gp120mAb对gp120抑制大鼠海马脑片CA1区LTP作用的研究

目的探讨人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)的包膜糖蛋白gp120特异抗体gp120mAb对gp120引起大鼠海马脑片CA1区的突触传递及可塑性变化的影响.方法应用离体脑片记录技术,记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位(EPSP),研究gp120mAb对gp120抑制高频电刺激Schaffer侧支引起的鼠海马长时程增强效应(LTP)作用的影响.结果gp120对高频电刺激(HFS,100 Hz,1 000 ms×2,串间隔20秒,共2次)Schaffer侧支引起的大鼠海马CA1区LTP产生抑制作用,而对其基础EPSP没有影响.用浓度为200 pmol/L的gp120灌流脑片,可引起LTP的维持发生抑制.这种抑制作用可被gp120特异抗体gp120mAb(50 ng/ml)所拮抗.结论gp120mAb可能是通过拮抗gp120抑制海马CA1区的LTP诱发和维持而参与艾滋病痴呆(HIV-1 associated dementia,HAD)的形成.     

点燃大鼠海马脑片CA1区兴奋性突触活动及双脉冲易化的观察

实验采用24只SD雄性大鼠,随机均分成马桑内酯(CL)肌注点燃组及生理盐水对照组。点燃大鼠在达到点燃标准后的保留期间,在原阈下剂量诱发出4—5级发作手24～48h内制备海马脑片,结果为:1.在阈强度与最大刺激强度间共选择10个强度,用于刺激Schaffcr侧支,以CA1区锥体细胞顺向群体锋电位(PS)振幅与EPSPs斜率的比值(PS/EPSPs slope)示突触效能,发现点燃组PS/PE明显高于对照组(P=0.004),表明 CL点燃伴随着兴奋性突触效能     

铅暴露对大鼠学习记忆功能和海马CA1区LTP的影响

目的 本研究观察铅对大鼠学习记忆功能和海马CA1区LTP的影响,探讨铅对学习记忆功能影响的可能机制.方法 22只大鼠随机分为2组.铅暴露组每天通过饮水饲以浓度为0.05g/L醋酸铅水溶液,对照组大鼠饮用蒸馏水.28天后开始水迷宫实验.之后,通过电生理实验比较强直刺激前后海马CA1区PS幅度变化.结果 在水迷宫实验中,铅暴露组大鼠寻找平台时间的缩短速度明显低于对照组,在搜索实验中错误次数明显增多.电生理实验中.铅暴露组强直刺激后平均PS幅值增至强直刺激前的(120.48±4.67)%,明显低于对照组(181.71±3.86)%.结论 铅暴露明显损伤了大鼠的空间学习和记忆能力.并明显抑制了大鼠海马CA1区LTP,铅对海马LTP的抑制是其损伤学习记忆功能的可能机制之一.     

大鼠离体海马脑片缺氧耐受性的研究

电刺激大鼠海马脑片的Schaffer氏侧支,记录CA_1区锥体细胞层的细胞外场电位,即群锋电位(PS),观察74个脑片在缺氧后的变化。当浴槽内氮气流速为150ml/min时,PS开始减小时间与完全消失时间分别为3.60±1.01min(均值±标准差)及4.90±1.21min。缺氧10、15、18、20min后再次给氧,PS恢复率分别是85.7、64.3、22.2、17.6％,由此推算50％脑片不能恢复的缺氧时间为15.9min。以上指标可作为脑片缺氧耐受性的可比指标,文中讨论了处理双孔浴槽实验结果时应注意的问题。     

SC1001钠对大鼠海马脑片CA1区锥体细胞痫样放电的影响

本实验采用离体海马脑片技术,在20只SD大鼠海马脑片上初步观察了SC1001钠对马桑内酯(CL)所致海马CAl锥体细胞痫样放电活动的影响,为进一步研究SC11001钠的抗痫作用机理提供线索。     

