慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者血清IFN-γ基因多态性分析

目的 探究慢加急性乙型肝炎肝衰竭(HBV-ACLF)患者血清γ-干扰素(IFN-γ)基因多态性分布特点。方法 2017年5月～2019年9月我院收治的HBV-ACLF患者60例,另选择同期健康体检者60例作为对照。采用Taqman探针荧光定量PCR法检测外周血IFN-γ基因多态性位点+874T/A和+2109A/G基因型,采用x²检验和Hardy-Weinberg平衡检验IFN-γ基因SNP位点+874T/A和+2109A/G基因型和等位基因频率分布差异。结果 在IFN-γ+874T/A位点,ACLF患者TT基因型为48.3%,显著低于健康人的56.7%,而AA基因型为31.7%,显著高于健康人的13.3%(P＜0.05),在等位基因频率分布方面,ACLF患者T等位基因频率为58.3%,显著低于健康人的71.7%,而A等位基因频率为41.7%,显著高于健康人的28.3%(P＜0.05);在IFN-γ+2109A/G位点,ACLF患者显性等位基因纯合子AA基因型频率为53.3%,显著低于健康人的66.7%,隐性等位基因纯合子GG基因型频率为28.3%,显著高于对照组的10.0%(P＜0.05),在等位基因频率分布方面,ACLF患者A等位基因频率为62.5%,显著低于对照组的78.3%,而G等位基因频率为37.5%,显著高于对照组的21.7%,差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论 IFN-γ基因多态性与乙型肝炎患者发生ACLF可能存在某种关系,其中IFN-γ基因+874T/A位点中的A等位基因和+2109A/G位点中的G等位基因可能是患者发生HBV-ACLF的风险等位基因,监测外周血IFN-γ基因多态性对及时准确地预测ACLF的发生可能具有一定的临床意义。     

慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者外周血IFN-γ基因多态性分析及其临床意义探讨*

目的 探讨乙型肝炎病毒感染引起的慢加急性肝衰竭患者血IFN-γ基因多态性。方法 采用单核苷酸多态性（SNP）技术检测51例ACLF患者和50例健康人血IFN-γ基因内含子+874 位点T/A 和+2109位点A/G单核苷酸多态性。结果 ACLF患者+874位点TA+AA基因型频率（54.9%）显著高于健康人（24.0%）,A等位基因频率（38.2%）显著高于健康人（22.0%,P<0.05）;ACLF组+2109位点AG+GG型基因型频率（51.0%）显著高于健康人（26.0%）,G等位基因（32.4%）显著高于健康人（16.0%,P<0.05）;在3 m末,28例生存与23例死亡的ACLF患者+874、+2109位点等位基因和基因型频率分布无显著性差异（P>0.05）。结论 IFN-γ基因+874 位点A等位基因和基因型、+2109位点G等位基因和基因型是ACLF的遗传易感基因。     

白细胞介素-1β和干扰素-γ基因单核苷酸多态性与溃疡性结肠炎遗传易患性研究

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)和干扰素-γ(IFN-γ)基因单核苷酸多态性与溃疡性结肠炎(UC)遗传易患性的关系。方法应用聚合酶链反应顺序特异性引物法(PCR-SSP),检测2005年5月至2006年8月在哈尔滨医科大学附属第一医院就诊的56例UC患者(UC组)和44名同期体检健康者(对照组)的IL-1β( 3962T/C位点)和IFN-γ( 874A/T位点)基因单核苷酸多态性,分析2组基因型频率和等位基因频率分布特点。结果UC组IL-1β 3962位点CT杂合子基因型的频率及T等位基因频率明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05)。IL-1β 3962位点各基因型在UC不同发病部位之间的分布,差异无显著性意义(P>0.05)。IFN-γ基因 874位点各基因型的频率和等位基因的频率在2组中的分布差异无显著性意义(P>0.05)。结论IL-1β 3962位点CT基因型频率及T等位基因频率增高可能与UC遗传易患性有关,但与UC发病部位无关。IFN-γ基因 874位点的多态性与UC遗传易患性无关。     

