030 苯并(a)芘对细胞周期、细胞增殖的影响及相关信号传导途径的作用

以苯并(a)芘及其代谢物为模式化学物,围绕着DNA损伤修复、细胞信号传导途径、细胞周期检测点调控等方面,从化学致癌物对细胞周期的影响角度来阐明化学致癌物的致癌机制已成为当前环境毒理学的热点问题与研究前沿.本文就苯并(a)芘对细胞周期分布与细胞周期调节因子的影响、以及相关信号传导途径在苯并(a)芘对细胞周期与细胞增殖影响中的作用等方面,对苯并(a)芘对细胞周期的影响进行了综述.     

苯并（a）芘多次灌胃对小鼠体液免疫功能的影响

苯并（ａ）芘多次灌胃对小鼠体液免疫功能的影响北京医科大学卫生毒理学教研室（１０００８３）雷志明，赵西龙，薛彬苯并（ａ）芘［Ｂ（ａ）Ｐ］是环境中重要的致癌物之一。近年来的大量动物实验表明［１～３］，用Ｂ（ａ）Ｐ对小鼠进行皮下、腹腔或气管内注入的途径染毒...     

全反式视黄酸阻断苯并(a)芘致成纤维细胞周期改变的通路

目的 观察全反式视黄酸（ATRA）逆转苯并（a）芘诱导的人胚肺成纤维细胞（HELF）细胞周期紊乱过程中细胞周期素D1（cyclin D1）、细胞周期素依赖性激酶K4（CDK4）、转录因子E2F-1和E2F-4的作用.方法 用0.1 μmol/L ATRA预处理细胞后,再用2 μmol/L苯并（a）芘作用细胞,用Western blotting方法测定其蛋白表达水平;建立稳定转染了反义cyclin D1质粒和反义CDK4质粒的细胞系,应用反义技术证明上下游关系;用流式细胞技术 测定细胞周期.结果 2μmol/L苯并（a）芘作用于HELF24h后,cyclin D1、E2F-1蛋白表达水平明显增高,CDK4和E2F-4蛋白表达水平无明显变化;用0.1 μmol/LATRA预处理24h后,cyclin D1、E2F-1蛋白表达水平明显下降;与相同作用的对照组相比,苯并（a）芘刺激反义cyclin D1或反义CDK4细胞后E2F-1表达增加的幅度明显降低;与相同作用的对照组相比ATRA预处理的反义cyclin D1或反义CDK4细胞中,苯并（a）芘诱导的E2F-1过表达水平降低的幅度明显降低;流式细胞术测定结果显示,苯并（a）芘诱导细胞从G1期进入S期,ATRA通过聚积G1期细胞而阻滞苯并（a）芘诱导的细胞周期进程.结论 ATRA通过cyclin D1/E2F-1途径阻断苯并（a）芘诱导的HELF的细胞周期改变.     

苯并（a）芘对神经细胞DNA损伤及细胞周期影响的体外研究

为通过研究苯并（a）芘染毒后神经细胞DNA损伤和神经元细胞周期改变，探索苯并（a）芘致神经细胞凋亡的机制。研究人员采用新生1～3天的SD大鼠，在无菌条件下取出大脑皮质并用0．25％胰酶消化，以1×10^5密度接种神经元细胞，培养5d，以苯并（a）芘同时加入S。对细胞染毒，并设空白对照组和溶剂对照组。用单细胞琼脂糖凝胶电泳检测DNA损伤，采用流式细胞仪检测细胞周期变化情况。结果显示，与溶剂对照组相比，     

致癌物诱导恶变细胞中线粒体高变区序列分析

目的检测苯并（a）芘代谢产物反式二羟环氧苯并芘（反式-BPDE）及结晶型硫化镍（NiS）诱发永生化人支气管上皮细胞系（16HBE）恶性转化过程中线粒体DNA控制区序列变化。探讨线粒体DNA控制区在环境致癌物苯并（a）芘及硫化镍致癌作用中是否存在靶分子序列。方法 应用银染PCR-单链构向多态性（SSCP）方法及测序方法分析恶变细胞中线粒体DNA高变区的序列变化。结果 经反式-BPDE和NiS诱导恶变的人支气管上皮细胞系线粒体高变区均未发现异常改变。结论 线粒体基因控制区可能并非是化学致癌物诱发肺癌的靶序列。     

环境致癌剂与p53基因突变

p5 3基因是至今为止发现的与人类肿瘤相关性最高的基因。它不仅作为抑癌基因发挥作用 ,还参与细胞周期调控、DNA损伤与修复、基因转录及细胞凋亡等多个过程。肿瘤病因学的研究表明 ,6 0 %～ 90 %的人类肿瘤是由环境中的化学致癌物引起。环境中的化学致癌物或前致癌物可以造成p5 3基因突变及蛋白表达的改变 ,且p5 3的突变形式也随着致癌物和肿瘤的类型不同而具有特征性的差异 ,相关研究已成为近年来肿瘤分子生物学的热点。本文综述了苯并 [a]芘、烟草、亚硝胺、黄曲霉毒素和氯乙烯等几种环境中存在的主要化学致癌物质的致癌效应以及对p5 3基因和P5 3蛋白的影响。     

