Lnc-ob1对大鼠大鼠骨质疏松性骨折的影响及其机制

目的探讨Lnc-ob1对大鼠大鼠骨质疏松性骨折的影响及其分子机制。方法 30只SD随机分为对照组、模型组和治疗组, 模型组和治疗组大鼠采用切除卵巢去势法建立骨质疏松性骨折模型。治疗组大鼠经骨折部位注射过表达Lnc-ob1腺相关病毒, 对照组和模型组大鼠在相同部位注射等体积空载腺相关病毒。治疗8周后, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析3组大鼠骨折部位Lnc-ob1表达水平, 采用X线片评分分析骨折愈合;测定3组大鼠骨密度;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析骨痂组织Osterix蛋白表达水平;采用三点弯曲法检测3组大鼠胫骨生物力学参数。组间计量数据比较采用单因素方法分析。结果治疗组大鼠骨折部位Lnc-ob1表达水平(2.12±0.21)明显高于对照组(1.10±0.09), 差异有统计学意义(t=18.370, P<0.05)。治疗组大鼠X线评分[(3.50±0.71)分]明显高于对照组[(2.30±0.82)分], 差异有统计学意义(t=3.497, P<0.05)。治疗组大鼠骨密度[(0.55±0.11) g/cm2]明显高于对照组[(0.29±0.07...     

铁死亡在肝缺血—再灌注损伤大鼠肠损伤中的作用

目的 探究铁死亡在肝缺血-再灌注损伤(HIR)大鼠肠损伤中的作用。方法 选择健康清洁级雄性SD大鼠40只,周龄8～10周,体重220～260 g。采用随机数字表法将大鼠分成四组：假手术组(S组)、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1+假手术组(SF组)、HIR模型组(IR组)和铁死亡抑制剂Ferrostatin-1+HIR模型组(IF组),每组10只。S组腹腔注射等容量0.02%DMSO,30 min后行假手术,仅进行开腹、分离第一肝门和关腹处理。SF组腹腔注射Ferrostatin-1(溶于0.02%DMSO)5 mg/kg, 30 min后行假手术。IR组腹腔注射等容量0.02%DMSO,30 min后制备HIR模型。IF组腹腔注射Ferrostatin-1(溶于0.02%DMSO)5 mg/kg, 30 min后制备HIR模型。于再灌注后8 h处死大鼠,取小肠组织,采用ELISA法检测肠组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和铁(Fe²⁺)浓度;采用速率法检测血清中ALT和AST活性;采用Western blot法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁...     

硫化氢对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗和脂代谢的影响

目的 观察硫化氢对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗和脂代谢的影响.方法 65只大鼠采用高糖高脂饮食+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立T2DM模型,将45只成模大鼠随机分为糖尿病(DM)、DM+硫氢化钠(NaHS)和DM+ DL-炔丙基甘氨酸(PAG)组,每组各15只,另设正常对照组.DM+ NaHS组大鼠腹腔注射NaHS[56 μmol/(kg·d)],DM+ PAG组腹腔注射PAG[50 mg/(kg·d)],对照组和DM组给予相同体积的生理盐水,连续给药2周.给药结束后,测定大鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素(FIns)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI);测定胰腺组织中硫化氢(H2S)浓度,免疫组织化学方法检测胰腺组织胰岛素表达.结果 与对照组比较,DM组大鼠FBG[(18.22±3.99) mmol/L]、TG[(1.54 ±0.16) mmol/L]、TC[(3.27±0.38) mmol/L]、FFA[(504.68±37.70) μmol/L]水平及HOMA-IR升高(P＜0.05),FIns[(41.79±3.43) mU/L]和ISI(-6.57 ±0.37)降低,胰腺组织H2S浓度[(96.98±19.44) μmol/L]升高,胰腺组织胰岛素阳性表达细胞面积(AIEP)和胰岛素阳性染色率(PRSI)降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);与糖尿病组比较,NaHS干预后,糖尿病大鼠FBG[(25.42 ±0.21) mmol/L]、TG[(2.40 ±0.21) mmol/L]、TC[(4.80 ±0.16) mmol/L]、FFA[(633.96±25.64)μmol/L]水平及HOMA-IR升高更明显,FIns[(29.36±2.65) mU/L]和ISI(-6.58±0.27)降低,胰腺组织H2S浓度[(134.50±12.70)μmol/L]明显升高,AIEP和PRSI降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);应用PAG后,糖尿病大鼠血浆FBG[(10.83±1.10) mmol/L]、TG[(1.30±0.12) mmol/L]、TC[(2.79 ±0.33) mmol/L]、FFA[(383.39±69.00) μmol/L]水平明显降低,胰岛素抵抗改善,FIns[(51.58±1.49) mU/L]和ISI(-6.32±0.11)明显升高,胰腺组织H2S浓度[(71.48±10.94) μmol/L]明显降低,AIEP和PRSI增加.结论 H2S通过影响T2DM大鼠胰岛素抵抗和脂代谢参与糖尿病发生发展.     

