PD-L1对人口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨程序性细胞死亡配体1 (PD-L1)在口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞中的表达及其对OSCC CAL27细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制。方法：采用Western blotting法检测口腔上皮HOK细胞和OSCC CAL27、TCA8113和SCC15细胞中PD-L1蛋白表达水平。免疫荧光染色法检测CAL27细胞中PD-L1蛋白表达和定位情况。将CAL27细胞分为对照组（转染si-NC）和si-PD-L1组（转染si-PD-L1）,Western blotting法检测2组细胞干扰效率,CCK-8法检测不同时间点2组细胞增殖活性,平板克隆实验检测2组细胞克隆形成数,细胞划痕愈合实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测2组细胞中迁移和侵袭细胞数。结果：OSCC细胞中PD-L1蛋白表达水平均高于HOK细胞（P<0.05或P<0.01）, PD-L1在CAL27细胞的细胞质和细胞核中均有表达。CCK-8法和平板克隆实验,与对照组比较,不同时间点si-PD-L1组CAL27细胞增殖活性明显降低（P<0.05或P<0.01）,克隆形成...     

长链非编码RNA linc00152促进人口腔鳞状细胞癌的增殖和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA-linc00152对口腔鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响.方法采用RT-qPCR方法检测linc00152在口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织以及口腔鳞癌细胞系中的表达.CAL27和SCC9细胞转染linc00152-siRNA后,采用CCK8、划痕以及Transwell实验检测CAL27和SCC9细胞增殖、侵袭转移情况.结果Linc00152在口腔鳞癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织,在人口腔鳞状细胞癌细胞系TSCCA、SCCl5、CAL27和SCC9中的表达显著高于人正常黏膜HOK细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);经相关性分析,Linc00152的高表达与淋巴结转移有关(P<0.05);CAL27和SCC9细胞系敲低Linc00152后,CAL27和SCC9细胞增殖、侵袭和转移明显受到抑制(P<0.05).结论linc00152在口腔鳞癌组织和口腔鳞癌细胞系中呈高表达,下调linc00152表达可抑制口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和转移,linc00152可成为口腔鳞癌潜在治疗靶点.     

LncRNA SNHG3对宫颈癌细胞SiHa增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探究长链非编码RNA（lncRNA）小核仁RNA宿主基因3（SNHG3）对人宫颈癌细胞系SiHa增殖、迁移及侵袭的影响。方法 利用 GEO 数据库芯片分析 lncRNA SNHG3 在正常宫颈组织和宫颈癌样本中的表达;通过实时定量 PCR 检测LncRNA SNHG3、上皮-间质转化标志物 N-cadherin、Snail、Vimentin 和 E-cadherin 基因表达水平;通过 Western blot 检测 N-cadherin、Snail、Vimentin和E-cadherin蛋白表达水平;在SiHa细胞中转染siRNA干扰片段来敲低lncRNA SNHG3,并采用qRT-PCR验证转染效率;通过CCK8实验检测细胞增殖能力,划痕愈合实验检测细胞横向迁移能力,Transwell小室实验检测细胞纵向迁移及侵袭能力。结果 LncRNA SNHG3在宫颈癌组织及细胞系中高表达;敲低lncRNA SNHG3后,明显抑制SiHa细胞的增殖能力（P<0.001）、迁移能力（P<0.01）和侵袭能力（P<0.001）;qRT-PCR和Western blot结果显示敲低lncRNA SNHG3可下调N-cadherin、Snail和Vimentin表达水平（P<0.001）,同时上调E-cadherin表达水平（P<0.001）。结论 LncRNA SNHG3可通过激活EMT通路促进宫颈癌细胞SiHa增殖、迁移及侵袭能力。     

口腔鳞癌组织中LINC01605的表达及对细胞侵袭、迁移的影响

目的：探究LINC01605在口腔鳞癌组织中的表达及对细胞侵袭、迁移的影响。方法：收集口腔鳞癌病人的口腔鳞癌组织及相对应的癌旁组织标本各40例,分析口腔鳞癌组织中LINC01605的表达与临床病理特征的关系。将处于对数期的口腔鳞癌细胞CAL-27随机分为：CK组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01605组(转染si-LINC01605)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01605组(转染pcDNA-LINC01605);qRT-PCR检测组织和细胞中LINC01605表达;CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;Western blotting检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、神经型钙黏素(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达;体内移植瘤实验检测肿瘤生长情况。结果：口腔鳞癌组织中LINC01605表达高于癌旁组织(P<0.01);LINC01605表达与TNM分期、分化程度、淋巴结...     

