乙肝病毒X蛋白可通过调控CXC趋化因子受体6表达促进肝癌细胞的侵袭和转移

目的探究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)通过调控CXC趋化因子受体6(CXCR6)对肝癌HepG2细胞生长和凋亡的作用。方法按处理方式不同将HepG2细胞分成Control组、NC组(转染阴性对照质粒)、HBx组(转染HBx mimics)、HBx+si-CXCR6组(共转染HBx-mimics和CXCR6 siRNA)。二苯基四氮唑溴盐(MTT)、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡率、迁移和侵袭情况, 蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中CXCR6和HBx蛋白表达。多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用SNK-q检验。结果 HBx组CXCR6、HBx蛋白表达及细胞增殖水平高于Control组和NC组[(0.49±0.05)比(0.27±0.04、0.26±0.03)、(0.59±0.05)比(0.32±0.04、0.30±0.05)、(0.96±0.07)比(0.66±0.03、0.62±0.03), t=5.951、5.732、7.304、8.195、6.823、7.495, P<0.05]。HBx+si-CXCR6组CXCR6蛋白表...     

基质细胞源性因子-1α/CXC趋化因子受体-4轴经PI3K/Akt通路对胃癌细胞CD133表达的调控作用

目的 观察胃癌中基质细胞源性因子-1α/CXC趋化因子受体-4(SDF-1α/CXCR4)轴经由PI3K/Akt信号通路对下游分子CD133表达及其活性的影响.方法 免疫细胞化学染色检测胃癌KATO -Ⅲ细胞株中CXCR4、Akt、p-Akt及CD133的表达.分别用SDF-1α、AMD3100及LY294002作用于胃癌KATO -Ⅲ细胞株,半定量酶链聚合反应(PCR)检测CXCR4 mRNA和CD133mRNA的表达变化,蛋白免疫印迹法检测CXCR4、Akt、p-Akt及CD133蛋白的表达变化.结果 免疫细胞化学染色证实KATO -Ⅲ细胞呈CXCR4、Akt、p-Akt及CD133阳性表达.SDF-1α组中,CXCR4蛋白(0.980±0.083)、p-Akt蛋白(0.770±0.071)及CD133蛋白(0.890±0.078)表达与对照组(0.750±0.042、0.680±0.038、0.720±0.034)比较明显增高(P＜0.05).与对照组(0.540±0.036、0.520±0.034)比较,CD133 mRNA(0.890±0.061)表达明显增高(P＜0.05).AMD3100组与对照组(0.750±0.042、0.680±0.038、0.720 ±0.034)比较,CXCR4蛋白(0.430±0.055)、p-Akt蛋白(0.350±0.050)及CD133蛋白(0.110±0.060)表达显著下降(P＜0.05).LY294002组中,p-Akt蛋白(0.100 ±0.033)、CD133蛋白(0.440±0.055)表达与对照组(0.680±0.038、0.720±0.034)比较显著下降(P＜0.05).同时,与对照组(0.540±0.036)比较,CD133mRNA(0.310±0.021)表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 刺激或抑制SDF-1α/CXCR4轴可经由PI3K/Akt信号通路上调或下调CD133表达.     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.     

CXC趋化因子配体-5在结直肠癌中的表达及临床意义分析

目的：分析CXC趋化因子配体-5(CXCL5)在结直肠癌中的表达及其临床意义。方法：收集165例患者结直肠癌组织和对应癌旁组织,免疫组化和q RT-PCR实验分别检测组织中CXCL5蛋白和mR-NA表达情况。根据免疫组化评分将患者分为CXCL5高表达组和低表达组,比较两组患者临床病理特征、3年总生存率和3年疾病无进展生存率。结果：结直肠癌组织CXCL5免疫组化评分为9.03±2.08,高于癌旁组织3.18±1.04,差异有统计学意义(t=27.024,P<0.001)。结直肠癌组织CXCL5 mRNA相对表达水平为3.97±1.23,高于癌旁组织0.25±0.16,差异有统计学意义(t=38.461,P<0.001);CXCL5高表达组与CXCL5低表达组TNM分期、浸润深度、淋巴结转移和神经侵犯比较差异有统计学意义(P<0.05);CXCL5高表达组3年总生存率为70.23%(92/131),低于CXCL5低表达组88.23%(30/34),差异有统计学意义(log-rankχ²=4.135,P=0.038)。CXCL5高表达组3年疾病无进展生...     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.     

