特应性皮炎患者Th1/Th2细胞因子谱的检测及意义

目的：检测特应性皮炎（atopic dermatitis,AD）患者Th1/Th2细胞因子谱的变化,探讨其在AD发病中的作用。方法：采用Flowcytomix流式检测技术对35例青年成人期特应性皮炎患者血清中多种Thl/Th2细胞因子进行芯片式集成测定,同时以30名正常人作为对照组。结果：与对照组比较,特应性皮炎患者组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）水平显著降低（P〈0.05）;Th1型细胞因子白介素-1α（IL-1α）、IL-2及干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平显著降低;Th2型细胞因子白介素-4（IL-4）、IL-5、IL-6、IL-10水平显著升高。结论：Th1/Th2细胞因子网络失衡,在AD的免疫发病机制中发挥重要作用。     

特应性皮炎患者外周血辅助性T细胞22的表达及意义

[目的]检测特应性皮炎(AD)患者外周血辅助性T细胞22(Th22)的表达,探讨其在AD发病机制中的作用.[方法]以湿疹面积及严重度指数(EASI)评分评估患者病情,采用流式细胞术检测46例AD患者和28例健康对照者外周血Th22(IL-22)细胞,ELISA法检测血清中IL-22、IFN-γ、IL-4水平.[结果]AD患者外周血Th22细胞(2.35±0.64)％,明显高于对照组的(0.94±0.43)％(P＜ 0.01); Th22细胞与血清中IL-22呈正相关(r=0.48,P＜0.05),而与IFN-γ、IL-4无相关(r=- 0.105,P＞0.05;r=- 0.267,P＞0.05),Th22细胞与疾病的EASI评分呈正相关(r=0.53,P＜0.05).[结论]Th22细胞有可能作为监测AD严重程度或病情波动的指标.     

特应性皮炎患者单个核细胞Th1/Th2和IFN-γ及IL-4 mRNA表达

目的：探讨外周血单个核细胞Th1／Th2在特应性皮炎（AD）发病中的作用和IFN-γ及IL-4 mRNA表达的情况。方法：分别用流式细胞仪及RT—PCR方法检测97例AD患者（AD组）及20例健康人（对照组）外周血单个核细胞（PBMCs）Th1／Th2水平和IFN-γ、IL-4 mRNA表达。结果：AD组外周血Th1细胞百分比低于对照组（P〈0．01），而Th2百分比高于对照组（P〈0．01）；AD组PBMCs IFN-γ mRNA表达水平与对照组差异无统计学意义（P〉0．05），而IL-4 mRNA表达显著高于对照组（P〈0．01）。结论：AD患者体内存在Th1／Th2的失衡，并提示AD属Th2优势疾病。     

初治肺结核患者外周血T淋巴细胞IL-4、IL-10、IL-18、IL-23及IFN-γ表达的研究

目的研究肺结核患者外周血T淋巴细胞IL-4、IL-10、IL-18、IL-23及IFN-γ的表达,分析IL-4、IL-10、IL-18、IL-23及IFN-γ与结核病的相关性。方法选择确诊为涂阳初治肺结核患者100人,同期随机选择90例健康志愿者作为对照组,通过比较肺结核患者治疗2个月前后与健康对照组外周血T淋巴细胞IL-4、IL-10、IL-18、IL-23及IFN-γ的表达,分析细胞因子的表达与肺结核免疫发病机制、治疗及其预后的相关性。结果肺结核组治疗前IL-4、IL-10、IL-18、IL-23及IFN-γ水平明显高于正常组(P<0.01),有统计学意义;肺结核组治疗后IL-4、IL-18水平明显高于正常组(P<0.05),有统计学意义,IIL-10、IL-23及IFN-γ比较,差异无统计学意义(P>0.05);肺结核组治疗后细胞因子IL-4、IL-10、IL-18、IL-23及IFN-γ水平明显低于治疗前(P<0.05),有统计学意义。转阴患者五种细胞因子与未转阴患者间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在进行抗肺结核药物治疗时动态观察细胞因子水平,有利于监测肺结核病情的转归,利用细胞因子的变化趋势,可以预知该治疗方案有效性。     