MMP-7和bFGF mRNA在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的检测基质金属蛋白酶7(MMP-7)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达,并探讨其在OSCC发生发展中的作用。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对36例手术切除的OSCC组织及14例正常口腔组织(NOT)中MMP-7及bFGF mRNA的表达进行检测。结果 MMP-7及bFGF mRNA在OSCC表达均高于NOT(P<0.01),在有淋巴结转移组的表达均高于无淋巴结转移组(P<0.01),两者的表达均与肿瘤的病理分期、淋巴结转移有关,MMP-7及bFGF表达之间呈正相关(r=0.621,P<0.01)。结论 MMP-7和bFGF的异常表达与OSCC生物学行为密切相关,成为预测OSCC侵袭与转移的标志物,并为患者的预后提供评估依据。     

lncRNA UCA1对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

目的 探究长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1（lncRNA UCA1）通过靶向miR-206调控Yes相关蛋白1（YAP1）的表达,介导口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞增殖、凋亡的分子机制。方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测人正常口腔角质细胞系HOK和人口腔鳞状细胞癌细胞株TSCCA、SCCl5、HN13、CAL27、HSC3和SCC9中lncRNA UCA1和microRNA-206（miR-206）的表达;在HN13细胞中敲除IncRNA UCA1,采用CCK-8法和流式细胞术检测其对HN13细胞增殖和细胞凋亡的影响;通过生物信息学网站starBase预测IncRNA UCA1、YAP1与miR-206的互补结合位点,并通过双荧光素酶实验验证它们之间的结合关系;Western blotting检测YAP1蛋白的表达。结果 qRT-PCR结果显示,相比于人正常口腔角质细胞系HOK,6种OSCC细胞中lncRNA UCA1 mRNA相对表达量上调（P <0.05）,而miR-206 mRNA相对表达量均降低（P <0.05）。与转染siNC的对照组相比,siUCA1组细胞活力下降,凋亡比例升高（P <0.05）。生物信息学预测结合双荧光素酶实验证实miR-206与lncRNA UCA1、YAP1均存在互补结合。qRT-PCR和Western blotting检测结果显示,siUCA1组miR-206 mRNA相对表达量较对照组升高（P <0.05）,YAP1 mRNA相对表达量较对照组降低（P <0.05）,而同时转染siUCA1和miR-206 inhibitor则抑制miR-206表达,恢复YAP1的表达（P <0.05）。结论 lncRNA UCA1在OSCC细胞中高表达,通过抑制miR-206的表达,上调YAP1,从而促进OSCC细胞增殖,抑制凋亡。     

LncRNA CASC9高表达激活PI3K/AKT信号通路促进口腔鳞癌细胞增殖转移

目的：探索lncRNA CASC9在口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中的表达、功能及机制。方法：用原位杂交检测101例口腔鳞癌组织中CASC9的表达并行临床相关性和生存分析;siRNA干扰口腔鳞癌SCC15细胞中CASC9;qPCR和Western blot检测SCC15中PI3K、AKT和p-AKT的mRNA和蛋白表达水平;CCK-8实验、流式细胞和Transwell分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭。结果：CASC9在口腔鳞癌组织中的表达明显升高（P=0.000）;CASC9表达水平与肿瘤大小、颈淋巴结转移及临床分期呈显著正相关（P<0.05）,CASC9高表达的患者生存时间明显缩短（P=0.007）;CASC9是OSCC的独立危险因素（P<0.05）;沉默CASC9后,PI3K和p-AKT表达明显降低（P<0.05）,SCC15细胞增殖、迁移和侵袭能力明显减弱（P<0.05）。结论：CASC9通过激活PI3K/AKT通路促进OSCC发展;CASC9可能是OSCC新的临床预后标志物和治疗靶点。     

