脂肪分化相关蛋白的研究进展

脂肪分化相关蛋白(ADRP)是细胞内脂肪积聚的一个特异指标。它在未分化的脂肪细胞中含量很低，在分化过程中急剧增加。ADRP不仅参与巨噬细胞中脂质的代谢，刺激纤维母细胞中脂质的聚集和脂滴的形成，而且也参与肺泡Ⅱ型细胞与纤维母细胞间的脂质转移，促进脂肪酸的摄取。ADRP的调控与环氧化酶抑制物、长链脂肪酸及某些药物有关。     

脂肪分化相关蛋白的生理功能及其与疾病的关系

PAT家族蛋白是最主要的脂滴相关蛋白,与细胞内脂代谢密切相关.目前发现该家族包括5种蛋白,脂肪分化相关蛋白(ADRP)是其中的一员.与其他PAT家族蛋白相比,无论是在组织分布、分子结构还是生理功能上ADRP均有其独特之处,如它在脂肪细胞分化、肝脏甘油三酯蓄积、乳汁生成与分泌方面发挥重要的作用,ADRP的表达异常还可能与...     

脂肪分化相关蛋白基因与2型糖尿病相关

目的通过单核苷酸多态性(SNP)的检测及基因分型来研究脂肪分化相关蛋白基因(ADRP)与2型糖尿病的相关性。方法使用PCR测序方法,对ADRP基因的启动子、外显子以及临近的内含子,分别在正常人群、2型糖尿病人群进行测序,确定该基因是否与华东地区汉族2型糖尿病患者相关。结果所测ADRP基因片段总长度5003个碱基,有23个SNP,高频、低频分别是5个、18个。启动子的一个SNP(P/-407)在2型糖尿病人群与正常人群的等位基因型、基因型差异均有显著性(P<0.05);两个错义突变Ser251Pro、Thr396Ala分别在两个2型糖尿病家系中传递。结论ADRP可能与华东地区汉族人2型糖尿病相关。     

脂肪分化相关蛋白在兔动脉粥样硬化模型中的表达

研究脂肪分化相关蛋白与动脉粥样硬化发生和发展的关系。使用高胆固醇饲料喂养新西兰白兔 12周 ,复制动脉粥样硬化模型。用生物化学法测定血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯及动脉壁胆固醇含量 ;苏丹Ⅳ染色观察主动脉斑块面积 ;HE染色观察主动脉及肝脏的病变 ;免疫组织化学法观察脂肪分化相关蛋白在主动脉病变区及肝脏中的表达。结果发现 ,喂高胆固醇饲料的动物血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯及动脉壁胆固醇含量显著升高 ,主动脉病变面积为 4 0 .1%± 7.3% ,脂肪分化相关蛋白在主动脉动脉粥样硬化病变区免疫组织化学染色呈强阳性 ,在肝脏中染色呈阴性。喂高胆固醇饲料能成功复制出兔动脉粥样硬化模型。脂肪分化相关蛋白在兔动脉粥样硬化病变中表达明显增高 ,提示脂肪分化相关蛋白与动脉粥样硬化的发生发展密切相关     

脂肪分化相关蛋白对泡沫细胞形成中脂质蓄积的影响

动脉粥样硬化是一种常见的心血管代谢性疾病,它的主要并发症心肌梗死与缺血性脑卒中已经成为世界首要的死因。泡沫细胞的形成在动脉粥样硬化的发生和发展中起到关键作用。这些细胞的产生与细胞内脂质蓄积密切相关。脂肪分化相关蛋白(PLIN2)能够促进细胞内脂质蓄积。本文主要阐述在泡沫细胞形成中,PLIN2对于脂质蓄积的影响,为动脉粥样硬化防治提供新的思路。     

