没药甾酮对H2O2损伤PC12细胞的保护作用

探讨没药甾酮(guggulsterone)对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用。以过氧化氢(hydrogen peroxide，H₂O₂)损伤PC12细胞为氧化应激损伤模型， 维生素E为对照， 采用四甲基偶氮唑蓝［3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT］法检测细胞增殖状况； 试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)及一氧化氮(nitric oxide，NO)的释放； DCFH法和Fura 2-AM法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)和Ca²⁺的含量； 碘化丙啶(propidium iodide，PI)染色流式细胞术(flow cytometry，FCM)检测细胞凋亡； 罗丹明123(rhodamine 123，Rh 123)染色FCM检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane protential，MMP)。结果表明， 没药甾酮(0.1～10 μmol·L^-1)可使200 μmol·L^-1 H₂O₂作用24 h后的PC12细胞生长抑制率下降； 细胞外LDH和NO， 细胞内ROS和Ca²⁺含量降低； 明显抑制200 μmol·L^-1 H₂O₂作用12 h后诱导的PC12细胞凋亡和线粒体膜电位降低作用，没药甾酮(0.1～10 μmol·L^-1)使细胞凋亡率由24.3%下降至18.4%、 15.9%、 11.8%。实验结果表明, 没药甾酮对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用， 其机制可能为降低细胞内ROS含量， 进而抑制LDH和NO释放， 降低细胞内Ca²⁺含量， 升高线粒体膜电位,减少细胞凋亡。     

西洋参皂苷对H_2O_2致PC12细胞损伤的保护作用

目的研究西洋参皂苷对H2O2致PC12细胞损伤的保护作用。方法建立H2O2诱导PC12细胞损伤模型,化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶活性,并在显微镜下观察其形态学特征。结果200μmoL/L H2O2诱导PC12细胞,10 h呈明显损伤作用,250μg/mL西洋参皂苷对H2O2致PC12损伤的细胞有增殖作用。结论西洋参皂苷对H2O2致PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧能力有关。     

神经妥乐平对H2O2致PC12细胞损伤的保护作用

目的 探索神经妥乐平对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的影响及其潜在机制.方法 用CCK-8法检测细胞存活率,以流式细胞术检测细胞氧化损伤的发生、细胞内活性氧的生成及线粒体膜电位的变化,荧光显微镜观察细胞内活性氧的产生,qRT-PCR测定Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA的表达.结果 PC12细胞存活率随H2O2浓度的增加而逐渐下降.其中,450μM H2O2处理细胞24 h后细胞存活率、凋亡率、坏死率明显降低;细胞内活性氧水平表达明显升高;线粒体膜电位JC-1红/绿荧光比值下降;Bax和Caspase-3的mRNA表达升高,而Bcl-2的mRNA表达下降,以上指标与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).而预先给予0.01UN/ml的NTP处理细胞12h可明显提高细胞存活率,降低细胞凋亡率和坏死率,减少细胞内活性氧生成并提高线粒体膜电位,抑制Bax和Caspase-3的mRNA表达,促进Bcl-2 mRNA的表达,以上指标与H2O2组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NTP能抑制H2O2诱导的PC12细胞损伤,其神经细胞保护作用可能与其降低细胞内活性氧水平、维持线粒体膜电位的高能状态和抑制促凋亡基因表达、促进抗凋亡基因表达有关.     

α-硫辛酸注射液对过氧化氢致PC12细胞损伤的保护作用

目的 研究α-硫辛酸注射液(抗氧化剂)对H2O2致PC12细胞损伤的保护作用.方法 600 μmol·L-1H2O2与细胞共同孵育4 h,建立PC12细胞氧化应激损伤模型,用MTT法,测定细胞生长抑制率;培养介质中的LDH测定,用紫外分光光度法,用流式细胞术测定细胞凋亡率和线粒体膜电位.结果 与模型组相比,3个剂量(10,1 μmol·L-1)α-硫辛酸注射液能提高H2O2损伤的PC12细胞的存活率,减少LDH的漏出,降低细胞凋亡率,抑制线粒体膜电位的下降(P＜0.05,P＜0.01).结论 α-硫辛酸注射液对H2O2致PC12细胞损伤模型具有较好的保护作用.     

香港远志黄酮类成分对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用研究

目的:研究香港远志黄酮类成分对H2O2损伤PC12细胞的保护作用。方法:应用现代分离鉴定技术分离香港远志中黄酮类成分;96孔板培养PC12细胞24h加入100μmol的受试样品(以维生素C为对照),培养24h后加入400μmolH2O2作用2h。使用MTT法检测各组细胞活性,用自动酶标仪在570nm波长下测定各孔吸光度。结果:香港远志中黄酮类成分山柰酚-3-O-芸香糖苷、山柰酚-3-O-葡萄糖苷、芒果苷、香港远志黄酮A、香港远志黄酮B具有一定的对H2O2损伤PC12细胞保护作用的活性。结论:本实验可为防治阿尔茨海默病新药的研发提供理论基础。     

