DOCK8蛋白在特应性皮炎调节性T细胞中的作用

[目的]探讨DOCK8蛋白在特应性皮炎(AD)调节性T细胞中的作用.[方法]取NC/Nga小鼠建立AD模型,利用AutoMACS仪器从NC/Nga小鼠脾脏细胞中分离调节性T细胞,用促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)处理后观察DOCK8表达变化;处理DOCK8 siRNA后观察调节性T细胞的功能性改变.[结果] CRH处理后AD调节性T细胞中DOCK8表达水平明显降低(P<0.01).Real-time PCR及ELISA检测结果显示,调节性T细胞DOCK8表达量降低后细胞因子IL-10和TGF-β表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001).[结论] DOCK8蛋白在调节性T细胞中起重要作用,调节性T细胞中DOCK8的表达水平提高可能有助于减轻AD症状.     

辅助T细胞17及其相关调控因子在特应性皮炎患者中的表达情况及其临床意义

目的 探讨辅助T细胞17 (Th17)及其相关调控因子白细胞介素-23(IL-23)和微小RNA155(miR-155)在特应性皮炎(AD)患者外周血中的表达情况及其临床意义.方法 选择54例AD患者和30例健康对照者,检测受试者外周血白细胞中Th17比例、IL-23、miR-155的表达水平,分析3者诊断AD的敏感性和特异性以及3者与AD严重程度特应性皮炎评分(SCORAD)的相关性.结果 AD患者Th17比例、IL-23和miR-155表达水平均显著高于健康对照者(P＜0.05);Th17比例、IL-23和miR-155诊断AD的敏感性分别77.64％、65.30％和82.19％,特异性分别为62.81％、74.28％和77.06％;Th17比例、IL-23和miR-155表达水平均与SCORAD评分呈正相关(P＜0.05).结论 IL-23和miR-155可能参与了AD中Th17细胞的表达调控,Th17细胞及其相关因子尚不能作为AD的诊断指标,但可以辅助判断其疾病严重程度.     

特应性皮炎患者负向调节性B细胞的研究及意义

目的研究特应性皮炎(Atopic Dermatitis,AD)患儿外周血中调节性B细胞(Breg)的变化,分析其与Th22、Th17的关系,并探讨在AD患儿免疫学机制中的作用。方法选择28例AD患儿,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测调节性B细胞与Th22、Th17的变化,用ELISA测定培养上清中IL-10、IL-22及IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较。结果 AD患儿PBMC中CD19+IL-10+调节性B细胞数量低于健康对照组[(1.15±0.31)%vs(2.36.±0.82)%,P0.05],Th22、Th17细胞的数量均高于健康对照组,培养液上清中细胞因子IL-10的水平也低于健康对照组,IL-22与IL-17水平高于对照组,差别有统计学意义(P0.05)。结论 AD患儿外周血调节性B细胞与以及相关的细胞因子IL-10的的下调,以及Th22、Th17细胞上调,可能共同参与了AD的免疫学机制,它们免疫紊乱的调节可为AD的临床治疗提供了新思路。     

调节性T细胞及白细胞介素17在子宫内膜癌患者中的表达及意义

目的研究调节性T细胞及白细胞介素17(IL-17)在子宫内膜癌患者中的表达及意义。方法选取2013年1月～2016年1月我院收治的20例子宫内膜癌患者作为子宫内膜癌组,另选取同期20名健康志愿者作为对照组,应用流式细胞术检测两组外周血中调节性T细胞水平。采用realtime-PCR及ELISA检测调节性T细胞转录因子Foxp3、抑制性细胞因子白细胞介素10(IL-10)及炎性细胞因子IL-17的水平。结果子宫内膜癌患者外周血中调节性T细胞的水平及Foxp3表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。同时子宫内膜癌患者IL-10及IL-17的分泌水平也显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。结论子宫内膜癌患者调节性T细胞/Th17细胞间的平衡被打破,调节性T细胞可能通过分泌IL-10参与调控子宫内膜癌的病理进程。     