Calphostin C抑制脂肪分化相关蛋白诱导的ACAT1表达

目的 我们已经发现adipophilin通过改变乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)的表达来促进细胞内脂质蓄积,病理状态下形成泡沫细胞,成为动脉粥样硬化的始动因素.本研究旨在探讨该过程所涉及的信号通路,阐明adipophilin引起细胞内脂质积聚的机制.方法 通过克隆adipophilin基因,构建逆转录病毒载体pQCXIP-HA-Adi,使用siRNA技术构建pSuper-retro-adipophilin siRNA逆转录病毒载体,包装病毒后,感染RAW264.7细胞,筛选后获得高或低表达adipophilin的细胞.将该细胞分别与300 nmol/L PKC抑制剂Calphostin C孵育16 h或同时再加入50 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育,应用RT-PCR和Western blot检测细胞内ACAT1的表达.当低表达adipophilin的细胞与Calphostin C共孵育时,在不同的时间点取样,RT-PCR和Western blot检测各时间点细胞内ACAT1的表达.结果 高表达adipophilin细胞中ACAT1表达增加,低表达adipophilin细胞中ACAT1表达减少.无论在高或低表达adipophilin的细胞中,Calphostin C能够抑制ACAT1的表达,与不孵育Calphostin C组相比差别有显著性.与ox-LDL孵育使高表达adipophilin的细胞荷脂,同样能够发现Calphostin C抑制ACAT1的表达.低表达adipophilin的细胞与Calphostin C共孵育1h后,ACAT1 mRNA开始下降;孵育8h后,ACAT1蛋白开始下降;孵育16 h后ACAT1 mRNA及蛋白表达均明显下降,与对照组相比差别有显著性.高及低表达adipophilin或负荷脂质状态下,Calphostin C能够时间依赖性的抑制ACAT1的表达.结论 adipophilin引起细胞内脂质积聚的机制可能是,PKC信号分子作用于adipophilin,并进一步影响ACAT1的表达,最终导致细胞内脂质积聚.     

脂肪分化相关蛋白通过抑制中性胆固醇酯水解酶表达促进RAW264.7细胞内脂质积蓄

目的探讨RAW264.7巨噬细胞中脂肪分化相关蛋白(adipophilin)调控中性胆固醇酯水解酶(nCEH)表达进而介导脂质积蓄的作用机制。方法用已成功构建的沉默与高表达Adipophilin的逆转录病毒质粒载体转染包装细胞PA317,继而收集病毒液感染RAW264.7巨噬细胞,筛选出Adipophilin沉默细胞株和高表达细胞株。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹分析技术(Western blot)分别检测nCEH的mRNA和蛋白表达水平,液体闪烁计数仪、高效液相色谱法检测细胞内胆固醇流出及胆固醇酯含量。结果 (1)高表达Adipophilin的细胞组胆固醇、胆固醇酯含量明显高于空白对照组(P0.01),而沉默Adipophilin表达的细胞组则显著低于空白对照组(P0.01),Adipophilin可抑制nCEH mRNA和蛋白的表达。(2)用100 nmol/L蛋白激酶Cδ(PKCδ)激动剂佛波酯(PMA)孵育高表达Adipophilin的RAW264.7细胞30 min后,nCEH的mRNA与蛋白表达水平明显降低(P0.05),而用100 nmol/L PKCδ抑制剂卡马拉素(Rottlerin)同样孵育30 min后,nCEH的表达水平较对照组增高(P0.05)。结论 Adipophilin促进巨噬细胞内脂质积蓄可能通过抑制nCEH表达来实现,在这一调控机制中PKCδ发挥了重要作用。     