海马CA1区锥体细胞内钙离子释放与突触传递的可塑性

为分析海马CA1区锥体细胞内钙离子释放与突触传递长时程增强以及长时程抑制的关系，采用全细胞膜片钳和细胞内钙成像技术，观察了不同参数的突触前刺激引起大鼠海马锥体细胞内钙离子释放的状况。结果为：100Hz、50Hz、20Hz频率，分别用50、25、15、10、5脉冲的突触前刺激均可引起锥体细胞内钙的释放，10脉冲以上的刺激引起细胞内钙释放的成功率为100％，而5脉冲的刺激引起细胞内钙的释放率为57％。100Hz 3脉冲的刺激可引起少数锥体细胞内钙释放，而5Hz各脉冲的刺激均不能引起锥体细胞内钙的释放。结果提示，长时程抑制时细胞内钙的升高并非来自于细胞内钙库的钙释放；引起长时程增强的刺激参数与引起锥体细胞内钙释放的参数相似。本文又分析了两者的异同处。     

PAF对大鼠海马脑片CA1区长时程增强效应的影响

目的 :艾滋病是由人类免疫缺陷病毒 (humanimmunodeficiencyvirus ,HIV)引起。HIV - 1直接感染脑引起神经病理变化导致认知和行为障碍 ,称为艾滋病痴呆症综合症 (HIV - 1-associateddementiacomplex ,HAD)。大量证据显示HIV - 1感染 ,免疫激活MPS分泌一系列神经毒 ,包括来源于HIV - 1感染MPS的因子 (如细胞因子、PAF、兴奋性氨基酸等 )和来源于病毒的因子(gp12 0、tat、nef)等 ,这些毒素被广泛认为是HAD病理发生因子。但有关血小板激活因子 (platelet-activatingfactor,PAF)如何通过对大鼠海马脑片CA1区LTP的作用而参与HAD…     

Lavendustin A对gp120抑制大鼠海马CA1区LTP的翻转作用

目的：为了探讨酪氨酸蛋白激酶抑制剂Lavendustin A（Lav A）对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型（HIV-1）的包膜糖蛋白gp120引起大鼠海马脑片CA1区的长时程增强效应（Iong-term potentiation，LTP）的影响。方法：应用离体脑片记录技术，记录大鼠海马CA1区的兴奋性突触后电位EPSP，研究了Lav A对gp120引起的大鼠海马脑片CA1区突触传递和可塑性变化的影响。     

点燃大鼠海马脑片CAI区LTP及双脉冲抑制的观察

本文采用离体海马脑片技术首次观察了马桑内醣(Coriaria Lactone,CL)点燃大鼠海马脑片CAI区LFP及双脉冲抑制。28只SD雄性大鼠随机均分为CL肌注点燃组及生理盐水对照组。达点燃标准的大鼠在保留期间,用原阈下剂量诱发出4—5级大发作后24—48h内断头制备海马脑片。结果如下:1.     

合成抗痫新药SC1OO1Na对海马脑片锥体细胞突触传递的影响

目前认为抗痫药可通过抑制NMDA受体介导的兴奋性突触传递和增强GABA能的 IPSI发挥作用。SC1001Na是一种合成抗痫药。本实验在47只SD成年大鼠海马脑片上运用低镁模型及双脉冲抑制模型观察了该药对锥体细胞突触传递的影响并探讨其作用机理。经典制备海马脑片,人工脑脊液(ACSF)孵育1.5小时后进行实验,施予锥体细     

长期硒缺乏对大鼠子代海马CA3区突触结构参数的影响

目的　探讨硒缺乏对生长发育期大鼠神经发育的影响及机制。方法　取子3代膳食性硒碘缺乏的生长发育期大鼠,定量研究大鼠海马CA3区GrayⅠ型突触界面结构。实验分为对照组、低硒组、低碘组、低硒低碘组,利用透射电镜观察结合图像分析,比较各组大鼠海马CA3区突触的形态结构。结果　与对照组相比,低硒组、低碘组和低硒低碘组大鼠突触活性带的长度明显缩短[分别为(261 7±50 1)nm、(286 7±41 6)nm和(220 8±61 6)nm比(312 4±47 7)nm,均P<0 01],突触后致密物质的厚度明显缩短[分别为( 22 9±6 3 )nm、( 27 5±8 6 )nm和( 25 2±6 5 )nm比(48 1±12 3)nm,均P<0 01 ],低硒组和低碘组的突触界面曲率下降( 1 076±0 039和1 079±0 038比1 108±0 054,P<0 01),低硒低碘组的突触间隙宽度明显缩小[ (11 1±3 3)nm比(16 1±4 0)nm,P<0 01]。结论　膳食性硒缺乏可能通过在突触水平发生的神经元改变,影响学习记忆等神经功能。     

