c─myc、hsp70基因与动脉粥样硬化发生中平滑肌细胞增殖的关系

ｃ─ｍｙｃ、ｈｓｐ７０基因与动脉粥样硬化发生中平滑肌细胞增殖的关系万腊香，杨永宗，杨和平（衡阳医学院分子生物学研究中心，衡阳，４２１００１）原癌基因（ｐｒｏｔｏ─ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ）是一类能编码关键性调控蛋白、促进细胞分裂的基因群，在正常情况下不表达...     

SHR和WKY大鼠主动脉hsp70mRNA水平的比较研究

本工作应用热激蛋白７０ＫＤ（ｈｓｐ７０）核酸分子杂交方法，检测了：（１）自发性高血压（ＳＨＲ）主动脉和离休培养的主动脉平滑肌细胞受热激后ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ水平的变化；（２）不同细胞培养时间（３个月与６周）的ＳＨＲ、ＷＫＹ主动脉ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ水平。结果提示ＳＨＲ主动脉ｈｓｐｍＲＮＡ水平增加，ＳＨＲ细胞培养受热激（４２℃，１５ｍｉｎ）后２ｈ，ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ水平明显高于ＷＫＹ鼠者，６周较３个月的ＳＨＲ细胞ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ水平高；６个月的ＳＨＲ细胞较同期和３个月的ＷＫＹ细胞ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ高。推论ＳＨＲ血管平滑肌细胞对热敏感，原癌基因ｃ－ｍｙｃ和抗癌基因Ｐ５３可能参与ｈｓｐ７０表达调控，并共同参与ＳＨＲ细胞增殖的调节。     

日本血吸虫26ku抗原基因在分枝杆菌和大肠杆菌中的高效表达

构建了大肠杆菌－分枝杆菌穿梭质粒ｐＢＣＧ－２０００，并将日本血吸虫２６ｋｕ抗原（Ｓｊ２６ＧＳＴ）基因在分枝杆菌中进行了克隆和表达。以质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ｓｋ为骨架，分别克卫生玫分枝杆菌质粒复制基因、Ｎｅｏ基因（编码卡那霉素抗性）以及人结核杆菌热休克蛋白７０（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ，ｈｓｐ７０）的启动子，并带有质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ的多克隆位点，构建成分枝杆菌－大肠杆菌穿梭     

人结核杆菌热休克蛋白70和卡介苗α抗原基因启动子序列测定

用Ｔ７ＤＮＡ聚合酶测序系统测定了人结核杆菌热休克蛋白７０（ｈｓｐ７０）基因的启动子序列和卡介苗（ＢＣＧ）α基因的启动子和信号肽序列，并比较了它们与大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）和其它分枝杆菌启动子之间的异同。结果所测的ｈｓｐ７０启动子序列为人结核杆菌ｈｓｐ７０编码基因起始密码（ＡＴＧ）上游１５０个脱氧核苷酸，其中在ＡＴＧ上游－１２￣－８核苷酸处有核糖体结合位点（ＳＤ序列）ＧＧＡＧＧ，在ＲＮＡ聚合酶的结合     

骨肉瘤组织中c—myc蛋白表达及其临床意义

目的 探讨ｃ－ｍｙｃ基因与骨肉瘤发生发展及预后的关系。方法 用Ｓ－Ｐ免疫组化法，对５０例骨肉瘤石蜡包埋标本进行了ｃ－ｍｙｃ ｐ６７表达水平的研究。结果 骨肉瘤ｃ－ｍｙｃ ｐ６７蛋白阳性率高达７２％，ｃ－ｍｙｃ ｐ６７表达与骨肉瘤患者性别、年龄、病理类型、肿瘤分期等均无明显关系，而ｃ－ｍｙｃ ｐ６７例表达骨肉瘤患者的３年生存率低于ｃ－ｍｙｃ ｐ６７阴性表达者。结论 ｃ－ｍｙｃ ｐ６７表达可能对判断骨     