CXC趋化因子受体5及其配体CXCL13在结直肠癌中的表达及意义

目的 观察CXC趋化因子受体-5(CXCR5)及其特异性配体CXCL13在结直肠癌组织中的表达,探讨其与临床病理特征、预后的关系.方法 用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测25对结直肠癌及13例结直肠腺瘤冰冻新鲜标本中CXCR5及CXCL13 mRNA的表达,应用免疫组织化学法(IHC)检测153例结直肠癌及相对应的癌旁组织、62例结直肠腺瘤标本中CXCR5及CXCL13蛋白的表达,分析其与临床病理特征、术后生存率的关系.结果 CXCR5及CXCL13mRNA及蛋白表达在结直肠癌组织中的表达率均高于癌旁组织及结直肠腺瘤组织(P均＜0.05).CXCR5与CXCL13的mRNA及蛋白表达呈正相关(PCR:r =0.681,P＜0.01;IHC:r =0.196,P＜0.05).CXCR5-CXCL13蛋白表达与肿瘤的淋巴结转移、远处转移、肿瘤分期及复发相关;在有淋巴结转移、有远处转移、中晚期患者及出现复发的患者中阳性率都明显较高(P＜0.05).此外,CXCL13阳性表达与结直肠癌的组织分化程度相关,分化越差组阳性率越高(P＜0.05).CXCR5-CXCL13表达与其他临床病理特征无关(P＞0.05).CXCR5及CXCL13阳性表达患者的5年复发率和5年生存率明显差于其阴性表达的患者(5年复发率:CXCR5:48.6％比14.8％,CXCL13:41.5％比22.7％;5年生存率:CXCR5:55.6％比91.4％,CXCL13:61.5％比84.1％)(P＜0.05);CXCR5及CXCL13阳性表达患者的中位复发时间和中位生存时间明显短于其阴性表达的患者[中位复发时间:CXCR5 (13.0±1.3)个月比(45.0±7.8)个月,CXCL13(13.0±1.3)个月比(29.0±11.2)个月;中位生存时间:CXCR5(17.0±1.1)个月比(55.0±14.4)个月,CXCL13(17.0±1.9)个月比(25.0±11.2)个月](P＜0.05).结论 CXCR5及CXCL13在结直肠癌的发生、发展和转移、复发中可能起着重要的作用,可作为预测结直肠癌转移和复发的有价值指标.     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.

Abstract：

Objective To investigate the expression of CXCR6 in allograft rejection and effect of CXCL16/CXCR6 interaction on allograft survival Methods Intra-abdominal heterotopic heart transplantation was performed using wild type (WT) Balb/c mice (H-2d) (allogeneic) as donors or WT C57BL/6 mice (B6, H-2b) (syngeneic) as donors, and using WT B6 mice as recipients. The intragraft expression of CXCR6 and expression of CXCR6 in CD8+ T cells of the spleens from syngeneic and allogeneic recipients were examined. The allogeneic recipients were further divided into the experimental group (n = 5) and control group (n = 6) randomly. The experiment group and control group were injected with anti-CXCL16 mAb or control mAb respectively until rejection occurred. The cardiac allograft survival in experimental group and control group was evaluated. Results Rejected allografts showed higher expression of CXCR6 than syngeneic cardiac grafts. More importantly,expression of CXCR6 in CD8+ T cells was also up-regulated by allograft rejection. However, injection of anti-CXCL16 mAb could not inhibit cytotoxic activity of CD8+ T cells. Moreover, experimental group could not prolong the cardiac graft survival time as compared with control group. Conclusion Expression of CXCR6 in CD8+ T cells is up-regulated in allograft rejection.     