长链非编码RNA SNHG6在结肠癌中的表达及其生物学意义

目的 探索核仁小分子RNA宿主基因6(SNHG6)在结肠癌组织中的表达特点,以及其对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.方法 采用荧光定量PCR检测25例患者结肠癌组织及对应癌旁组织中SNHG6 mRNA的表达水平.将LoVo细胞分成Blank组、NC组、siRNA-1组和siRNA-2组,其中Blank组不作任何处理,另外3组依次使用Lipofectamine 2000转染NC-siRNA、SNHG6-siRNA-1及SNHG6-siRNA-2;通过CCK-8实验测定细胞增殖能力,通过Transwell实验测定细胞迁移及侵袭能力;通过荧光定量PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测上皮-间质转化(EMT)标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、Snail的mRNA及蛋白表达水平.结果 患者结肠癌组织SNHG6 mRNA表达水平高于对应癌旁组织(U=138.0,P=0.000 7).siRNA-1组和siRNA-2组细胞增殖活性较Blank组明显下降(P＜0.05);siRNA-1组和siRNA-2组细胞的迁移和侵袭数量较Blank组明显减少(P＜0.05);siR-NA-1组、siRNA-2组与Blank组比较,E-Cadherin mRAN及蛋白表达上调,N-Cadherin、Vimentin及SnailmRNA及蛋白表达下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SNHG6在结肠癌组织中高表达,敲低SNHG6表达能够抑制结肠癌细胞EMT进程,进而抑制细胞的增殖、迁移及侵袭能力.     

组织蛋白酶D与基质金属蛋白酶-9在口腔鳞癌的表达

目的 探讨组织蛋白酶D(CD)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人类口腔鳞癌(OSCC)中的表达意义. 方法 采用免疫组织化学SP法检测76例OSCC组织与20例癌旁正常口腔黏膜的CD与MMP-9水平. 结果 CD和MMP-9在OSCC中的阳性表达率分别为81.6%和77.6%,显著高于癌旁正常口腔黏膜(P＜0.01).两者均与OSCC浸润深度和淋巴结转移密切相关,浸润越深,其表达越强(P＜0.05);有淋巴结转移的病例,其阳性率明显高于无转移者(P＜0.05);MMP-9表达还与组织分化程度密切相关,分化程度越低,其表达越强(P＜0.05).OSCC组织中CD和MMP-9表达具有一定的一致性. 结论 CD和MMP-9的阳性表达与OSCC的侵袭转移有关.     

环状RNA Hsa_circ_0006948对口腔鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨环状RNA Hsa_circ_0006948（circ_0006948）对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞恶性生物学行为的影响。方法 qRT-PCR检测SCC-15、CAL27和HIOEC细胞circ_0006948的表达;将SCC-15细胞分别转染pc-NC、pc-circ_0006948、si-NC、si-circ_0006948,记为pc-NC组、pc-circ_0006948组、si-NC组以及si-circ_0006948组,取正常培养的细胞作为NC组。CCK-8法检测细胞存活率;平板克隆法检测细胞克隆情况;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞E-Cadherin、N-Cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果 与HIOEC细胞相比,CAL27细胞和SCC-15细胞中circ_0006948表达明显升高（P＜0.05）,由于SCC-15细胞中circ_0006948的表达最高,后续使用SCC-15细胞进行后续转染实验。与NC组和pc-NC组相比,pc-circ_0006948组细胞存活率、克隆个数、迁移和侵袭个数以及细胞N-Cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显升高（P＜0.05）,细胞凋亡率以及E-Cadherin蛋白表达明显降低（P＜0.05）;与NC组和si-NC组相比,si-circ_0006948组细胞存活率、克隆个数、迁移和侵袭个数以及细胞N-Cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低（P＜0.05）,细胞凋亡率以及E-Cadherin蛋白表达明显升高（P＜0.05）。结论 circ_0006948在OSCC细胞中呈高表达,过表达circ_0006948会促进SCC-15细胞增殖,克隆,迁移,侵袭,并抑制细胞凋亡,其作用机制可能与调控上皮间充质转化（EMT）有关     

lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中的表达及其对卵巢癌生物学行为的影响

目的 探讨lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中相对表达情况,评估其对卵巢癌生物学行为的影响。 方法 将2017年4月—2019年4月宁波市鄞州人民医院治疗的112例卵巢癌患者纳入研究,分析卵巢癌及卵巢癌旁组织、卵巢癌细胞系lncRNA SOX2OT表达情况,并测试其影响增殖及周期、迁移状况。 结果 卵巢癌组织内SOX2OT mRNA表达(3.50±0.13)高于癌旁组织(1.59±0.21,t=81.045,P<0.01);HO-8910PM细胞株内lncRNA SOX2OT表达(5.78±0.04)高于HO-8910细胞株(1.05±0.11,t=405.918,P<0.05)。空白对照组克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数高于siSOX2OT-1组、siSOX2OT-2组;阴性对照组克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数高于siSOX2OT-1、siSOX2OT-2组(均P<0.01)。子宫内膜样癌、浆液性卵巢癌、黏液性卵巢癌lncRNA SOX2OT表达分别为4.12±0.25、3.68±0.42、3.44±0.31,组间差异无统计学意义(均P>0.05)。 结论 lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中呈异常高表达,敲低lncRNA SOX2OT表达可对卵巢癌细胞的增殖及迁移、侵袭进行抑制,加快卵巢癌细胞凋亡。      

敲低lncRNA SNHG7通过抑制ROCK1降低前列腺癌细胞增殖和迁移能力

目的 探究长链非编码RNA (lncRNA) SNHG7在前列腺癌细胞中的恶性调控机制。方法 利用癌症基因组图谱数据库对SNHG7在前列腺癌组织和癌旁组织中的表达进行比对,并分析SNHG7表达对患者生存时间的影响。采用荧光原位杂交实验检测SNHG7的亚细胞分布;利用转染技术构建SNHG7敲低细胞系,通过MTT实验和Transwell实验检测细胞的增殖和迁移能力;采用Western blotting检测ROCK1的表达,采用共转染实验检测SNHG7和ROCK1在前列腺癌细胞中的调控关系。结果 SNHG7在前列腺癌组织和细胞系中高表达（P <0.05）,并与患者生存时间缩短相关（P <0.01）。SNHG7主要位于细胞质;敲低SNHG7后前列腺癌PC-3细胞增殖和迁移能力下降;敲低SNHG7可抑制ROCK1表达（P <0.05）;敲低SNHG7引起的细胞增殖和迁移能力下降可被过表达ROCK1恢复。结论 敲低SNHG7可通过抑制ROCK1表达降低前列腺癌细胞的增殖和迁移能力。     

LncRNA HCP5调节miR-27b-3p/H2AFZ轴对口腔鳞状细胞癌增殖侵袭迁移的机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)人类白细胞抗原复合物P5(HCP5)通过调节微小RNA(miR)-27b-3p/H2A组蛋白家族成员Z(H2AFZ)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)增殖、侵袭、迁移的影响。方法:收集2021年2月至2022年2月在本院行手术治疗的48例OSCC患者癌组织及邻近癌旁组织、OSCC细胞系(Tca-811、SCC-9、SCC-25、HN4)及人正常口腔角质形成细胞(hNOK),检测LncRNA HCP5、miR-27b-3p、H2AFZ mRNA表达水平；取对数生长期Tca-811细胞，分为对照组、小干扰RNA阴性对照(si NC)组、干扰HCP5表达(si HCP5)组、si HCP5+抑制物阴性对照(inhibitor NC)组、si HCP5+miR-27b-3p抑制物(miR-27b-3p inhibitor)组。双荧光素酶验证LncRNA HCP5与miR-27b-3p、miR-27b-3p与H2AFZ的靶向关系；qRT-PCR检测LncRNA HCP5、miR-27b-3p、H2AFZ mRNA表达水平；流式细胞仪及MTT法检测Tca-81...     