黄芪注射液对糖尿病非酒精性脂肪肝模型大鼠血糖、血脂及肝脏脂肪分化相关蛋白表达水平的影响

目的研究黄芪注射液对糖尿病非酒精性脂肪肝模型大鼠血糖、血脂及肝脏脂肪分化相关蛋白表达水平的影响。方法采用高糖高脂结合链脲佐菌素诱导Wistar大鼠糖尿病非酒精性脂肪肝模型;将大鼠随机分为对照组、模型组及黄芪注射液干预组,分别于实验8周、12周及16周检测大鼠血清血糖、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）的表达水平;HE切片观察大鼠肝脏病理形态的改变;免疫印迹（western—blot）检测大鼠肝脏脂肪分化相关蛋白（ADRP）的表达水平。结果高糖高脂结合链脲佐菌素大鼠血糖、TG、TC增高,肝脏脂肪发生变性,糖尿病非酒精性脂肪肝模型构建成功。实验12周,干预组大鼠血清血糖、TG、TC水平均低于模型组,但差异无统计学意义（P〉0．05）,肝脏脂肪变性程度与模型组大鼠基本相当,炎细胞浸润程度较模型组程度轻;实验16周,干预组大鼠血清血糖及TG水平明显低于模型组,差异有统计学意义（P〈0．05）,肝脂肪变性程度较模型组明显减轻,炎细胞浸润基本消失;与正常对照组相比,NAFLD大鼠肝脏ADRP水平显著增高（P〈0．05）,通过黄芪注射液治疗后,NAFLD模型肝脏ADRP的表达水平下调。结论黄芪注射液可改善NAFLD大鼠血糖血脂代谢紊乱,减轻肝脏的炎症反应和变性,具有一定的肝脏保护作用。     

脂肪因子与肥胖相关心血管疾病关系的研究进展

肥胖是各种心血管疾病（包括高血压、动脉粥样硬化和心肌梗死）的危险因素。通过对脂肪组织微环境以及对全身代谢影响的研究,可揭示肥胖相关心血管疾病的发病机制。脂肪组织具有分泌多种免疫调节蛋白的功能,这些免疫调节蛋白称为脂肪因子。肥胖可导致促炎性脂肪因子的表达增加和抗炎性脂肪因子的表达减少,从而产生一种慢性轻度的炎症状态。这种脂肪因子的失衡被认为是促进全身代谢功能障碍和心血管疾病的关键原因。     

脂肪分化相关蛋白促进RAW 264.7细胞内酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1高表达

目的 观察高表达脂肪分化相关蛋白细胞内酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达的变化,阐明脂肪分化相关蛋白促进细胞内脂质蓄积的机制.方法 构建的pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒载体转染PA317包装细胞,获得pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒.用病毒感染RAW 264.7细胞, Puromycin筛选后获得稳定高表达脂肪分化相关蛋白的RAW264.7细胞株.应用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法检测经感染后细胞内脂肪分化相关蛋白和酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1的表达.并应用阿托伐他汀处理高表达脂肪分化相关蛋白的RAW 264.7细胞,观察酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达的改变.结果 用pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒感染RAW 264.7细胞后,脂肪分化相关蛋白和酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1 mRNA和蛋白表达明显升高,而对照组表达无明显变化.加入阿托伐他汀后,即在去除底物对酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达影响的情况下,高表达脂肪分化相关蛋白细胞内酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达仍升高.结论 高表达脂肪分化相关蛋白可明显上调RAW 264.7细胞酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1的表达.     

脂肪分化相关蛋白通过酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1促进巨噬细胞脂质蓄积

目的观察高表达脂肪分化相关蛋白对酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达及脂质蓄积的影响。方法构建表达载体pcDNA3.1-HA-脂肪分化相关蛋白,使用THP-1巨噬细胞,通过瞬时转染使之高表达脂肪分化相关蛋白,依次用氧化型低密度脂蛋白和(或)丙泮尼地处理。逆转录聚合酶链反应和Western blot检测酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1及脂肪分化相关蛋白的表达,油红O染色和高效液相色谱检测细胞内脂质的蓄积。结果随着氧化型低密度脂蛋白浓度的增加,巨噬细胞脂肪分化相关蛋白及酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达明显增强,两者呈伴行关系。丙泮尼地能抑制酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达上调,且随处理时间延长,其表达逐渐减少,并且能减少细胞内脂滴生成。与对照组相比,瞬时转染pcDNA3.1-HA-脂肪分化相关蛋白能使脂肪分化相关蛋白表达明显升高。高表达脂肪分化相关蛋白的巨噬细胞能使酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达增加,促进细胞内胆固醇酯蓄积,并协同增强氧化型低密度脂蛋白的作用。加入丙泮尼地后,高表达脂肪分化相关蛋白的作用被减弱。结论高表达脂肪分化相关蛋白能上调THP-1巨噬细胞酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达,促进细胞内脂质蓄积。脂肪分化相关蛋白可能通过酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1促进细胞内胆固醇酯的蓄积。     