辅助性T细胞17和调节性T细胞在哮喘小鼠中的失衡表达及其意义

目的探讨辅助性T细胞17(Th17)和CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Treg)的表达失衡在哮喘小鼠发病机制中的作用。方法将24只BALB/c小鼠随机分为哮喘组和正常对照组,每组12只。哮喘组采用卵白蛋白致敏和激发的方法制作小鼠哮喘模型,对照组用等量的生理盐水代替。采用体积描记法测定气道反应性;对BALF中炎性细胞进行计数;流式细胞术检测脾脏单个核细胞中Th17及Treg细胞占CD4+ T细胞比例;ELISA法检测BALF及肺匀浆中Th17及Treg相关细胞因子IL-17和IL-10水平。结果与对照组比较,哮喘组平均气道阻力显著升高(P0.01),Th17细胞比例显著升高[(5.68±1.99)%比(2.80±0.82)%,P0.01],而Treg细胞比例显著降低[(2.88±0.46)%比(6.10±2.44)%,P0.01],Th17/Treg比值显著升高(1.93±0.41比0.50±0.15,P0.01),BALF及肺匀浆中IL-17水平均显著升高[(22.37±3.00)pg/mL比(11.42±2.15)pg/mL,(52.93±5.39)pg/mL比(19.38±2.65)pg/mL,P均0.01],而IL-10水平均显著降低[(6.05±1.25)pg/mL比(14.23±2.94)pg/mL,(9.33±1.79)pg/mL比(21.40±2.44)pg/mL,P均0.01]。结论哮喘小鼠Th17细胞数量增多及IL-17水平增高,而Treg细胞数量减少及IL-10水平降低,Th17/Treg细胞比例失衡可能在哮喘的发病机制中具有重要作用。     

硒对特应性皮炎小鼠CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的影响

目的分析膳食硒对特应性皮炎小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的影响。方法 40只BALB/c小鼠随机分为致敏组和对照组,致敏组(G1、G2、G3)分别以缺硒(0.01μg/m L)、中量硒(0.25μg/m L)和高量硒(3.00μg/m L)饲料喂养,对照组(G4)以中量硒饲料喂养。8周后致敏组采用DNCB诱导特应性皮炎症状,G4组作为对照。致敏期间监测皮炎症状。致敏3周后,检测血浆总Ig E、全血细胞计数、脾脏CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平和组织硒含量,分析组间各指标差异和变量间关系。结果 G1、G2、G3组小鼠第6天皮炎症状评分、第8天抓挠计数、第21天血浆总Ig E和全血炎症细胞数均高于G4组,差异有统计学意义(P0.05)。G1、G2、G3、G4组CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+CD25+T细胞百分比分别为(79.6±7.6)%、(59.0±27.5)%、(37.6±5.4)%、(85.26±9.2)%,差异有统计学意义(P=0.000);其中G3组降低最为明显,与G1、G2和G4组比较差异具有统计学意义(t=0.174,40.828,1.466,P0.01);相关回归分析发现,CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平与皮肤组织硒含量呈直线负相关(r=-0.623,P=0.001)。结论膳食硒通过其免疫学效应影响特应性皮炎小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的增殖分化水平。     

CIN及宫颈癌患者外周血调节性T细胞的表达及意义

目的探讨CIN及宫颈癌患者外周血调节性T细胞的表达及意义。方法选取2014年1月~2018年12月我院收治的CIN(宫颈上皮内瘤变)患者20例,宫颈癌患者40例,其中Ⅰ~Ⅱ期20例、Ⅲ~Ⅳ期20例,同时选择健康志愿者20例作为对照组。采用流式细胞仪检测调节性T细胞,酶联免疫吸附法测定相关细胞因子。结果 CIN及宫颈癌患者外周血中调节性T细胞的水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P0.01)。结论 CIN及宫颈癌患者调节性T细胞/Th17细胞间的平衡被打破,可能导致了CIN的进展及宫颈癌的发生发展。     

支气管肺炎患儿外周血调节性T淋巴细胞和辅助性T淋巴细胞17及其细胞因子水平变化

目的探讨支气管肺炎患儿外周血调节性T淋巴细胞(Treg)和辅助性T淋巴细胞17(Th17)及其细胞因子白细胞介素(IL)-10、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-17水平的变化及意义。方法选取2012年2月至2013年12月在新安县人民医院接受治疗的支气管肺炎患儿41例作为观察组,并选取30例健康儿童为对照组;采用流式细胞仪检测外周静脉血全血中CD4+、CD8+、Treg和Th17水平,计算Treg/Th17、CD4+/CD8+比值;采用酶联免疫吸附测定法检测外周静脉血中IL-10、TGF-β和IL-17水平。结果观察组患儿CD4+细胞的比例显著高于对照组(P<0.05),2组小儿CD8+细胞的比例比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组患儿CD4+/CD8+比值显著低于对照组(P<0.05)。观察组患儿外周血Treg比例显著低于对照组(P<0.05),Th17比例显著高于对照组(P<0.05)。观察组患儿血IL-10、TGF-β水平显著低于对照组(P<0.05),而IL-17水平显著高于对照组(P<0.05)。结论支气管肺炎患儿外周血存在外周血T淋巴细胞亚群失衡,尤其是Treg/Th17细胞及其细胞因子的表达失衡,可能是支气管肺炎的发病机制之一。     