MMP-2和CyclinD1在口腔鳞癌中表达的研究

目的研究口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中MMP-2和CyclinD1的表达水平,阐明其在口腔鳞癌发病中的临床意义。方法采用免疫组化法对40例口腔鳞癌标本和10例正常对照组标本中MMP-2、CyclinD1的表达量进行检测并比较分析。结果口腔鳞癌组的MMP-2和CyclinD1阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。MMP-2与CyclinD1在口腔鳞癌中的表达与患者的年龄无关(P>0.05);高~中分化患者的MMP-2阳性表达率较高(P<0.01),而低分化患者CyclinD1蛋白阳性表达率较高(P<0.01);临床分期为Ⅲ~Ⅳ期的患者MMP-2与CyclinD1阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05或0.01);有淋巴结转移的患者的MMP-2和CyclinD1蛋白阳性表达率均高于无淋巴结转移的患者(P<0.05)。MMP-2和CyclinD1的表达呈负相关(rs=-0.56,P<0.05)。结论 MMP-2和CyclinD1联合检测可作为OSCC早期诊断的指标,为尽早抑制口腔鳞癌侵袭、转移提供帮助。     

TGF-β1促进人舌鳞状细胞癌侵袭迁移的研究

目的：研究转化生长因子β1(TGF-β1)能否促进人舌鳞状细胞癌的侵袭转移。方法细胞增殖与活性实验试剂盒(CCK8)检测比较不同浓度TGF-β1刺激或不刺激舌鳞状细胞癌细胞株SCC9、CAL27之间生长速度的差异;划痕实验检测比较TGF-β1刺激或不刺激舌鳞状细胞癌SCC9、CAL27之间的迁移差异;Transwell实验进一步比较TGF-β1刺激或不刺激舌鳞状细胞癌SCC9、CAL27侵袭迁移能力的差异。结果 CCK8实验表明低浓度TGF-β1刺激后SCC9、CAL27细胞与空白对照组相比活细胞数量降低,但高浓度组未明显影响舌鳞癌细胞增殖,差异具有统计学意义(P<0.05)。划痕实验和Transwell实验均显示,TGF-β1刺激后SCC9、CAL27细胞与空白对照组相比较具有更强的侵袭能力,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论低浓度TGF-β1可以抑制舌鳞癌细胞的增殖,但可以显著促进舌鳞状细胞癌侵袭转移。     

MMP-9在口腔鳞状细胞癌患者术前血清和组织中表达的意义

目的研究口腔鳞状细胞癌患者血液及癌组织中基质金属蛋白酶9（matrix metallopro-teinase-9,MMP-9）的水平与表达,深讨它们与口腔鳞状细胞癌（Oral Squamous Cell Carcinoma OS-CC）病理参数的关系。方法用ELISA法检测49OSCC患者,30名口腔粘膜鳞状上皮不典型增生患者和20例正常对照血清标本中的MMP-9水平,用S-P免疫组化法检测组织中MMP-9的表达。结果 OSCC患者血清中MMP-9水平为（35.12±17.21）ng/ml。高于不典型增生组（19.76±10.55）ng/ml和正常对照组（16.25±9.6）ng/ml,血清中MMP-9水平与淋巴结转移有关。MMP-9在OS-CC中的表达高于不典型增生组,MMP-9在不典型增生组中的表达高于正常对照组,MMP-9的表达与OSCC的大小和淋巴结转移有关。结论 MMP-9在OSCC浸润和转移中起重要作用,检测OSCC患者术前血清中MMP-9的水平,有助于判断OSCC的转移。     

白藜芦醇对食管鳞癌Eca-109细胞侵袭迁移及EMT的影响

目的:研究白藜芦醇(RES)对食管鳞癌Eca-109细胞侵袭迁移及上皮间质转化(EMT)的影响.方法:用不同浓度(50和100 μmol/L)的RES处理Eca-109细胞,采用细胞划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力,荧光定量PCR检测EMT蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果:与对照组比较,RES各浓度(50 μmol/L和100 μmol/L)组均可明显抑制Eca-109细胞侵袭迁移(P<0.01),下调N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达(P<0.05~P<0.01),增加E-cadherin mRNA和蛋白表达(P<0.01).结论:RES抑制Eca-109细胞侵袭迁移能力,其机制可能通过下调MMP-2、MMP-9的表达,调控EMT蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)的表达、抑制上皮间质转化过程.     

