姜黄素干预对实验性肺间质纤维化的影响

目的研究姜黄素干预对实验性肺间质纤维化的治疗作用及其可能的机制。方法健康雄性SD大鼠96只，随机分为正常对照组、模型组、泼尼松处理组和姜黄素处理组，每组24只。除正常对照组外，其余各组大鼠气管内一次性注入博来霉素诱导肺纤维化。造模后第15d起，姜黄素处理组和泼尼松处理组分别给予姜黄素（300mg／kg）和泼尼松（5mg／kg）每日灌胃一次，其余两组每日给予1％羧甲基纤维素钠（10mL／kg）灌胃一次。各组动物分别于造模后第21，28，42及56d随机处死6只，取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化，消化法测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量，免疫组化法测定肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。结果姜黄素处理组肺纤维化程度于造模后第42和56d显著低于模型组（P均〈0．05），其肺组织HYP含量在造模后第42和56d时较模型组显著降低（P〈0．01），肺组织TGF-β1蛋白表达于造模后第28，42及56d显著低于模型组（P均〈0．05），其中第56d时与正常对照组比较无显著差异（P〉0．05）。结论在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化形成阶段应用姜黄素干预能有效减轻肺纤维化程度，可能机制为姜黄素抑制了TGF-β1蛋白在肺组织的表达。     

姜黄素对肺纤维化模型大鼠TGF-β_1表达的影响

目的:探究姜黄素对肺纤维化模型大鼠TGF-β_1表达的影响。方法:将96只雄性昆明大鼠随机分为4组,空白对照组(A)、模型组(B)、阳性药物对照组(C,醋酸泼尼松片)和姜黄素干预组(D),每组24只。B、C、D均一次性气管内给予博莱霉素(5mg/kg)制作肺纤维化动物模型,空白对照组以同样方法一次性气管内注入等体积的生理盐水。28d后造模成功,然后A、B组给予等量生理盐水[0.014L/(kg·d)],C组给予醋酸泼尼松混悬液[0.56mg/(kg·d)],D组给予姜黄素羧甲基纤维素钠混悬液[200mg/(kg·d)]。观察4组大鼠肺组织HE染色、TGF-β_1表达情况。结果:(1)HE、免疫组化染色:模型组大鼠肺组织形成了稳定的肺纤维化;阳性药物对照组和姜黄素干预组肺组织纤维化情况好转明显。(2)模型组在灌注BLM后28d TGF-β_1表达水平达到高峰。模型组肺组织TGF-β_1的表达较对照组的差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,阳性药物对照组和姜黄素干预组肺组织TGF-β_1表达降低,但二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:姜黄素对大鼠肺间质纤维化具有明显的防治作用。姜黄素的作用可能是通过抑制TGF-β_1在肺组织中的表达来实现的。     

川芎嗪防治特发性肺纤维化的MMP表达

目的探讨川芎嗪对博来霉素诱导IPF模型的干预作用及相关机制。方法 80只SD大鼠随机分为4组：假手术组、模型组、阳性药物对照组和川芎嗪组。除假手术组外其余各组气管灌注博来霉素诱导肺纤维化,假手术组灌注生理盐水。术后第2天开始灌胃给药,阳性药物对照组灌胃醋酸强的松1.5mg.kg-1.d-1,川芎嗪组给予川芎嗪20mg.kg-1.d-1,模型组和假手术组给予相应体积的生理盐水。分别于第14天和第28天每组各取10只处死,取肺组织,HE染色和Mallory染色观察肺泡炎和纤维化程度,免疫组化法检测MMP-1的表达。结果川芎嗪可改善IPF模型大鼠肺泡炎和肺纤维化程度。川芎嗪组MMP-1表达较模型组降低。结论川芎嗪可减轻博来霉素诱导的IPF大鼠肺纤维化程度,减少MMP-1表达,可能是其抗IPF的机制之一。     

黄芪甲苷对肺纤维化小鼠α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达影响

目的:观察黄芪甲苷对肺纤维小鼠肺组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响,并初步探讨黄芪甲苷对小鼠肺纤维化抑制作用的机制。方法:通过于气管内滴注博来霉素(10 mL/kg)建立肺纤维化模型,空白组为正常饲养的小鼠,假手术组用生理盐水代替。造模后的C57bl/6小鼠随机分成空白组(正常饲养)、模型组(博来霉素造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、假手术组(生理盐水造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、黄芪甲苷组(博来霉素造模+黄芪甲苷灌胃)和阳性对照地塞米松组(博来霉素造模+地塞米松灌胃),分别于第14天和第28天处死小鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察小鼠肺组织肺纤维化程度,碱性水解法检测小鼠肺组织内羟脯氨酸的含量,免疫组织化学染色法检测小鼠肺组织α-SMA的表达,免疫蛋白印记法检测小鼠肺组织α-SMA、COL1、COL3的表达。结果:与空白组、假手术组相比,模型组肺纤维化分级较高,肺组织炎症反应明显,羟脯氨酸含量明显升高(P0.05)。与模型组相比,黄芪甲苷组内的羟脯氨酸含量降低(P0.05),肺组织内α-SMA、COL1、COL3的表达减少(P0.05),地塞米松组的表达降低不明显(P0.05)。结论:黄芪甲苷对肺纤维化的干预作用明显,其机制可能与减少成纤维细胞的生成和抑制胶原蛋白的沉积有关。     

