五味子乙素对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用

目的 探讨五味子乙素对氧化损伤心肌细胞的保护作用.方法 体外培养乳鼠心肌细胞,待细胞生长至接近汇合状态分为空白对照组、氧化损伤组、溶剂对照组、槲皮素对照组、五味子乙素低、中、高浓度组.将500 μmol/L过氧化氢(H2O2)作用于加入槲皮素及不同浓度五味子乙素(5、25、50 μmol/L)预培养6h的心肌细胞,继续培养18 h,测定乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定心肌细胞抑制率,用流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率.结果 与空白对照组比较,氧化损伤组MDA、LDH含量明显升高,GSH-Px活性明显下降,细胞抑制率和凋亡率明显增加.五味子乙素呈剂量依赖性降低H2O2对心肌细胞活性的影响,降低MDA (nmol/L)、LDH (U/L)含量,提高GSH-Px (U/mg)活性,并能显著降低细胞抑制率和细胞凋亡率,且以高浓度组最为明显[MDA:6.01±0.36比13.78±0.21,LDH:61.0±5.7比168.0±6.9,GSH-Px:532.90±9.70比59.50±7.41,细胞抑制率:(22.4±5.2)％比(59.7±7.9)％,细胞凋亡率:(17.6±3.8)％比(41.6±5.1)％,均P＜0.01].结论 五味子乙素可保护和修复H2O2诱导的心肌细胞损伤,其作用可能与抗氧化、提高细胞GSH-Px活性、抑制细胞凋亡有关.     

促红细胞生成素对氯化钴诱导的PC12细胞凋亡的拮抗作用

目的 观察促红细胞生成素(EPO)对氯化钴(CoCl2)诱导的PC12细胞缺氧损伤凋亡的影响并探讨其作用机制.方法 将PC12细胞分为四组:空白对照组、CoCl2处理组、重组人促红细胞生成素(rhEPO)处理组、rhEPO+CoCl2处理组.应用MTT,乳酸脱氢酶(LDH),流式细胞术(FCM)及Hoechst33258染色法检测rhEPO对氯化钴诱导的细胞活性下降及凋亡的影响.通过逆转录PCR(RT-PCR)法检测Survivin表达情况.结果 MTT结果显示rhEPO预处理能够提高PC12细胞活力,0.6 mmol/L CoCl2单独处理组细胞存活率仅为(43.07±5.9)%,rhEPO处理24 h后细胞存活率上升明显至(77.89±3.4)%(P<0.01).LDH检测,FCM及Hoechst33258结果表明CoCl2处理能诱导PC12细胞损伤及凋亡,而预先采用2 U rhEPO处理PC12细胞可抑制CoCl2的细胞毒性作用,减少细胞缺氧性损伤及凋亡.RT-PCR显示rhEPO处理组PC12细胞Survivin表达较CoCl2处理组明显升高.结论 EPO处理能抑制CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,其细胞保护作用的机制可能与上调PC12细胞的Survivin表达有关.     

山萘酚对过氧化氢损伤血管内皮细胞的保护作用

目的 探讨山萘酚对氧化损伤血管内皮细胞的保护作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),将细胞分为空白对照组、氧化损伤组、溶剂[二甲亚砜(DMSO)]对照组、槲皮素干预对照组,以及山萘酚低、中、高浓度干预组(0.5、10.0、50.0 μmol/L)7组.将750 μmol/L过氧化氢(H2O2)作用于加入槲皮素及不同浓度山萘酚预培养24 h的内皮细胞中继续培养18 h,检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)含量以及细胞活性和细胞凋亡率.结果 槲皮素和不同浓度的山萘酚均可抑制H2O2诱导的血管内皮细胞MDA、LDH含量的升高,增加培养液中NO-2/NO-3含量,可呈剂量依赖性抑制H2O2所致细胞活性降低,并显著减少细胞凋亡率,上述各指标与氧化损伤组比较差异均有统计学意义(均P<0.01);山萘酚的上述作用呈剂量依赖性.结论 山萘酚可保护和修复H2O2诱导的血管内皮细胞损伤,其作用可能与抗氧化、减少NO降解有关.     

