变应性鼻炎对小鼠鼻黏膜核因子-κB p65和糖皮质激素受体表达的影响

目的探讨变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）小鼠鼻黏膜核因子-κB（nuclear factor kappat B,NF-κB）p65和糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的表达,进一步了解NF—κB p65和GR在AR发病机制中的作用。方法清洁级C57BL6／J小鼠20只,随机分为AR组和对照组,每组10只。AR组用10％卵清蛋白（ovalbumin,OVA）200μl腹腔注射,6％OVA鼻腔局部激发建立AR模型。取鼻面骨,石蜡包埋,连续切片,行HE染色。分别运用免疫组化SABC法和SP法染色,观察鼻黏膜中NF-κB p65和GR的表达情况。结果AR组中10只动物均建模成功,鼻部AR典型症状明显;对照组无明显变化。①形态学改变：对照组鼻黏膜无明显炎症改变;AR组黏膜则显示不同程度水肿,黏膜下嗜酸粒细胞（eosinophils,Eos）、淋巴细胞和单核细胞浸润。②黏膜NF—κB p65表达：NF-κB p65主要表达于上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆,偶见胞核。AR组中上皮细胞染色平均光密度值（0．40±0．12）强于对照组（0．23±0．05;P〈0．05）。③GR表达：2组中均有GR表达,主要表达于鼻黏膜上皮、腺上皮及血管内皮细胞的胞核或胞质。AR组中GR的平均光密度值（0．20±0．04）低于对照组（0．36±0．11;P〈0．05）。结论 NF-±κB p65在AR黏膜中表达增强,而GR的表达下降,提示两者的失衡在AR的发病中发挥重要作用。     

变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中血管细胞黏附因子-1与Eotaxin的表达及临床意义

摘要：目的分析血管细胞黏附因子 1(vasular cell adhesion molecule 1, VCAM 1)与Eotaxin在变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中的表达及临床意义。方法SD健康大鼠40只随机分为2组:卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏组和生理盐水(sodium chloride,SC) 组。以卵清蛋白致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型,HE染色和甲苯胺蓝染色观察鼻黏膜组织病理学变化,免疫组织化学SP法测定鼻黏膜组织中VCAM 1、Eotaxin的表达。结果 OVA 致敏组可见鼻黏膜高度肿胀,大量炎性细胞浸润,SC组病理学未见异常表现;OVA 致敏组与SC组比较,VCAM 1和Eotaxin表达强度差异均具有统计学意义(P均<0.01); OVA 致敏组大鼠鼻黏膜组织中VCAM 1表达强度与Eotaxin呈正相关(r=0.886,P<0.01)。结论Eotaxin及VCAM 1参与了变应性鼻炎的发病过程,且二者有协同作用。     

细胞间黏附分子-1和白细胞介素-6在变应性鼻炎鼻和支气管黏膜中的表达及意义

目的 :探讨细胞间黏附分子 1(ICAM 1)、白细胞介素 6 (IL 6 )在变应性鼻炎鼻及支气管黏膜中的表达及意义。方法 :采用免疫组织化学方法检测ICAM 1、IL 6在 2 8例变应性鼻炎患者 (鼻炎组 )及 12例健康志愿者 (对照组 )的鼻、支气管黏膜中的表达。结果 :ICAM 1在鼻炎组鼻和支气管黏膜中的表达率分别为 10 0 .0 0 %和92 .86 % ,其差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;对照组鼻、支气管黏膜中ICAM 1表达率 (分别为 6 6 .6 7%和 5 8.33% )分别与鼻炎组 (分别为 10 0 .0 0 %和 92 .86 % )比较 ,差异均有统计学意义 (分别P <0 .0 1和P <0 .0 5 )。IL 6在鼻炎组鼻、支气管黏膜中的表达率分别为 10 0 .0 0 %、82 .14 % ,其差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;对照组鼻、支气管黏膜中IL 6表达率均为 4 1.6 7% ,分别与鼻炎组 (分别为 10 0 .0 0 %和 82 .14 % )比较 ,差异均有统计学意义 (分别P<0 .0 1和P <0 .0 5 )。结论 :ICAM 1、IL 6是呼吸道变态反应性炎症中的重要细胞因子 ,上、下呼吸道变应性炎症密切相关 ;同时治疗上、下呼吸道炎症性疾病 ,才能取得更好的治疗效果。     