热应激对热休克蛋白70mRNA的诱导

用＾３２Ｐ标记的热休克蛋白７０（ｈｓｐ７０）ｃＤＮＡ为探针，检测了热应激时完整及人骨肉瘤细胞（ＨＯＳ－８６０３）的ｈｓｐ７０ ｍＲＮＡ。结果表明，大鼠体温在４２℃３０ｍｉｎ后，脑、肝、肺、脾中ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ的表达明显增加，以脑最为显著。ＨＯＳ－８６０３细胞经４２℃热处理３０ｍｉｎ，置３７℃培养２～４ｈ后，ｈｓｐ７０ｍＲＮＡ的表达，且在整体动物上有组织特异性。     

大鼠脑损伤时神经细胞c—fos,c—jun和c—myc基因表达变化

目的 观察大鼠脑损伤不同时间皮质神经细胞早期快反应基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｍｙｃ表达变化。方法 应用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、原位杂交和免疫组织化学方法检测皮质神经细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｍｙｃ的表达。结果 脑损伤后１５ｍｉｎ,伤测皮质神经细胞出现上述３种基因ｍＲＮＡ的表达,随时间的延长,表达逐渐增加,于伤后３ｈ达高峰并持续至伤后２５ｈ伤后,伤后７２ｈ恢复至对照水平ｃ－ｆｏｓ、ｃ－     

原发性肝癌中 HBV X、S、Pre-S、C 基因片段整合与 ras、myc 癌基因表达的关系

用地高辛标记的ＨＢＶ基因组探针检测了６６例肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）中ＨＢＶ的存在状态，从中筛选出３２例仅有ＨＢＶＤＮＡ整合的ＨＣＣ作为研究对象，进一步检测了ＨＢＶＸ基因、Ｓ基因、Ｐｒｅ－Ｓ、Ｃ基因ＤＮＡ片段的整合情况，并探讨了ＨＢＶ４种基因亚片段整合与ｒａｓ、ｍｙｃ癌基因表达的关系。结果显示，ＨＢＶＸ、Ｓ、Ｐｒｅ－Ｓ和Ｃ基因片段的整合率分别为８７．５％（２８／３２）、６２．５％（２０／３２）、６２．５％（２０／３２）和２５．０％（８／３２）。ｐ２１ｒａｓ、ｐ６２ｍｙｃ在ＨＣＣ中的表达率分别为５０．０％（２０／４０）、８１．２％（２６／３２）。通过对ＨＣＣ中４种ＨＢＶ基因片段整合与ｐ２１ｒａｓ、ｐ６２ｍｙｃ表达之间关系的研究，显示ｐ６２ｍｙｃ的表达与ＨＢＶＸ、Ｐｒｅ－Ｓ基因整合关系密切，ｐ２１ｒａｓ的表达则主要与ＨＢＶＸ基因整合有关（Ｐ＜０．０５）。提示ＨＢＶＸ、Ｐｒｅ－ＳＤＮＡ片段在宿主细胞染色体上的整合可能直接或通过其蛋白启动ｍｙｃ和（或）ｒａｓ癌基因的表达。     

乳腺癌

目的探讨肿瘤多药抗性（ｍｄｒ１）的基因调控及其特异的凋亡机制。方法在建立的ｍｄｒ１肿瘤裸鼠的瘤组织中,采用ＡＢＣ免疫组化法,检测Ｐ－１７０、ｃ－ｍｙｃ、野生型ｐ５３、ｐ１６、Ｆａｓ和Ｂｃ１－２等蛋白的表达。结果发现ｍｄｒ１肿瘤细胞的ｃ－ｍｙｃ表达增强;经抗ｍｄｒ１－ｒｉｂｏｚｙｍｅ部分逆转ＭＤＲ表型后,ｍｄｒ１肿瘤细胞的ｐ５３表达有所升高。结论ｃ－ｍｙｃ、ｐ５３可能参与了对ｍｄｒ１基因表达的调控,其中ｃ－ｍｙｃ可能起着激活ｍｄｒ１基因转录的作用。实验还发现ｍｄｒ１肿瘤细胞的Ｆａｓ蛋白缺失、Ｂｃ１－２表达升高,提示ｍｄｒ１肿瘤可能拥有自己特异的凋亡调节机制。     

