抗LPS-IgY防治烧伤小鼠肠源性内毒素血症的实验研究

目的实验研究抗LPS-IgY对烧伤肠源性内毒素血症的作用。方法标准LPS免疫鸡,采用改良水溶法(WD)从蛋黄中提取特异性抗内毒素IgY。将纯系昆明种小鼠制成30%体表面积(TBSA)Ⅲ°烧伤合并内毒素血症的动物模型,喂服抗LPS-IgY并定期检测血中LPS、二胺氧化酶(DAO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)等相关指标。结果喂服抗LPS-IgY后,能明显降低烧伤小鼠的死亡率;明显降低血浆中LPS、DAO和TNF-α的含量;回肠黏膜的损伤程度明显减轻。结论抗LPS-IgY有效拮抗LPS,减少其移位入血,减轻回肠黏膜的损害,对烧伤小鼠肠源性内毒素血症疗效较好。     

CpG-ODN治疗小鼠膀胱肿瘤的实验研究

目的 探讨含CpG序列的寡脱氧核糖核苷酸(CpG Oligodeoxynucleotide, CpG-ODN)对小鼠膀胱肿瘤的治疗作用.方法 建立BTT739荷瘤小鼠动物模型,随机分为CpG-ODN治疗组和PBS对照组,于肿瘤细胞接种后第7、14天给予治疗,每组分两亚组,分别用于测量瘤重、体积及用于观察荷瘤小鼠存活情况.ELISA法检测小鼠血清中IL-12水平.流式细胞仪检测肿瘤组织中浸润性树突状细胞表面共刺激分子CD80、CD86的表达.结果 第2次治疗7d后,平均瘤重CpG-ODN组为(3.30±0.81)g,对照组为(4.50±0.47)g(P<0.01),平均体积CpG-ODN组为(3.57±0.84)cm3,对照组为(4.84±0.58)cm3(P<0.01),CpG-ODN组荷瘤小鼠生存期长于PBS对照组(P<0.05).治疗组及对照组小鼠血清中IL-12浓度分别为(391.5±28.4)pg/mL和(257.2±13.7)pg/mL(P<0.01).肿瘤组织中浸润性树突状细胞(Tumor infiltrating dendritic cell, TIDC)表面CD80、CD86表达水平治疗组分别为(17.75±3.13)%、(18.72±2.79)%,对照组分别为(11.32±1.18)%(P<0.01)、(12.65±1.22)%(P<0.01).结论 CpG-ODN对膀胱肿瘤荷瘤小鼠具有抑瘤效应和生存期延长作用,其机制主要是通过诱导DC成熟、促进Th1型细胞因子分泌、诱导免疫应答向Th1细胞分化.     

肝细胞生长因子治疗小鼠中毒性肝炎的实验研究

本文研究了肝细胞生长因子粗制品(hHGF-1),及经三步纯化的肝细胞生长因子(hHGF-3)对小鼠中毒性肝炎的治疗作用。两者腹腔注射使中毒性肝炎小鼠的死亡率从对照的60%分别降至11%和0,并能促进肝细胞DNA合成,使升高的血清胆红素和血清谷丙转氨酶在96hr内恢复或接近正常。组织学检查发现hHGF-1和hHGF-3有保护肝细胞、促进肝细胞再生和治疗肝损伤的作用,hHGF静脉注射对中毒性肝炎的治疗作用更明显。我们认为肝细胞生长因子是起上述治疗作用的有效成份,也是胎肝细胞输注治疗重症肝炎的主要有效物质。     

黄芪多糖治疗溃疡性结肠炎小鼠的实验研究

目的初步研究黄芪多糖在溃疡性结肠炎(UC)治疗中的作用,探讨黄芪多糖是否通过影响MDSC发挥作用。方法通过建立DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型,研究黄芪多糖对MDSC的影响,探讨黄芪多糖(APS)在治疗UC中的效果。分析干预前后,APS对UC小鼠体内MDSC数量的影响。从病理组织学讨论黄芪多糖对UC小鼠肠黏膜修复的影响,评价黄芪多糖对溃疡性结肠炎的治疗效应。结果APS对UC模型小鼠干预后,小鼠骨髓中、脾脏中、外周血中MDSC细胞的表达均明显下降,表明APS对MDSC细胞有明显地抑制作用。结论黄芪多糖在溃疡性结肠炎的治疗中具有潜在应用价值,且可能是通过MDSC来实现的。     