Th1/Th2型细胞因子与原因不明复发性流产的相关性研究

目的探讨Th1/Th2型细胞因子与原因不明复发性流产(URSA)发病及发病时间、次数的相关性。方法治疗组为150例URSA患者,给予主动免疫疗法治疗。对照组为100例正常早期妊娠要求人工流产妇女。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测治疗组治疗前后及对照组外周血清中IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值。结果治疗组治疗前IFN-γ、IL-4水平与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。治疗组治疗后IL-4、IFN-γ水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组治疗后较治疗前IL-4水平升高,IFN-γ水平下降显著,差异有统计学意义(P<0.05)。URSA妇女反复流产次数与IFN-γ/IL-4水平无关(P>0.05),流产时间与IFN-γ/IL-4水平有关(P<0.05)。结论正常妊娠表现为一种特殊的Th2现象,当Th1型细胞因子过度表达,Th2型细胞因子处于抑制状态时,将导致流产的发生。     

1型糖尿病外周血Th1/Th2细胞因子表达水平的研究

目的检测1型糖尿病患者外周血CD_4~+T细胞分泌细胞因子的水平变化,探讨患者Th1/Th2细胞因子的平衡状态及其在1型糖尿病中的作用。方法对49例1型糖尿病患者和30例健康时照组外周血用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗原抗体结合,以流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。结果1型糖尿病患者Th1型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)表达水平较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平较正常时照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论1型糖尿病患者Th1/Th2平衡失调,Th1型反应模式处于优势状态,Th2型反应模式处于弱势状态。Th1/ Th2平衡向Th1方向漂移。     

免疫相关性血细胞减少患者血清细胞因子变化与骨髓免疫的相关性

目的检测89例免疫相关性血细胞减少(IRH/IRP)患者外周血细胞因子的变化状况,观察骨髓细胞活化状态,探讨IRH/IRP的免疫相关机制。方法 ELISA方法检测IRH/IRP患者外周血清IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ的含量,分析患者组和正常对照组间细胞因子含量的差异,并对患者组Th1类细胞因子与Th2类细胞因子变化的相关性和升高率以及骨髓细胞免疫活化状况与细胞因子变化的相关性进行分析。结果 89例患者血清IL-4、IL-6和IFN-γ呈现不同程度明显升高(P<0.01),其中IFN-γ显著高于正常对照组,分别为(38.75±3.67)pg/ml和(8.69±1.68)pg/ml。患者Th1活化相关细胞因子的升高率与Th2活化相关细胞因子的升高率相比具有统计学差异。结论 IFN-γ的变化与IRH/IRP者细胞免疫活化密切相关,IL-4和IL-6可能参与与IRH/IRP体液免疫的活化,感染等可加重多重免疫活化,细胞因子含量和骨髓细胞免疫状况的监测有助于IRH/IRP的诊断并有利于评价患者的免疫机能状态。     

CTLA-4 siRNA对慢性乙型肝炎患者外周血Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察化学合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血淋巴细胞细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxic T-lympho-cyte antigen 4,CTLA-4)表达的抑制作用及干扰后对细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4分泌的影响,探讨CTLA-4对慢性乙型肝炎的T细胞免疫调节作用。方法:检测CHB患者外周血淋巴细胞CTLA-4,观察其与HBV-DNA的相关性(P<0.05);根据人淋巴细胞CTLA-4的基因序列,设计合成CTLA-4 siRNA及阴性对照siRNA(siR-NA-co),电穿孔法转染CHB患者外周血淋巴细胞,采用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)方法检测淋巴细胞CTLA-4 mRNA的表达,采用Western Blotting检测淋巴细胞CTLA-4蛋白表达,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedim-muno sorbent assay,ELISA)检测IFN-γ、IL-2和IL-4分泌。结果:CHB患者外周血淋巴细胞CTLA-4表达量与血清HBV-DNA载量有关;CTLA-4 siRNA转染CHB患者外周血淋巴细胞后,CTLA-4 mRNA及CTLA-4蛋白表达均受到抑制,IFN-γ、IL-2分泌增加,与阴性对照相比差异具有统计学意义(P<0.01)。而IL-4分泌没有变化,与阴性对照相比差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:CHB患者外周血淋巴细胞CTLA-4表达一定程度抑制免疫反应,利于HBV-DNA的复制;利用siRNA在mRNA水平抑制CHB患者外周血淋巴细胞CTLA-4的表达,能够诱导Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ分泌增加,对Th2型细胞因子IL-4无影响。说明抑制CTLA4有助于慢性乙型肝炎患者T细胞免疫的增强。     