ERK1/2和P38在7-二氟甲氧基金雀异黄素抗H2O2损伤PC12细胞中的作用

[目的]探讨7-二氟甲氧基金雀异黄素(FMGEN)对神经细胞氧化应激损伤的保护作用机制.[方法]以H2O2损伤PC12细胞为神经细胞氧化应激模型,多功能生化分析仪测定培养液上清中的乳酸脱氢酶(LDH)活性,Western-Blot测定磷酸化ERK1/2蛋白和磷酸化p38蛋白的表达水平.[结果]H2O2孵育的PC12细胞培养液中LDH量明显增高,FMGEN呈浓度依赖性的降低H2O2诱导PC12细胞LDH的释放;FMGEN处理细胞后均可使ERKl/2蛋白的磷酸化水平升高,ERK1/2特异性抑制剂U0126可显著阻断FMGEN对H2O2损伤PC12细胞的拮抗作用;FMGEN抑制H2O2激活PC12细胞P38,P38特异性抑制剂SB203580可显著减轻H2O2对PC12细胞的损伤作用.[结论]FMGEN对PC12细胞氧化应激损伤的拮抗作用可能与其激活ERK1/2和抑制P38的活性有关.     

异丙酚预处理诱导PC12细胞缺氧耐受作用研究

目的 观察异丙酚预处理对PC12细胞缺氧损伤的影响.方法 对数生长期的PC12细胞分为四组:对照组(C组),普通培养箱内常规培养;脂肪乳剂组(F组),在细胞培养基中加入10%脂肪乳剂,置普通培养箱内常规培养;缺氧组(H组),细胞置三气培养箱内培养,设置培养条件为2% O2、5% CO2;异丙酚+缺氧组(PH组),在细胞培养基中加入终浓度为2 mmol/L的异丙酚,再置入三气培养箱培养,条件设置同H组.四组细胞均在培养4 h后行细胞活力和细胞凋亡检测.结果 C组与H组之间细胞活力和细胞凋亡率的差异有统计学意义(P<0.05);与H组相比,PH组细胞活力明显增高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05).结论 异丙酚预处理改善PC12细胞活力,通过抑制细胞凋亡诱导PC12细胞缺氧耐受.     

灵芝多糖肽对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用与神经生长因子的比较

目的探讨灵芝的主要有效成分灵芝多糖肽对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用,并以神经生长因子作为阳性对照.方法实验于2004-01/06在第二军医大学神经科学研究所进行.以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,将培养的PC12细胞随机分成4组①正常对照组PC12细胞在无血清的DMEM培养基中培养.②H2O2作用组PC12细胞与终浓度为200 μmol/L的H2O2作用4 h.③灵芝多糖肽组PC12细胞预先用终浓度为10 mg/L的灵芝多糖肽预处理24 h后,加入终浓度为200μmol/L的H2O2共同作用4 h.④神经生长因子组PC12细胞预先用终浓度为0.1 mg/L的神经生长因子预处理24 h后,加入终浓度为200μmol/L的H2O2共同作用4 h.采用MTT法检测细胞的存活率以及Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 P20活性片段.结果①细胞存活率H2O2作用组显著低于正常对照组[(38.6±7.1)%,(100±9.3)%,P＜0.01 ];灵芝多糖肽组和神经生长因子组显著高于H2O2作用组[(83.4±10.2)%,(75.9±7.4)%,P＜0.01],但两组间比较无差异(P＞0.05).②半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 P20活性片段Westernblotting检测结果提示灵芝多糖肽组和神经生长因子组较H2O2作用组明显减少.结论适量灵芝多糖肽灵芝多糖肽能促进氧化应激损伤PC12细胞的存活,抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用,其效果与神经生长因子相似.     