调节性B细胞在卵巢癌病人外周血中表达及其临床意义

目的探究调节性B细胞(Bregs)在卵巢癌病人外周血中的表达频率及其与FIGO分期间的关系,并分析其与调节性T细胞(Tregs)及IL-10之间的相关性。方法将卵巢癌(23例)和卵巢良性肿瘤病人(26例)纳入研究,流式细胞术检测外周血CD19+CD24hiCD38hiBreg和CD4+CD25+Treg细胞表达频率及血清IL-10表达水平。并分析两种细胞与FIGO分期、IL-10浓度的关联及两者间的相关性。结果卵巢癌病人外周血中Bregs、Tregs百分比高于卵巢良性肿瘤病人(P < 0.01),并与FIGO分期密切相关,卵巢癌Ⅲ期+Ⅳ期病人高于Ⅰ期+Ⅱ期(P < 0.01);卵巢癌病人血清IL-10高于卵巢良性肿瘤病人(P < 0.01)。相关性分析显示:卵巢癌病人外周血Breg细胞与Treg细胞比例呈正相关关系(P < 0.05);卵巢癌病人血清IL-10与Bregs、Tregs细胞均呈正相关关系(P < 0.05)。结论Bregs和Tregs在卵巢癌病人外周血中所占比例显著升高,能够通过分泌IL-10参与卵巢癌免疫反应,这可能为卵巢癌的免疫治疗提供新靶点。     

特应性皮炎患者外周血白介素-17和白介素-23水平的检测

目的探讨特应性皮炎(AD)患者外周血中白介素-17(IL-17)、白介素-23(IL-23)的含量及其在AD发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测40例AD患者外周血中IL-17、IL-23的含量,并与AD疾病严重程度作相关性分析。AD疾病严重程度用SCORAD评分标准判断。同时以30例性别、年龄匹配的健康人作为对照组。结果AD组外周血中IL-17的含量为(36.23±8.66)pg/L,明显高于健康对照组(17.11±2.25)pg/L(t=13.38,P0.01);其含量与SCORAD评分呈显著正相关(r=0.412,P0.05)。AD组外周血中IL-23的含量为(52.78±8.56)pg/L,高于健康对照组(24.86±3.12)pg/L(t=19.02,P0.01);其含量与SCORAD评分呈显著正相关(r=0.493,P0.05)。结论AD患者外周血中IL-17、IL-23的含量增高且与病情的正相关性,提示过量表达的Th17细胞调控因子IL-23可能激发Th17细胞处于功能活跃状态,Th17细胞分泌过量的效应因子IL-17促进AD发病发挥一定作用。     

姜黄素对慢性阻塞性肺疾病大鼠辅助性T细胞17与调节性T细胞的调节作用

目的观察姜黄素(curcumin,CUR)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)的调节作用,探讨其可能作用机制。方法 30只大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组、CUR治疗组(200 mg/kg),每组10只。采用气管内注射脂多糖叠加烟熏联合造模。各组处置取材后,观察大鼠肺组织病理变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织中调节性T细胞炎性标记物CD4、CD25、Foxp3的含量,大鼠外周血和BALF中白细胞介素(IL)-10、IL-17的浓度;免疫组化方法测定肺组织中CD4、CD25、Foxp3的表达。结果与正常组比较,COPD大鼠肺组织中的CD4、CD25、Foxp3调节性T细胞水平均升高;与模型组相比,CUR治疗组调节性T细胞CD4、CD25、Foxp3明显降低(P0.05),肺泡灌洗液中IL-10水平明显上升(P0.05)、IL-17水平明显下降(P0.05),血浆中IL-10含量无明显差异(P0.05)、但IL-17水平有明显的下降(P0.05)。结论 CUR可能通过调节COPD大鼠Th17/Treg平衡,升高IL-10及降低IL-17的含量,下调CD4、CD25、Foxp3调节性T细胞,从而发挥对COPD大鼠的保护和治疗作用。     