IgY治疗烧伤后肠源性白色念珠菌感染的实验研究

目的　为治疗严重烧伤后肠源性白色念珠菌感染寻求新的治疗措施。方法　选用标准白色念珠菌菌株免疫纯系Leghorn鸡 ;采用改良水溶法 (WD)从蛋黄中提取抗体IgY ,双紫外光测定抗体含量 ,通过SDS PAGE电泳检测抗体纯度 ,Wes tern blotting免疫印迹法测定该抗体来源 ,ELISA法检测热处理后IgY的活性 ,采用纯系SPF小鼠烧伤 (2 5 %Ⅲ度烧伤面积 )肠源性白色念珠菌感染的模型 ,特异IgY治疗并与对照组比较。结果　IgY的效价高 (1∶12 80 0 )、特异性强和理化性质稳定 ;喂服IgY治疗烧伤小鼠后 ,明显抑制小鼠肠道内白色念珠菌的黏附、生长 ;明显降低了烧伤小鼠血浆中二胺氧化酶 (DAO)和肿瘤坏死因子 (TNF α)的释放 ,维护肠黏膜上皮的完整 ,减轻了白色念珠菌对小肠上皮细胞的损害 ;促进肠淋巴细胞分泌IgA ;恢复肠道局部免疫功能。结论　特异IgY效价高、特异性强、理化性质稳定 ,治疗烧伤小鼠肠源性白色念珠菌感染疗效显著     

消银汤治疗银屑病小鼠模型的实验研究

目的:通过检测消银汤对银屑病小鼠增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)和血小板内皮细胞黏附分子(CD31)的影响,探讨消银汤对银屑病小鼠模型的治疗作用。方法:BALB/c雌性小鼠50只,随机分为对照组、模型组、消银汤高、中和低剂量组,每组10只。实验前1 d全部小鼠背部皮肤去毛(3 cm2);次日模型组和消银汤各剂量组小鼠背部去毛处皮肤均匀涂抹10%十二烷基硫酸钠(SDS) 2 ml,1次/d,共7 d制备模型;对照组小鼠给予蒸馏水同样涂抹7 d。消银汤组采用灌胃方式给予17. 3、34. 5和69. 0 g/kg的消银汤,每天2次,连续14 d,对照组及模型组均每日给予等剂量的生理盐水,然后处死取血液和皮肤组织。采用苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠皮肤组织的病理改变;采用实时荧光定量PCR法和免疫组织化学方法检测小鼠血液和皮肤组织中PCNA、VEGF和CD31的mRNA水平及蛋白的阳性表达强度。结果:HE染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠皮肤表皮明显增厚,消银汤各剂量组小鼠皮肤表皮略增厚;模型组小鼠血液及皮肤组织中PCNA、VEGF和CD31的mRNA水平及蛋白的阳性表达强度均显著升高,差异有统计学意义(P0. 05);与模型组比较,消银汤组小鼠皮肤组织中PCNA、VEGF和CD31的mRNA水平及蛋白的阳性表达强度均明显降低有统计学意义(P0. 05)。结论:消银汤能抑制银屑病小鼠表皮细胞增殖,明显改善银屑病小鼠的临床症状,可能与下调皮损处PCNA、VEGF和CD31的mRNA及蛋白表达水平有关。     

HSV-TK/GCV系统治疗小鼠乳腺癌的实验研究

我们从体内外两方面研究单纯疱疹病毒胸苷激酶基因联合前药ＧＣＶ系统（ＨＳＶＴＫ／ＧＣＶ）对小鼠乳腺癌的作用,并初步探讨引起细胞死亡的机理。一、材料与方法１－细胞培养和实验动物：小鼠乳腺癌细胞系４Ｔ１（密执安州大学Ｄｒ．Ｍｉｌｌｅｒ惠赠）,常规培养在Ｄｕｌｂａｃｃｏ’ｓＭｏｄｉｆｉｅｄＥａｇｌｅ（ＤＭＥ,美国Ｂｉｏｆｌｕｉｄ公司）培养液内,添加１０％胎牛血清,青、链霉素,谷胺酰胺（Ｂｉｏｆｌｕｉｄ公司）。６～８周雌性Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠用于实验。２－逆病毒载体及基因转导：ＳＴＫ逆病毒载体来自ＬＮＬ６载…     