趋化因子受体4、黏着斑激酶和基质金属蛋白酶-9在非小细胞肺癌组织的表达及其临床意义

目的探讨趋化因子受体4(CXCR4)、黏着斑激酶(FAK)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平与非小细胞肺癌临床病理学特征的关系。方法选取2019年6月至2022年1月新乡医学院第三附属医院收集的79例非小细胞肺癌肺癌和癌旁组织作为研究对象, 采用蛋白质印迹法(Western blot)检测肺癌组织和癌旁组织中CXCR4、FAK和MMP-9表达水平, 并分析不同年龄段、性别、分化程度、临床分期和淋巴结转移等病理特征患者癌组织中CXCR4、FAK和MMP-9表达水平, 分析CXCR4、FAK和MMP-9表达水平与非小细胞肺癌临床病理学特征的相关性。结果非小细胞肺癌组织CXCR4、FAK和MMP-9蛋白表达水平(1.94±0.41、2.23±0.42、2.06±0.44)明显高于癌旁组织表达水平(0.92±0.17、0.80±0.21、0.93±0.21), 差异有统计学意义(t=20.590, 26.750, 20.450, P均<0.05)。Ⅲ～Ⅳ期患者非小细胞肺癌组织CXCR4、FAK和MMP-9蛋白表达水平(2.09±0.20、2.39±0.22、2.23±0.25)明...     

FOXP3 shRNA3对肝癌细胞趋化因子及受体CXCL12、CXCL11、CXCR4、CXCR7作用的研究

目的研究FOXP3 shRNA对肝癌细胞株SMMC-7721和MHCC-97H的趋化因子及受体CXCL12、CXCL11、CXCR4、CXCR7的影响。方法设计三种编码FOXP3 shRNA的FOXP3干扰慢病毒,sh-FOXP3-1-pGreenPuro、sh-FOXP3-2-pGreenPuro和sh-FOXP3-pgreenpuro并分别转染SMMC-7721和MHCC-97H细胞。q-PCR检测各组CXCL12、CXCL11、CXCR4、CXCR7 mRNA的表达情况;Western Blot检测各组CXCL12、CXCL11、CXCR4、CXCR7蛋白的表达情况。结果经菌落PCR和测序验证证明三个FOXP3干扰慢病毒载体构建正确;三种干扰序列中sh-FOXP3-1干扰效果最明显,因此后期实验都使用sh-FOXP3-1进行下面的实验。研究显示:(1)与对照组相比,sh-FOXP3-1组的CXCL12、CXCL11、CXCR4、CXCR7 mRNA表达明显下降,差异具有统计学意义。(2)与对照组相比,sh-FOXP3-1组的CXCL12、CXCL11、CXCR4、CXCR7蛋白表达明显下降,差异具有统计学意义。结论干扰FOXP3的表达后,能减少趋化因子CXCL12、CXCL11、CXCR4、CXCR7的表达。     

CXCL12/CXCR4激活Akt通路降低前列腺癌干细胞多西紫杉醇敏感性的研究

【摘要】目的 观察前列腺癌干细胞中趋化因子受体-4(CXCR4)的表达,探索CXCR4影响癌干细胞化疗敏感性的机制。方法 流式细胞仪检测细胞表面CXCR4阳性率;MTS检测不同剂量多西紫杉醇对细胞活力的影响,绘制量效曲线,计算多西紫杉醇IC50;分别使用CXCL12或者抗CXCR4抗体激活或者阻断CXCR4后,检测多西紫杉醇化疗后前列腺癌干细胞细胞活力;蛋白免疫印迹法测p-Akt、Akt蛋白的表达变化。结果 前列腺癌干细胞中CXCR4阳性率为71.37±4.03%,非癌干为19.08±1.86%,二者有显著差异;使用多西紫杉醇化疗时,癌干细胞IC50为7.5 μM,非癌干细胞IC50为0.6 μM,癌干细胞耐多西紫杉醇能力明显强于非癌干细胞;CXCL12激活CXCR4后,细胞活力为92.15±3.44%;抑制CXCR4后,细胞活力为68.46±4.16%;对照组细胞活力为70.24±3.52%;使用CXCL12激活CXCR4后,Akt磷酸化水平显著增加,抗CXCR4抗体可以阻断Akt磷酸化过程。结论 CXCL12/CXCR4可通过激活Akt下调前列腺癌干细胞对多西紫杉醇敏感性,这可能是前列腺癌干细胞化疗不敏感的重要机制之一。     