特应性皮炎患儿外周血Th17、Th1/Th2细胞亚群的研究

目的检测特应性皮炎(AD)患儿外周血中辅助性T细胞亚群(Th1、Th2和Th17)数量和比例的变化,探讨其在AD发病机制中的作用。方法选择40例AD患儿,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测Th1、Th2、Th17细胞的数量及Th1/Th2比值,用ELISA测定培养上清中IFN-γ、IL-4、IL-17水平,与同期选择的健康对照组比较并进行相关分析。结果AD患儿PBMC中CD4+IL-4(+Th2)细胞的数量、CD4+IL-17(+Th17)细胞的数量均高于健康对照组([19.56±4.9)%vs(12.91±1.7)%,P0.05;(26.61±2.6)vs(11.4±1.2),P0.05],Th1/Th2细胞的比值低于健康对照组([0.98±0.13)vs(1.84±1.6),P0.05]。结论IL-17+Th17细胞与Th1/Th2比值变化可能参与AD患儿的免疫学发病机制。     

T细胞分化及其细胞因子在特应性皮炎发病机制中的意义

特应性皮炎 (atropicdermatitis ,AD) ,是临床上常见的慢性、瘙痒性、炎症性皮肤病 ,有血管舒缩障碍和免疫反应异常等特征 ,临床表现为湿疹和极度瘙痒 ,可因感染、精神压力、季节 /气候变化、刺激物和过敏原等因素作用而加重。近年国内外学者对T细胞分化及其细胞因子在AD发病过程中的意义方面都进行了不少的研究 ,有助于阐明AD的病因和发病机制。1　T细胞的分化　　成熟T细胞分为CD4+ T细胞和CD8+ T细胞两大亚群 ,在正常人 ,CD4+ T细胞和CD8+ T细胞亚群保持着平衡。　　 2 0世纪 80年代中期 ,Mosmann等[1] 在小鼠中发现CD4+ T细胞…     

急性髓系白血病患者外周血调节性T细胞、辅助性T细胞17及其相关细胞因子的表达及意义

目的 探讨急性髓系白血病(AML)患者外周血调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)及其相关细胞因子转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、白细胞介素(IL)-10和IL-17的表达及意义。方法 选择2015年1月至2021年12月南阳市第一人民医院和南阳医学高等专科学校第一附属医院收治的85例AML患者为研究对象,根据《成人急性髓系白血病(非急性早幼粒细胞白血病)中国诊疗指南(2017年版)》预后危险度分级标准将患者分为非高危组(n=56)和高危组(n=29);另选择同期在本院体检的40例健康人作为对照组。应用流式细胞术检测3组受试者外周血Treg、Th17细胞水平,应用酶联免疫吸附法检测3组受试者血清中TGF-β₁、IL-10和IL-17水平。结果 高危组和非高危组患者Treg细胞占外周血CD4⁺ T细胞百分比及Treg/Th17显著高于对照组,高危组患者Treg细胞占外周血CD4⁺ T细胞百分比及Treg/Th17显著高于非高危组(P<0.05);高危组和...     

慢性乙型肝炎患者外周血调节性B细胞与调节性T细胞的表达频率及其相关性

目的：分析慢性乙型肝炎患者外周血IL-10＋CD19＋调节性B细胞（regulatory B cells,Breg）与CD4＋CD25^high调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）的比例及两者的相互作用。方法：收集急性乙肝（acute hepatitis B,AHB）患者28例,慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者31例和健康体检者（健康组）25例。分离外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）,经CpGODN2006和佛波酯体外作用后,流式细胞术分析Breg、Treg的表达及其相关性,ELISA检测培养上清IL-10水平。通过免疫磁珠剔除CD4＋CD25＋T细胞后分析Breg与Treg表达频率间的相关性。结果：CpGODN 2006和佛波酯作用后CHB组Breg和Treg百分率较AHB组和健康组均明显升高（Breg：P值分别为0．003和0．001;Treg：P值分别为〈0．001,0．005）,AHB组和健康组间两类细胞表达频率差异无统计学意义（Breg：P=0．796;Treg：P=0．227）;Spearman相关性分析显示CHB组Breg与Treg表达百分比存在正相关关系（r=0．50,P=0．004）,而AHB组和健康组无此相关性（r=-0．15,P=0．462;r=0．09,P=0．669）。CHB组IL-10表达高于AHB组和健康组（z值分别为-6．596、-6．373,P均〈0．001）,AHB组和健康组间差异无统计学意义（Z=-0．952,P=0．341）。Spearman相关性分析表明CHB组IL—10与Breg存在正相关关系（r=3．303,P=0．005）。CHB组患者Breg和IL-10的表达在剔除CD4’CD25’T细胞前后间的差异无统计学意义。结论：Breg和Treg在CHB患者中表达频率升高,Breg可能通过IL-10的分泌参与慢性乙肝的免疫调节,且该作用不依赖于Treg。     

