急性肺损伤大鼠颗粒溶素与白介素-2相关性表达的研究

目的 在大鼠急性肺损伤模型中,观察肺组织颗粒溶素表达及血清白介素-2水平的改变及相关性,探讨急性肺损伤的机制.方法 36只Wistar大鼠随机分成实验组(LPS组)和正常对照组(NS组),LPS组腹腔注射脂多糖(LPS)制备急性肺损伤(ALI)模型,NS组注射等量生理盐水,并于注射后6,18,30h取材.通过ELISA法检测血清白介素-2变化,并取肺组织行HE染色观察病理改变,免疫组化法测定肺组织颗粒溶素的表达.结果 LPS组大鼠病理改变表现为肺组织受损,水肿、出血、渗出明显,符合急性肺损伤标准;LPS组各时点血清白介素-2水平和肺组织GNLY表达均较对照组有不同程度增加(P<0.05).结论 急性肺损伤大鼠血清白介素-2水平与颗粒溶素表达有相关性,共同参与急性肺损伤的致病和免疫防御过程.     

白细胞介素-37及相关因子在急性肺损伤大鼠模型中的作用及意义

目的 研究在急性肺损伤大鼠肺组织中白细胞介素-37(interleukin 37,IL-37)及相关因子的表达水平,阐述IL-37在急性肺损伤中的作用及意义,并进一步探究急性肺损伤发病机制。方法 将45只清洁级Wistar大鼠按随机数字表法分为健康对照组、博来霉素组、地塞米松治疗组,每组大鼠15只,博来霉素组及地塞米松治疗组大鼠气管内给予博来霉素4 mg/kg制作急性肺损伤模型,健康对照组给予相同体积生理盐水作为对照,地塞米松治疗组大鼠于急性肺损伤造模基础上第2 d每日腹腔注射地塞米松3 mg/kg,健康对照组、博来霉素组大鼠腹腔注射生理盐水作为对照。各组大鼠分别于造模后7、14、28 d处死,HE染色评价肺组织病理形态学变化,分别测定肺组织匀浆中IL-37、血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量,RT-PCR法检测肺组织IL-18mRNA表达量。结果 病理形态学检查提示:健康对照组大鼠在各时间点肺组织结构完整,无炎性及纤维化改变;博来霉素组、地塞米松治疗组大鼠肺组织由早期急性肺泡炎性改变发展为晚期纤维化性改变,地塞米松治疗组急性炎症及肺纤维化性改变在同时间点较博来霉素组减轻。博来霉素组、地塞米松治疗组的IL-37和TNF-α含量及IL-18 mRNA表达于第7 d升高至最高点,后逐渐降低,至第28 d均高于健康对照组,差异有统计学意义(P均0.05)。结论 IL-37在大鼠急性肺损伤发病过程中起重要作用,该作用可能与调控IL-18、TNF-α转导有关。     

全氟异丁烯诱发大鼠急性肺损伤的初步观察

目的建立大鼠吸入全氟异丁烯（perfluoroisobutylene,PFIB）染毒致急性肺损伤实验模型,并进行血液和组织中细胞因子和组织形态学改变观察。方法制作大鼠吸入PFIB诱发急性肺损伤动物模型,测定动物染毒后肺灌洗液（BALF）中总蛋白含量和肺含水量变化,血清和肺组织中白介素-1（IL-1）、白介素-8（IL-8）、白介素-10（IL-10）、白介素-18（IL-18）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量改变,以及肺组织病理学观察。结果（1）模型大鼠肺含水量和BALF蛋白含量较空白对照组明显增加;（2）PFIB染毒诱发急性肺损伤动物血清和肺组织中IL-1,8、10、18和TNF—α细胞因子可见特征性改变;（3）形态学观察可见肺组织水肿和明显的炎症反应。结论研究和探讨PFIB吸入诱发急性肺损伤的变化规律和特点可提供更多的急性肺损伤预防和治疗信息。     