干扰素-γ基因+874位点及肿瘤坏死因子-α基因-238位点单核苷酸多态性与HBV宫内感染相关性研究

目的:研究IFN-γ+874位点T/A以及TNF-α-238位点G/A的单核苷酸多态性与HBV宫内感染的相关性。方法:采集HBV标记物单项或多项阳性孕妇的外周血,提取基因组DNA,根据新生儿是否感染HBV将孕妇分为宫内感染组和对照组。利用等位基因特异性PCR检测IFN-γ+874位点等位基因型,利用PCR-RFLP方法检测TNF-α-238位点等位基因型。结果:等位基因特异性PCR可以准确判断IFN-γ+874位点等位基因型,对照组IFN-γ+874位点等位基因频率A为0.562,T为0.438,而宫内感染组A为0.738,T为0.262,两组之间的差异具有统计学意义(χ2=4.38,P=0.036)。TNF-α-238位点等位基因型的检测可以使用PCR-RFLP方法,对照组TNF-α-238位点等位基因频率A为0.146,G为0.854,宫内感染组A为0.262,G为0.738,两组之间的差异无统计学意义(χ2=3.26,P=0.071)。结论:IFN-γ+874位点T/A等位基因与HBV宫内感染具有一定相关性,T等位基因对胎儿HBV宫内感染具有防护作用。TNF-α-238位点G/A等位基因型与HBV宫内感染的关系尚不明确。     

肝细胞癌患者IL-18基因-137G/C和-607A/C位点单核苷酸多态性变化及其意义探讨

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者白细胞介素-18(IL-18)基因-137G/C和-607A/C位点单核苷酸多态性(SNP)的变化。方法在178例伴有HBV感染的HCC患者和251例健康人,取外周静脉血提取DNA,采用聚合酶链反应-连接酶检测反应(PCR-LDR)行基因分型,测定IL-18基因-137G/C和-607A/C位点SNP。结果 HCC患者和健康人IL-18-37 G/C基因GG基因型、GC基因型和CC基因型分布频率分别为75.3%对47.0%(P0.05)、20.8%对51.4%(P0.05)和3.9%对1.6%(P0.05),G等位基因和C等位基因分布频率分别为93.6%对72.7%(P0.05)和6.4%对27.3%(P0.05);HCC患者和健康人IL-18-607A/C位点AA基因型、AC基因型和CC基因型分布频率分别为37.6%对13.5%(P0.05)、43.3%对66.9%(P0.05)和19.1%对19.5%(P0.05),A等位基因和C等位基因分布频率分别59.3%对47.0%(P0.05)和40.7%对53.0%(P0.05);HCC组IL-18-137G/C位点的GG基因和G等位基因频率显著高于健康人(P0.05),HCC组IL-18-607A/C位点的AA基因和A等位基因频率也显著高于健康人(P0.05),提示携带IL-18-137G/C和IL-18-607A/C位点基因型和A等位基因者罹患HCC的风险增加。结论携带IL-18基因-137G/C位点GG基因型和G等位基因以及-607A/C位点AA基因型和A等位基因者可能更容易发生HCC,对HBV感染者筛查这些基因可能有助于早期发现肝肿瘤,以利于早期处理和改善预后。     

干扰素γ基因多态性与动脉粥样硬化斑块稳定性相关性研究

目的初步探讨干扰素γ(interferon gamma,IFNγ)+2109A/G和+874A/T位点基因多态性是否影响动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生及其斑块稳定性。方法选择204例住院患者,将AS斑块不稳定患者109例为观察组和无斑块或动脉粥样硬化斑块稳定患者95例为对照组,流式细胞仪检测血浆IFNγ水平,并通过PCR产物直接测序法检测IFNγ+2109基因表达,通过序列特异性引物引导的PCR反应技术检测IFNγ+874基因表达,采用DNAStar、GeneTool软件分析测序结果。结果观察组IFNγ+2109位点AA、AG、GG型基因为46.79%、44.04%、9.17%,对照组分别为43.16%、43.16%、13.68%(P=0.585),观察组等位基因频率A、G为68.81%、31.19%,对照组为64.74%、35.26%(P=0.383);观察组IFNγ+874A/T位点AA、AT、TT型基因为48.62%、41.28%、10.10%,对照组分别为46.32%、50.53%、3.15%(P=0.102),观察组等位基因频率A、T分别为69.27%、30.73%,对照组为71.58%、28.42%(P=0.610)。观察组血浆IFNγ为(4.60±1.91)μg/L,对照组为(4.88±2.10)μg/L(P=0.318)。结论 IFNγ的基因多态性不能作为AS斑块稳定性的预警指标。     