变应性鼻炎鼻黏膜组织中NF-κB p50表达及其与DNA结合活性的研究

目的:探讨核转录因子-κB亚单位p50(NF-κB p50)在季节性变应性鼻黏膜中的表达及活性状态.方法:采用免疫组织化学方法检测16例季节性变应性鼻炎(SAR组)下鼻甲黏膜组织中NF-κB p50的表达,其中6例为非发作期患者,10例为发作期患者;并与10例鼻中隔偏曲患者下鼻甲黏膜进行对照.采用电泳迁移率滞后分析(EMSA)检测鼻黏膜组织中核蛋白提取物与特异性NF-κB探针的结合活性.结果:NF-κB p50在SAR组及对照组中均有表达,p50阳性表达主要分布在2组鼻黏膜的上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞的胞质和部分胞核中;SAR组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率发作期是(41.83 ±4.43)%,非发作期是(37.19±3.93)%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率仅(8.89±1.32)%.SAR组(包括发作期和非发作期)与对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率间比较差异有统计学意义(P<0.01);SAR组NF-κB的DNA结合的32P标记电泳带密度扫描值为32.14±8.73,与对照组(11.12±3.42)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在对照组鼻黏膜中保持低水平的表达,在SAR鼻黏膜中表达显著增高,且其与DNA-蛋白结合活性增高,提示NF-κB p50可能参与维持鼻黏膜的生理功能,并在SAR鼻黏膜持续慢性炎症反应中起重要作用.     

黏附分子在实验性变应性鼻炎鼻黏膜中的表达

变应性鼻炎迟发相反应阶段是以嗜酸粒细胞为代表的大量的炎性细胞的浸润而导致的慢性炎症，血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)在嗜酸粒细胞等炎性细胞的黏附、浸润到黏膜炎症区域起着重要作用。本研究观察实验性变应性鼻炎鼻黏膜中黏附分子的表达。     

细胞黏附分子及一氧化氮合酶在变应性鼻炎鼻黏膜中的表达

目的:对细胞黏附分子(CAM)及一氧化氮合酶(NOS)进行原位观察,探讨它们在变应性鼻炎(AR)发病中的作用。方法:采用链霉卵白素-生物素复合体(SABC)法,对AR患者及对照组手术切除的下鼻甲黏膜内细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管CAM-1(VCAM-1)和淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1),以及神经型NOS(nNOS)、诱导型NOS(iNOS)和内皮细胞型NOS(eNOS)进行原位检测。结果:AR下鼻甲黏膜内3种CAM表达的阳性细胞数ICAM-1为[(14.4±2.2)个/HP(×400),以下同],LFA-1为(17.2±3.3)个/HP,VCAM-1为(11.5±2.7)个/HP;对照组下鼻甲黏膜内3种CAM表达的阳性细胞数ICAM-1为(8.7±1.8)个/HP,LFA-1为(10.3±2.1)个/HP,VCAM-1为(6.9±1.8)个/HP。t值分别是11.57,10.02和8.07(均P<0.01)。AR及对照组下鼻甲黏膜内nNOS表达的阳性细胞数分别为(9.4±1.7)个/HP和(4.7±1.3)个/HP,t值为12.62,(P<0.01);iNOS表达的阳性细胞数分别为(27.5±3.2)个/HP和(4.3±1.7)个/HP,t值为36.03(P<0.01)。eNOS表达的阳性细胞数分别为(6.5±2.1)个/HP,(6.2±1.9)个/HP,t值为0.62(P>0.05)。结论:CAM在黏膜上皮、腺上皮、血管内皮以及黏膜下的各种炎性细胞等的表达,说明CAM参与AR的发生、发展。nNOS和iNOS在AR的发病过程中可能起重要作用。     