姜黄素对脊髓损伤大鼠神经保护作用及其机制

目的探讨姜黄素对脊髓损伤大鼠神经保护作用及其机制。方法 30只SD大鼠采用随机数字表法分为假手术组、模型组和姜黄素组。假手术组大鼠仅切开椎板, 不做其他处理。模型组大鼠采用改良Allen’s捶击法建立脊髓损伤模型, 姜黄素组大鼠在建立脊髓损伤模型后给予50 mg/kg的姜黄素。治疗4周后采用Basso Beanie Bresnahan(BBB)量表进行运动功能评分, 斜板试验最大角度来评估脊髓功能恢复情况, 苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓组织病理形态变化, 酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测损伤段脊髓组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)水平, 生化酶学检测大鼠脊髓组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、总超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;蛋白质免疫检测脊髓组织磷酸化p65和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用LSD法。结果姜黄素组大鼠斜板实验最大角度[(47.23±4.51)°]明显高于模型组大鼠[(31.35±4.56)°], 差异...     

脑源性神经营养因子对脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察脑源性神经营养因子(BDNF)对脑缺血再灌注损伤的影响。方法 45只SD大鼠随机数字表法分为假手术组、模型组和BDNF组, 每组15只。假手术组和模型组大鼠经侧脑室注射对照AAV病毒, 模型组大鼠经侧脑室注射过表达BDNF AAV病毒, 24 d后, 模型组和BDNF组大鼠采用大脑中动脉闭塞(MCAO)模型, 1 h后恢复血流灌注, 假手术组大鼠做手术切口不夹闭中动脉。建模24 h后分析假手术组、模型组和BDNF组大鼠神经功能缺损评分;检测3组大鼠脑组织梗死百分比、炎性因子[白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6]、氧化应激指标[谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)]、铁离子水平;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析3组大鼠脑组织中铁死亡蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平。组间数据采用单因素方差分析。结果 BDNF组神经行为评分[(1.53±0.74)分]明显高于模型组[(3.07±0.80)分], 差异有统计学意义(t=5.443, P<0.05)。BDNF组大鼠脑梗死百分比[(22.61±2.89)%]明显高于模型...     

微小RNA-204对糖尿病视网膜病变大鼠模型的保护作用及其机制

目的探讨微小RNA(miR)-204对糖尿病视网膜病变大鼠模型的保护作用及其机制。方法 30只SD大鼠随机数字表格法分为对照组、模型组和miR-204组, 每组10只, 其中miR-204组大鼠经尾静脉注射过表达miR-204的腺相关病毒;对照组和模型组大鼠注射等体积对照腺相关病毒。注射30 d后, 模型组和miR-204组大鼠通过高脂饲料喂养+腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病视网膜病变模型。治疗4周后, 分析3组大鼠视网膜血管通透性和视网膜厚度;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组大鼠外周血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠视网膜细胞凋亡;蛋白质印迹法(Western blot)分析3组大鼠视网膜组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果 miR-204组大鼠视网膜组织miR-204表达水平(2.12±0.17)明显高于对照组和模型组miR-204表达水平(1.05±0.11、0.93±0.05), 差异有统...     