L-肌肽对过氧化氢诱导PC12细胞损伤的保护机制

目的探讨L-肌肽对H2O2诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞）凋亡保护的作用机制。方法在H2O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上加入肌肽,采用MTT比色法检测肌肽对H2O2抑制PC12细胞增殖的影响;RT-PCR法检测凋亡相关基因Caspase-3 mRNA的表达变化;免疫组织化学SABC法检测Caspase-3蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果不同浓度的肌肽对H2O2损伤的PC12细胞的存活率有显著的提高作用,20mmol/L浓度时达最大值（P〈0.05）;20mmol/L的肌肽作用于PC12细胞可降低其Caspase-3 mRNA的表达及Caspase-3蛋白的表达,流式细胞仪检测显示,肌肽可抑制细胞的早期和晚期凋亡。结论肌肽对H2O2损伤的PC12细胞有保护作用,机制可能是通过抑制Caspase-3的表达来抑制PC12细胞的凋亡而实现的。     

血红素加氧酶-1对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡及线粒体跨膜电位的影响

目的 探讨血红素加氧酶-1 (HO-1)对过氧化氢(H2O2)氧化损伤肺泡Ⅰ型上皮细胞(AEC Ⅰ)凋亡以及线粒体跨膜电位(MTMP)的影响.方法 将24只健康雄性SD大鼠腹腔注射麻醉处死后取肺,分离纯化AEC Ⅰ接种于培养板,原代培养24 h后等量分为正常对照组、H2O2损伤组、HO-1保护组、HO-1抑制组4组.采用0.5 mmol/L H2O2刺激AEC Ⅰ 2.5 h建立细胞氧化损伤模型.制模后用0.2μmol/L HO-1或20μmol/L锌原卟啉Ⅸ处理给予保护或抑制.处理2.5h后用荧光显微镜观察细胞的形态学变化;分别于处理0.5、1.0、1.5、2.0、2.5h5个时间点用流式细胞仪检测细胞凋亡率及MTMP去极化比例的变化.结果 荧光显微镜下观察.:H2O2损伤组可见大量呈绿色(凋亡早期)、红色(凋亡中晚期)荧光的凋亡细胞;HO-1保护组所见绿色或红色荧光细胞明显减少;HO-1抑制组与H2O2损伤组镜下所见相似.流式细胞仪检测结果显示:与正常对照组比较,H2O2损伤组细胞凋亡率增加,且随H2O2作用时间延长逐渐增加,2.5h达峰值[0.5 h:(30.27±0.74)％比(3.76±0.81)％,2.5 h:(40.46±0.91)％比(22.74±0.60)％,均P＜0.05],MTMP去极化比例明显降低(0.99±0.21比1.91±0.16,P＜0.05);与H2O2损伤组比较,HO-1保护组AEC Ⅰ细胞凋亡率明显降低[0.5 h:(5.99±0.60)％比(30.27±0.74)％,2.5h:(22.69±1.69)％比(40.46±0.91)％,均P＜0.05],MTMP去极化比例明显升高(2.02±0.12比0.99±0.21,P＜0.05);与HO-1保护组比较,HO-1抑制组细胞凋亡率明显增加[0.5 h:(30.73±1.08)％比(5.99±0.60)％,2.5h:(41.38±0.57)％比(22.69±1.69)％,均P＜0.05],MTMP去极化比例明显降低(0.98±0.09比2.02±0.12,P＜0.05).结论HO-1可保护AEC Ⅰ细胞完整性,降低细胞凋亡率并且稳定MTMP,对H2O2所致大鼠AEC Ⅰ氧化损伤具有一定的保护作用.     