阴道栓剂治疗阴道毛滴虫感染小鼠的实验研究

本实验以小白鼠为实验动物，作阴道毛病虫感染的动物模型，对阴道栓剂抗鼠体内阴道毛滴虫疗效进行了研究，实验分：配伍栓剂组、甲硝唑原粉组、环丙沙星原粉组和１％ＳＣＣ对照组。感染后２４ｈ采用一次性灌胃给药，１０ｄ后解剖小鼠，观察脓肿形成及愈合，镜检腹水和脓液。结果显示：栓剂治疗组滴虫清除率为５０％和９０％时，其剂量低于甲硝唑原份治疗剂量，两者比较具有显著性差异（Ｐ＜０．０５），而栓剂中杀淋球菌药环丙沙星原粉单独使用不能杀灭阴道毛滴虫。可见，甲硝唑与环丙沙星联合应用产生了一定的协同作用，减少了甲硝唑原粉杀滴虫的用量。     

生物胶原纤维刘氏烧伤敷料实验研究

目的了解生物胶原纤维刘氏烧伤敷料的性能。方法对生物胶原纤维刘氏烧伤敷料进行生物及物理性测定,包括抗拉力试验、水分蒸发试验、黏附试验、细菌过滤、抗菌试验、皮肤毒性及致敏试验和电镜观察。结果生物胶原纤维刘氏烧伤敷料的抗拉力试验平均拉力为（73．54±11．17）N,水分蒸发试验平均水分丢失为30．884．60g·m^-2·h^-1,黏附试验平均黏附力为（88．16±36．13）g／cm^2,经刘氏烧伤敷料过滤含菌液及刘氏烧伤敷料覆盖下含菌培养皿区均无菌生长,皮肤刺激及致敏试验两者均为阴性,电镜扫描观察该敷料为胶原纤维网状三维纳米结构。结论生物胶原纤维刘氏烧伤敷料是一种无细胞胶原纤维三维纳米结构密闭性敷料,能阻止细菌通过并有抗菌抑菌作用,有良好密闭性能和通透性,抗拉力强和黏附力好。无毒无菌胶原敷料,是理想烧伤创面真皮替代覆盖物。     

用心康口服液治疗小鼠急性病毒性心肌炎的实验研究

报告了中药复方心康口服液抗病毒保护心肌的作用。研究观察了药物对小鼠感染柯萨奇Ｂ３病毒后的防治效果。心肌细胞学检查结果提示，治疗组小鼠心肌细胞坏死及炎性细胞浸润明显低于对照组。这一结果在接毒前给药组小鼠效果更为显著。     

永生化人肝细胞治疗小鼠急性肝衰竭的实验研究

目的评价微载体培养的永生化人肝细胞(immortalized human hepatocytes,IHH)对裸鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)的治疗作用。方法采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)建立裸鼠ALF模型,将微载体培养的IHH注射于裸鼠腹腔内进行腹膜透析治疗,并设未治疗组和空微载体治疗组,比较各组动物的肝功能损伤指标,肝组织病理和动物生存率。结果腹腔注射CCl4后24h,所有动物的转氨酶升高达正常值10倍以上,未治疗组和空微载体治疗组动物48h内全部死亡,肝组织检查发现肝细胞广泛坏死;而采用IHH微载体治疗组,48h的动物生存率为83.3%,持续14d后转为长期存活。存活的动物转氨酶降至正常水平,肝组织检查显示肝细胞坏死显著减少,免疫组织化学染色显示腹腔微载体上肝细胞仍存活,并表达人肝细胞特异蛋白α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)。结论采用微载体培养的IHH腹腔透析治疗小鼠ALF是有效的,表明IHH适合作为生物人工肝的细胞材料。     

重组腺病毒载体mIL-12治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

目的： 观察重组腺病毒载体AdmIL-12对小鼠黑色素瘤的治疗效应.方法： 皮下注射B16黑色素瘤细胞给C57BL/6小鼠建立荷瘤模型.于瘤内注射重组腺病毒载体AdmIL-12治疗, 观察皮下肿瘤的生长及荷瘤小鼠的存活期.采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测荷瘤小鼠脾细胞的杀伤活性.结果： 重组腺病毒载体AdmIL-12治疗后, 能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长, 明显延长荷瘤小鼠的存活时间, 增强荷瘤小鼠脾细胞的杀伤活性.结论： 重组腺病毒载体AdmIL-12对小鼠黑色素瘤有显著的治疗效应.     

巴戟天对小鼠抗疲劳的实验研究

巴戟天对小鼠抗疲劳的实验研究锦州医学院病理生理学教研究室（锦州１２１００１）夏桂兰赵宝东赵春玉巴戟天始载于《神农本草经》，作为补益药列为上品。据记载可补元气、安五脏、强筋骨、壮腰身，为温肾助阳的中草药。本文通过小鼠持续游泳耐疲劳等实验，研究巴戟...     

