HIF-PHI减轻炎症反应预防小鼠肾缺血再灌注损伤

目的探讨低氧诱导因子—脯氨酰羟化酶抑制剂(hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitor, HIF-PHI)预处理小鼠能否减轻炎症反应, 减少细胞凋亡, 缓解肾脏缺血再灌注损伤。方法将雄性C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(IRI)组、IRI+HIF-PHI组, 每组6只, 其中IRI+HIF-PHI组提前1周隔天灌胃罗沙司他20 mg/kg。建立肾脏缺血再灌注模型后, 检测各组小鼠血清肌酐(sCr)水平;HE染色观察小鼠肾组织病理变化并进行损伤评分;原位末端标记法(TUNEL)评估肾组织细胞凋亡;实时定量逆转录聚合酶链(RT-PCR)反应检测肾脏组织内低氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白介素1β(IL-1β)的mRNA表达水平;免疫荧光及免疫组化分别检测HIF-1α, 炎症因子TNF-α和IL-1β表达情况。结果与IRI组相比, IRI+HIF-PHI组小鼠sCr水平明显降低(P<0.01), 肾组织损伤情况明显改善, 肾小管损伤半定量评分更低(P...     

预处理对缺血再灌注肝细胞自噬的影响

大型肝脏手术及肝移植手术时常伴随肝缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury, HIRI), 其与围手术期病死率、术后并发症等密切相关。既往研究均已证实预处理可通过调节体内肝细胞自噬水平来减轻HIRI。文章对近年来国内外通过调节肝细胞自噬水平减轻HIRI的预处理方式及其简要的生物学机制进行综述, 为临床上采用合理的预处理方式以减轻HIRI及进一步研究提供参考。     

自噬在缺血后处理减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的评价自噬在缺血后处理减轻小鼠肠缺血再灌注损伤中的作用。方法 SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠32只,9～12周龄,体重25～29 g,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(IIR组)、缺血后处理组(IPO组)和缺血后处理+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(IPO+3-MA组)。采用夹闭肠系膜上动脉根部45 min恢复灌注2 h的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型,IPO组于恢复灌注前3 min给予3个循环灌注30 s,缺血30 s的处理。于再灌注2 h时采集股动脉血样,测定血清二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸及肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)的浓度,随后处死小鼠取小肠组织,光镜下观察病理学结果并行Chiu评分,计算肠组织含水量;Western blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1和p62的表达。结果与S组比较,IIR组和IPO组Chiu评分升高,血清DAO、D-乳酸和I-FABP的浓度及肠组织含水量升高,肠组织LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,Beclin-1表达上调,p62表达下调(P<0.05);与IIR组比较,IPO组Chiu评分降低,血...     

芹菜素对小鼠肺缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的观察并探讨芹菜素对小鼠肺缺血再灌注(I/R)损伤的影响及机制。方法根据随机数表法, 将40只雄性C57/B6小鼠平均分为假手术组(Sham组)、I/R组、低剂量芹菜素组和高剂量芹菜素组, 每组10只。采用左肺门夹闭1 h, 再灌注2 h的方法构建小鼠肺I/R损伤模型。低剂量芹菜素组和高剂量芹菜素组小鼠分别在肺I/R造模前连续7 d给予芹菜素(10 mg·kg-1·d-1和50 mg·kg-1·d-1)灌胃。再灌注2 h结束后, 留取小鼠肺组织, 通过HE染色评估小鼠肺损伤状况并评分;RT-PCR检测小鼠肺组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、环加氧酶2(PTGS2)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA表达水平;Western blot检测小鼠肺组织Bax、Bcl-2、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、PTGS2和GPX4的蛋白表达。最后, 按处理方式不同, 将处理后的A549肺上皮细胞分为PBS组、缺氧/复氧(H/R)组、H/R+芹菜素组和H/R+芹菜素+莫立司他组。用莫立司他激活HIF-1α后, 进一步观察...     

缺血预处理对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探究缺血预处理(IP)对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用。方法将18只购自湖南斯莱克公司的雄性C57BL/6J小鼠完全随机分为假手术组(Sham), 缺血再灌注组(I/R)和缺血预处理组(IP)3组, 使用肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和Paller评分来判断肾脏损伤程度, 对IRI组和IP组进行转录组测序, 对测序结果进行KEGG聚类分析和蛋白相互作用分析, 并对结果进行定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)验证, 采用t检验进行两组间的比较。结果 IP组损伤低于I/R组, IP组的SCr低于I/R组(141.6±15.38比193.10±10.55, t=6.185, P<0.01)、IP组BUN低于I/R组(39.44±2.44比54.96±6.54, t=4.957, P<0.01), 以及Paller评分IP组低于I/R组(27.12±2.28比43.53±3.34, t=9.084, P<0.01)。测序结果示IP组比I/R组有1 560个差异基因, 其中863个表达升高, 697个降低。KEGG富集...     