白三烯制剂对大鼠急性肺损伤的干预作用

目的:探讨白三烯抑制剂齐留通对博莱霉素(BLM)所致肺损伤的保护作用。方法:采用气管内滴注博来霉素致大鼠急性肺损伤模型,并给予齐留通胃管内灌注进行干预,另设生理盐水(NS)对照组。观察大鼠肺系数的改变、肺组织病理学检查及评分以及肺组织免疫组化转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平。结果:齐留通干预组的肺系数、急性肺损伤程度以及TGF-β1在肺组织中的表达水平均显著低于模型组。结论:齐留通可减轻博莱霉素诱导的大鼠肺损伤程度,并可能通过调节全身炎症反应综合征与代偿性抗炎症反应综合征之间平衡的方式而实现对急性肺损伤的保护。     

罗格列酮对急性胰腺炎肺损伤的保护作用

目的：探讨罗格列酮对急性胰腺炎肺损伤的保护作用,为临床治疗提供参考。方法：采用5%牛黄胆酸钠逆行胰胆管内注射建立SAP肺损伤模型,并用罗格列酮进行干预。观察肺组织的病理改变及iN-OS mRNA、PPARγmRNA的表达。分析罗格列酮在急性胰腺炎肺损伤治疗中的作用。结果：干预组肺组织病理改变及i NOS mRNA表达均低于模型组、PPARγ mRNA的表达高于模型组。结论：罗格列酮可减轻急性胰腺炎肺损伤程度。     

MMP-2和TIMP-2在脂多糖诱导的新生大鼠急性肺损伤中表达的变化

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metallo proteinase-2,MMP-2)及其组织抑制剂(tissue inhibitors of metallo proteinase-2,TIMP-2)在脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤中的作用.方法 选择30只新生7日龄SD大鼠,随机分为生理盐水对照组(n=6)和急性肺损伤组(n=24),后者进一步分为1、2、4及6h亚组,每组6只.以LPS 腹腔注射建立急性肺损伤模型,观察注射LPS后不同时间点大鼠肺组织的病理改变,用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肺组织中MMP-2和TIMP-2的蛋白及mRNA表达.结果 病理学检查证实新生大鼠急性肺损伤模型复制成功.与生理盐水对照组比较,急性肺损伤组注射LPS后MMP-2蛋白及mRNA均表达增加,4～6h达高峰,差异有统计学意义(均P<0.05).TIMP-2蛋白及mRNA表达在6h内可见微弱增加趋势,但与生理盐水对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05).结论 LPS致新生大鼠的急性肺损伤存在MMP-2和TIMP-2的表达失衡,进而可能通过破坏基底膜参与急性肺损伤的病理过程.     

地塞米松对内毒素肺损伤糖皮质激素受体的影响

内毒素急性肺损伤时肺组织糖皮质激素受体(GCR)的数目明显降低,由此可对机体产生不利影响,进一步加剧肺损伤的病理过程。本实验利用清醒绵羊大肠杆菌内毒素急性肺损伤模型,观察地塞米松(Dex)对内毒素肺损伤GCR变化的影响,从受     

急性肺损伤小鼠NF-κB的表达

目的：研究核转录因子-κB(nuclearflactor-κB，NF-κB)在急性肺损伤的动态改变，以期找到NF-κB在肺损伤中的作用。方法：25只雄性小鼠随机分为5组，正常对照及不同时间点致伤组，致伤组腹腔注射脂多糖形成急性肺损伤模型，采用免疫印迹和免疫组化法检测正常鼠及致伤鼠肺组织中NF-κB的表达。结果：脂多糖注射后1hNF-κB即开始增高，3h达高峰，随后开始下降。结论：NF-κB可能是急性肺损伤发病中的一个关键性因子。     