橄榄油中5种多环芳烃的测定

多环芳烃（PAHs）中包括苯并（a）芘等十几种致癌物质。国家食品卫生标准中规定各类食用油中苯并（a）芘的限值为10ug／kg。国家标准GB5009．27—2003（（食品中苯并（a）芘的测定》规定了两种检测方法，分别是荧光分光光度法和目视比色法。我们研究了利用凝胶净化技术进行前处理，用液相色谱法测定橄榄油中苯并（a）芘等5种PAHs的含量。该法自动化程度高，有机溶剂使用量少，回收率高，满足相关标准的要求。     

苯并(a)芘代谢产物高效液相法测定

苯并(a)芘E[B(a)P]是第一个被发现的环境化学致癌物,其致癌性很强.但B(a)P是前致癌物,进入体内后在细胞色素P450酶的作用下才能形成终致癌物具有致癌作用.     

绿茶对石棉和苯并（a）芘联合诱发大鼠肺癌的预防效果

绿茶对石棉和苯并（ａ）芘联合诱发大鼠肺癌的预防效果罗素琼，刘学泽，王朝俊流行病学调查发现，接触石棉的工人吸烟者比不吸烟者患肺癌的危险性高［１，２］。许多国家的调查资料也表明，大气已受到石棉、苯并（ａ）芘［Ｂ（ａ）Ｐ］等多种致癌物的污染。职业和非职业人...     

苯并芘的生殖毒性机制研究进展

多环芳烃是常见的空气污染物,主要来源于烟草烟雾、煤炭燃烧、汽车尾气和室内烹调油烟,易在水体、土壤和作物中残留蓄积。苯并（a）芘是多环芳烃中最具代表性的环境有机污染物。大量的流行病学调查和动物实验表明,苯并（a）芘与不良妊娠结局的发生有关,如生育能力下降、不孕不育、流产、早产、胎儿生长受限及胎儿出生缺陷等,其可能的作用机制包括影响细胞色素P450酶的代谢、改变细胞周期进程、参与DNA损伤及其抗雌激素效应等。     

苯并芘的生殖毒性机制研究进展

多环芳烃是常见的空气污染物,主要来源于烟草烟雾、煤炭燃烧、汽车尾气和室内烹调油烟,易在水体、土壤和作物中残留蓄积。苯并（a）芘是多环芳烃中最具代表性的环境有机污染物。大量的流行病学调查和动物实验表明,苯并（a）芘与不良妊娠结局的发生有关,如生育能力下降、不孕不育、流产、早产、胎儿生长受限及胎儿出生缺陷等,其可能的作用机制包括影响细胞色素P450酶的代谢、改变细胞周期进程、参与DNA损伤及其抗雌激素效应等。     

新兴工业开发区环境有机致癌物污染的研究

「目的」了解新兴工业区环境致癌物污染。「方法」对某一工业开发区的空气、水、土壤等环境进行致癌物含量及其致突变性的测定。「结果」大气的飘尘浓度多数超过国家标准,苯并（ａ）芘浓度也接近或超过建议标准;自来水厂大氯污染较重,自来水厂的沉淀池水和出厂水苯并（ａ）芘含量增加且超标,其致突变强度也比水源水增加;土壤表层、水管只灰和树叶的苯并（ａ）芘含量也增加,认为主要是大气污染物沉降的结果。「结论」要降低环境     

低pH值条件下叙利亚地鼠胚胎细胞体外转化试验的研究

叙利亚地鼠胚胎（Syrian hamster embryo，SHE）细胞体外转化系统是一种有效的体外检测化学物潜在致癌性的细胞转化系统，但是传统的SHE细胞转化试验在用于致癌物的常规筛选方面存在一定的困难。近年来，国外实验室采用低pH值条件下培养SHE细胞获得成功，使致癌物的检出率有所增加。本实验室采用低pH值条件下培养SHE细胞，以苯并（a）芘为受试物，探讨研究SHE细胞体外转化系统的建立。     

焦化作业工人淋巴细胞微核率的观察

焦化作业工人淋巴细胞微核率的观察印福康，蔡逸云（上海梅山冶金公司防疫站，２１００３９）焦化作业接触最主要的毒物是由焦炉逸散的大量荒煤气，其中含有致癌物，如苯并（ａ）芘（ＢａＰ）等可致肺癌，从煤焦油中回收与精炼化工产品，可有大量分散的苯类气体污染，苯可...     