BCG干预对哮喘小鼠气道炎症及调节性T细胞生成的影响

目的观察减毒卡介活菌疫苗(BCG)干预后哮喘小鼠气道炎症及调节性T细胞生成的变化,以探讨其可能的作用机制。方法24只昆明小鼠随机分为哮喘组、BCG干预组、正常对照组。昆明小鼠以卵白蛋白(OVA)致敏激发建立哮喘模型,于OVA致敏前及后5d分别以BCG皮内注射干预;正常对照组小鼠以生理盐水代替OVA致敏激发。所有小鼠在最后一次激发后24h收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和外周血。计数BALF中的细胞总数及嗜酸性粒细胞(EOS)数。并用流式细胞仪分析外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)的百分比。开腹取脾,制备脾单细胞悬液并培养48h,收集上清液。Elisa法测定上清液中的IL-10含量。结果哮喘组小鼠BALF中的细胞总数及EOS计数较正常对照组显著增高(P<0.01),而BCG干预组其BALF中的细胞总数及EOS的计数较OVA致敏激发组降低(P<0.01);哮喘组外周血CD4 CD25 Treg百分比为(11.59±1.33)%,较正常对照组的(13.66±1.68)%显著下降(P<0.01);而BCG干预组CD4 CD25 Treg百分比为(14.4±2.75)%,较哮喘组明显上升(P<0.05)。BCG干预组脾细胞培养上清液中IL-10的水平(7.79±1.34pg/ml)较哮喘组(5.54±0.66pg/ml)显著升高(P<0.01)。结论BCG能明显抑制哮喘小鼠气道的炎症反应,其干预机制可能与促进Treg生成有关。     

辅助性T细胞17及调节性T细胞在慢性乙型肝炎患者外周血的变化及意义

目的 探究辅助性T细胞17及调节性T细胞在慢性乙型肝炎病毒感染患者外周血的变化及意义。方法 以2016年5月—2017年5月在深圳市龙华区中心医院肝病房收治的120例慢性乙型肝炎病毒感染患者为研究对象,根据慢性乙型肝炎诊断标准分为轻、中、重度三组患者,其中轻度患者31例,中度患者48例,重度患者41例,同时选取本院60例健康体检者作为对照组。采用流式细胞仪对辅助性T细胞17（Th17）及调节性T细胞(Treg)进行监测,同时对各组患者的肝功指标:血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)进行检测,对四组患者的以上指标进行比较分析。结果 中度组ALT和AST的含量要高于轻度组,差异存在统计学意义（t=8.264、10.237,P<0.05）,重度组ALT和AST要高于中度组,差异存在统计学意义（t=11.036、17.209,P<0.05）。中、重度组乙型肝炎病毒感染者的Th17表达率均要高于健康对照组（t=16.230、18.714,P<0.05）;各感染组的Th17表达率差异存在统计学意义（F=22.783,P<0.05）;轻、中和重度组感染乙肝病毒的患者Treg表达率要高于健康对照组（t=3.201、3.784、4.115,P<0.05）,而不同程度地感染乙型肝炎的各组之间无差异（P>0.05）; 轻、中和重度组感染乙肝病毒的患者Th17/Treg 比值要高于健康对照（t=21.306、24.397、28.001,P<0.05）,且不同程度地感染乙型肝炎的各组之间差异存在统计学意义（F=35.067,P<0.05）。结论 慢性乙型肝炎病毒感染的患者随着病情的发展Th17和Treg细胞水平会呈现一定的上升趋势,Th17/Treg比值较单一的 Th17、Treg 表达率更能反映肝脏受侵害的病情发展。