血管内皮细胞特异性敲除cdc42基因的杂合子小鼠与非基因敲除小鼠在急性肺损伤肺组织病理改变以及肺微血管通透性变化的比较

目的比较血管内皮细胞特异性敲除cdc42基因的杂合子小鼠与非基因敲除小鼠在急性肺损伤肺组织病理改变和肺微血管通透性变化的差异。方法 cdc42flox/flox小鼠与血管内皮细胞特异性表达cre重组酶的小鼠杂交,取其基因型为cdc42flox/+Cre+/-的子代小鼠与cdc42flox/flox小鼠回交,得到基因型分别为Cdc42flox/+Cre+/-、Cdc42flox/+Cre-/-、Cdc42flox/floxCre-/-的小鼠,其中Cdc42flox/+Cre+/-为血管内皮细胞特异性敲除cdc42基因的杂合子小鼠,其余两种同一窝出生的非基因敲除小鼠作为对照组,在各组小鼠气道内滴入LPS,制成急性肺损伤模型,比较各组小鼠在肺组织病理改变、病理评分、肺湿干重比值、肺微血管通透系数等指标变化的差异。结果血管内皮细胞特异性敲除cdc42基因的杂合子小鼠急性肺损伤模型在肺组织病理改变、病理评分、肺湿干重比值、肺微血管通透系数等方面与对照组小鼠比较无明显统计学差异。结论血管内皮细胞特异性敲除cdc42基因杂合子小鼠与非基因敲除小鼠比较,在急性肺损伤中肺组织病理改变和肺微血管通透性的变化无明显差异。     

白三烯制剂对大鼠急性肺损伤的干预作用

目的：探讨白三烯抑制剂齐留通对博莱霉素（BLM）所致肺损伤的保护作用。方法：采用气管内滴注博来霉素致大鼠急性肺损伤模型。并给予齐留通胃管内灌注进行干预，另设生理盐水（NS）对照组。观察大鼠肺系数的改变、肺组织病理学检查及评分以及肺组织免疫组化转化生长因子-β1（TGF—β1）的表达水平。结果：齐留通干预组的肺系数、急性肺损伤程度以及TGF—β1在肺组织中的表达水平均显著低于模型组。结论：齐留通可减轻博莱霉素诱导的大鼠肺损伤程度．并可能通过调节全身炎症反应综合征与代偿性抗炎症反应综合征之间平衡的方式而实现对急性肺损伤的保护。     

肿瘤坏死因子-α与天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

目的：探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）在大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）肺损伤中的作用及意义。方法：大鼠胰腺被膜下均匀注射质量分数5％的牛磺胆酸钠建立ANP动物模型。建模后12、24和48h检测肺组织TNF-α水平和Caspase-3蛋白表达水平。同时观察肺组织病理改变并给予常规病理评分。结果：大鼠肺组织TNF-α水平和Caspase-3蛋白表达水平明显升高（P〈0．01）。肺组织呈现典型炎性损伤性改变，常规病理评分升高（P〈0．01）。结论：TNF-α和Caspase-3可能参与了大鼠ANP肺损伤。其水平的高低与ANP损伤严重程度密切相关。     

3例SARS患者肺组织病理学观察及核转录因子-κB的表达

为观察严重急性呼吸综合征 (SARS)患者肺损伤的病理学特点及核转录因子 κB(NF κB)在肺组织中的表达 ,探讨急性肺损伤时NF κB的活化及其与肺损伤的关系 ,对 3例SARS死亡病例进行尸体解剖 ,HE染色观察肺组织的病理改变 ;采用免疫组织化学SP法检测肺组织NF κBp65活性。结果 :肺部病变主要表现为弥散性肺间质炎症及肺泡损伤 ,肺泡上皮细胞凋亡脱落及肺透明膜形成 ,肺间隔明显增宽 ,以淋巴细胞和单核细胞为主的炎细胞浸润。 3例肺组织NF κBp65检测均为阳性 ,阳性信号表达于肺泡上皮细胞、巨噬细胞及淋巴细胞的胞质及胞核内。结果提示 :SARS患者的肺组织表现为急性肺损伤 ,NF κB在SARS患者肺组织的损伤中起重要的作用     