缺氧诱导因子-1α在大鼠膝骨关节炎模型中表达及靶向干预效果

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠膝骨关节炎模型中表达及靶向干预效果。方法 10只大鼠采用木瓜蛋白酶局部注射复制膝骨关节炎动物模型, 另外10只作为对照组, 建模后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析膝关节液中HIF-1α表达水平。另30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PX-478组, 模型组和PX-478组建立膝骨关节炎模型, PX-478组大鼠经膝关节腔注射PX-478 5 mg/kg, 假手术组和模型组分别注射等体积生理盐水。治疗30 d后, 采用Mankin组织学评分和Pelletier评分分析膝骨关节炎病变程度;原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠膝关节软骨的凋亡水平;蛋白质免疫印迹分析3组大鼠膝关节软骨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果膝骨关节炎大鼠膝关节组织液HIF-1α水平[(281.71±26.14) ng/ml]明显高于对照组[(116.37±19.98) ng/ml], 差异有统计学意义(t=15.890, P<0.05)。P...     

创伤性脑损伤大鼠神经炎症和铁死亡的变化及干预效果

目的探讨创伤性脑损伤大鼠神经炎症和铁死亡的变化及铁死亡抑制剂去铁胺的干预效果。方法 30至SD大鼠随机数字表格法分为对照组、模型组和去铁胺组, 每组10只。模型组和去铁胺组大鼠采用Feeney自由落体法建立创伤性脑损伤模型。建模成功后, 去铁胺组大鼠建模前2 h腹腔注射去铁胺100 mg/kg, 对照组和模型组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。采用改良神经功能缺损评分(mNSS)评估大鼠神经功能;采用干事比重法测定脑组织水肿情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平;生物化学酶法测定脑组织采用蛋白质免疫应激分析谷胱甘肽和铁离子水平;采用蛋白质免疫印迹分析铁死亡相关蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果去铁胺组大鼠神经功能缺损评分(5.80±1.14)明显低于模型组(10.20±1.55), 差异有统计学意义(t=7.244, P<0.05)。去铁胺组大鼠神经功能缺损评分[(74.52±5.71)分]明显低于模型组大鼠[(87.20±3.71)分], 差异有统计学意义(t...     

高尿酸血症对肩袖腱骨愈合的影响

目的观察高尿酸血症对大鼠肩袖损伤修复后腱骨愈合的影响。方法将40只SD大鼠按标签数字法随机分为2组, 每组20只, 正常尿酸组每天给予羧甲基纤维素钠灌胃给药。高血尿酸组每天给予羧甲基纤维素钠配氧嗪酸钾灌胃给药。两组大鼠每周一上午检测血尿酸、肌酐、尿素氮水平并记录。两组大鼠在第4周时损伤冈上肌腱, 利用骨隧道缝合方式进行修复。以原来的方式灌胃饲养与定期检测。第8周时, 处死大鼠, 取肱骨头-冈上肌-肩胛骨标本, 进行两组标本大体观察、组织学染色分析、生物力学分析、酶联免疫吸附试验(ELISA)分析, 组间比较采用独立样本t检验。结果第8周时, 高尿酸组大鼠血尿酸水平高于正常尿酸组[(159.32±5.70) μmol/L比(83.34±8.83) μmol/L, t=22.859, P<0.01);高尿酸组大鼠血肌酐水平高于正常尿酸组[(61.87±4.08) μmol/L比(33.50±3.32) μmol/L, t=17.055, P<0.01];高尿酸组大鼠血尿素氮水平高于正常尿酸组[(9.31±1.12) mmol/L比(5.68±1.05) mmol/L, t=7....     