日本血吸虫32ku抗原基因的克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

日本血吸虫３２ｋｕ抗原（简称ｓｊ３２ｋｕ）是血吸虫的一种保护性抗原,为研究其重组疫苗的保护作用,将该抗原基因的全编码序列接正确的阅读框顺序列插入到穿梭质粒ｐＢＣＧ２１００,受控于人结核杆菌热休克蛋白７０（Ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏ－ｔｅｉｎ,７０,简称ｈｓｐ７０）启动子,构建成重组表达质粒ｐＢＣＧ－ＳＪ３２,在大肠杆菌－分枝杆菌两个系统中能稳定复制。重组分枝杆菌于４２℃诱导２ｈ或４５℃诱导３０ｍ     

乳腺癌c—myc扩增的临床意义

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法检测２５例乳腺癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因的拷贝数及多态性，发现其中１２例有ｃ－ｍｙｃ基因的扩增，长度分别为１３ｋｂ和（或）２３ｋｂ，高龄患者（≥４５岁）中，ｃ－ｍｙｃ扩增的阳性率高于成年患者（〈４５岁），同时证实腋窝淋巴结转移出现，ｃ－ｍｙｃ扩增的比例明显高于无腋窝淋巴结转移者（Ｐ〈０．０５）。结果表明，ｃ－ｍｙｃ基因扩增与乳腺癌腋窝淋巴结转移及高龄状态发病有关，提示ｃ－ｍｙ     

骨肉瘤rad,c—myc和Rb基因蛋白表达

应用免疫组织化学（ＬＳＡＢ法）检测９例人骨肉瘤ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ原癌基因和Ｒｂ抑癌基因蛋白产物的表达，研究结果表明：原癌基因ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ的蛋白表达阳性率分别为７８％（７例）、８９％（８例）。两种蛋白表达的强度无显著性差异。在９例骨肉瘤中，两种原癌基因蛋白共同表达有６例，占６７％。抑癌基因Ｒｂ蛋白阴性表达为３例，阴性表达率３３％，且都伴有Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ癌基因蛋白的阳性表达。本文研究结果提示     

人肝癌c─myc基因产物和HBxAg表达研究

本实验对４８例石蜡包埋人肝癌和癌旁组织的Ｐ６２￣（ｃ－ｍｙｃ）和ＨＢｘＡｇ进行了免疫组化（ＡＢＣ法）检测。结果显示，Ｐ６２￣（ｃ－ｍｙｃ）在肝癌和癌旁组织阳性率分别为８３．３％（４０／４８）和８９．６％（４３／４８），肝癌及其癌旁组织ＨＢｃＡｇ阳性率均为９３．８％（４５／４８）．在肝癌组织中Ｐ６２￣（ｃ－ｍｙｃ）与ＨＢｘＡｇ的表达呈显著正相关（Ｐ＜０．０５），这为ＨＢｘＡｇ在肝癌中作为叵式作用因子激活ｃ—ｍｙｃ癌基因提供了细胞水平的证据。ｃ－ｍｙｃ基因过度表达参与了人肝癌的发生发展过程。     

肝癌组织中bax,突变p53和c—myc蛋白测定

目的：检测肝癌组织中促细胞凋亡基因、癌基因和抗基因的治疗。方法 用免疫组化技术ＡＢＣ法,测定肝细胞中的ｂａｘ、ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ蛋白。结果 ｐ５３基因突变、ｃ－ｍｙｃ基因激活导致肝癌的发生,同时,促细胞凋亡基因ｂａｘ基因增强,细胞凋亡剧烈。     

食管癌c－myc基因扩增的临床意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对４１例食管鳞癌石蜡包埋标本进行了ｃ－ｍｙｃ基因的研究。结果发现：ｃ－ｍｙｃ基因扩增与淋巴结转移及临床病理分期有密切关系（Ｐ＜０．０１）。ｃ－ｍｙｃ基因扩增者，淋巴结转移较多，临床病理分期较晚，同时还发现ｃ～ｍｙｃ基因扩增与预后有明显关系（Ｐ＜０．０５），ｃ－ｍｙｃ基因扩增者预后较差。提示ｃ－ｍｙｃ基因可以作为判断食管鳞癌预后的检测指标之一。     