小鼠骨髓间充质干细胞通过糖代谢途径减轻肾缺血再灌注损伤

目的探究小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)对肾缺血再灌注损伤(IRI)的作用。方法雄性C57BL/6小鼠30只, 根据随机数字法分为6组(每组5只):空白组、常氧BMSC外泌体组、低氧BMSC外泌体组、IRI组、常氧BMSC外泌体+IRI组、低氧BMSC外泌体+IRI组。缺血25 min, 再灌注24 h后行肾脏功能和组织病理检查。另取小鼠30只, 分为三组(IRI组、常氧+IRI组、低氧+IRI组, 每组10只), 观察各组存活率。同时, 检测肾内炎性因子, 巨噬细胞的极化, 糖酵解和氧化磷酸化水平。结果常氧+IRI组小鼠的血肌酐及尿素氮低于IRI组(P<0.05), 且病理损伤轻。IRI组, 常氧+IRI和低氧+IRI组的7 d存活率分别为20%, 50%和80%(P<0.05)。RT-PCR结果示IRI造成肾组织内肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)和IL-10的表达水平增加, 而低氧可降低TNF-α、IL-1β、MCP-1(P<0.05), 但升高IL-10(P<0.05)。低氧可促进巨噬细胞向M2型极化, ...     

肝脏缺血再灌注损伤的临床与基础研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)是指器官在缺血的基础上恢复血流后损伤进一步加重甚至发生不可逆性损伤的现象。在临床上IRI常见于肝、脑和肾等实质性器官。其中, 肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)是肝脏部分切除术和肝移植后肝功能受损甚至肝衰竭的主要原因之一, 其与患者的预后密切相关。HIRI的发生发展涉及多种机制, 而氧自由基的积聚和炎症的改变是主要的病理生理过程。此外, HIRI与双刃剑补体联系紧密。本文主要论述HIRI的基础和临床两方面研究进展, 为HIRI的防治提供理论和实践的参考。     

昼夜节律振荡在器官缺血再灌注损伤中的作用研究进展

昼夜节律存在于人体的中枢和外周器官中, 在生理或病理状态下都发挥着关键的调节作用。缺血再灌注(I/R)损伤是缺血的组织血液循环得到恢复后, 组织再次受到额外的损伤。各器官缺血再灌注损伤发生率高, 严重危害人类健康。研究结果显示昼夜节律振荡对器官缺血再灌注损伤的发生和严重程度有重要影响, 相关信号通路可以作为治疗靶标, 具有潜在应用价值, 但目前未得到全面总结。我们回顾了昼夜节律振荡与各器官缺血再灌注损伤相关研究, 总结了相关信号分子通路, 为器官缺血再灌注损伤的预防及治疗提供新的思路。     

乙醛脱氢酶2在缺血再灌注损伤中的研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)是指血供中断再通后, 组织器官损伤加重的过程, 其损伤机制复杂, 主要包括氧化应激、钙超载、炎性反应等, 由此引起的临床疾病称为再灌注综合征。乙醛脱氢酶2(ALDH2)是人体乙醇代谢过程中的关键酶, 主要功能是将乙醛代谢成无毒的乙酸。近年来有大量研究表明, ALDH2在缺血再灌注损伤中有明确的保护性作用, 其特异性激动剂Alda-1也被广泛运用于IRI相关研究中。本文就ALDH2的结构、功能、基因多态性和在各器官IRI中的研究进展进行了综述, 探讨ALDH2成为IRI治疗靶点的可能性。     

白藜芦醇预处理对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探究白藜芦醇(resveratrol, Res)预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)的影响。方法将42只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组:假手术组(Sham组, 12只)、心肌缺血再灌注损伤组(IR组, 12只)、白藜芦醇组(Res组, 12只)和地尔硫卓组(阳性对照组, 6只)。IR组、Res组和阳性对照组大鼠均采用结扎冠状动脉左前降支30 min再灌注2 h的方法建立MIRI模型, Sham组大鼠只穿线不结扎。建立MIRI模型前, Res组和阳性对照组大鼠连续7 d、每天分别腹腔注射1次Res(20 mg/kg)和地尔硫卓(5 mg/kg), Sham组和IR组大鼠每天腹腔注射1次等容量二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)溶液。4组大鼠于再灌注2 h时取腹主动脉血, 采用ELISA法测定血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme, CK-MB)浓度;取心肌组织测定...     