小剂量氯胺酮预处理对大鼠肠缺血/再灌注后肝脏血红素加氧酶-1表达的影响

目的 观察小剂量氯胺酮对血红素加氧酶-1 (heme-oxygenase 1,HO-1)在大鼠肠缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)后肝脏中表达的影响,并对其可能的保护机制作一初步探讨. 方法 48只雄性成年SD大鼠按随机数字表法分为A组(氯胺酮10 mg/kg术前30 min腹腔注射+假手术)、B组(盐水0.2 ml术前30 min腹腔注射+假手术)、C组(氯胺酮10 mg/kg术前30 min腹腔注射+小肠I/R)、D组(盐水0.2 ml术前30 min腹腔注射+小肠I/R)、E组(锌原卟啉5 mg/kg、氯胺酮10 mg/kg术前30 min腹腔注射+小肠I/R)、F组(锌原卟啉5 mg/kg、盐水0.2 ml术前30 min腹腔注射+小肠I/R),每组8只.小肠I/R造模组大鼠通过夹闭肠系膜上动脉60 min,然后松血管夹,于再灌注6h后取材,测定肝组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;采用免疫组化法测定肝组织HO-1的表达和定量;光镜下观察肝脏病理学改变;取外周静脉血测血清谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)、谷草转氨酶(glutamic-oxaloacetic transaminase,GOT). 结果 A、B两组间各项数据比较差异无统计学意义(P＞0.05);各缺血造模组大鼠肝组织MDA含量:C组[(2.69±0.35) μmol/g]、D组[(4.62±0.36) μmol/g]、E组[(4.35±0.24) μmol/g]、F组[(4.74±0.34) μmol/g]与B组[(1.08±0.26) μmol/g]比较,显著升高;SOD活力:C组[(129±6) μU/L]、D组[(102±5) μU/L]、E组[(99±4)μU/L]、F组[(96±6)μU/L]与B组[(133±7) μU/L]比较,显著下降;血清GOT、GPT含量:C组[GPT(212±21) U/L,GOT(129±16) U/L]、D组[GPT(416±33) U/L,GOT(362±15)U/L]、E组[GPT(407±29) U/L,GOT(359±14) U/L]、F组[GPT(414-±40) U/L,GOT(366±16) U/L]与B组[(GPT(53±9) U/L,GOT(83±7) U/L]比较,显著升高;HO-1表达:C组(0.472±0.126)、D组(0.324±0.078)、E组(0.337±0.092)、F组(0.328±0.083) OD与B组(0.078±0.010) OD比较,显著上调(P＜0.05或P＜0.01);与D组比较,C组血清GPT、GOT、肝组织MDA含量均显著降低,SOD活力显著上升,HO-1表达上调(P＜0.05);与D组比较,E组、F组血清GPT、GOT及MDA、SOD值差异无统计学意义(D0.05);E组和C组比较,血清GPT、GOT,肝组织MDA含量显著升高,SOD活力显著下降,HO-1表达下调(P＜0.05). 结论 小剂量氯胺酮预处理能减轻肠I/R后造成的肝脏损伤,这种作用在一定程度上是通过上调HO-1的表达来实现的.     

大鼠正畸过程中牙周组织糖酵解途径变化

目的探讨大鼠正畸过程中牙周组织糖酵解途径变化。方法 48只雄性SD大鼠按照随机数字表法随机分为对照组、正畸7 d组、正畸14 d组, 建立大鼠正畸牙齿移动模型。采用游标卡尺测量大鼠正畸治疗后牙齿移动距离;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠牙槽骨组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6表达水平;采用微量法检测大鼠牙槽骨组织中糖酵解途径关键酶丙酮酸激酶(PK)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸果糖激酶(PFK)的活性;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测糖酵解上游调控因子信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达水平, 计量数据比较采用t检验。结果正畸7 d组[(0.476±0.017) mm]、正畸14 d组[(0.715±0.027) mm]大鼠牙齿移动距离明显高于对照组(0 mm), 差异有统计学意义(t=16.563、20.730, P<0.05)。正畸7 d组[(139.411±5.985) ng/ml]、正畸14 d组[(196.068±8.972) ng/ml]大鼠牙槽骨组织中TNF-...     