姜黄素对BLM诱导的肺纤维化模型大鼠CTGF表达的影响

目的观察博菜霉素诱导的大鼠肺间质纤维化模型中肺内结缔组织生长因子表达的变化,探讨姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织内结缔组织生长因子表达的影响及姜黄素对肺间质纤维化的干预作用及其可能的机制。方法建立博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化模型。将健康雄性昆明大鼠96只,随机分为4组,每组24只,分别为空白对照组、模型组、阳性药物对照组和姜黄素干预组。模型组、阳性对照组和姜黄素干预组均一次性滴入博莱霉素（气管内给予5mg／kg）制作肺纤维化动物模型,空白对照组以同样方法一次性气管内注入等体积的生理盐水。造模后第1天,姜黄素干预组给予姜黄素200mg／kg／d,阳性对照组给予醋酸泼尼松0．56mg／kg／d,空白对照组和模型组每天分别灌服等体积的生理盐水。各组大鼠分三批分别在造模7d、14d、28d时随机处死8只,取肺组织：1）行病理切片进行HE染色,观察肺组织肺泡炎程度和肺纤维化情况。2）进行免疫组织化学技术,结合图像分析来检测各组肺组织中结缔组织生长因子蛋白的表达情况。结果空白对照组大鼠结缔组织生长因子表达低微,模型组大鼠结缔组织生长因子的表达水平较空白对照组的正常肺组织明显上升（P〈0．01）,且与肺纤维化的程度显著相关。姜黄素干预组大鼠和阳性对照组大鼠肺组织中的结缔组织生长因子的表达与模型组大鼠相比明显降低,其差异有统计学意义（P〈0．01）,但仍高于空白对照组。结论证明了姜黄素对博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化具有明显的防治作用,其机制可能是通过抑制结缔组织生长因子在肺组织中的表达来实现的。     

1,25-(OH)2D3治疗肺纤维化的动物实验研究

目的观察1,25-(OH)2D3对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的干预效果。方法将C57BL/6雄性小鼠110只分为对照组(n=30),模型组(n=40),干预组(n=40)。对模型组及干预组小鼠用博来霉素(3.5mg/kg)气管内滴入构建肺纤维化模型,对照组滴入等量生理盐水。干预组小鼠每日予罗盖全0.5μg/kg灌胃,对照组及模型组以等体积蓖麻油灌胃。在造模第7、14、28天分批处死各组一定数量小鼠,取右上肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织纤维化程度并评分,除此之外,在第28天增加检测肺组织羟脯氨酸含量。结果造模第7和14天,干预组与模型组肺纤维化评分无明显差别;第28天,干预组小鼠肺纤维化评分低于模型组(P<0.05),干预组小鼠肺组织羟脯氨酸含量低于模型组(P<0.05)。结论 1,25-(OH)2D3可减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化程度。     

双氢青蒿素对肺纤维化大鼠ERK和CTGF表达的影响

目的:探讨双氢青蒿素对博来霉素诱导肺纤维化大鼠肺组织中Col1(a2)、CTGF、ERK基因及蛋白表达的影响。方法:75只SD大鼠随机分成假手术对照组、模型对照组、溶剂对照组、阳性对照组、和双氢青蒿素治疗组5组,每组各15只;每组再按处死时间点分为7 d、14 d、28 d三个亚组,每个亚组5只。除假手术对照组外,所有动物气管内注入博来霉素5 mg/kg。造模后第一天起,相应予生理盐水、生理盐水、5%羧甲基纤维素钠、泼尼松5 mg/kg、双氢青蒿素75 mg/kg,1次/d,持续至处死当天。结果:大鼠肺纤维化模型构建成功,双氢青蒿素治疗组大鼠肺组织中CTGF、ERK1/2、pERK1/2蛋白及ERK1、ERK2、Col1(a2)基因的表达量低于模型对照组(P<0.01)。结论:双氢青蒿素可抑制肺纤维化大鼠肺组织ERK和CTGF的表达,减轻实验大鼠的肺纤维化程度。     