灵芝多糖肽对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用：与神经生长因子的比较

自的：探讨灵芝的主要有效成分灵芝多精肽对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用，并以神经生长因子作为阳性对照。方法：实验于2004—01／06存第二军医大学神经科学研究所进行.以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,将培养的PC12细胞随机分成4组：①正常对照组：PC12细胞在无血清的DMEM培养基中培养、②H2O2作用组：PC12细胞与终浓度为200μmol／L的H2O2作用4h，③灵芝多粮肽组：PC12细胞预先用终浓度为10mg／L的灵芝多糖肽预处理24h后，加入终浓度为200μmol／L的H2O2共同作用4h、④神经生长因子组：PC12细胞预先用终浓度为0．1mg／L的神经生长因子预处理24h后．加入终浓度为200μmol／L的H2O2共同作用4h,采用MTT法检测细胞的存活率以及Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3P20活性片段.结果：①细胞存活率：H2O2作用组显著低于正常对照组[（38．6&;#177;7．1）％，（100&;#177;9．3）％，P〈0.01]；灵芝多糖肽组和神经生长因子组显著高于H2O2作用组[（83．4&;#177;10．2）％，（75.9&;#177;7．4）％．P〈0．01]，但两组间比较无差异（P〉0.05）.②半胱氩酸天冬氨酸蛋白酶3P20活性片段：Weslern blotting检测结果提示灵芝多糖肽组和神经生长因子组较H2O2作用组明显减少.结论：适量灵芝多精肽灵芝多精肽能促进氧化应激损伤PC12细胞的存活，抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡，对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用,其效果与神经生长因子相似.     

二苯乙烯苷对过氧化氢诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)对过氧化氢(H₂O₂)所致PC12细胞损伤的保护作用。方法培养PC12细胞给予H₂O₂(100 μmol/L)诱导细胞凋亡,实验分为空白对照组、H₂O₂损伤组、高剂量组(TSG 120 μg/L+H₂O₂）、中剂量组(TSG 60 μg/L+H₂O₂)和低剂量组(TSG 30 μg/L+H₂O₂)。TSG处理2 h后,加入H₂O₂损伤细胞,4 h后取细胞测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,采用硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(MDA),黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,噻唑兰(MTT)法检测细胞活力,免疫组织化学方法检测bcl-2的蛋白表达。结果TSG能提高细胞活力,降低LDH漏出和细胞凋亡率(P<0-05)。0-1～1 μmol/L TSG处理后bcl-2的蛋白表达降低(P<0-05)。结论TSG能减少H₂O₂对PC12细胞的损伤。     

骨髓间充质干细胞条件培养液对H_2O_2损伤大鼠心肌细胞的保护

背景：间充质干细胞移植可以降低心肌梗死面积、改善心功能,目前多数认为间充质干细胞分泌生物因子起主要作用。目的：观察骨髓间充质干细胞条件培养液对过氧化氢诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法：分离培养并鉴定骨髓间充质干细胞和新生大鼠心肌细胞,制作骨髓间充质干细胞条件培养液以及过氧化氢损伤新生大鼠心肌细胞模型,实验分为4组：对照组、模型组、骨髓间充质干细胞条件培养液组以及骨髓间充质干细胞条件培养液＋PI3K抑制剂处理组。以ELISA检测乳酸脱氢酶活性和流式细胞术检测细胞凋亡率来评估新生大鼠心肌细胞损伤程度。结果与结论：模型组乳酸脱氢酶活性明显高于其余各组（P〈0.01）,同时骨髓间充质干细胞条件培养液＋抑制剂组也高于骨髓间充质干细胞条件培养液组（P〈0.01）;骨髓间充质干细胞条件培养液组细胞凋亡率低于与骨髓间充质干细胞条件培养液＋抑制剂组（P〈0.01）,并且都低于与模型组（P〈0.01）。证明了骨髓间充质干细胞条件培养液抑制了过氧化氢诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡,该作用部分是通过PI3K途径发挥的。     