右美托咪定预处理对脂多糖致大鼠急性肺损伤时高迁移率族蛋白1的影响

目的观察右美托咪定(Dex)预处理对脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)时高迁移率族蛋白1(HMGB1)的影响。方法采用尾静脉注射LPS方法制备大鼠ALI模型;将40只健康雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分为4组:正常对照组(NR组)、LPS组(尾静脉注射LPS 5 mg/kg)、Dex组(腹腔分别注射右美托咪定25 μg/kg、50 μg/kg后, 尾静脉注射LPS 5 mg/kg)。NR组和LPS组给予等容量生理盐水。大鼠注射LPS 24 h后处死, 取颈动脉血记录动脉血氧分压(PaO2), 观察大鼠一般情况以及肺组织病理变化, 收集支气管肺泡灌洗液(BALF), 测定BALF总蛋白、白细胞介素(IL)-1β及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度;取大鼠肺组织称重, 计算肺湿干重比(W/D比);检测肺组织HMGB1、IL-1β和TNF-α的表达。组间比较在符合正态性分布和方差齐性下采用单因素方差分析。结果 LPS组和Dex组大鼠病态表现(呼吸浅快、精神萎靡、口鼻可见血性分泌物)更明显, PaO2[(98±7) mmHg比(66±9)、(79±5)、(83±7) mmHg...     

针刺治疗膝关节骨性关节炎的效果及对低氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察针刺治疗膝关节骨性关节炎的效果及对低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 30只SD大鼠根据随机数字表法随机分为对照组、模型组和针刺组, 每组10只, 模型组和针刺组采用木瓜蛋白酶膝关节注射建模。建模成功后, 对照组和模型组不做处理, 针刺组采用无菌电疗仪每天连续治疗20 min。5次为一个疗程, 治疗2个疗程。采用Mankin’s病理评分法评估关节软骨病理损伤程度;采用行为观测系统分析大鼠关节活动程度;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)分析大鼠关节滑液炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和血VEGF水平;采用蛋白质免疫印迹分析大鼠关节组织HIF-1α表达水平。组间数据比较采用单因素方差分析。结果针刺组大鼠Mankin’s病理评分[(4.10±1.45)分]明显低于模型组[(8.90±1.20)分], 差异有统计学意义(t=8.075, P<0.05)。针刺组大鼠关节活动度[(119.24±9.48)°]明显高于模型组[(92.39±9.15)°], 差异有统计学意义(t=6.444, P<0....     

青蒿素抑制Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3复合物对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨青蒿素抑制Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)复合物对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法选用SD大鼠, 结扎左冠状动脉前降支, 构建大鼠心肌缺血再灌注损伤模型, 并随机分为对照组、模型组和青蒿素组, 每组10只。其中10只不结扎的大鼠作为假手术组。青蒿素组大鼠建模前灌胃25 mg/kg青蒿素, 模型组和对照组建模前灌胃等体积生理盐水。3组大鼠造模1 d后采用生化酶法检测心肌损伤标志物酸激酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌钙蛋白Ⅰ(cTn Ⅰ);采用TTC染色分析3组大鼠梗死百分比;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析白细胞介素(IL)-1β和IL-18的表达水平;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析大鼠心肌组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-1/NLRP3表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果青蒿素组大鼠血清CK-MB、LDH和cTn Ⅰ水平[(2 424.30±199.06) U/L、(1 128.30±118.46) U/L、(35.26±3.56) pg/ml]明显低于模型组[(4 105.10±191.55)...     