女性系统性红斑狼疮患者血清Th相关细胞因子水平分析

目的了解女性系统性红斑狼疮（SLE）患者血清Th相关细胞因子水平,并探讨其与患者病情发生、发展的关系。方法用采用双抗体夹心法检测女性SLE患者Th1相关细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2相关细胞因子IL-4、IL-10。结果SLE患者血清IL-2、IFN-γ水平显著低于正常对照组（P〈0.05）,IL-4、IL-10水平显著高于正常对照组（P〈0.01）。IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10与ANA、C3、C4、CRP、ACA、抗ds-DNA抗体水平及SLEDAI活动性评分均无相关性,经治疗后IL-2、IFN-γ水平在治疗后升高,IL-4和IL-10水平较治疗前下降。结论SLE患者IL-4、IL-10水平明显高于健康对照组,IL-2、IFN-γ水平明显低于健康对照组,支持SLE患者体内存在Th1细胞向Th2细胞转化,表现为以Th2细胞为主的免疫应答。     

乌司他丁对急性肺损伤患者Th1/Th2细胞因子比率变化的影响

目的探讨乌司他丁对急性肺损伤患者Th1/Th2细胞因子比率变化的影响。方法选择急性肺损伤患者60例,随机分为常规组和乌司他丁组,每组30例,同时选择健康体检者30例为对照组。所有患者进行ApacheⅡ评分、PO2/FiO2监测,用酶联免疫吸附法测定血清Th1类细胞因子(IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4)水平。结果与对照组比较,常规组和乌司他丁组血清IFN-γ、IFN-γ/IL-4明显升高(P<0.05),而IL-4水平差异无统计学意义(P>0.05);与常规组治疗后比较,乌司他丁组治疗后患者血清IFN-γ、IFN-γ/IL-4明显下降(P<0.05),IL-4水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论急性肺损伤患者Th1/Th2类细胞因子失衡,乌司他丁可以调节炎性细胞因子的释放,恢复Th1/Th2类细胞因子的平衡,发挥肺保护作用。     

变应性鼻炎患者血清Th1/Th2细胞因子水平变化及孟鲁司特的干预作用

目的 探讨变应性鼻炎患者血清Th1/Th2细胞因子水平的变化及孟鲁司特的干预作用.方法 选择变应性鼻炎患者40例（治疗组）予以孟鲁司特片10 mg口服,1次/d,连用8周.观察患者治疗前后外周血中γ-干扰素（IFN-γ）和白介素-4（IL-4）水平的变化,并进行临床疗效及安全性的观察.另选择同期体检的正常健康者30例作为对照组.结果 治疗组患者治疗前培养上清中IFN-γ水平[（8.74±1.37） ng/mL]明显低于对照组[（15.13 ±3.16） ng/mL],IL-4水平[（1.64±0.47）ng/mL]明显高于对照组[（0.72±0.21） ng/mL]（t=2.93、3.52,均P＜0.01）.治疗8周后,患者培养上清中IFN-γ水平[（12.36±2.56） ng/mL]均较治疗前[（8.74±1.37） ng/mL]明显上升,IL-4水平[（1.21±0.28） ng/mL]均较治疗前[（1.64±0.47） ng/mL]明显下降（t=2.36、2.31,均P＜0.05）;且治疗组治疗8周后,临床总有效率92.5％ （37/40）,治疗期间未发生严重的药物不良反应.结论 变应性鼻炎患者存在外周血Th1/Th2细胞因子的失衡.孟鲁司特治疗变应性鼻炎的疗效确切,安全性较好,作用机制与其能降低外周血IL-4水平,提高外周血IFN-γ水平,纠正Th1/Th2细胞因子的平衡紊乱,使免疫反应由Th2型向Th1型转变密切相关.     