PGLC对小鼠致畸实验研究

观察了乙交酯-L-丙交酯-ε-己内酯三元无规共聚物材料(PGLC)对昆明种小鼠孕期和胎鼠的影响。结果表明，PGLCA组(1000mg／kg)、B组(500mg／kg)、C组(250mg／kg)各组孕鼠和胎鼠各项指标与阴性对照组(c^-，PBS液每日0．5ml／鼠)差异无显性(P＞0．05)，与阳性对照组(c^ ，CP，14mg／kg)差异有高度显性(P＜0．01)。PGLC剂量在1000～250mg／kg范围内对小鼠生殖能力和胎鼠发育无明显影响。PGLC作为植入体内的长效药物载体无生殖毒性作用。     

丹参改善烧伤后肠道缺血的实验研究

目的探讨丹参改善烧伤后肠道缺血的作用及其机制.方法Wistar大鼠88只,分为3组,正常组8只,烫伤组40只,治疗组40只.烫伤组和治疗组制成30%深Ⅱ度烫伤模型,伤后均以林格氏液复苏,治疗组用丹参注射液腹腔注射治疗,8 h 1次,烫伤组以等容积生理盐水腹腔注射作对照.分别于伤后3、6、12、24、48 h检测大鼠肠黏膜血流量(IMBF)、血浆内皮素(ET)及一氧化氮(NO)含量.结果(1)伤后IMBF显著低于伤前(P＜0.01),但治疗组IMBF下降幅度明显低于烫伤组(P＜0.05,P＜0.01);(2)伤后ET、NO均升高(P＜0.01),但治疗组与烫伤组相比较,ET含量降低、NO含量升高(P＜0.05,P＜0.01),ET/NO比值与IMBF行相关性分析呈显著负相关(r=-0.89,P＜0.01).结论丹参能显著改善烧伤后肠道缺血、增加血液灌流,其机制与调节ET、NO含量进而优化ET/NO比值有关.     

黄芪和山药配伍治疗MLD-STZ诱导糖尿病小鼠的实验研究

目的探讨黄芪、山药配伍对小剂量多次链脲佐菌素（MLD—STZ）诱导糖尿病小鼠的治疗作用及相应机制。方法以低剂量链脲佐菌素多次腹腔注射,建立糖尿病小鼠模型,将制备好模型小鼠分为山药组（1．4g·kg^-1·d^-1）、黄芪组（2．8g·kg^-1·d^-1）、配伍组（山药加黄芪4．2g·kg^-1·d^-1）及模型组（等量蒸馏水进行灌胃）,同时设立正常对照组,每周测定小鼠空腹血糖及体质量,4周后处死小鼠。形态学方法观察胰岛病理结构变化,TUNEL检测胰岛细胞凋亡,化学比色法测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）的含量;MTF测定脾细胞对刀豆蛋白A（ConA）的增殖反应,以酶联免疫吸附法（ELISA）检测脾细胞白细胞介素-4（IL-4）和γ-干扰素（IFN-γ）的分泌。结果与模型组比较,各药物处理组对血糖的升高均有显著的抑制作用,对体质量的降低也有改善作用。胰岛病理结构显示各药物处理组均能改善胰岛病理损伤,对胰岛细胞凋亡有保护作用,其中配伍组效果明显。各药物处理组对NO均有明显的抑制作用;山药组、配伍组明显上调SOD表达;黄芪组、配伍组脾细胞对ConA的增殖能力明显减弱,同时Th1／Th2分泌因子比值下调。结论黄芪、山药配伍能有效防治糖尿病,其机制是通过抗氧化及免疫调节共同发挥作用。     