肠道基质金属蛋白酶-7高表达对胆道闭锁小鼠肠道通透性的影响

目的探讨胆道闭锁(BA)小鼠肠道通透性变化以及基质金属蛋白酶-7(MMP-7)对其影响的机制。方法将BALB/c新生幼鼠采用随机数表法分为4组:对照组(NC组)、BA模型组(BA组)、肠道高MMP-7对照组(MNC组)和BA肠道高MMP-7组(MBA组)。采用腹腔注射轮状病毒和anti-Ly6G抗体建立BA纤维化模型;通过向空肠内注射MMP-7纯化蛋白构建肠道高MMP-7环境。完成各项指标检测, 多组间比较应用单因素方差分析, 两组间比较采用t检验, 细菌易位率比较采用χ2检验。结果 BA组和MBA组血清MMP-7水平[(2.28±0.21)、(2.35±0.23) ng/ml]显著高于NC组[(0.48±0.11) ng/ml, t= -29.866、-28.853, P<0.05];MNC组和MBA组的回肠液[(0.71±0.12)、(0.68±0.10) ng/ml]和大便MMP-7水平[(0.48±0.07)、(0.43±0.06) ng/ml], 均显著高于NC组[(0.10±0.04) ng/ml, t= -19.273、-21.542, P<0.05;(0.0...     

激活γ-氨基丁酸B受体对糖尿病神经痛大鼠脊髓背角神经元谷氨酸递质释放的影响

目的 探讨激活γ-氨基丁酸B(γ-aminobutyric acid B,GABAB)受体对糖尿病神经痛大鼠脊髓背角谷氨酸能神经元递质释放中的影响.方法 30只(4周龄,150 g～170 g)雄性Sprague-Dawley( SD)大鼠,采用随机数字表法随机分为2组(每组15只):正常对照组(N组)、糖尿病神经痛组(D组).D组通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)50 mg/kg制备糖尿病神经痛模型,N组腹腔给予等量生理盐水,两组分别于腹腔注射后第3～4周测定空腹血糖、机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);然后处死大鼠取腰1～5脊髓,制备脊髓薄片,采用全细胞膜片钳技术,记录脊髓Ⅱ板层单突触神经元谷氨酸能诱发兴奋性突触后电流(evoked excitatory postsynaptic currents,eEPSCs).细胞封接后稳定5 min开始记录,灌流液中加入终浓度为1、10、20、50μmol/L的Baclofen(GABAB受体特异性激动剂),于给药前对照、给予上述浓度药后各时点及洗脱后5 min,记录上述各时点eEPSCs的波幅变化,比较Baclofen对两组大鼠eEPSCs波幅的抑制率,并观察CGP55845 (GABAB 受体特异性阻断剂,1 μmol/L)对Baclofen(50 μmol/L)eEPSCs作用的影响.结果 与N组比较,D组大鼠血糖显著增高,PWT明显降低(P＜0.05).电生理共记录30个神经元(每组15个),1 μmol/L～50 μmol/L的Baclofen均以剂量依赖方式降低两组大鼠eEPSCs波幅(P＜0.05),N、D两组在1、10、20、50 μmol/L Baclofen时点波幅抑制率均明显下降(P＜0.05),两组上述时点比较,D组显著低于N组(P＜0.05),分别为:(47±7)vs(21±7),(55±6)vs(50±6),(92±6)vs(72±9),(95±8)vs(88±8),1μmol/LCGP55845可完全去除50 μmol/L Baclofen对两组神经元(每组12个)eEPSCs的作用.结论 激活GABAB受体可明显抑制脊髓背角神经元谷氨酸递质释放,但对糖尿病神经痛大鼠其抑制作用减弱.     

碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑缺血再灌注损伤的影响。方法 30只SD大鼠按照随机数字表分为对照组、模型组和AAV-bFGF组, 模型组和AAV-bFGF组大鼠采用大脑中动脉闭塞(MCAO)模型, 1 h后恢复血流灌注, 对照组做手术切口但不闭塞中动脉。3组大鼠在建模前20 d经侧脑室分别注射对照AVV和AAV-bFGF。建模24 h后分析3组大鼠神经功能缺损评分;采用TTC染色分析脑组织梗死百分比;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脑组织血管内皮生长因子(VEGF)、神经生长因子(NGF)、髓鞘碱性蛋白(MBP)表达;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析脑组织细胞凋亡比例;采用比色法检测脑组织一氧化氮(NO)水平。组间数据采用单因素方差分析。结果 AAV-bFGF组大鼠神经功能评分[(1.52±0.23)分]明显低于模型组大鼠[(4.00±1.04)分], 差异有统计学意义(t=7.371, P<0.05)。AAV-bFGF组大鼠脑组织梗死体积比[(15.25±2.85)%]明显低于模型组大鼠[(36.81±4.46)%], 差异有统计学意义(t=12...     