内质网应激与氧化应激在肺纤维化中的作用及中药丹芍化纤胶囊对它的影响

目的:观察内质网应激标志蛋白GRP78和氧化应激指标在博来霉素诱导的肺纤维化中的变化及中药丹芍化纤胶囊对它的影响。方法:选取SD大鼠30只,随机分为正常对照组(正常组)、肺纤维化模型组(模型组)和丹芍化纤胶囊治疗组(丹芍组),每组各10只。正常对照组气管内滴注生理盐水,模型组和丹芍组气管内一次性灌注博来霉素5 mg/kg诱导肺纤维化,丹芍组于造模第2天给予丹芍化纤胶囊混悬液灌胃0.8 g/(kg.d)治疗,正常组及模型组则给予等量生理盐水灌胃。实验第28天称大鼠体重,处死各组大鼠,称肺湿重并收集肺组织,行HE和Masson染色观察肺组织病理变化;比色法检测肺组织MDA及SOD变化;采用免疫组织化学方法检测肺组织中GRP78蛋白的表达情况。结果:①与正常组比较,模型组大鼠肺组织中MDA含量及GRP78表达明显升高,而SOD酶活性则显著下降。②与模型组比较,丹芍组大鼠肺组织中MDA含量及GRP78蛋白表达明显降低,但仍较正常组高;SOD酶活性显著回升,但未恢复正常水平。结论:丹芍化纤胶囊可在一定程度上减轻博来霉素诱导的肺泡炎症反应及肺纤维化进展,对肺纤维化具有一定的治疗作用。丹芍化纤胶囊对肺纤维化的干预机制可能与...     

丹芍化纤对肺纤维化大鼠肺内结缔组织生长因子表达的影响

目的：观察辛伐他汀对博来霉素引起的肺纤维化大鼠肺内结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法：选取SD大鼠30只,随机分为正常对照组（对照组）、肺纤维化模型组（模型组）和丹芍化纤胶囊治疗组（治疗组）。模型组和治疗组气管内注射博来霉素（5 mg/kg）诱导肺纤维化,对照组气管内注射等量生理盐水。次日起治疗组大鼠给予丹芍化纤混悬液（0.8 g/kg/d）灌胃,其余两组给予等量生理盐水灌胃。治疗第28 d处死各组大鼠,计算肺系数,HE染色观察肺组织病理变化,碱水解法检测肺组织羟脯氨酸含量,免疫组化ABC法观察肺组织CTGF表达的变化。结果：与对照组比较,模型组大鼠肺系数明显增加,肺组织胶原沉积明显,羟脯氨酸含量、CTGF表达增加。与模型组比较,治疗组大鼠肺系数明显降低,肺组织胶原沉积有所减轻,肺组织羟脯氨酸含量、CTGF蛋白表达减少。结论：丹芍化纤具有较好的抗大鼠肺纤维化作用,其作用机制部分是通过下调肺组织内CTGF的表达,从而延缓甚至抑制纤维化的进展。     

实验性酸吸入致大鼠肺纤维化

目的研究实验性酸吸入致肺纤维化可能的作用机制。方法健康雄性SD大鼠120只,随机分为正常对照组、博来霉素组、高浓度盐酸组、中浓度盐酸组和低浓度盐酸组,每组24只。博来霉素组气管内一次性注入博来霉素诱导纤维化,盐酸组每周气管内滴注不同浓度盐酸1次,正常对照组每周气管内滴注生理盐水1次。各组分别于造模后第7、14、28及42d随机处死6只,取肺组织行HE、Masson染色评价肺组织病理变化,消化法测定肺组织羟脯氨酸（HYP）含量,分别采用RT-PCR和免疫组化法测定肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）的mRNA和蛋白表达。结果盐酸组肺泡炎程度始终显著高于对照组（P〈0．01）,在开始2周内达到一个高峰,随后仍旧维持一个相对较高状态,从28d达到或者超过博来霉素组水平。盐酸组纤维化程度随时问逐渐增强,显著高于对照组（P〈0．01或0．05）,但始终未超过博来霉素组;第42d时高浓度和中浓度盐酸组与博来霉素组纤维化程度无显著差异（P〉0．05）;而低浓度盐酸组纤维化程度与高、中浓度组相比,早期没有显著差异,自42d起与高浓度盐酸组有明显差异（P〈0．05）。高、中浓度盐酸组肺组织HYP含量自14d起始终显著高于对照组（P均〈0．05）,但未超过博来霉素组;高浓度盐酸组HYP含量在第42d与博来霉素组无明显差异,中、低浓度盐酸组HYP含量始终低于博来霉素组（P均〈0．05）。盐酸组肺组织TGF—β1 mRNA在28d时达到博来霉素组水平,至42d时超过博来霉素组水平。盐酸组TGF-β1表达水平从42d起与博来霉素组无显著性差异。结论实验性酸吸入可引起大鼠肺纤维化,比传统的博来霉素造模方法更符合肺纤维化的病理生理过程。