大肠癌IFN-γ基因+874位点的单核苷酸多态性

目的：探讨中国浙江地区汉族人群中IFN-γ基因 874位点多态性分布,分析其与大肠癌的相关性.方法：应用突变特异性扩增系统(ARMS)- PCR对健康者132例和大肠癌患者92例IFN-γ基因 874位点多态性进行分析,并将PCR产物克隆及测序鉴定.结果：大肠癌患者IFN-γ 874位点AA基因型频率为70.6%,显著高于正常人中的57.6% (P＜0.05).进一步分析显示IFN-γ 874位点AA基因型与患者的年龄、性别、肿瘤部位、Dukes分期无关.结论：IFN-γ 874位点AA基因型可能与大肠癌的发生相关.     

葡萄糖激酶基因多态性与妊娠期糖尿病遗传易感性的关系

目的 探讨葡萄糖激酶(GCK)基因-259位点单核苷酸多态性与妊娠期糖尿病(GDM)发病的关系.方法 应用PCR-RFLP技术对80例GDM孕妇(GDM组)和80例正常孕妇(对照组)的GCK基因-259位点(A→T)进行单核苷酸多态性分析.结果 两组GCK基因-259位点各基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡检验,具有群体代表性;GDM组GCK基因-259位点T等位基因频率高于对照组 (P＜0.05),A等位基因频率、A/A基因型频率无统计学差异(P＞0.05),T/T基因型频率与GDM组呈正相关(OR值为3.235,P=0.031),结论 GCK基因-259位点单核苷酸多态性可能在GDM遗传易感性中起重要作用;T等位基因可能与GDM发生有关.     

IL-10基因多态性与乙肝肝硬化易感性的相关性研究

探讨白细胞介素10(IL-10)基因多态性与乙型肝炎肝硬化易感性的关系.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-PFLP)分析方法,检测100例乙肝肝硬化患者及124例健康对照组IL-10基因启动子-1082G/A、-592A/C位点的基因多态性,并确定了其基因型和等位基因频率的分布.肝硬化组与对照组IL-10基因启动子-592A/C位点基因型分布频率和等位基因频率差异无显著性(P＞0.1),肝硬化组-1082G/A位点AA基因型频率及A等位基因频率高于对照组(P＜0.05),G等位基因相对于A等位基因患肝硬化的机会比为0.373(95%CI:0.166～0.838).IL-10基因多态性与肝硬化易感性相关,基因启动子-1082G/A位点AA基因型携带者肝硬化易感性高.     

脑源性神经营养因子基因多态性与血管性认知障碍的相关性研究

目的探讨脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因多态性与血管性认知障碍(vascular cognitive impairment,VCI)的相关性。方法采用PCR-RFLP技术检测42例VCI患者(VCI组)、49例脑梗死患者(脑梗死组)和46例健康体检者(对照组)BDNF基因 G196A位点及C270T位点单核苷酸多态性的分布,分析各基因型与发病的关系。结果 3组间BDNF基因G196A多态性位点各基因型频率和等位基因频率差异无统计学意义(P0.05);3组间BDNF基因C270T多态性位点各基因型频率和等位基因频率差异无统计学意义(P0.05)。结论 BDNF基因多态性可能与我国石家庄地区汉族人群VCI的发病无相关性。     

EGF+61基因多态性与肝硬化的相关性研究

目的 探讨表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)G61A位点(EGF+61)多态性与肝硬化发生、发展的关系.方法 运用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测中国人群中147例肝硬化患者和227例正常对照者中EGF+61位点的基因型,分析其基因型及等位基因的分布频率.结果 EGF+61位点AA基因型及A等位基因在正常对照者中的分布频率均高于肝硬化患者(7.0% vs 6.1%,30.4% vs 27.2%),但其差异均无统计学意义(P＞0.05).EGF+61位点AA基因型及A等位基因在不同的Child-Pugh分级的肝硬化中的分布频率及规律不一,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在中国人群中,EGF+61位点的基因多态性与肝硬化的发生和发展无密切相关性.     