脂质体前列腺素E对大鼠内毒素性急性肺损伤的影响

目的探讨脂质体前列腺素E对内毒素性急性肺损伤血气分析和肺组织改变的影响。方法将SD大鼠随机分为生理盐水对照组、内毒素脂多糖（LPS）急性肺损伤模型组及脂质体前列腺素E干预组。抽取腹主动脉和下腔静脉血液监测血气分析,计算灌支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞数量及测定总蛋白总量,取肺组织进行病理学观察。结果脂质体前列腺素E显著减少LPS所致BALF中白细胞的数量及总蛋白的浓度（P〈0.01）,降低LPS组大鼠动-静脉血PCO2、PH差值和静脉血乳酸浓度（P〈0.05）,减轻LPS所致的肺组织出血及炎性细胞浸润。结论脂质体前列腺素E可减轻LPS所致的急性肺损伤改变。     

TGF-β1在SARS患者急性肺损伤中的作用

目的 观察SARS急性肺损伤的组织病理学特点并探讨SARS-CoV S蛋白，TGF-β1（转化生长因子β）在SARS急性肺损伤中的作用。方法 利用4例SARS尸检肺组织为研究对象，经常规HE染色及免疫组织化学检测。结果 双肺广泛性实变，呈脱屑性肺泡炎及脱屑性支气管炎改变，肺透明膜形成及小灶性坏死；病变肺组织内肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞及浆液腺腺上皮细胞、单核巨噬细胞SARS-CoV S蛋白及TGF-β1均呈强阳性表达。结论 肺是SARS病毒主要攻击的靶器官，严重的肺部病变是本病死亡的主要原因；TGF-β1协同病毒致病加速急性肺损伤发生。     

内皮细胞敲除TFPI对小鼠急性肺损伤的影响

目的 本研究旨在阐明内皮细胞特异性敲除TFPI对内毒素引起小鼠急性肺损伤的影响和可能机制。方法 采用气管内滴注内毒素建立急性肺损伤小鼠模型。与野生型小鼠比较,评价内皮细胞中的TFPI对急性肺损伤内皮细胞屏障功能和炎性反应的作用,评价内皮细胞敲除TFPI后对炎性信号通路NF-κB通路的影响。结果 内皮细胞敲除TFPI可以明显加重内毒素所引起急性肺损伤的肺部病理改变,增加肺泡灌洗液中蛋白含量及伊文思蓝的渗透,促进肺组织及肺泡灌洗液中炎性因子TNF-α、IL-1β 和 IL-6的分泌。内皮细胞敲除TFPI小鼠与野生型内毒素诱导的急性肺损伤小鼠比较,肺泡灌洗液及肺组织中炎性细胞浸润增加。研究发现内皮细胞TFPI敲除与野生型小鼠相比内毒素诱导后,其炎性信号通路NF-κB激活更加明显。以上研究结果证实内皮细胞TFPI敲除小鼠急性肺损伤后肺组织中的炎性反应和血管渗透性都明显增加。结论 特异性内皮细胞TFPI敲除小鼠,在内毒素诱导的急性肺损伤模型中,通过对NF-κB信号通路的激活来促进肺组织的炎性反应和血管内皮细胞的通透性。     

肺表面活性物质治疗新生儿肺内/肺外源性急性肺损伤研究

目的:探究肺表面活性物质治疗新生儿肺内/肺外源性急性肺损伤的效果。方法:选取2017年1月-2018年4月在本院接受治疗的新生儿肺内/肺外源性急性肺损伤患儿56例作为研究对象,根据不同的病因将其分为内源性组(n=28)和外源性组(n=28)。所有患儿均采用肺表面活性物质治疗,比较两组治疗前后的肺顺应性和氧合指数以及各项治疗指标。结果:治疗前两组肺顺应性数值及氧合指数比较,差异均无统计学意义(P0.05);治疗2、24、48 h后以及拔管前,外源性组肺顺应性数值及氧合指数均明显高于内源性组,差异均有统计学意义(P0.05)。外源性组机械通气、氧疗和住院时间均明显短于内源性组,并发症和病死发生情况均明显低于内源性组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:肺表面活性物质治疗肺外源性急性肺损伤,效果要好于肺内源性急性肺损伤,值得临床推广。     