合成抗痫药SC1001Na对海马脑片锥体细胞突触传递的影响

经典制备海马脑片,人工脑脊液(ACSF)孵育1.5小时后进行实验,施予锥体细胞顺向或逆顺向刺激,玻璃微电极记录SAl区细胞群集峰电位(PS)。低镁模型实验:脑片记录正常PS后改用低镁ACSF灌流,PS幅度     

焦亚硫酸钠对大鼠海马CA1区神经元钠电流的影响

目的：探讨SO2 及其体内衍生物（亚硫酸盐和亚硫酸氢盐）对中枢神经元钠通道的影响。 方法: 采用全细胞膜片钳技术研究了焦亚硫酸钠（SMB）对大鼠海马CA1区神经元钠电流的影响及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)相应的保护作用。 结果： ① 焦亚硫酸钠可剂量依赖性地增大全细胞钠电流，剂量为2 μmol/L和20 μmol/L时，钠电流分别增大（22.36±3.28）% 和（65.05±5.75）%（n=10）。② 10　μmol/L的焦亚硫酸钠不影响钠电流的激活过程，却非常显著地影响其失活过程，使失活曲线显著右移，作用前后的半数失活电压分别为（-82.38±0.54）mV和（-69.39±0.41）mV (n=10, P<0.01), 但失活曲线的斜率因子未见改变。③ SOD(1×106 U/L)、CAT(2×106 U/L) 及GPx (1×104 U/L) 均可使SMB（10 μmol/L）增大的钠电流部分恢复。 结论： SMB增大钠电流并抑制其失活过程，从而影响神经细胞的兴奋性，这一效应可能与硫中心或氧中心自由基的损伤作用有关。     

过氧化氢对大鼠海马CA1区神经元钠电流的影响

目的与方法:采用全细胞膜片钳技术研究过氧化氢(H₂O₂)对急性分离的大鼠海马CA1区神经元钠电流的影响。结果:①过氧化氢可剂量依赖地增大钠电流,剂量为10μmol/L和100μmol/L时,钠电流分别增大(48.0±4.2)%和(88.2±5.1)%(n=10)。②10μmol/L的H₂O₂不影响钠电流的激活过程,却非常显著地影响其失活过程,作用前后的半数失活电压分别为(-64.58±1.22)mV和(-53.55±0.94)mV(n=10,P<0.01),但不改变失活曲线的斜率因子。结论:H₂O₂作为体内氧化代谢产物可能与一些神经系统疾病的发生有关。     

过氧化氢对大鼠海马CA1区神经元钠电流的影响

目的与方法 :采用全细胞膜片钳技术研究过氧化氢 (H2 O2 )对急性分离的大鼠海马CA1区神经元钠电流的影响。结果 :①过氧化氢可剂量依赖地增大钠电流 ,剂量为 10 μmol/L和 10 0 μmol/L时 ,钠电流分别增大 4 8 0 %± 4 2 %和 88 2 %± 5 1% (n =10 )。② 10 μmol/L的H2 O2 不影响钠电流的激活过程 ,却非常显著地影响其失活过程 ,作用前后的半数失活电压分别为(- 6 4 5 8± 1 2 2 )mV和 (- 5 3 5 5± 0 94 )mV(n =10 ,P <0 0 1) ,但不改变失活曲线的斜率因子。结论 :H2 O2 作为体内氧化代谢产物可能与一些神经系统疾病的发生有关…     

PTSD大鼠海马CA1区和前额叶皮层突触小泡蛋白的表达

目的:观察创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠海马CA1区和前额叶皮层(prefrontal cortex,PFC)突触小泡蛋白(synaptophysin)的表达,探讨PTSD大鼠空间记忆损伤的机制。方法:健康成年SD大鼠36只,随机分为正常对照组和模型组,每组18只。模型组采用单次延长应激(single prolonged stress,SPS)构建PTSD大鼠模型。Morris水迷宫实验检测2组大鼠的学习记忆能力,利用免疫组化、Western blot和免疫荧光实验检测海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达情况。结果:经过Morris水迷宫实验,模型组大鼠从第2天开始逃避平台的潜伏期较对照组均显著延长(P 0.01),目标象限的停留时间均明显降低(P 0.01),穿越原平台位置的次数也明显减少(P 0.01)。在免疫组化、Western blot和免疫荧光实验中,模型组大鼠海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达较对照组均明显减少(P 0.05或P 0.01)。结论:创伤后应激障碍大鼠空间记忆能力减退,可能与海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达减少有关。     