人参皂苷Rg1对PC12细胞凋亡保护作用的可能机制

目的探讨人参皂苷Rg1对多巴胺诱导PC12细胞凋亡的保护作用及其机制.方法用流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡率及Bcl-2和Bax蛋白表达率,RT-PCR分析bcl-2和baxmRNA表达水平,荧光分光光度计法检测CPP32活力.结果经10μmol·L^-1Rg1预处理后,由多巴胺诱导的PC12细胞凋亡受到明显的抑制.同时,Bcl-2蛋白和mRNA表达增加,Bax蛋白和mRNA表达减少,CPP32活力明显下降.结论Rg1可抑制多巴胺诱导的PC12细胞凋亡,其作用机制可能通过调节Bcl-2与Bax蛋白的比值和抑制CPP32的激活而起作用.     

川芎嗪对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用研究

目的探讨盐酸川芎嗪对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法采用川芎嗪预处理PC12细胞后,制备H2O2细胞损伤模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性及细胞活性氧(ROS)水平来反映细胞损伤程度,流式细胞术和蛋白印迹法分析细胞凋亡发生机制。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数提高,LDH释放及ROS水平显著降低(P<0.05),总凋亡率降低,caspase-3活性降低,Bax/Bcl-2比值降低。结论川芎嗪预处理后可以降低H2O2诱导的PC12细胞凋亡。     

灯盏乙素对过氧化氢致PC12细胞损伤的抗氧化作用

目的研究灯盏乙素对过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法建立H2O2致PC12细胞损伤模型,倒置相差显微镜下进行一般形态学观察,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果100μmol/L H2O2诱导PC12细胞4 h,细胞呈现明显损伤形态,LDH释放量增加,细胞培养液和细胞内MDA含量升高,SOD活性降低。灯盏乙素可明显改善形态学损伤,显著降低LDH释放量、细胞培养液及细胞内MDA含量,提高SOD活性。结论灯盏乙素对H2O2诱导PC12细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化能力有关。     

复方丹参注射液对H2O2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的:探讨复方丹参注射液(ISM)对H2O2诱导的PC12细胞凋亡保护作用的机制.方法:在H2O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上,采用MTT比色分析测细胞存活率,Hoechst-PI荧光染色和流式细胞仪检测分析细胞凋亡情况,RT-PGR检测par-4和NF-gB P 65基因mRNA表达,Western b1ot检测Par-4和NF-κB P 65蛋白表达.结果:不同剂量ISM预处理1 h可提高PC12细胞的存活率,降低par-4和NF-κB P 65的mRNA表达以及蛋白表达.结论:ISM可剂量依赖性地对抗H2O2的神经毒性作用,其机制可能与降低凋亡基因par-4的表达有关.     

大豆异黄酮活性组分对H2O2诱导的PC12细胞损伤的影响

目的:探讨大豆异黄酮活性组分对H2 O2 诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法:以H2 O2 损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型,采用光学显微镜观察细胞形态,MTT法判断细胞的存活率,LDH法检测细胞的损伤程度。结果:不同浓度大豆异黄酮能明显改善H2 O2 导致的细胞甲瓒减少,大豆异黄酮处理组细胞存活率明显高于H2 O2 处理组(P <0 .0 1) ;而LDH漏出率则明显低于H2 O2 处理组(P <0 .0 5 )。结论:大豆异黄酮活性组分对H2 O2 诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。     

甘西鼠尾草注射液与丹参注射液对PC12细胞H2O2损伤保护作用比较研究

目的：比较甘西鼠尾草注射液与丹参注射液对PC12细胞H2O2损伤的保护作用。方法：采用细胞株培养的方法,建立PC12细胞H2O2损伤模型,通过MTT法和流式细胞分析仪检测细胞存活率和凋亡率;采用免疫细胞化学染色法检测PC12细胞bcl-2和bax表达。结果：PC12细胞经H2O2损伤后,细胞存活率降低、凋亡率增加,甘西鼠尾草注射液与丹参注射液处理组均可有效缓解上述改变（P〈0.05）;两药均使bcl-2表达增加（P〈0.05）,bax表达减少（P〈0.05）。结论：甘西鼠尾草注射液与丹参注射液对PC12细胞H2O2损伤具有明显保护作用。其机理可能与增强凋亡抑制因子bcl-2表达、抑制凋亡促进因子bax表达,进而抑制细胞凋亡有关。     