变应性鼻炎对小鼠鼻黏膜核因子-кB p65和糖皮质激素受体表达的影响

目的 探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠鼻黏膜核因子-кB(nuclear factor kappa B,NF-кB)p65和糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的表达,进一步了解NF-кB p65和GR在AR发病机制中的作用.方法清洁级C57BL6/J小鼠20只,随机分为AR组和对照组,每组10只.AR组用10%卵清蛋白(ovalbumin,OVA)200μl腹腔注射,6%OVA鼻腔局部激发建立AR模型.取鼻面骨,石蜡包埋,连续切片,行HE染色.分别运用免疫组化SABC法和SP法染色,观察鼻黏膜中NF-кB p65和GR的表达情况.结果 AR组中10只动物均建模成功,鼻部AR典型症状明显;对照组无明显变化.①形态学改变:对照组鼻黏膜无明显炎症改变;AR组黏膜则显示不同程度水肿,黏膜下嗜酸粒细胞(eosinophils,Eos)、淋巴细胞和单核细胞浸润.②黏膜NF-кB p65表达:NF-кB p65主要表达于上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆,偶见胞核.AR组中上皮细胞染色平均光密度值(0.40+0.12)强于对照组(0.23±0.05;P<0.05).③GR表达:2组中均有GR表达,主要表达于鼻黏膜上皮、腺上皮及血管内皮细胞的胞核或胞质.AR组中GR的平均光密度值(0.20±0.04)低于对照组(0.36±0.11;P<0.05).结论 NF-кBp65在AR黏膜中表达增强,而GR的表达下降,提示两者的失衡在AR的发病中发挥重要作用.     

变应性鼻炎整合素的表达及其与肥大细胞的关系

变应性鼻炎(allergic rhinitis，AR)属于Ⅰ型超敏反应，肥大细胞是其发病的主要启动细胞之一。有学者认为肥大细胞的迁移、聚集、定位很可能受到整合素α4β1及其配体血管细胞间黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule，VCAM-1)的影响。本研究目的在于探讨AR患者鼻黏膜中整合素α4β1及其配体VCAM-1的表达及其与肥大细胞的关系。     

NF-κB和IL-5在豚鼠变应性鼻炎脾脏组织表达及意义

目的 探讨实验性豚鼠变应性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）核转录因子一出（NuclearfactorkappaB，NF-κB）和白介素-5（Intefleukin-5，IL-5）的表达及相互关系，分析其在豚鼠AR发病中的作用。方法用免疫组化Elivision方法半定量测定脾脏组织NF-κB（亚单位P65）的活性细胞表达及双抗体夹心酶联免疫吸附技术（Enzyme labeledimmunosorbent assay，ELISA）定量测定IL-5的表达；比较豚鼠AR模型组及与正常组的差异。结果豚鼠AR模型组NF-κB P65阳性细胞比例和IL-5、嗜酸粒细胞（Eosinophil，Eos）明显高于正常组（P〈0．05），且NF-κB P65阳性细胞比例与IL-5的表达呈正相关（r=0．85，P〈0．05）。结论 核转录因子 -κB通过促进豚鼠AR发病过程中Th2类细胞因子IL-5的表达，进而增多鼻黏膜Eos的浸润而加重豚鼠AR症状。     

NF—κB及其相关分子在变应性鼻炎中的作用

变应性鼻炎的发病率近年来呈上升趋势,严重影响人类的健康与生活质量。随着基础和临床免疫学的进展,变应性鼻炎的发病不仅仅是传统观念所认为的IgE介导的鼻黏膜I型变态反应,而且是易感个体接触致敏变应原后导致的包含IgE介导的炎症递质的释放和多种免疫活性细胞、细胞因子参与的鼻黏膜慢性炎症性疾病。Th1／Th2细胞因子网络的失衡,引发了以鼻腔黏膜Th2免疫反应为主的变态炎症反应,后者启动了相关黏附分子（如ICAM-1）、趋化因子（如eotaxin）等的表达,促使炎症细胞如肥大细胞和嗜酸粒细胞向鼻黏膜移行、聚集,     

神经生长因子mRNA在变应性鼻炎病人鼻黏膜中的表达

目的探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)mRNA在变应性鼻炎病人鼻黏膜中的表达。方法采用RT-PCR方法对30例变应性鼻炎病人鼻黏膜组织中NGF mRNA的表达进行检测,以10例正常鼻黏膜组织作对照。结果变应性鼻炎组的NGF/GAPDH(内参照)为0.42±0.04,对照组的NGF/GAPDH(内参照)为0.21±0.01,两组差异有统计学意义(P<0.001)。结论NGF与变应性鼻炎的发生有着密切联系。     

