急性髓性白血病混合谱系白血病基因重排的研究

目的对急性髓性白血病(AML)患者可能出现的混合谱系白血病(mixed lineage leukemia,MLL)基因重排进行研究,并探讨其临床意义。方法在常规细胞遗传学分析基础上运用分子生物学方法-荧光原位杂交技术(FISH),采用多种位点特异性DNA探针(染色体全染、特殊位点、双色或多色易位融合探针),对58例AML患者(47例成人AML,11例儿童AML)进行分析研究。结果有6例出现MLL基因重排,分别出现MLL基因的移位,复制及丢失,阳性率占10．3％。其中4例为成人AML,2例为儿童AML,除了MLL基因重排外,5例AML患者同时合并有复杂的核型变化,分别为:47-48,XX,der(1)t(1;17)(p36．1;q23),+4,+10,der(11)t(11;17)(q23;q23),-17,-18, +20,+21?.ish+21(wcp21+),der(1)t(1;17)(wcp17+),der(11)t(11;17)(wcp11+;wcp17 +);46,XX,del(5)(q13q33),r(11)(p15q25),+r(11)(p15q25)．ishr(11)(wcp11+,MLL+),+r (11)(wcp11+,MLL+);46,XY,del(11)(q23)[2]／46,idem,add(16)(p13．1)[8]／46,XY[10]．ishadd(16)(wcp16+),rea(11)(wcp11+);55,XY,+ markers．ish 11q23(MLL×3),+21(wcp21 +);46,XY,add(11)(q23)[6]／46,idem,t(15;17)(q22;q21)[12]／46,XY[2]．ish dup(11)(MLL ++),t(15;17)(PML+,RARa+;RARa-)[24]。结论急性髓性白血病常合并有MLL基因重排,本实验组的阳性率超过10％。由于MLL基因重排的患者具有对常规化疗不敏感及预后不良的特点,对初治急性白血病患者应常规进行MLL基因重排的检查。     

聚合酶链反应检测老年人急性白血病IgH基因重排的意义

目的 为进一步了解老年人急性白血病的分子生物学特征。方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测２８例老年人急性白血病免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排 结果 ６６．７％（４／６）老年人急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和４０．９％（９／２２）急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）存在ＩｇＨ基因重排;ＩｇＨ基因重排阳性老年人ＡＮＬ治疗缓解率（２２．２％）显著低于ＩｇＨ基因重排阴性老年人ＡＮＬＬ（６６．７％）（Ｐ〈０．０     

用DNA指纹技术检测儿童急性粒细胞白血病的基因重排

目的：应用DNA指纹分析技术检测儿童急性粒细胞白血病的基因重排。方法：用LE11．8、MYO和M13探针，经Southern杂交法检测12例儿童急性粒细胞白血病患者的外周血或骨髓细胞的基因重排。结果：发现初治或复发与完全缓解时的DNA指纹图相比，谱带有增加或减少。结论：急性粒细胞白血病患儿的白血病细胞存在基因重排；DNA指纹可以区别白血病细胞和正常细胞；DNA指纹技术可以检测到残留的少量白血病细胞。     

用电原位杂交法定位急性白血病免疫球蛋白重链基因重排

采用电镜原位杂交法，观察６例急性白血病免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排，结果发现，５例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）阳性，表明均为Ｂ－ＡＬＬ；１例急性粒单细胞白血病（ＡＭＬ－Ｍ４）阴性。在阳性细胞核内，代表ＩｇＨ基因重排的胶体金颗粒成群分布，该技术把核酸探针杂交与超微形态学相结合，在基因水平确定白血病细胞类型，尤其对缺乏特异免疫表型的白血病更有应用价值。     

用DNA指纹技术检测儿童急性粒细胞白血病的基因重排

应用ＤＮＡ指纹分析技术检测儿童急性粒细胞白血病的基因重排。用ＬＥ１１．８，ＭＹＯ和Ｍ１３探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法检测１２例儿童急性粒细胞白血病患者的外周血或骨髓细胞的基因重排。发现初治或复发与完全缓解时的ＤＮＡ指纹图相比，谱带有增加或减少。结论：急性粒细胞白血病患儿的白血病细胞存在基因重排；ＤＮＡ指纹可以区别白血病细胞和正常细胞；ＤＮＡ指纹技术可以检测到残留的少量白知病细胞。     

聚合酶链反应检测老年人急性白血病IgH基因重排的意义

目的为进一步了解老年人急性白血病的分子生物学特征。方法应用聚合酶链反应（PCR）检测28例老年人急性白血病免疫球蛋白重链（IgH）则基因重排结果66.7％（4／6）老年人急性淋巴细胞白血病（ALL）和40．9％（9／22）急性非淋巴细胞白血病（ANLL）存在IgH基因重排：IgH基因重排阳性老年人ANLL治疗缓解率（22．2％）显著低于IgH基因重排阴性老年人ANLL（66.7％）（P＜0.05）。结论应用PCR技术检测老年人急性白血病基因重排可帮助了解老年人白血病的分子生物学特征和预后,此方面尚需进一步研究。     