ET-1基因多态性与海南黎族人原发性高血压的相关性

目的研究内皮素1(ET-1)基因K198N、G8002A、+138A/-多态性与海南黎族人群原发性高血压(EH)的相关性。方法采用引物特异性片段长度多态性(PCR-SSP)方法分别检测98名海南籍黎族EH患者及244名海南籍黎族血压正常者组的ET1基因的+138A/-,K198N,G8002A位点多态性,基因频率采用基因计数法计算。研究对象与Hardy-Weinberg平衡的符合程度及组间基因型与等位基因频率比较均用χ2检验。以上统计学处理均采用SPSS16.0软件进行分析。结果海南籍黎族EH组+138A/-位点的4A3A基因型分布频率明显高于正常对照组(53.1 vs37.3)(P<0.001),高血压组中4A(+138/-)等位基因分布频率显著高于正常对照组(28.6 vs 15.78)(P=0.003)。海南籍黎族EH组K198N位点的GT基因型分布频率明显高于在正常对照组(53.1%vs37.3%)(χ2=6.595,P<0.05)。EH组G8002A位点的A等位基因分布频率明显高于正常对照组(34.7%vs 25.0%)(P<0.05)。结论 ET-1基因+138A/-、K198N多态性与海南黎族人EH相关,ET-1基因+138A/-位点的4A3A基因型和4A等位基因、K198N位点的GT基因型、G8002A位点的A等位基因与海南黎族人EH相关,4A3A基因型、GT基因型、A等位基因可能是黎族EH发生的危险因素。     

少数民族帕金森病患者α-突触核蛋白和PARK基因突变与多态性的研究

目的分析兴义市少数民族帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者PARK基因突变与多态性分布的特点及其与PD的关系,为基因治疗研究打下基础。方法收集PD患者,提取原发性PD患者(PD组,包括布依族和苗族)及对照者(正常对照组及汉族PD患者)基因组DNA,采用PCR方法扩增α-突触核蛋白(SNCA)和PARK基因1~8号外显子,对其扩增产物进行测序,斑点杂交法验证其基因型和等位基因频率,计算基因频率和等位基因频率,并进行统计学分析。结果 PD组SNCA基因中T/T、C/T基因型高于对照组,但无统计学意义(P0.05),PD组患者GG、G等位基因频率高于对照组,差异不明显(P0.05)。布依族、苗族PD组患者SNCA基因T/T、T基因型频率显著高于同族健康对照组(P0.05),布依族、苗族健康人T/T、C/T、T基因频率显著低于汉族健康人(P0.05),几组患者G等位基因携带者发生PD风险性没有统计学差异(P0.05),T等位基因携带者发生PD风险性显著高于非携带者(P0.05)。布依族、苗族PD患者GG、G基因型频率显著高于对照组(P0.05),G等位基因携带者发生PD风险性显著高于非携带者(P0.05),几组患者G等位基因携带者发生PD风险性没有统计学差异(P0.05)。结论贵州省少数民族PD患者SNCA基因rs3822086位点和PAPK16基因rs947211多态性可能是潜在易感位点,G等位基因、T等位基因携带者发生PD风险性较高。     