分泌型卷曲相关蛋白/β-联蛋白信号通路对脂肪形成的影响

目的:探讨分泌型卷曲相关蛋白(sFRP5)和经典Wnt信号通路在脂肪细胞形成中的作用及机制。方法:诱导3T3-L1前体脂肪细胞分化,用过表达sFRP5的携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒(Ad-sFRP5-GFP)感染3T3-L1细胞并诱导成熟,利用实时荧光定量PCR检测经典Wnt下游靶基因和脂肪分化相关基因mRNA水平的变化。3T3-L1细胞分化成熟后,进行油红染色,观察过表达sFRP5对脂滴形成的影响;提取核浆蛋白,用蛋白质印迹法检测sFRP5对β-联蛋白核转位的影响。结果:3T3-L1细胞分化成熟后期,sFRP5、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ2(PPARγ2)表达均显著增加,同时,细胞周期蛋白D1表达显著下调。而诱导分化成熟后,过表达sFRP5的3T3-L1细胞周期蛋白D1无显著改变。与空载对照组相比,过表达sFRP5的3T3-L1细胞脂滴形成无明显变化。给予3T3-L1细胞重组小鼠sFRP5直接刺激或感染Ad-sFRP5-GFP,均未明显改变β-联蛋白核转位。结论:sFRP5的表达随着脂肪细胞分化而显著增加,但不影响体外脂肪细胞分化,sFRP5在体外不直接通过拮抗Wnt/β-联信号通路的方式发挥作用。     

肝细胞脂质代谢相关蛋白的研究进展

肝脏作为能量代谢的中枢器官，在脂类代谢中起着十分重要的作用。肝细胞内的脂质总是处于动态平衡状态。肝脏脂质代谢稳态的变化是构成各种形式脂肪肝的基础，而肝脏脂质代谢又是受许多相关蛋白的调控和影响。     

神经系统相关蛋白的研究进展

特异性蛋白在神经系统的再发育或再生中能够决定和诱导神经突起沿正确方向生长.有两类蛋白较为重要,一类能够在神经损伤后诱导促进神经突起生长;另外一类能够指引神经突起的延伸方向.很多特异性蛋白已经进入到研究者视野,其中包括GAP-43、p38、L1黏附分子、外周髓鞘蛋白-22等.本文将着重探讨GAP-43与p38的变化与意义.     

巨噬细胞荷脂过程中脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1及中性胆固醇酯水解酶相互结合

目的探讨脂肪分化相关蛋白是否与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1或中性胆固醇酯水解酶相互结合。方法50mg/L氧化型低密度脂蛋白孵育RAW264.7细胞0、0.5、1、3、6h,使用逆转录-聚合酶链反应及蛋白免疫印迹分析技术检测脂肪分化相关蛋白、酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1和中性胆固醇酯水解酶的mRNA及蛋白的表达;应用免疫共沉淀技术检测脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1或中性胆固醇酯水解酶是否相互结合。结果随着氧化型低密度脂蛋白与RAW264.7细胞孵育时间的延长,逆转录-聚合酶链反应和蛋白免疫印迹分析显示,脂肪分化相关蛋白、酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1和中性胆固醇酯水解酶的mRNA和蛋白质随着时间的延长而增多,与0h相比,差异有显著性（P<0.05,n＝3）。免疫共沉淀实验显示,RAW264.7细胞与氧化型低密度脂蛋白孵育0、0.5、1、3h时脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1结合,6h时脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1不结合;孵育0、0.5、1h时脂肪分化相关蛋白与中性胆固醇酯水解酶不结合,3、6h时与中性胆固醇酯水解酶结合。结论在荷脂的RAW264.7细胞中脂肪分化相关蛋白与中性胆固醇酯水解酶及酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1相互结合。脂肪分化相关蛋白与酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1和中性胆固醇酯水解酶在细胞内脂质代谢中可能协同作用。     