急性白血病细胞免疫球蛋白重链和T细胞受体r基因重排及意义

急性白血病是一组异质性较高的恶性血液病，通过T细胞受体正（TCRr）基因和免疫球蛋白重链（IgH）基因重排检测其白血病细胞，在鉴别T或B一急性淋巴细胞白血病（ALL）有一定价值［’1。对急性白血病细胞来源、分化发育，对分型、监测微小残留细胞及判断预后都有重要意义。！材料与方法1．l病例：27例ALL，l例T细胞淋巴瘤（T－LL），5例急性粒细胞白血病（AML），共33例。男ZI例，女12例；年龄18～53岁。均根据FAB标准确诊和分型。采用间接免疫荧光技术［’］，用CD。、CD。、CD。、CD。、CDI。、CD19、CD。。、OKT。单克…     

免疫分型和基因重排在急性淋巴细胞白血病中的应用价值

对３０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）在形态学基础上进行免疫分型及基因重排检测，结果表明：（１）分型可控白血病细胞的不同分化阶段进行标记，使ＡＬＬ及各亚型有了明确的划分，对临床诊断及预后判断有一定价值；（２）多聚酶链反应（ＰＣＲ）分析白血病具灵敏、快速的特点，在作骨髓移植（ＢＭＴ）病例选择上具有优质，尤对缺细胞分化抗原表达者的诊断具有补充作用；（３）不是所有ＡＬＬ都能依赖ＰＣＲ检测，认为必须在形态学     

急性粒细胞白血病TCRγ基因重排的检测及其意义

①目的　探讨急性粒细胞白血病 (AML)中T细胞抗原受体γ链 (TCRγ)基因重排的发生情况及其与AML临床特征的关系。②方法　以构建的TCRγ基因片断为内参照模板 ,用聚合酶链反应 (PCR)法扩增TCRγ基因重排片断。③结果　TCRγ基因重排在AML中发生率为 2 4 .4 % ,在急性单核系白血病中发生率高达 4 8.1% ,差异有极显著性 (χ2 =12 .32 ,P <0 .0 0 1)。有TCRγ基因重排的AML病人的外周血白细胞计数高于无TCRγ基因重排的AML病人 (t=2 .5 35 ,P <0 .0 5 ) ;有TCRγ基因重排的AML病人的肝大程度大于无TCRγ基因重排的AML病人 (t=2 .35 7,P <0 .0 5 ) ;TCRγ基因重排阳性的AML病人达到第 1次缓解的时间长于TCRγ基因重排阴性的AML病人 (t=2 .5 32 ,P <0 .0 5 )。④结论　TCRγ基因重排可发生于部分髓系白血病病人 ,急性单核系白血病的发生率最高 ,这部分病人临床体征明显 ,对标准化疗不敏感 ,不易获得缓解。     

白血病患者重排基因检测的临床意义

白血病患者重排基因检测的临床意义徐兵周淑芸孙竞王时书免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）或Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）基因重排可作为淋巴细胞系克隆的标志。本研究采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法，检测了９０例急性白血病患者ＩｇＨ／和ＴＣＲ重排基因，并对部分病例进行追踪检测，...     

维甲酸受体α基因在急性早幼粒细胞白血病中的重排和扩增

以维甲酸受体（ＲＡＲα）基因的全长ｃＤＮＡ片断为探针，检测了３例急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者骨髓或外周血细胞中ＲＡＲα基因的结构。结果发现１例有ＲＡＲα基因的重排，另１例带型与胚原型一致，但在ＲＡＲα基因的某区域有基因高度扩增的异常现象。提示扩增也可能是导致ＡＰＬ的分子机理之一。     

儿童急性淋巴细胞性白血病IgH基因和TCR基因重排的研究

采用PCR或巢式PCR方法对71例未治疗的急性淋巴细胞性白血病（ALL）患儿骨髓样本的免疫球蛋白重链基因（IgH）和T细胞受体基因（TCR）进行了克隆性重排检测，结果显示在52例B系ALL及19例T系ALL中分别存在82．7％（43例）和15．8％（3例）的IgHCDRⅢ区域重排，而TCRVδ2Dδ3基因重排见于32．7％的B系ALL（17例）和63．2％的T系ALL（12例），二种基因重排在儿童ALL的覆盖面达到88．7％（63例），此结果提示IgHCDRⅢ和TCRVδ2Dδ3基因可作为监测儿童ALL的标志基因；采有相同方法对完全缓解期患儿的67份脑脊液标本进行了检测，结果显示9例存在IgHCDRⅢ基因重排，4例存在TCRVδ2Dδ3基因重排（与骨髓标本重排类型一致），提示采用PCR技术对ALL患儿CSF标本进行IgH和Vδ2Dδ3基因重排的检测对早期诊断中枢神经系统白血病（CNSL）具有较大价值；采用有限稀释法对完全缓解期的儿童ALL病例骨髓样本进行上述二种基因重排的定量分析，结果提示对儿童ALL进行微小残留病（MRD）的持续追踪监测可指导化疗方法的选择，观察治疗效果并预测预后。     