CpG寡脱氧核苷酸对1型糖尿病患者外周血单个核细胞功能的影响

目的:观察CpG寡脱氧核苷酸(ODN)对1型糖尿病患者与健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12以及IL-10表达的影响。方法:将1型糖尿病患者与健康志愿者的PBMC根据刺激物不同分为对照组、CpG组(CpGODN 2 nmol·mL-1)。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测PBM CIFN-γmRNA、IL-12mRNA和IL-10mRNA的表达。结果:1型糖尿病患者IFN-γmRNA和IL-12mRNA的表达明显低于健康志愿者;1型糖尿病患者与健康志愿者PBMC经CpGODN刺激后,IFN-γ mRNA和IL-12mRNA的表达均高于对照组(P<0.01,P<0.01),IL-10mRNA的表达与对照组相似(P>0.05)。结论:1型糖尿病患者PBMC表达IFN-γ和IL-12下降,CpGODN可促进其表达,增强其免疫调节能力。     

原因不明复发性流产患者外周血T细胞亚群变化及意义

目的观察原因不明复发性流产(URM)患者外周血Th1型细胞因子干扰素γ及Th2型细胞因子白细胞介素10水平的变化。方法选择2005年9月至2006年4月河南省鹤壁煤业集团总医院妇产科35例URM(非孕期)患者和40例正常非孕(NNP)妇女,采用流式细胞分析法对各组患者进行CD4+Th1型细胞因子干扰素γ和Th2型细胞因子白细胞介素10水平进行检测,从而测出相应Th1、Th2细胞的百分比。结果URM患者CD4+干扰素γ表达水平和Th1/Th2值高于NNP组(P<0.05),CD4+白细胞介素10表达水平低于NNP组(P<0.05)。结论URM患者存在Th1/Th2失衡,且可能与URM发病有一定关联。     

HER-2多肽负载自体树突状细胞治疗HER-2阳性乳腺癌的初步研究

目的 探讨HER-2多肽负载自体树突状细胞治疗HER-2阳性乳腺癌的安全性和有效性.方法 15例HER-2阳性及HLA-A2阳性的乳腺癌患者（Ⅱ～Ⅲ期）经标准治疗后行HER-2多肽负载自体树突状细胞治疗.检测治疗前后患者外周血淋巴细胞亚群、Th1型和Th2型细胞因子水平,以及IFN-γ分泌型CD8＋T淋巴细胞比例,观察治疗相关毒副反应及近期临床疗效.结果 治疗后外周血CD3＋比例、CD3＋CD4＋比例和CD4＋/CD8＋比值较治疗前明显升高（P〈0.05）,治疗后血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ较治疗前明显上升（P〈0.05）,IL-4、IL-10、IL-12无明显变化（P＞0.05）,IL-10/TNF-α比值较治疗前显著下降（P〈0.05）.IFN-γ分泌型CD8＋T淋巴细胞比例较治疗前也显著上升（P〈0.05）.在治疗结束后的随访时间内,15例患者取得了13例病情稳定,2例病情进展的近期临床疗效.所有治疗患者均未出现3～4级不良反应.结论 HER-2阳性乳腺癌行HER-2多肽负载自体树突状细胞治疗是安全可行的,可改善患者细胞免疫功能并提高Th1型细胞因子水平,促进特异性抗肿瘤细胞免疫应答并产生一定临床获益.     