日本血吸虫32ku抗原基因的克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达

日本血吸虫３２ ｋｕ抗原（简称ｓｊ３２ｋｕ）是血吸虫的一种保护性抗原,为研究其重组疫苗的保护作用,将该抗原基因的全编码序列按正确的阅读框顺序插入到穿梭质粒 ｐＢＣＧ２１００,受控于人结核杆菌热休克蛋白 ７０（Ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏ－ｔｅｉｎ ７０,简称ｈｓｐ７０）启动子,构建成重组表达质粒 ｐＢＣＧ－ｓｊ３２,在大肠杆菌－分枝杆菌两个系统中能稳定复制。重组分枝杆菌于 ４２℃诱导 ２ ｈ或 ４５℃诱导 ３０ ｍｉｎ,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,在 ３２ ｋｕ的位置能见到明显的蛋白条带,表明 ３２ ｋｕ抗原能在分枝杆菌中高效表达。     

新型大肠杆菌—分枝杆菌穿梭载体的构建及卡那霉素抗性基因？…

用ＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅｃａｔｉｏｎ）技术克隆了卡介苗（ＢａｃｉｌｌｅＣａｌｍｅｔｔｅ－Ｇｕｅｒｉｎ，ＢＣＧ）热休克蛋白６５（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ６５，ｈｓｐ６５）启动子序列，构建成穿梭载体ＭＥ－６５。该载体含有分枝杆菌和大肠杆菌的质粒复制基因，ＢＣＧ的ｈｓｐ６５高效启动子序列以有在分析杆菌和大肠杆菌中都能表达的卡那霉素抗性基因，将其转化到耻垢分枝杆菌和ＢＣＧ中均可     

c—Ha—ras和c—myc反义寡聚脱氧核苷酸对人胃癌细胞生长增殖…

作观察了人工合成的反义ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯ－ｒ，ＡＳＯ－ｍ）对两株胃癌细胞中Ｈａ－ｒａｓ癌基因表达和细胞生长增殖的影响，观察至ＡＳＯ－ｒ能显抑制ＭＧｃ－８０３细胞Ｐ２１蛋白合成（作用１２ｈ抑制率达４８．１０％，Ｐ＜０．０１），同时对其ＤＮＡ合成和细胞增殖也有较显的抑制作用（抑制率分别为７６．７９％，５５．６１％，Ｐ＜０．０５）。ＡＳＯ－ｒ对ＳＧｃ－７９０１细...     

乳腺癌c－myc扩增的临床意义

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法检测２５例乳腺癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因的拷贝数及多态性，发现其中１２例有ｃ－ｍｙｃ基因的扩增，长度分别为１３ｋｂ和（或）２３ｋｂ。高龄患者（≥４５岁）中，ｃ－ｍｙｃ扩增的阳性率高于成年患者（＜４５岁）；同时证实腋窝淋巴结转移出现ｃ－ｍｙｃ扩增的比例明显高于无腋窝淋巴结转移者（Ｐ＜０．０５）．结果表明，ｃ－ｍｙｃ基因扩增与乳腺癌腋窝淋巴结转移及高龄状态发病有关，提示ｃ－ｍｙｃ经扩增方式激活在更年期女性乳腺癌发生过程中起着重要作用，可作为临床预后的评价指标。     

p21和c-myc蛋白在肝细胞癌与癌旁肝组织中表达的对比研究

本文用连续切片免疫组化法检测了肝细胞癌及癌旁组织ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白在肝癌及癌旁组织的阳性率分别为５３．３％和９６．７％；４０％和８６．７％；两者表达率均以癌旁组织为高（Ｐ＜０．０１）。ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性信号形态呈浆膜和／或核型；其表达均以近癌组织的癌旁肝细胞为强，肝硬变结节尤甚。本文结果进一步支持ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ癌基因异常激活和表达与肝细胞癌发生具相关性的观点。