急性非淋巴细胞白血病IgH,TCRr基因重排的检测

研究急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）基因分型和微小残留病（ＭＲＤ）的检测方法，选择ＩｇＨ、ＴＣＲｒ基因重排标记，用ＰＣＲ技术，对３１例ＡＮＬＬ患者进行检测，结果：ＩｇＮ阳性１２．９％，ＴＣＲｒ阳性６．４５％，表明ＡＮＬＬ中存在ＩｇＨ和ＴＣＲｒ基因重排，对ＭＲＤ的研究有一定的临床意义。     

维甲酸受体α基因在急性早幼粒细胞白血病中的重排和扩增

以维甲酸受体（RARα）基因的全长CDNA片断为探针，检测了3例急性早幼粒细胞白血病（APL）患者骨髓或外周血细胞中RARα基因的结构．结果发现1例有RARα基因的重排，另1例带型与胚原型一致，但在RARα基因的某区域有基因高度扩增的异常现象．提示扩增也可能是导致APL的分子机理之一．     

淋巴细胞性白血病／淋巴瘤bcl—2基因重排的研究

目的：探讨ｂｃｌ－２／ＩｇＨ基因重排的临床意义。方法：应用多聚酶链反应技术检测９种恶性淋巴瘤细胞系和不同类型淋巴系统恶性肿瘤临床标本中ｂｃｌ－２／ＩｇＨ基因重排情况。结果：２种细胞系,１例慢性淋巴细胞白血病及６例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）有ｂｃｌ－２／ＩｇＨ基因重排,其中,３６．４％滤泡型ＮＨＬ及１８．２％弥漫性ＮＨＬ有重排。ｂｃｌ－２基因断裂点绝大多数（８／９）位于主要断裂区（ＭＢＲ）。结论：ｂｃ     

慢性粒细胞性白血病的bcr／abl基因重排

用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测１４例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）和３例其他白血病的ｂｃｒ／ａｂｌ基因的重排，发现１４例ＣＭＬ几乎均有ｂｃｒ区域的新裂，断裂点多在２、３亚区，而对照组均未发现有ｂｃｒ区域的断裂重排，可见ｂｃｒ区域断裂点的检测对ＣＭＬ有特殊的诊断价值，若用ＰＣＲ方法检测ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因，引物最好设计在２、３亚区。     

用电镜原位杂交法定位急性白血病免疫球蛋白重链基因重排

采用电镜原位杂交法，观察６例急性白血病免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排，结果发现，５例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）阳性，表明均为Ｂ－ＡＬＬ；１例急性粒单细胞白血病（ＡＭＬ－Ｍ４）阴性。在阳性细胞核内，代表ＩｇＨ基因重排的胶体金颗粒成群分布，该技术把核酸探针杂交与超微形态学相结合，在基因水平确定白血病细胞类型，尤其对缺乏特异免疫表型的白血病更有应用价值。     

老年人急性白血病T细胞受体VγI-Jγ基因重排分析

OBJECTIVE: To obtain insight into the molecular mechanism of acute leukemia in elderly patients in relation to the clinical features of the disease. METHODS: DNA specimens were obtained from 34 elderly patients with acute nonlymphoblastic leukemia (ANLL), 9 elderly patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and 10 healthy blood donors. Polymerase chain reaction (PCR) coupled with single-strand conformation polymorphism (SSCP) was performed to detect T cell receptor (TCR) V gamma I-J gamma gene rearrangement. RESULTS: In the 34 elderly ANLL patients, 47.1% (16/34) were found with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement, showing a higher rate of the rearrangement than in younger ANLL patients (P<0.025). TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement was identified in 7 (77.8%) of the 9 elderly patients with ALL, and 3 of the identified cases had oligoclonal/ subclonal rearrangement, suggesting a higher rate of oligoclonal/subclonal rearrangement in elderly ALL patients than in younger ALL patients (P<0.01). None of the blood donors was found with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement. The complete remission rate was lower in the elderly ANLL patient with TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement than in those without (P<0.05). CONCLUSION: The detection of TCRV gamma I-J gamma gene rearrangement can be of value in assessing the therapeutic effect and making prognostic prediction in elderly patients with acute leukemia.     

急性髓系白血病M2b型患者AML1与MTG8基因重排融合的研究

作者研究了４１例急性聚系白血病（ＡＭＬ）Ｍ２ｂ患者ＡＭＬ１和ＭＴＧ８基因重排融合情况。利用Ｓｏｕｒｔｅｒｎ印迷杂交技术，发现８０％（２４／３０）患者有ＡＭＬ１基因重排，７８．６％（２２／２８）患者有ＭＴＧ８重百。使用逆转录－多聚酶链反应，在３７例ＡＭＬ１－Ｍ２ｂ患者中均检出ＡＭＬ１／ＭＴＧ８融全基因。