1型糖尿病并发血管病变患者Th1/Th2细胞亚群的研究

目的探讨1型糖尿病并发血管病变患者体内Th1/Th2细胞亚群的变化。方法用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测了15例1型糖尿病合并有下肢血管病变患者血清中Th1型细胞亚群分泌的细胞因子IFN-γ、TNF-α和Th2型细胞亚群分泌的细胞因子IL-4、IL-10的水平变化,20例无糖尿病早期合并症患者和20例健康志愿者做为对照组。结果1型糖尿病患者血清中Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α的水平显著高于对照组（P〈0.01）;Th2型细胞因子IL-4、IL-10的水平明显低于对照组（P〈0.01）;糖尿病并发血管病组Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α显著高于单纯糖尿病组（P〈0.05）,而Th2型细胞因子IL-4、IL-10的水平明显低于单纯糖尿病组（P〈0.05）。结论当1型糖尿病并发血管病变时,患者体内Th1/Th2细胞亚群发生了Th2-Th1的漂移改变。     

细菌性阴道病患者治疗前后阴道灌洗液中干扰素-γ和白细胞介素-4表达的研究

目的检测细菌性阴道病(BV)患者治疗前后阴道灌洗液中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)的水平,了解阴道局部免疫状态与治疗转归关系。方法应用酶联免疫吸附法测定健康妇女33例(对照组)、BV患者32例(BV组)治疗前后阴道灌洗液IFN-γ、IL-4水平。结果①与对照组相比,BV组IFN-γ显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);而IL-4升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。②BV组治疗转归变化,趋向治愈组中IFN-γ因子水平升高,IL-4因子水平显著下降,差异有统计学意义。结论①BV时阴道灌洗液IFN-γ下降,提示IFN-γ降低与阴道局部细胞免疫功能异常密切相关;②Th1/Th2的漂移在下生殖道感染的发病机制中占有重要地位,联合检测阴道局部细胞因子变化,将为指导BV患者的治疗提供合理的依据。     

卡介苗对哮喘患者血Th1／Th2平衡和IgE的影响

目的：探讨口服卡介苗（BCG）对哮喘患者外周血Th1／Th2平衡、嗜酸性粒细胞（EOS）和IgE水平的影响。方法：对40例急性发作期的哮喘患者（治疗组）在常规治疗的基础上加用BCG口服（50mg／支）,100mg用5％碳酸氢钠溶液250ml稀释后饭前口服,每周1次,共16周。分别在治疗前后采用双抗体夹心ELISA法检测外周血培养上清单个核细胞（PBMC）中白介素4（IL4）和 γ-干扰素（IFN-γ）水平,同时测定外周血IgE和嗜酸性粒细胞（EOS）计数,并进行肺功能的测定。并以同期入选的健康体检者30例作对照（对照组）。结果：治疗组患者治疗前外周血IL4、IgE水平和EOS细胞数明显高于对照组,而IFN-γ水平明显低于对照组（P〈0．05或P〈0．01）,经BCG口服治疗16周后患者外周血IL-4、IgE水平和EOS细胞数均明显降低,而IFN-γ水平明显上升（P均〈0．05）;同时患者肺功能指标FVC、FEV,和PEF均明显改善（均P〈0．05）。结论：哮喘患者存在外周血Th1／Th2平衡失调。口服BCG治疗哮喘的临床疗效确切,作用机制可能通过纠正外周血Th1／Th2细胞因子平衡,抑制EOS聚集,使B细胞分泌IgE减少,从而改善患者肺功能,达到治疗哮喘的目的。     

拉米夫定治疗变异后慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和IL-10的测定及临床意义

目的评估拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者在治疗后及病毒变异后血清中Th1型[γ干扰素（IFN-γ）]和Th2型[白细胞介素（IL）-10]细胞因子水平,探讨拉米夫定治疗乙型肝炎病毒变异后的细胞因子动态变化。方法选取拉米夫定治疗而发生病毒变异及未变异的慢性乙型肝炎患者各20例,另选取20例健康人作为对照,检测患者血清IFN-γ、IL-10的水平。结果在治疗后6个月时,未变异组血清IFN-γ、IL-10水平与变异组相比差异无统计学意义（P〉0.05）;但在病毒变异后,变异组IFN-γ水平均低于未变异组,IL-10水平则高于未变异组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论拉米夫定抗病毒治疗出现变异后,机体细胞因子表达发生改变。