二苯乙烯苷对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的抗凋亡作用

目的:探讨二苯乙烯苷(2,3,5,4'-tetrahydroxystibene-2-O-β-D-glucoside,TSG)对H2O2诱导的PC12细胞损伤的抗凋亡作用。方法:本实验分为正常对照组、H2 O2处理组和H2 O2+TSG(0.1,1,10和50μmol.L-1)预处理组。采用MTT比色法和乳酸脱氢酶(LDH)测定法检测细胞活性,Hoechst染色观察细胞凋亡程度,Western Blotting检测细胞凋亡相关蛋白表达。结果:与正常对照组相比,细胞经H2O2诱导处理后,细胞存活率降低,LDH释放增加,Hoechst染色显示凋亡细胞增多,细胞核呈固缩突亮或碎块状致密浓染,Western Blotting显示促凋亡蛋白Bax表达升高,抑凋亡蛋白Bcl-2表达降低,Bcl-2与Bax的比值降低。不同浓度TSG预处理能改善H2O2所致的细胞存活率降低,减轻细胞凋亡程度,减少促凋亡蛋白Bax的表达以及增加抑凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论:TSG可抑制H2O2诱导的PC12细胞损伤,其机制可能与抗凋亡有关。     

葛根素对二氯化钴造成PC12细胞缺氧损伤的保护作用

目的研究葛根素对PC12细胞缺氧损伤的影响。方法使用氯化钴对PC12细胞制备缺氧损伤模型,通过测定受损细胞给药后的活力、受损细胞LDH泄漏量和受损细胞SOD活力,研究葛根素对受损细胞的保护作用。结果在5×10-4~2×10-11mg.mL-1范围内,葛根素显著地增加模型受损细胞的活力;降低细胞LDH的泄露量;并增强受损细胞的SOD活性。结论葛根素对二氯化钴造成PC12细胞缺氧损伤具有修复作用。     

葛根素保护双氧水诱导的SH-SY5Y细胞凋亡

目的探讨葛根素对双氧水(H_2O_2)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用及其机制。方法建立体外神经元损伤模型,MTT法观察细胞存活率;Hoechst 33342染色观察细胞核改变;JC-1染色检测细胞线粒体膜电位的改变;酶活性检测线粒体caspase-3和caspase-9的变化;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、p-Akt、Akt蛋白的表达。结果与H_2O_2模型组相比,葛根素预处理能明显改善H_2O_2诱导的SHSY5Y细胞存活率下降(P<0.05),缓解H_2O_2引起的线粒体膜电位的下降(P<0.01),抑制caspase-3和caspase-9的酶活性(P<0.01),减少H_2O_2诱导的细胞凋亡。此外,葛根素还促进细胞内p-Akt、Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达,而这种作用能被PI3K/Akt的抑制剂LY294002所抑制。结论葛根素可保护H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,这种保护作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的。     

梓醇对L-谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用

梓醇是地黄中含量较高的活性成分,研究表明其对动物模型及培养细胞有明显神经保护作用[1～3].本室研究发现,梓醇可保护Aβ25～35损伤PC12细胞及脑内注射Aβ25～35拟AD小鼠的胆碱能神经系统功能,改善AD的病理变化,但其作用机制不明,既不是胆碱酯酶抑制剂,也不是M受体激动剂或阻断剂[4].兴奋性神经递质谷氨酸(glutamate,Glu)神经毒性在AD发病过程中起重要作用[5],梓醇的神经保护作用是否与影响L-Glu的毒性作用有关,本文利用PC12细胞对此进行了研究.     

布南色林对H2O2引起PC12细胞损伤的神经保护作用研究

目的 探讨布南色林对H2O2引起的PC12细胞损伤的保护作用。方法 用H2O2损伤PC12细胞建立神经元损伤模型,实验分空白细胞对照组（C组）,H2O2处理组（H组）,布南色林-过氧化氢处理组（B组）,阳性对照组（维生素E-过氧化氢处理组,E组）。MTT法检测细胞存活率;Hoechst33258以及TUNEL检测其对细胞凋亡影响;生化法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性以及丙二醛（MDA）的含量。结果 与C组比较,H组的细胞存活率明显下降（P＜0.05）,凋亡指数增加,细胞内的SOD活性减低,MDA水平增高（P＜0.05）;与H组比较,B组的细胞活性增强,凋亡指数下降,细胞内的SOD活性加强,MDA水平减低（P＜0.05）。结论 合适浓度的布南色林对H2O2引起的神经损伤有保护作用。     

Daidizein对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究Daid ize in对β淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法用Aβ1-42处理诱导体外培养的PC12细胞损伤,并用不同浓度的Daid ize in进行保护,显微观察细胞形态的改变,LDH法和MTT法检测细胞膜的损伤情况。结果保护组细胞数比损伤组显著增多,受损变圆的细胞数较少,细胞形态明显改善,保护组上清液LDH活性显著低于损伤组(P<0.01),MTT值显著高于损伤组(P<0.01)。结论Daid ize in对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。     

异黄酮活性成分对Aβ_(1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨异黄酮活性成分对β淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法从大豆中提取纯化异黄酮活性成分,以Aβ1-42诱导PC12细胞损伤为细胞模型,采用细胞形态学方法、MTT法、LDH法观察不同剂量的异黄酮活性成分对PC12细胞损伤的保护作用。结果异黄酮活性成分能有效地改善PC12细胞的形态,提高细胞存活率(P<0.05),保护组LDH活性低于损伤组(P<0.05)。结论大豆异黄酮活性成分对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。