三种不同β受体阻滞剂治疗小鼠血管瘤的实验研究

目的:比较三种不同β受体阻滞剂对小鼠血管瘤(EOMA细胞)细胞体内外的影响,初步探讨普萘洛尔对小鼠血管瘤的治疗作用及可能机制,为β受体阻滞剂治疗婴幼儿型血管瘤提供参考。方法:体外培养EOMA细胞,用不同浓度美托洛尔、普萘洛尔、布托沙明作用EOMA细胞,作用24 h。应用MTT法检测细胞存活率、吖啶橙染色检测细胞凋亡情况,观察美托洛尔、普萘洛尔、布托沙明对EOMA细胞体外增殖和凋亡的影响。体内实验将EOMA细胞移植裸鼠,待肿瘤体积生长至100 mm3,将动物随机分为4组,分别为对照组、美托洛尔组、布托沙明组和普萘洛尔组,药物组按2 mg/(kg·d)灌胃给药,对照组给予等体积的生理盐水(NS),每两天测量肿瘤体积大小。实验结束时收集血清,酶联免疫吸附实验检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达水平。结果:体外实验显示,普萘洛尔作用24 h后,EOMA细胞存活率随剂量增加逐渐下降,50μmol/L时有显著差异(P0.05),药物增加至800μmol/L,细胞存活率接近10%。吖啶橙染色显示50μmol/L时凋亡细胞显著增多。美托洛尔、布托沙明作用24 h后,100μmol/L时细胞存活率与对照组相比有显著差异(P0.05),800μmol/L时细胞存活率下降至20%,明显高于相同浓度的普萘洛尔组,存在显著性差异(P0.05)。吖啶橙染色亦出现相似的规律。体内实验显示,实验结束时美托洛尔、布托沙明小鼠和普萘洛尔药物组的肿瘤体积分别为(1 642.8±89.3)、(1 529.3±119.1)和(752.7±46.5)mm3,与对照组小鼠的肿瘤体积(2 023.3±123.07)mm3相比明显减少(P0.001)。美托洛尔、布托沙明小鼠和普萘洛尔药物组血清中VEGF分别水平为(606.5±105.8)pg/ml、(534.3±243.2)pg/ml和(420.1±123.7)pg/ml,明显低于PBS对照组的[(825.8±145.7)pg/ml,(P0.05)],TNF-α结果依次是(301.3±62.3)pg/ml、(305.1±53.8)pg/ml和(288.8±59.5)pg/ml,明显低于正常对照组[(444±100.4)pg/ml,(P0.05)]。结论:三种β受体阻滞剂均可在体外有效抑制小鼠血管瘤EOMA细胞的增殖并促进细胞凋亡普萘洛尔的这一作用较布托沙明和美托洛尔明显。三种β受体阻滞剂不同程度的抑制小鼠血管瘤的生长,其中普萘洛尔的抑制作用明显强于美托洛尔和布托沙明。三种β受体阻滞剂均可降低体内VEGF和TNF-α的水平。提示普萘洛尔对小鼠血管瘤的作用可能与β1和β2受体协同作用有关,其治疗血管瘤的机制可能与VEGF和TNF-α有关。     

紫杉醇亚微球制备及治疗小鼠乳腺癌的实验研究

目的观察紫杉醇亚微球对小鼠乳腺癌的治疗效果。方法以可生物降解材料聚己内酯（poly-caprolacton,PCL）为原料,采用溶剂替代法制备载紫杉醇亚微球。并对亚微球的粒径、形态、紫杉醇含量、体外释放等进行了测定。将TA2系实验小鼠随机分为空白对照组、紫素阳性对照组、紫杉醇亚微球低剂量组、紫杉醇亚微球中剂量组及紫杉醇亚微球高剂量组。实验时分别将生理盐水、紫素、紫杉醇亚微球注射到小鼠乳腺癌部位,通过测量治疗前后肿瘤大小,观察紫杉醇亚微球治疗实验小鼠乳腺癌的效果。结果制备的紫杉醇亚微球的平均粒径约为566nm,包埋率为93.25%,亚微球中紫杉醇含量约19.0536%。可在体外维持恒定释放约4周。药物注射2周观察抑瘤率：紫杉醇亚微球中剂量组为70.21%,紫杉醇亚微球高剂量组为84.16%,与紫素阳性对照组（48.96%）比较差异有显著统计学意义（P〈0.001）。紫杉醇亚微球低剂量组为45.47%,与紫素阳性对照组相比,两者差异亦有显著统计学意义（P〈0.001）。结论紫杉醇亚微球（中剂量组和高剂量组）对小鼠乳腺癌的抑瘤率高于紫素。     

微囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的实验研究

观察微囊化和未囊化大鼠胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠的疗效。选用SD大鼠经胆总管原位灌注胶原酶液,分离消化胰腺组织,用淋巴细胞分离液(Histopaque-1077)纯化胰岛细胞,将微囊化和未囊化大鼠胰岛细胞移植于糖尿病小鼠腹腔。分离的胰岛细胞对刺激反应良好,微囊化和未囊化胰岛细胞移植后均可纠正糖尿病小鼠的高血糖状态,但未囊化胰岛细胞移植组只能维持血糖正常2~3d,而微囊化胰岛细胞移植组可持续降低血糖30d以上。微囊化胰岛细胞移植治疗糖尿病小鼠具有良好的效果,微囊具有较好的免疫隔离作用。