PKC-NF-κB信号传导系统对变应性鼻炎Th2细胞因子IL-4及IL-5表达的调控

目的:探讨PKC-NF-κB信号传导系统在调节变应性鼻炎(AR)T淋巴细胞的活化及IL-4、IL-5表达及其在发病过程中的作用.方法:24例急性发作期AR患者和24例健康成人为研究对象,分别从每位受试者的外周血中分离出T淋巴细胞并分成3组进行培养;第1组为空白对照(正常空白对照组及 AR空白对照组);第2组加入终浓度为20 nmol/L的PKC激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(PMA)(加PMA 正常组及加PMA AR组);第3组同时应用PKC激动剂PMA和终浓度为100 μmol/L的NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC) (加PMA和PDTC 正常组及加PMA和PDTC AR组).将培养的T淋巴细胞涂片,用免疫组织化学染色方法检测NF-κB的表达,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中的IL-4及IL-5含量.结果:加PMA AR组T淋巴细胞NF-κB活化细胞百分比、培养上清液中的IL-4、IL-5与正常空白对照组及AR空白对照组比较,差异有统计学意义(均P<0.01);与加PMA正常组及加PMA和PDTC正常组T淋巴细胞比较,差异有统计学意义(均P<0.01);与加PMA和PDTC AR组T淋巴细胞比较,差异有统计学意义(P<0.01).同时,加PMA和PDTC AR组T淋巴细胞NF-κB活化细胞百分比、培养上清液中的IL-4、IL-5与加PMA AR组、AR空白对照组、正常空白对照、加入PMA正常组、加入PMA和PDTC正常组比较,差异有统计学意义(均P<0.01).T淋巴细胞NF-κB活化细胞的百分比与培养上清中IL-4和IL-5含量呈显著正相关性(r=0.88、0.85,均P<0.01).结论:T淋巴细胞PKC活化后使IL-4和IL-5的表达增加的生物信号能通过激活NF-κB来实现,T淋巴细胞的PKC-NF-κB信号传导系统可能是变应性鼻炎发病机制中的重要环节之一.     

白细胞介素5和核因子κB在变应性鼻炎动物模型骨髓中的表达

目的探讨白细胞介素5(interleukin-5,IL-5)和核因子κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)在变应性鼻炎动物模型骨髓中表达的意义。方法采用6-8周雄性SD大鼠,随机分成实验组10只和对照组10只,以卵清蛋白致敏激发制成变应性鼻炎模型,免疫组化染色检测骨髓中IL-5和NF-κB的表达。结果大鼠变应性鼻炎模型骨髓涂片中IL-5阳性细胞和NF-κB比例都显著高于对照组(P<0.05),从形态上判断IL-5阳性细胞和NF-κB阳性细胞是嗜酸性粒细胞,IL-5阳性细胞比例和NF-κB阳性细胞比例呈显著正相关(r=0.79,P<0.01)。结论大鼠变应性鼻炎动物模型骨髓原位嗜酸性粒细胞能产生IL-5和NF-κB,可能调节骨髓中嗜酸性粒细胞的增殖和分化。     

血红素氧合酶1在变应性鼻炎豚鼠模型的鼻黏膜中的表达

目的:通过制备豚鼠变应性鼻炎动物模型,观察并分析内源性一氧化碳(CO)的限速酶血红素氧合酶1(HO1)在豚鼠鼻黏膜组织中的表达。方法:分别以卵清蛋白致敏制备豚鼠变应性鼻炎动物模型为致敏组及以地塞米松处理作为治疗组,以生理盐水处理作为正常对照组,取豚鼠鼻黏膜,苏木精伊红染色观察炎性细胞浸润,免疫组织化学染色方法观察HO1在各组豚鼠的鼻黏膜组织中的表达情况。结果:在黏膜组织中,炎性细胞的浸润与炎症程度有关,炎性细胞以嗜酸粒细胞(EOS)浸润明显,HO1主要表达在黏膜腺上皮细胞的胞质中,3组中,致敏组鼻黏膜HO1表达明显增强(P<0.01),黏膜下EOS浸润明显(P<0.01),激素治疗组HO1的表达弱于致敏组(P<0.01),黏膜下EOS浸润程度减轻,但强于对照组(P<0.01),组间差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:HO1主要表达于鼻黏膜的腺上皮细胞质内,豚鼠变应性鼻炎模型中HO1的表达与炎症的严重程度相关,提示内源性CO可能参与了变应性鼻炎的炎症过程。     