脂肪因子与糖尿病动脉粥样硬化相关性的研究进展

<正>传统上,普遍认为脂肪组织为能源仓库,由于肥胖和代谢疾病发病率的迅速增加,脂肪组织也获得了巨大的研究价值,其分泌的脂肪因子除了调节脂肪存储和养分平衡,还参与了胰岛素抵抗(IR)、糖脂代谢、炎症调节等病理生理过程。21世纪,糖尿病已成为一种世界范围内的流行病,而其大血管并发症,即动脉粥样硬化所致的心脑血管疾病,是造成患者死亡的主要原因。本文旨在对糖尿病动脉粥样硬化作用较突出的部分脂肪因子作一综述,以阐述其对该病理过程的影响。     

脂肪源性基质细胞特性及其向神经细胞分化的研究进展

干细胞移植治疗中枢神经系统损伤和变性疾病已成为研究热点，广泛应用于基础研究及临床治疗。其中研究较多的是骨髓基质细胞（bonemar—row stromal cells，BMSC），但骨髓基质细胞的获取给病人带来一定的痛苦，且数量有限，不利于大规模的实验研究及临床应用。近年来发现脂肪组织中存在一些类似于骨髓基质细胞的细胞，此类细胞具有干细胞特征，可自我复制，高度增殖，并具备多向分化潜能。     

脂肪因子与中枢对话

脂肪组织是体内最大的能量储存器官和内分泌器官。1994年发现脂肪组织分泌瘦素，继而发现它还分泌细胞因子、炎症因子、凝血因子等。肥胖时脂肪组织产生大量脂肪因子和炎症因子，是导致胰岛素抵抗（IR）、糖尿病（DM）、高血压、心血管病、肿瘤的重要原因。脂肪因子除作用于外周组织，还对中枢神经系统，尤其对下丘脑的能量代谢和生殖功能有重要调节作用。近年发现更多的脂肪因子如脂联素、抵抗素等也参与中枢能量调节。本文对脂肪因子在中枢的作用研究进展作一综述。     

眼眶成纤维细胞异常脂肪分化与甲状腺相关性眼病关系的研究进展

甲状腺相关性眼病也称为Graves眼病(Graves'ophthalmopathy,GO),是一种发病机制尚未完全阐明、累及眼眶组织的自身免疫炎性疾病.突眼是该病最常见、也是最难缓解的症状,目前认为其主要与透明质酸沉积、眼外肌增粗、脂肪组织重塑等致眼眶内容物增加有关.其中,眼眶内脂肪组织的增多似乎与突眼关系更为紧密.眼...     

糖尿病前期患者内脏脂肪面积与脂肪因子的相关性研究

目的探讨糖尿病前期患者内脏脂肪面积(VATA)与血清脂肪因子的相关性。方法选择在该院门诊确诊的糖尿病前期患者57例,其中超重组22例,肥胖组14例(P-NGT),正常体重组21例。检测其血清胰岛素(FINS)、脂联素(APN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,按稳态模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),采用双能X线骨密度仪检测观察对象全身脂肪比例及VATA。结果 (1)超重及肥胖组血清FINS、HOMA-IR及TNF-α水平明显高于正常体重组(P0.01);APN水平明显低于正常体重组(P0.01)。IL-6在三组之间差异无统计学意义。(2)肥胖组的全身脂肪比例明显高于超重组及正常体重组(P0.01);肥胖组及超重组VATA均显著高于正常体重组(均P0.01);(3)APN与腰臀比(WHR)、HOMA-IR、全身体脂比例、VATA、甘油三酯(TG)呈负相关;TNF-α与WHR、HOMA-IR、全身体脂比例、VATA、TG呈正相关。结论糖尿病前期超重及肥胖患者VATA明显增加,与APN分泌减少密切相关,可能是糖代谢紊乱的重要影响因素。