MED28在口腔鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达及临床特征分析

目的 探讨中介体复合物亚基28蛋白(mediator complex subunit 28 protein,MED28)于口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)、癌旁组织中表达及其与病理特征、预后的关系.方法 选取2015年1月至2020年6月首次在我院口腔颌面外科住院手术的OSCC患者标本142例,其中91份OSCC标本包含癌旁正常组织.免疫组织化学法于OSCC及癌旁组织石蜡切片检测MED28的表达.分析OSCC组织与癌旁组织的MED28表达差异.计算MED28表达结果即切片最终评分的平均值,并以此为标准将OSCC患者分为MED28低表达组和MED28高表达组,用Logistic回归模型分析MED28表达与病理特征的关系,Kaplan-Meier法分析MED28的表达与预后的关系,并用COX回归模型分析预后的影响因素.结果 与癌旁组织比较,MED28在OSCC组织中高表达(P＜0.01).Logistic回归模型分析显示MED28表达与吸烟、淋巴结转移相关(P＜0.05),Kaplan-Meier生存分析显示MED28低表达组总体生存时间(overall survival,OS)显著高于高表达组(P＜0.01).吸烟和性别也是影响预后的相关因素(P＜0.05).结论 MED28在OSCC患者癌组织中高表达,可能与OSCC的发生、发展相关,并影响预后,其表达与吸烟、淋巴结转移有关.     

AP000892.6通过靶向miR-616-5p影响膀胱癌细胞迁移、侵袭和上皮间充质转化的分子机制

目的 探讨长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lncRNA)AP000892.6对膀胱癌细胞迁移、侵袭和上皮间充质转化进程的影响及相关分子机制。方法 应用GEPIA数据集分析AP000892.6在膀胱癌和癌旁组织中的表达。应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测膀胱癌细胞株647V、T24、UMUC3、5637、RT4和正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中AP000892.6的表达水平。将AP000892.6过表达质粒或阴性对照质粒转染到T24细胞,实验分为AP000892.6组和NC组,RT-qPCR法验证质粒转染效率。细胞划痕法和Transwell实验分别检测转染T24细胞的迁移和侵袭能力。应用生物信息学方法预测以及双荧光素酶报告基因实验验证AP000892.6的下游靶基因。RT-qPCR法检测AP000892.6下游靶基因的表达。Western blot法检测上皮表型蛋白E-cadherin、ZO-1和间充质表型蛋白Vimentin、N-cadherin、Twist的表达。结果 与癌旁组织比较,AP000892.6在膀胱癌组织中表达降低(P<0.01)。与SV-HUC-1细胞比较,AP000892.6在膀胱癌细胞株中表达降低(P<0.05),T24细胞中AP000892.6的相对表达水平最低(P<0.01)。与NC组比较,过表达AP000892.6抑制膀胱癌T24细胞的迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.01)。双荧光素酶报告基因分析证明miR-616-5p是AP000892.6的靶基因(P<0.01)。与NC组比较,AP000892.6对miR-616-5p表达具有负调控作用(P<0.01)。与NC组比较,AP000892.6组T24细胞中上皮表型蛋白E-cadherin、ZO-1表达上调,间充质表型蛋白Vimentin、N-cadherin、Twist表达下调。结论 AP000892.6通过靶向miR-616-5p抑制膀胱癌T24细胞的迁移、侵袭和上皮间充质转化进程。     

靶向沉默热休克蛋白27对口腔鳞状细胞癌CAL27细胞侵袭和迁移的作用及其机制

目的:探讨热休克蛋白27(HSP27)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)CAL27细胞侵袭和迁移的影响,并阐明其作用机制.方法:CAL27细胞分为对照组[转染阴性对照小干扰RNA(NC-siRNA)]和实验组[转染HSP27小干扰RNA(HSP27-siRNA)],实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blo...