内毒素刺激前后鼻黏膜上皮细胞中Toll样受体4 mRNA及核因子κB p50亚型mRNA的表达及意义

目的探讨内毒素(即脂多糖,lipopolysaccharide,LPS)刺激前后 Toll 样受体4(Tolllike receptor 4,TLR4)mRNA 和核因子 kB(nuclear factor kB,NF-kB)p50亚型 mRNA 在正常鼻黏膜上皮细胞中的表达及意义。方法在15例成人鼻中隔偏曲患者(无鼻-鼻窦炎)矫正术中,取正常中鼻甲外侧黏膜组织各2份行组织外植块培养,其中15份加 LPS 刺激培养为 LPS 组,另外为培养组。应用 HE 染色光镜下观察鼻黏膜组织上皮细胞的病理形态学改变;应用核酸分子原位杂交技术检测离体培养正常鼻黏膜组织上皮细胞中 TLR4 mRNA 和 NF-kB p50 mRNA 的表达情况。结果①LPS刺激后,光镜下见正常鼻黏膜上皮细胞纤毛有粘连成束、胞体增大的病理形态学改变;②LPS 组 TLR4mRNA 表达明显高于培养组;LPS 组表达阳性区平均吸光度为1.283±0.027,培养组为0.538±0.038,二组间差异有统计学意义(t=1.761,P<0.05);③NF-kB p50 mRNA 在 LPS 组均出现阳性表达,而培养组阳性率仅为26.7%。LPS 组明显高表达于培养组,且以胞核表达为主,LPS 组表达阳性区平均吸光度为1.668±0.037;培养组为0.372±0.052,二组间差异有统计学意义(t=2.624,P<0.01)。结论 LPS 能通过 TLR4活化 NF-kB p50,进而激活正常鼻黏膜上皮细胞。这可能在 LPS 对鼻黏膜上皮细胞激活和损伤效应中具有一定的作用。     

雷公藤红素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中NF-κB和Eotaxin表达的影响

目的:观察雷公藤红素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中核因子-κB(NF-κB)和Eotaxin的作用,以及它们之间的关系,从而探讨雷公藤红素治疗变应性鼻炎的可能机制。方法:健康SD大鼠40只随机分为4组:卵清蛋白(OVA)致敏组,雷公藤红素处理组,地塞米松处理组和生理盐水组。以OVA致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型,苏木精-伊红染色观察鼻黏膜组织病理学变化,免疫组织化学SP法测定鼻黏膜组织中NF-κB、Eotaxin的表达。结果:生理盐水组病理学未见异常表现;雷公藤红素处理组和地塞米松处理组可见鼻黏膜轻度肿胀,少量炎性细胞浸润;OVA致敏组可见鼻黏膜高度肿胀,大量炎性细胞浸润。OVA致敏组与其他3组比较,NF-κB和Eotaxin表达强度差异均有统计学意义(均P<0.01);雷公藤红素处理组和地塞米松处理组间差异无统计学意义(P>0.05);OVA致敏组大鼠鼻黏膜组织中NF-κB的表达强度与Eotaxin呈正相关(r=0.908,P<0.01)。结论:雷公藤红素可通过抑制鼻黏膜NF-κB的活性抑制Eotaxin的表达。     

神经生长因子在变应性鼻炎病人鼻黏膜中的表达

目的 进一步探讨神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在变应性鼻炎发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法对30例变应性鼻炎病人鼻黏膜组织中NGF的含量进行检测,以10例正常鼻黏膜组织作对照。结果 变应性鼻炎组鼻黏膜组织中NGF的含量为(6.03±1.53)ng/g湿重(n=30),明显高于对照组鼻黏膜组织中NGF的含量(3.43±1.19)ng/g湿重(n=10),两组差异有统计学意义(P<0.001)。结论 NGF与变应性鼻炎的发生有着密切联系。     

B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1在变应性鼻炎中的作用研究进展

变应性鼻炎(AR)是特异性免疫球蛋白E介导的鼻黏膜非感染性慢性炎症性疾病,以Th2及其分泌的IL-4、IL-5参与主要炎症过程.B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(Blimp-1)是一种含锌指基序的转录抑制因子,调控T细胞发育、分化和功能,对活化T淋巴细胞增殖分化和免疫自稳有重要的调节作用.鉴于Blimp-1对于下呼吸道及其他...     

核转录因子κB p65在喉癌中的表达及临床意义

目的：探讨核转录因子κBp65（NF-κBp65）在喉癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学及原位杂交方法,检测48例喉癌组织和20例正常喉黏膜组织中NF-κBp65的表达水平及与肿瘤生物学行为间的关系。结果：①NF-κBp65的表达在喉癌与正常喉黏膜组织间的差异有统计学意义（P〈0.05）。②NF-κBp65的高表达与颈淋巴结转移和临床分期有相关性,而与肿瘤部位及病理分化无相关性。结论：NF-κBp65是判断喉癌预后极具价值的指标。