急慢性HBV感染者外周血白细胞IL-6-572位点基因多态性分析

目的探讨成年人群IL-6基因启动子区-597G/A和-572C/G位点多态性与HBV感染的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性法检测179例HBV感染者(包括118例慢性乙型肝炎和61例急性乙型肝炎)和120例健康对照人群外周血IL-6基因启动子区-597G/A和-572C/G位点基因分型。结果本研究在-597位点仅发现GG基因型,未发现GA或AA基因型,而-572位点发现CC、CG和GG基因型;对179例HBV感染者和120例健康对照人群检测发现,IL-6-572 GG基因型频率分别为15.1%和19.1%(P>0.05),而118例慢性乙型肝炎患者GG基因型(18.7%)明显高于61例急性乙型肝炎(8.2%)和健康人(11.7%),差异有统计学意义(P<0.05);在HBV感染患者G等位基因频率(47.9%)显著高于健康对照组(35.2%),但差异无统计学意义(P>0.05),而慢性乙型肝炎患者G等位基因频率(37.7%)明显高于急性乙型肝炎(22.1%)和健康对照组(26.7%),差异有统计学意义(P<0.05);多因素非条件Lo-gistic回归分析显示-572基因多态性与HBV感染后慢性化有关[P=0.038,OR=3.788(1.075～13.333)]。结论IL-6-572C/G基因多态性与HBV感染慢性化有关。     

磷酸二酯酶4D基因rs966221位点单核苷酸多态性与缺血性脑卒中发病的关系

目的探讨广西壮族人群磷酸二酯酶4D(PDE4D)基因rs966221位点单核苷酸多态性与缺血性脑卒中(IS)发病的关系。方法采用病例-对照研究设计,运用SNaPshot技术对101例广西壮族IS患者(IS组)及同期104例健康体检者(对照组)的PDE4D基因rs966221位点单核苷酸多态性进行检测,比较2组各基因型及等位基因频率,并进行相关性分析。结果 IS组与对照组PDE4D基因rs966221位点GG、GA、AA基因型(0.99%vs 3.85%,29.70%vs 21.15%,69.31%vs 75.00%)及G、A等位基因频率(15.84%vs 14.42%,84.16%vs 85.58%)比较,差异无统计学意义(P0.05)。单因素及多因素logistic回归分析显示,在显性(AAvs GG+GA)、隐性(GGvs AA+GA)和加性(GGvs AA)3种遗传模型下,PDE4D基因rs966221位点单核苷酸多态性与IS患病风险均无关联(P0.05)。结论广西壮族人群PDE4D基因rs966221位点单核苷酸多态性与IS发病不相关。     

脂联素基因多态性与代谢综合征和血浆脂联素水平的相关性

目的研究汉族人脂联素基因SNP+276G/T、SNP+45T/G与代谢综合征(MS)和血浆脂联素(APN)水平的关系。方法采用病例-对照研究方法,选择848例65⁹2岁汉族老年人,448例MS患者,健康人400例作为正常对照组(NC组),用DNA提取试剂盒提取外周血白细胞DNA,应用PCR-RFLP技术,检测SNP+276G/T、SNP+45T/G基因型,并观察各基因型和等位基因频率在该人群中的分布及其差异。血浆APN水平用ELISA法测定。结果该人群SNP+276和SNP+45位点均检测出三种基因型GG、GT、TT。SNP+276位点MS组GG基因型频率明显高于NC组,TT基因型频率明显低于NC组(P均﹤0.05),两组T、G等位基因频率亦有显著差异(P﹤0.05)。SNP+45位点两组基因型频率和等位基因频率均无统计学意义(P﹥0.05)。MS组血浆APN水平显著低于NC组(P﹤0.05),女性血浆APN水平明显高于男性(P﹤0.05)。SNP+45位点中TT基因型的APN水平显著低于非TT基因型(P﹤0.05)。结论 APN基因+276G/T多态性可能是汉族人MS的易感因素,而APN基因+45T/G多态性可能与MS无关;高血浆APN水平可能是MS发病的一个保护性因素;SNP+45T/G可能与脂联素水平相关。     

2型糖尿病患者肾素血管紧张素Ⅱ1型受体基因多态性与瘦素、白介素6的相关性

目的 分析2型糖尿病患者肾素血管紧张素Ⅱ1型受体基因(AGTR1)A10208G位点多态性与瘦素(LEP)、白介素6(IL-6)的关系. 方法 PCR-RFLP法检测105例伴有肥胖的2型糖尿病患者(DM-O组)、22例不伴肥胖的2型糖尿病患者(DM-N组)及224例健康人(NC组)AGTR1基因A10208G位点多态性,并测定相应指标进行分析. 结果 (1)DM-O组AG+GG基因型分布和等位基因频率显著高于NC组;(2)DM-O组、DM-N组携A等位基因患者LEP显著高于携G患者. 结论 AGTR1基因A10208G位点多态性与伴有腹型肥胖的2型糖尿病存在相关性;LEP抵抗可能是未发生AGTR1基因A10208G位点A→G突变的2型糖尿病重要发病因素之一.     

