ＭＣＶ还可以作为地贫杂合子类型鉴定的参考     

急性出血性脑血管病并发多脏器功能失常综合征患者血浆内皮素-1及降钙素基因相关肽水平的观察

目的：探讨血浆内皮素１（ＥＴ１）和降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）在急性出血性脑血管病（ＡＨＣＶＤ）并发多脏器功能失常综合征（ＭＯＤＳ）发病中的作用。方法：采用放射免疫法分别测定２１例ＡＨＣＶＤ合并ＭＯＤＳ患者（ＭＯＤＳ组）、２０例ＡＨＣＶＤ患者（ＡＨＣＶＤ组）及３０例正常人（正常对照组）血浆中ＥＴ１和ＣＧＲＰ水平。结果：ＭＯＤＳ组及ＡＨＣＶＤ组血浆ＥＴ１水平明显高于正常对照组（Ｐ均＜０．０１），ＭＯＤＳ组ＥＴ１水平又明显高于ＡＨＣＶＤ组（Ｐ＜０．０１）。ＡＨＣＶＤ组血浆ＣＧＲＰ水平高于正常对照组，但无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。而ＭＯＤＳ组血浆ＣＧＲＰ水平明显低于正常对照组，ＥＴ１／ＣＧＲＰ（Ｅ／Ｃ）比值明显高于ＡＨＣＶＤ组及正常对照组（Ｐ均＜０．０１）。结论：血浆ＥＴ１水平升高、ＣＧＲＰ水平降低、Ｅ／Ｃ比值严重失衡与ＭＯＤＳ的发生相关；检测血浆ＥＴ１和ＣＧＲＰ水平对评估ＡＨＣＶＤ患者预后有一定意义     

血清谷丙转氨酶异常者丙型肝炎抗体的检测

血清谷丙转氨酶异常者丙型肝炎抗体的检测辽宁省临床检验中心（沈阳１１００１５）刘力勇辽宁省人民医院检验科林亚哲，秦德生丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染机体后４～３２周（平均１５周）产生抗－ＨＣＶ（ＤｕｃｒｅｕｒＭ，Ｌａｎｃｅｔ１９９０，３３５：３０１），在抗...