电针对大鼠海马CA1区微循环血流量的影响

目的 研究电针对大鼠海马CA1区微循环血流量的影响。方法 采用激光多普勒微循环血流分析仪，实时监测大鼠双侧海马CA1区微循环血流量，研究电针人中、内关以及曲池、足三里对大鼠海马微循环的影响，并与电针地机、空白组对照。结果 电针人中、内关可使大鼠双侧海马CA1区微循环血流量升高，与同组同侧电针前相比差异具有显著性（P〈0．05）；电针曲池、足三里可使大鼠双侧海马CA1区微循环血流量降低，与同组同侧电针前相比差异具有显著性（P〈0．05）。结论 电针人中、内关可促进大鼠海马CA1区微循环血流量；电针曲池、足三里可降低大鼠海马CA1区微循环血流量。     

点燃大鼠海马脑片CA_1区电活动的变化

实验选用80只SD雄性大鼠,随机分成两组,40只实验组大鼠肌肉注射阈下致惊厥量的马桑内酯(1.25mg/kg,隔日一次)进行点燃,40只对照组大鼠以等量的生理盐水肌肉注射。将点燃7天后的大鼠与相应的对照组间隔取材制备海马脑片。用细胞外记录场电位的方法观察了点燃大鼠海马脑片CA_1区电活动,目的在于探讨点燃大鼠点燃效应保留的机制。     

葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L-型钙通道的影响

目的:观察不同浓度葛根素对大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道的作用。方法:采用酶加机械分离的方法,急性分离出成年大鼠海马CA1区锥体细胞后,将含有锥体细胞的细胞悬液滴加于盖玻片上,待贴壁后选取符合实验条件的细胞,运用膜片钳单通道技术记录同一钳制电压下离子通道活动情况。结果:低浓度葛根素(1.2,2.4mmol·L-1)对L型钙离子通道的活动无明显影响;浓度达到4.8,9.6mmol·L-1时,L型钙离子通道平均开放时间由对照组的11.773±4.838ms分别减少到7.948±2.513ms和4.533±0.828ms(P<0.05),浓度进一步增加到19.2mmol·L-1时,通道平均开放时间降至3.042±0.792ms(P<0.05)。当葛根素达到一定浓度(4.8,9.6mmol·L-1)时,通道开放概率由对照组的0.0011±0.0001分别减小到0.00053±0.00018和0.00032±0.00013(P<0.05),随着浓度的进一步增加(19.2mmol·L-1),开放概率降至0.00021±0.00009(P<0.05)。总体而言,葛根素可以抑制单个大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道活动,减少通道开放时间,降低通道开放概率。结论:葛根素可以抑制大鼠海马CA1区锥体细胞L型钙离子通道,减少通道开放时间,降低通道开放概率,并成浓度依赖性。提示临床上葛根素治疗缺血性中风可能与其抑制神经细胞L型钙离子通道的开放,防止钙超载有关。     

巴曲酶对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区的影响

目的 通过观察大鼠局灶性脑缺血再灌注不同时段，巴曲酶对海马CAl神经元及星形胶质细胞数目、形态等方面的影响，从而探讨巴曲酶对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 采用改良的线栓法制备大脑中动脉阻塞(MACO)2h、不同再灌注时间段(3h、6h、12h、24h、48h、72h、7d)的大鼠短暂局灶性脑缺血(transient focal cerebral isehemia)模型，随机设立巴曲酶组(Bat)、生理盐水对照组(N．S)、假手术组(sham-operated)，通过HE染色及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异核抗原(NeuN)的免疫组化染色，观测CAl区神经元和星形胶质细胞的形态、数目的动态变化。结果巴曲酶能显提高再灌注早期(6～24h)CAl区GFAP阳性细胞的数目，再灌注7d组存活锥体细胞的数量较盐水对照组有明显提高，提示局灶性脑缺血后早期反应性星形胶质细胞的增多对维持神经元的存活有积极意义，巴曲酶对短暂局灶性脑缺血再灌注引起的海马CAl区延迟性神经元坏死(DND)有一定的抑制作用。