常温机械门静脉灌注压力对大鼠供肝热缺血损伤修复的影响

目的建立大鼠供肝常温机械灌注(NMP)模型, 比较不同门静脉灌注压力对热缺血大鼠肝损伤修复的影响。方法经心脏停搏30 min、冷保存8 h的大鼠肝脏, 使用肝动脉供氧、常温双通道灌注肝脏体系后, 比较门静脉常压(M1组, n=6)和低压(M2组, n=6)灌注对肝灌注液流量和肝酶学指标的影响, 并使用HE染色和Suzuki标准评定肝脏病理损伤, 免疫组化检测中性粒细胞和巨噬细胞活化的指标髓过氧化物酶(MPO)和CD68表达, 检测肝组织脂质过氧化产物丙二醛含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。心脏停搏30 min、冷保存8 h的大鼠作为静态低温保存组(CS组, n=6)。结果保持门静脉灌注压力恒定的大鼠肝脏常温机械灌注模型建立后, 随着灌注时间的延长, 门静脉灌注流量呈增高趋势, NMP 60～120 min时灌注流量较0～20 min均增高(P<0.05)。与CS组比较, M1组肝淤血、肝细胞坏死、脂肪变性减轻, Suzuki评分减少(P<0.05)。与M1组比较, M2组的灌注液的肝酶学指标下降(P<0.05), 镜下观察M2组肝细胞坏死、脂肪变性、肝窦扩张减轻, ...     

脂肪肝在肝移植中的应用前景

肝移植是目前治疗终末期肝病最为有效的方法, 但供体肝的缺乏, 限制了肝移植的发展。随着脂肪性供肝等边缘性供肝使用的增加, 如何使边缘性供肝更好地发挥作用, 成为了新的研究热点。脂肪肝作为供体使用, 虽可缓解受者需求与供者器官短缺之间的矛盾, 但肝移植术后发生早期移植物功能不全的风险也随之增加。在脂肪肝作为供体的肝移植手术中, 应尽可能地应用脂肪样变性程度在中度及以下的供肝, 这样可以降低术后并发症, 并且对于受者恢复也很有利;与此同时术后脂质指标的监测也显得尤为重要, 必要时可加用药物干预, 从而提高移植物功能。     

小鼠脂肪肝缺血再灌注损伤中铁死亡的作用及机制研究

目的研究脂肪肝缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury, IRI)中发生铁死亡的现象与机制, 阐明靶向抑制铁死亡可减轻脂肪肝IRI的机制。方法先按照随机数字法取小鼠20只按照喂养方式不同分为2组:正常饮食(Normal chow diet, NCD)组(n=10)和高脂饮食(high fat diet, HFD)组(n=10), 经实验室检测相关指标和油红染色验证, 脂肪肝建模成功。然后另取两组小鼠分别构建假手术组(sham组, 每组n=10)和缺血再灌注组(IRI组, 每组n=10), 免疫印迹法检测NCD-sham组(n=10)、NCD-IRI组(n=10)、HFD-sham组(n=10)和HFD-IRI组(n=10)肝组织谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)的表达水平, 电子显微镜观察各组小鼠肝细胞线粒体形态等, 综合判断小鼠肝脏IRI中是否存在铁死亡的发生。另取NCD小鼠和HFD小鼠按照不同手术模型分为6组:NCD-sham组(n=10)、NCD-IRI组(n=10)、NCD缺血再灌注铁死亡组(NCD-IRI-fer-1, n=10), HFD-sha...     

线粒体转录因子A在缺血再灌注损伤中的研究进展

缺血再灌注损伤(IRI)是一种常见的临床综合征, 其病理机制复杂, 涉及多种因素相互作用, 预防和治疗棘手。文献显示, 在IRI的组织和器官中能观察到明显的线粒体损伤, 线粒体DNA拷贝数下降, 且线粒体转录因子A(TFAM)表达水平降低。TFAM是重要的线粒体DNA(mtDNA)结合蛋白, 能够调节mtDNA的转录和复制, 抑制线粒体氧化应激和凋亡, 在IRI治疗中具有重要的应用潜力。本文综述了TFAM的分子生物学特性、功能和信号通路等以期探究TFAM在IRI中的作用机制, 并整理了近几年治疗相关的研究进展, 探讨TFAM作为治疗IRI的靶点的可能性。     