CXCR2对胃癌细胞侵袭、迁移及凋亡的影响

目的 :探究CXC类趋化因子受体2(C-X-C motif chemokine receptor, CXCR2)对胃癌细胞侵袭、迁移及凋亡等生物学特性的影响。方法:取人胃癌MGC80-3细胞和SGC-7901细胞。转染建立CXCR2过表达细胞,质粒瞬时转染和RNA干扰建立敲减细胞。蛋白质印迹实验研究蛋白质相关细胞表型变化。通过transwell侵袭及迁移实验、增殖实验(cell counting kit-8, CCK8)、流式细胞实验AnnexinⅤ-PI双染法以及实时定量PCR等进行细胞功能、增殖、凋亡以及CXCR2 mRNA表达的检测。结果:胃癌细胞过表达CXCR2后其侵袭、迁移能力显著增强(P0.05),凋亡率显著降低(P0.01)。CXCR2下调后抑制胃癌细胞的侵袭、迁移能力(P0.05),凋亡率显著升高(P=0.02)。CXCR2过表达的胃癌细胞中Akt的磷酸化水平显著上调。Akt磷酸化水平与凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达水平相一致。结论:CXCR2上调后增强胃癌细胞的侵袭、迁移及抗凋亡能力。胃癌细胞中CXCR2的抗凋亡能力与CXCR2/Akt/Bcl-2通路相关。     

CXCR4/CXCL12信号途径在食管鳞癌浸润转移中的作用机制

目的研究趋化因子受体4(CXCR4)/趋化因子12(CXCL12)信号途径在食管鳞癌浸润转移中的作用机制,为探讨CXCR4成为食管癌治疗新的靶点提供理论依据。 方法取对数生长期的食管鳞癌EC9706细胞,添加趋化因子CXCL12,通过侵袭转移实验、黏附实验分别检测食管鳞癌EC9706细胞株的细胞侵袭、移动和黏附能力。采用RT-PCR和Western Blot技术检测表皮生长因子受体(EGFR)mRNA及蛋白的表达水平。 结果添加不同浓度趋化因子CXCL12(终浓度为5、10 μg/ml),食管鳞癌EC9706细胞株的细胞侵袭、移动和黏附能力均较空白对照组高,并且存在剂量依存关系,即CXCL12浓度越高,细胞的侵袭、移动、黏附能力越强,差异均有统计学意义(P<0.01)。添加不同浓度趋化因子CXCL12,食管鳞癌细胞的EGFR mRNA和蛋白表达水平均较对照组高,并且存在剂量依存关系,即CXCL12浓度越高,EGFR mRNA和蛋白表达水平越高,差异均有统计学意义(P<0.01)。 结论CXCR4/CXCL12信号途径与食管鳞癌细胞的侵袭、转移相关,并且存在剂量依存关系,有可能通过调控EGFR的表达参与食管鳞癌的浸润转移。     

CXC趋化因子受体2在肝细胞癌中的表达及意义

目的 探讨CXC趋化因子受体2(CXCR2)在肝细胞癌中的表达及与肝细胞癌发生、发展的关系.方法 采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot检测42例肝细胞癌组织及相应癌旁组织和23例正常肝组织中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平,分析表达水平与肝细胞癌生物学特征的关系.结果 肝细胞癌组织、癌旁组织和正常肝组织中CXCB2 mRNA和蛋白表达分别为(1.18±0.32、0.83±0.23和0.72±0.23)和(1.78±0.20、0.98±0.13和0.90±0.18),同癌旁组织和正常肝组织比较,肝细胞癌组织中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05).肝内转移、门静脉癌栓和低分化组中CXCR2 mRNA和蛋白表达水平分别为(1.37±0.26、1.45±0.34、1.31±0.28)和(1.87±0.20、1.93±0.13、1.86±0.18),无肝内转移、无门静脉癌栓和高分化组CXCR2 mRNA和蛋白表达水平分别为(1.08±0.33、1.08±0.27、1.06±0.33)和(1.73±0.18、1.73±0.20、1.71±0.19),差异有统计学意义(P<0.05).CXCR2蛋白表达与TNM分期相关,Ⅲ-Ⅳ期和Ⅰ-Ⅱ期表达水平分别为1.86±0.20和1.72±0.19,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CXCR2在肝细胞癌组织中高表达,其高表达可能与肝细胞癌发生、侵袭和转移相关.     