基质金属蛋白酶-2组织抑制剂基因多态性与慢性阻塞性肺病患者肺功能关系

目的研究基质金属蛋白酶-2组织抑制剂(TIMP-2)基因多态性与慢性阻塞性肺病(COPD)患者肺功能的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测92例COPD患者TIMP-2基因+853位点单核苷酸多态性(SNPs),测定COPD患者肺功能,分析TIMP-2基因+853位点多态性与肺功能的关系。结果 TIMP-2基因+853位点基因型频率为G/G型73.9%、G/A 23.9%、A/A 2.2%,G/G型肺功能FEV1和FEV1/FVC(%)明显低于G/A型和A/A型(P0.05)。结论 TIMP-2基因+853位点G/G基因型与COPD患者肺功能的损害程度有关。     

肝细胞癌患者IL-18基因-137G/C和-607A/C位点单核苷酸多态性变化及其意义探讨*

目的 探讨肝细胞癌（HCC）患者白细胞介素-18（IL-18）基因-137G/C和-607A/C位点单核苷酸多态性（SNP）的变化。方法 在178例伴有HBV感染的HCC患者和251例健康人,取外周静脉血提取DNA,采用聚合酶链反应-连接酶检测反应（PCR-LDR）行基因分型,测定IL-18基因-137G/C和-607A/C位点SNP。结果 HCC患者和健康人IL-18-37 G/C基因GG基因型、GC基因型和CC基因型分布频率分别为75.3%对47.0%（P<0.05）、20.8%对51.4%（P<0.05）和3.9%对1.6%（P>0.05）,G等位基因和C等位基因分布频率分别为93.6%对72.7%（P<0.05）和6.4%对27.3%（P<0.05）;HCC患者和健康人IL-18-607A/C位点AA基因型、AC基因型和CC基因型分布频率分别为37.6%对13.5%（P<0.05）、43.3 %对66.9%（P<0.05）和19.1%对19.5%（P>0.05）,A等位基因和C等位基因分布频率分别59.3%对47.0%（P<0.05）和40.7%对53.0%（P<0.05）;HCC组IL-18-137G/C位点的GG基因和G等位基因频率显著高于健康人（P<0.05）,HCC组IL-18-607A/C位点的AA基因和A等位基因频率也显著高于健康人（P<0.05）,提示携带IL-18-137G/C和IL-18-607A/C位点基因型和A等位基因者罹患HCC的风险增加。结论 携带IL-18基因-137G/C位点GG基因型和G等位基因以及-607A/C位点AA基因型和A等位基因者可能更容易发生HCC,对HBV感染者筛查这些基因可能有助于早期发现肝肿瘤,以利于早期处理和改善预后。     

TBX5基因rs3825214位点多态性和心房颤动的相关性

目的探讨TBX5基因多态性与心房颤动的相关性。方法房颤患者100例(房颤组)和非房颤患者(对照组)107例进行TBX5基因rs3825214单核苷酸多态性和房颤的关联研究。所有患者均采集外周血提取基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检查患者TBX5基因rs3825214多态性的基因型和等位基因分布。结果 TBX5基因rs3825214位点在入选人群中存在多态性,分别为GG、AG和AA型,其基因型频率在房颤组和对照组分别依次为28.0%,60.0%,12.0%和15.9%,50.5%,33.6%。GG基因型在房颤组的频率分布显著高于对照组(P=0.035),AA基因型在房颤组的频率分布明显低于对照组(P<0.001)。G和A等位基因频率在房颤组和对照组分别为56.0%,44.0%和41.1%,48.9%,G和A等位基因频率在两组间的差异有统计学意义(P=0.001)。结论 TBX5基因rs3825214位点多态性与房颤的发生有相关性,G等位基因可能是房颤的易感基因,GG基因型可能增加了房颤发生的危险性。