外源性神经生长因子促进大鼠牵张成骨区骨再生的研究

目的探讨牵张期给予牵张区持续灌注β神经生长因子(β-NGF)促进骨再生与重建的作用机制。方法 2021年9月至2022年1月, 选取由新疆医科大学实验动物中心提供健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只, 建立右侧股骨牵张成骨(DO)模型, 并运用随机抽样法均分为A组(20例)和对照组(20例)。透视下牵张期给予对照组牵张区注射无菌0.9%生理盐水300 μl, 给予A组牵张区注射β-NGF(10 μg/200 μl)300 μl。术后行X线、微型计算机断层扫描(micro-CT)、三点弯曲生物力学试验、血清标本酶联免疫吸附测定(ELISA)、骨组织学染色检测牵张区的骨再生情况。组间采用独立样本t检验或Mann-WhitneyU检验来评估。结果矿化第6周A组牵张区新生骨骨密度[(359.62±19.58) mm/cm3比(278.41±25.73) mm/cm3, t=3.824, P<0.001]、骨体积/总组织体积[(43.83±2.48)%比(33.25±3.96)%, t=4.092, P<0.05]、极限载荷[(48.16±1.25)%比(27....     

罗哌卡因对脂多糖诱导的小鼠肺损伤的保护作用及其机制

目的探讨罗哌卡因对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺损伤的保护作用及其机制。方法 30只小鼠按照随机数字表法随机分为对照组、模型组和罗哌卡因组, 每组10只, 模型组和罗哌卡因组大鼠经滴鼻法给予LPS, 制备大鼠急性肺损伤大鼠模型, 建模24 h后, 罗哌卡因组大鼠经灌胃给予2 mg/kg罗哌卡因, 对照组和模型组灌胃等体积生理盐水。治疗4 d后, 处理大鼠, 分离血清, 固定肺组织。测定肺组织湿重和干重之比;苏木精-伊红(HE)染色分析两组肺组织病理学变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清组织中白细胞介素(IL)-1β和IL-6的水平;蛋白质印迹法(Western blot)分析大鼠肺组织p65和p50蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果罗哌卡因组大鼠动脉血PaO2[(72.96±3.52) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)]明显高于模型组大鼠动脉血PaO2[(59.78±5.45) mmHg], 差异有统计学意义(t=6.418, P<0.05)。罗哌卡因组大鼠肺组织湿重/干重比(3.16±0.16)明显低于模型组(4.68±0.38), 差异有统计学意...     

腺相关病毒介导Parkin对帕金森模型大鼠的治疗作用

目的探讨腺相关病毒介导Parkin对帕金森模型大鼠的治疗作用。方法 60只SD大鼠随机分为对照组、模型组和Parkin组, 模型组和Parkin组大鼠采用颈背部皮下注射鱼滕酮乳化液建立帕金森(PD)模型。Parkin组大鼠在建模后于左侧黑质定向注射携带Parkin基因的腺相关病毒, 对照组和模型组经左侧黑质定向注射携带空载体的阴性腺相关病毒。在注射21 d后, 对3组大鼠进行行为学分析;并处死大鼠, 采用原位缺口末端标记法(TUNEL)分析3组大鼠黑质细胞凋亡指数;采用超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)-px试剂盒检测SOD和GSH-px水平;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)的水平。不同处理比较采用方差分析, 组间比较采用LSD法。结果 Parkin组大鼠脑组织黑质区Parkin蛋白表达水平(1.54±0.18)明显高于对照组和模型组(0.81±0.11、0.89±0.12), 差异有统计学意义(t=9.257、8.014,...