肠缺血/再灌注致远隔器官损伤相关机制的研究进展

肠缺血再灌注损伤(intestinal ischemia reperfusion injury, IIRI)是临床危重症患者常见并发症之一。IIRI相关机制研究表明, 在IIRI过程中, 肠黏膜屏障受损, 细菌易位导致活性氧、炎症因子大量产生并释放入循环系统, 可造成全身性炎症反应和肺、肝、肾等远隔器官功能障碍。文章阐述了肠缺血再灌注(intestinal ischemia reperfusion, IIR)引起肠外器官损伤的相关机制, 为进一步探究IIR致多器官损伤机制、寻求靶向干预的多器官保护策略提供思路。     

移植肾缺血再灌注损伤后间质纤维化

本文讨论了缺血再灌注损伤导致移植肾间质纤维化的相关分子机制, 重点是血管功能障碍、上皮细胞和周细胞在这一过程中的作用, 讨论了不同方式的动物实验模型构建及其影响, 并介绍了近年来一些针对这一过程进行预防及治疗的新的方案。     

阿片受体介导心肌缺血/再灌注损伤保护作用的研究进展

心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI)是心肌梗死后冠状动脉血管再通常见的并发症, 严重影响患者的康复, 甚至威胁患者生命安全。而阿片类药物不仅具有镇痛作用, 还具有心脏保护作用, 此作用依赖于阿片受体(opioid receptor, OR)的激活。κ-OR、δ-OR的激活直接参与心肌保护, 而μ-OR的作用及其作用机制尚存在争议。此外, 不同激动剂对3种OR亚型的不同亲和力使得"OR介导的心脏保护"这一结论具有争议。文章就内源性阿片肽类物质及外源性阿片类药物(如吗啡、芬太尼、瑞芬太尼、布托啡诺、美沙酮)对MI/RI的保护作用进行综述, 讨论不同OR介导MI/RI保护作用的机制及其与G蛋白耦联受体(G protein-coupled receptor, GPCR)家族其他成员的串扰, 以及可能的上下游信号通路, 以便为未来开发改善心肌、挽救心肌的药物提供参考。     

三结构域家族蛋白在器官缺血再灌注损伤中的研究进展

缺血再灌注损伤(I/R)是恢复某些缺血组织器官的血液灌流以及氧供后, 组织损伤不但没有减轻、反而进一步加重的病理过程。心、脑、肺、肾、肝等重要器官I/R发生率高, 致死率高, 严重影响人类健康。三结构域蛋白(TRIM)具有共同的氨基末端三方结构域排列-RING-Bbox1/2-卷曲螺旋(RBCC), 调节各种生物过程。本文系统地总结了TRIM家族蛋白的分类与功能以及其在器官缺血再灌注损伤中的作用机制, 为I/R的诊治提供理论依据。     

弥散张量成像评价兔肝热缺血再灌注损伤调控肝部分切除术后肝再生的研究

目的探讨弥散张量成像(DTI)评价不同程度兔肝热缺血再灌注损伤(WIRI)调控肝部分切除术后肝再生的价值。方法健康成年雄性新西兰大白兔30只,数字随机分为5组,每组6只,即对照组和10 min、20 min、30 min、40 min热缺血时间组,均行肝尾叶切除术,并于术后6 h、3 d、7 d、14 d、30 d分别进行常规磁共振及DTI扫描。30 d扫描结束后检测兔血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶和乳酸脱氢酶水平,冻存肝组织血清丙二醛、髓过氧化物酶、总超氧化物歧化酶、肿瘤坏死因子α、白介素-6和增殖细胞核抗原水平,并行组织病理学检查。测量兔肝表观扩散系数(ADC)值、各项异性分数(FA)值和肝体积,并计算肝再生率(LRR)。采用重复测量方差分析比较不同随访时间各组DTI参数值、LRR的差异,采用单因素方差分析比较同一随访时间多组间DTI参数值、LRR的差异。应用Pearson或Spearman相关分析评价DTI参数值与LRR及生化指标的相关性。结果时间因素和热缺血因素的交互作用(P<0.05)及两者的单独效应(P<0.001)对ADC值的影响均具有统计学意义。不同热缺血...     

围手术期患者发生肾移植缺血再灌注损伤的防治进展

肾移植手术作为终末期肾脏病的首选替代方式, 在临床中的应用逐年增加。然而在肾移植术中, 缺血再灌注损伤(IRI)是一个不可避免的过程, 其会导致急性肾损伤(AKI)和移植功能延迟恢复(DGF), 并且增加急慢性排斥反应的发生率。因此, 临床迫切需要预防和改善IRI的方法。本文分肾移植手术前、手术中和手术后3个时段, 就近5年关于肾移植患者发生IRI的防治研究作一研究, 以期为预防和改善IRI提供参考。