苯并(a)芘对雄性小鼠睾丸细胞周期的影响

目的研究苯并(a)芘对雄性小鼠睾丸细胞周期的影响.方法采用流式细胞术研究雄性小鼠睾丸细胞周期.结果不同剂量的苯并(a)芘可以使睾丸细胞各时相的细胞百分数发生变化,随着苯并(a)芘染毒剂量的增加,G0/G1、S时相的细胞百分数明显减少,5,10,20 mg/kg各剂量染毒组与阴性对照组比较差异具有显著性(P＜0.01).G2/M时相的细胞百分数逐渐增多,各剂量组与阴性对照组比较具有显著性差异(P＜0.01).结论苯并(a)芘可以抑制睾丸细胞的DNA合成,引起G2期细胞阻滞,使细胞有丝分裂延迟.     

人体毛囊中苯并(a)芘的代谢产物酚和二氢二醇的生成量无相关性

致癌物代谢酶可以确定人体对化学致癌物的敏感性。在作人体活组织检查时测定这些酶可以识别高危人群。本研究为了查明苯并(a)芘(BP)的两条代谢途径之间是否存在相关,分析了人体毛囊中BP的代谢产物酚和二氢二醇的生成量。酚和二氢二醇能分别反映细胞中芳烃羟化酶(AHH)和环氧化物水化酶(EH)的活性。     

BPDE—DNA加合物体外生成实验研究

目的：探讨体外合成苯并（a）芘与DNA形成加合物的条件.方法：以一定比例混合苯并（a）芘丙酮溶液、DNA溶液、S9混合液、于37℃孵育24 h后,紫外分光光度计扫描DNA图谱,得出DNA结构改变的信息;同时用HPLC检测反应体系中的苯并（a）芘含量、苯并（a）芘代谢物及DNA加合物酸水解后的产物.确定BPDE-DNA加合物生成,质谱验证生成物的结构.结果：反应后DNA紫外最大吸收峰红移;HPLC检测发现孵育后反应体系中苯并（a）芘含量降低,反应管有新的物质生成;质谱分析生成物的分子量同于目标产物.结论：一定条件下体外可合成苯并（a）芘-DNA加合物.     

自来水厂水中苯并(a)芘净化效果评价

由于环境污染,苯并(a)芘也存在于地面水中,被列为环境污染致癌物检测工作中常规检测项目之一。为了解自来水中苯并(a)芘含量水平及水源水经过自来水厂的常规处理后,苯并(a)芘含量的下降程度,几年来选择10个自来水厂的水源水、出厂水和管网水每季度监测1次,测定结果用配对t测验进行统计学处理。结果如下。水源水、出厂水、管网水苯并(a)芘含量水平:结果表明,水源水、出厂水、管网水中苯并(a)芘含量平均范     

应用TritonX－100进行食品中苯并（a）芘的快速测定方法

应用ＴｒｉｔｏｎＸ－１００进行食品中苯并（ａ）芘的快速测定方法杨貌端，李爱师，张勐为了实现食品中强致癌物苯并（ａ）芘的快速测定，我们在国标法￣［１］基础上进行了不断的改进和完善。１９８６年以特异性“咖啡因分配法￣［２］”代替了“二甲基甲酰胺分配”，取...     

牛磺酸对苯并(a)芘致人胚肝细胞损伤拮抗作用

目的探讨牛磺酸对苯并（a）芘致肝细胞DNA损伤的作用和机制。方法以人胚肝细胞为靶细胞体外培养,按完全随机实验设计分成5个组：（1）空白对照组;（2）溶剂对照组;（3）苯并（a）芘组：25μmol/L苯并（a）芘加入细胞培养体系后培养2 h;（4）牛磺酸组：设0.5,1.0,2.0,4.0μmol/L 4个浓度,加入培养体系后培养24 h;（5）牛磺酸预防组：先以4个不同浓度的牛磺酸预处理24 h,再加入25μmol/L的苯并（a）芘,培养2 h。各组培养结束后用单细胞凝胶电泳技术（SCGE）检测细胞DNA损伤,用分光光度法测定细胞培养液中丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、天门冬酸氨基转移酶（AST）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）含量。结果（1）微量苯并（a）芘可致人胚肝细胞NDA明显损伤,同时使MDA、ALT、AST水平升高、GSH含量降低,牛磺酸的作用则相反;（2）牛磺酸预处理可明显减轻苯并（a）芘引起的人胚肝细胞DNA损伤,抑制MDA、AST、ALT含量升高和GSH含量下降,其作用呈剂量-效应关系;（3）人胚肝细胞DNA损伤的Oliver尾矩值与细胞培养液中MDA、AST、ALT含量呈明显正相关,与GSH含量呈明显负相关。结论苯并（a）芘致人胚肝细胞DNA损伤可能与氧化损伤有关,而牛磺酸具有拮抗苯并（a）芘致人胚肝细胞DNA损伤的良好作用。