CXC型趋化因子配体11在胆囊癌组织的表达及其对胆囊癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨CXC型趋化因子配体11(CXCL11)在胆囊癌组织中的表达水平及其对胆囊癌细胞增殖和侵袭的影响。方法:收集2017年1月至2020年12月宁波大学附属李惠利医院手术切除的47例胆囊癌患者肿瘤组织和癌旁组织进行免疫组化染色,并分析CXCL11蛋白表达与患者临床病理特征的相关性。其中女性26例,男性21例,年龄...     

巨噬细胞炎性蛋白2及其受体在假体无菌性松动周围组织及外周血中的表达及临床意义

[目的]通过与正常髋关节患者比较,探讨人工髋关节置换术后假体无菌性松动周围组织及外周血中炎性因子巨噬细胞炎性蛋白2(Chemokine(C-X-C motif)ligand 2,CXCL2)及其受体CXC趋化因子受体2(C-X-C chemokine receptor type 2,CXCR2)的表达变化,分析其与无菌性松动间的关系。[方法]以2008年1月~2013年1月22例人工髋关节置换术后假体无菌性松动行人工髋关节翻修术患者作为试验组,20例因其他原因行人工髋关节翻修术患者作为对照组。两组患者年龄及性别比较,差异无统计学意义(P0.05)。取两组患者清晨空腹抗凝外周血,以及髋关节翻修术时取假体(或)骨周围组织,采用荧光定量PCR、Western blot以及ELISA法检测CXCL2、CXCR2基因mRNA、蛋白的表达程度及其浓度。免疫组化染色检测CXCL2、CXCR2在组织中表达。[结果]荧光定量PCR检测示,试验组CXCL2基因mRNA在外周血及周围组织中相对表达量(2-ΔΔCt)分别为(18.39±1.11),(8.07±1.18),显著高于对照组的(1.00±0.18)(t=119.47,P0.01)及(1.00±0.02)(t=45.50,P0.01)。CXCR2基因mRNA在外周血及周围组织中相对表达量(2-ΔΔCt)分别为(18.51±1.45),(8.40±1.02),显著高于对照组的(1.00±0.09)(t=91.87,P0.01)及(1.00±0.02)(t=55.40,P0.01)。Western blot检测示,试验组CXCL2蛋白在外周血及周围组织中相对表达比分别为(0.41±0.13),(0.97±0.24),显著高于对照组的(0.17±0.07)(t=12.83,P0.01)及(0.37±0.09)(t=17.947,P0.01)。试验组CXCR2蛋白在外周血及周围组织中相对表达比分别为(0.96±0.30),(1.15±0.29),显著高于对照组的(0.64±0.20)(t=6.91,P0.01)及(0.52±0.10)(t=15.38,P0.01)。ELISA检测外周血CXCL2浓度示,试验组为(3.26±0.59)ng/ml,显著高于对照组的(1.69±0.40)ng/ml(t=17.11,P0.01)。免疫组化染色显示松动的假体周围组织中CXCL2、CXCR2表达均显著高于对照组。[结论]CXCL2和CXCR2表达增高可能与人工髋关节置换术后假体无菌性松动有关。     