内毒素急性肺损伤大鼠肺组织survivin表达研究

目的探讨内毒素急性肺损伤大鼠肺组织中survivin表达情况及其与肺损伤发生发展关系。方法建立内毒素急性肺损伤大鼠模型,应用苏木精．伊红染色、免疫组化及RT-PCR方法,观察内毒素急性肺损伤大鼠肺组织中是否存在survivin阳性表达,且在注射内毒素后不同时间：量上表达水平的变化,分析该变化与肺损伤程度的关系。结果与对照组比较,内毒素急性肺损伤大鼠肺组织中存在survivin阳性表达（P〈0．05）。注射内毒素2h时,survivn在肺组织中出现表达,6h表达水平达顶峰,之后逐渐下降趋势,各时间组之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论内毒素急性肺损伤时,survivin在肺组织中存在阳性表达,且表达水平与肺损伤程度密切相关,提示survivin可能参与了内毒素急性肺损伤早期的病理生理过程。     

脂多糖诱导急性肺损伤小鼠肺脏蛋白质电泳图谱分析

目的 蛋白质双向电泳技术观察气管滴注脂多糖诱导急性肺损伤后小鼠肺组织在蛋白质水平上的改变.方法 小鼠气管内滴注脂多糖制备小鼠急性肺损伤模型,48 h后做小鼠肺CT、肺病理切片及测肺湿/干重比用于观察肺损伤程度;并提取总蛋白,进行双向电泳测定,对获取的蛋白图谱进行分析,寻找差异表达的蛋白质.结果 实验组肺CT显示明显炎症表现;病理切片显示小鼠肺组织水肿充血改变明显,肺泡中有大量红细胞和中性粒细胞浸润,肺损伤评分和肺湿/干重比正常组增加;双向电泳结果显示实验组小鼠比正常组小鼠的肺组织总蛋白数增加,蛋白质点数为(100±2),其中有21个表达的蛋白差异点,通过蛋白质谱鉴定和生物信息检索结果显示蛋白质过氧化物酶6在实验组和正常组中有明显差异, 其可能与急性肺损伤的发生相关.结论 通过向小鼠气管内滴注脂多糖可以诱发急性肺损伤,蛋白质双向电泳结果显示实验组小鼠肺组织中蛋白质过氧化物酶6表达的增加,机制还待进一步研究.     

地昔帕明对脂多糖急性肺损伤小鼠核因子-κB表达的影响

目的:观察地昔帕明(DP)对脂多糖(LPS)引起的急性肺损伤小鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)的影响,进一步探讨DP对急性肺损伤的保护机制。方法:昆明小鼠随机分为生理盐水对照组(NS组)、地昔帕明对照组(DP组)、模型组(LPS组)及地昔帕明处理组(DP+LPS组)。腹腔注射LPS建立小鼠急性肺损伤模型。造模6h后光镜下观察肺组织病理学改变,免疫组化检测NF-κB在肺组织的表达和分布。结果:病理切片显示LPS组肺泡和间隙水肿明显,大量中性粒细胞浸润,肺间隔增厚,充血明显,DP处理组病理改变较LPS组有不同程度减轻。免疫组化结果显示LPS组NF-κB p65表达较DP处理组明显升高。结论:DP对LPS急性肺损伤小鼠的保护机制可能抑制与NF-κB信号转导通路,减轻肺组织中性粒细胞浸润程度有关。     

间充质干细胞通过旁分泌抑制肺纤维化的分子机制

肺纤维化是以大量的成纤维细胞聚集、细胞外基质沉积并伴有炎症和损伤而导致正常的肺组织结构改变和功能丧失为特点的一类疾病,急性肺损伤是其常见病因,表现为毛细血管内皮细胞与急性弥散性肺泡上皮细胞的损伤[1-2]。多数患者在急性肺损伤后5～7d出现肺间质和肺泡纤维化,部分患者在10～14 d后表现出严重的肺纤维化、肺泡结构破坏和重建,急性肺损伤继发肺纤维化相关的病死率非常高,但目前除常规对症支持治疗外,尚无延缓或逆转纤维化进展的治疗措施。因此,临床急需治疗急性肺损伤安全有效的药物。