趋化因子受体CXCR4、CCR7在胃癌细胞中的表达及其与胃癌细胞侵袭能力的关系

目的 观察趋化因子受体CXCR4及CCR7在不同侵袭能力人胃癌细胞株中的差异表达.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot分析CXCR4及CCR7在人胃癌细胞株MGC803、AGS、BGC823、SGC7901的表达;体外侵袭实验测定4株胃癌细胞的侵袭能力.结果 MGC803、AGS、BGC823、SGC7901中CXCR4 mRNA相对表达量分别为:1.2556±0.1384、0.7943±0.0913、0.4749±0.0744、0.2463±0.0344,CCR7 mRNA相对表达量分别为:0.6071±0.1404、0.5355±0.0750、0.2549±0.0522、0.2466±0.0342,CXCR4及CCR7蛋白表达趋势同其相对应的基因表达趋势基本一致.4株胃癌细胞侵袭实验测定的侵袭细胞数分别为:400.0±18.2、310.0±4.0、110.0±13.9、85.0±9.5.CXCR4在不同侵袭能力的胃癌细胞株中存在差异性表达(P<0.05).结论 CXCR4的表达与胃癌细胞侵袭能力成正相关,CCR7的表达与胃癌细胞侵袭能力无明显相关.     

趋化因子CXCL14在不同转移潜能结直肠癌细胞中的表达及其与血管生成的关系

背景与目的:CXC趋化因子配体14(CXCL14)是一种与肿瘤细胞迁移密切相关的趋化因子,与多种恶性肿瘤的发生、进展有关.本研究旨在探讨CXCL14在结直肠癌细胞中的表达以及对血管生成的影响.方法:用RT-PCR与Western blot法分别检测CXCL14基因与蛋白在不同结直肠癌细胞株(HT-29、WiDr、CaC...     

结直肠癌淋巴结转移与趋化因子受体CXCR4/CXCL12信号转导通路的关系

目的检测趋化因子受体CXCR4/CXCL12信号转导通路在结直肠癌组织、癌旁黏膜组织以及转移淋巴结中的表达情况,分析CXCR4/CXCL12在结直肠癌淋巴结转移中的作用。方法应用Western blot检测结直肠癌组织中CXCR4/CXCL12表达,免疫组织化学法检测CXCR4/CX- CL12在细胞水平的分布。结果结直肠癌组织中CXCR4/CXCL12表达水平明显高于正常肠黏膜,分别为正常黏膜的2.8、2.6倍(P<0.05)。CXCR4/CXCL12表达水平与淋巴结转移有关(P<0.05),淋巴结组织中CXCR4/CXCL12表达增高,分别为原发肿瘤的2.1倍、1.7倍。CXCR4/CX- CL12在结直肠癌组织中表达情况呈线性相关,相关系数为0.523,P<0.05。结论趋化因子受体CXCR4/CXCL12在原发结直肠癌与淋巴结转移组织中呈高表达,CXCR4信号转导通路可能在结直肠癌淋巴结转移过程中起重要作用。     

抑制PI_3 K/Akt信号通路对Ephrin-A1介导的肝癌细胞运动和侵袭能力的影响

目的 探讨PI_3K/Akt信号传导通路在Ephrin-A1介导的肝癌细胞侵袭、转移过程中的作用.方法 Western blot法检测Ephrin-A1/Fc融合蛋白作用人肝癌细胞系Huh-7细胞前后丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇3激酶(PI_3K)信号分子的表达,利用LY294002特异性的阻断PI_3K/Akt信号通路后,检测细胞运动能力、细胞侵袭能力的变化.结果 Ephrin-A1/Fc融合蛋白作用后p-Akt磷酸化蛋白的表达与对照组比较明显上升(t=4.564,P＜0.05),PI_3K/Akt信号通路可能为Ephrin-A1/EphA1作用的下游信号传导通路;LY294002明显抑制Ephrin-A1/Fc融合蛋白对Huh7细胞中PI_3K/Akt信号通路的激活,p-Akt磷酸化蛋白的含量与对照组比较明显减少(P＜0.05);Ephrin-A1介导肝癌细胞的运动能力及侵袭能力明显受到抑制(P＜0.05). 结论 PI_3K/Akt信号通路在Ephrin-A1介导的肝癌细胞侵袭、转移过程中起重要的作用.