氧化应激对大鼠肾小管上皮细胞生物学行为的影响及L-EGCG的保护作用

[目的]探讨氧化应激对大鼠肾小管上皮细胞（NRK）生物学行为的影响及L -表没食子儿茶素没食子酸酯（L -EGCG）对NRK细胞氧化性损伤的保护作用.[方法]利用H2O2刺激离体培养的NRK细胞建立氧化损伤的模型,筛选H2O2对NRK细胞损伤研究的最适剂量与最佳时点.然后将培养细胞分EGCG正常对照组、H2O2组、不同浓度儿茶素组.MTT法检测细胞活力,流式细胞仪测定细胞凋亡,荧光探针JC-1测定线粒体膜电位.利用生物化学法检测各组NRK细胞培养上清中丙二醛（MDA）含量及乳酸脱氢酶（LDH）漏出量.[结果]①250 μmol/L H2O2作用6 h剂量组即可引起NRK细胞损伤;②L-EGCG能明显改善H2O2导致的细胞损伤,可使细胞存活率升高,LDH释放量降低,MDA生成减少,稳定了线粒体膜电位,减轻了细胞凋亡.[结论]氧化应激能导致大鼠肾小管上皮细胞活力下降,凋亡增加,L-EGCG可能是通过提高NRK细胞的抗氧化能力而提高其对H2O2损伤的保护及损伤修复能力.     

组蛋白H3K27甲基化抑制剂EPZ005687对U937细胞和正常骨髓CD34^＋细胞凋亡、增殖及细胞周期的影响

本研究目的在于探讨组蛋白H3K27甲基化抑制剂新药EPZ005687对白血病细胞系U937细胞和正常骨髓CD34＋细胞的凋亡、增殖抑制和细胞周期的影响。以不同浓度的EPZ005687作用于U937细胞,在不同时间点采用Annexin V/PI法检测细胞凋亡,WST-1法检测细胞增殖,7-AAD流式细胞术检测法检测细胞周期,免疫化学法检测H3K27组蛋白甲基化活性。结果表明：EPZ005687显著诱导U937细胞的凋亡,在0.5、1、5和10μmol/L浓度下作用于U937细胞48 h后,其凋亡率分别为3.96%±0.79%、5.74%±0.73%、13.34%±1.77%和25.24%±2.55%,而EPZ005687对正常骨髓CD34＋细胞的凋亡影响较小;在0.5、1、5和10μmol/L浓度下CD34＋细胞凋亡率分别为3.64%±0.62%、4.28%±0.99%、6.18%±1.19%和7.56%±1.34%;0.5、1、5和10μmol/L浓度的EPZ005687分别作用于U937细胞12 h至96 h,作用CD34＋细胞1至5 d,明显观察到EPZ005687显著抑制U937细胞的增殖且呈剂量依赖性,而对正常CD34＋细胞的增殖抑制并不明显。细胞周期分析显示,1μmol/L EPZ005687作用72 h可使U937细胞明显阻滞于G1期（64.18%±13.27%vs 49.43%±12.54%）,S期细胞比例明显下降低（9.67%±2.61%vs 15.26%±5.58%）,而正常CD34＋细胞因多数细胞位于G1期,S期细胞较少而不受其影响。进一步的H3K27组蛋白甲基化检测分析显示,EZP005687可明显地降低U937细胞的H3K27组蛋白甲基化,而不降低正常CD34＋细胞的H3K27组蛋白甲基化。结论：组蛋白H3K27甲基化抑制剂EPZ005687明显抑制U937细胞的增殖,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞,但对正常造血细胞CD34＋影响较小,可作为一种潜在的血液肿瘤治疗药物应用于临床。     

基质细胞衍生因子1预处理抑制大鼠骨髓间充质干细胞的凋亡

背景:研究发现基质细胞衍生因子1除参与趋化干细胞定向迁移途径,还具有抗凋亡作用。目的:观察基质细胞衍生因子1预处理后对骨髓间充质干细胞凋亡的影响。方法:以不同浓度H2O2诱导大鼠骨髓间充质干细胞凋亡,取最适宜浓度100μmol/L用于实验。不同质量浓度基质细胞衍生因子1干预100μmol/L H2O2诱导后的大鼠骨髓间充质干细胞,选择0.2mg/L最佳保护质量浓度用于实验。取第3代大鼠骨髓间充质干细胞,随机分组:正常对照组不进行任何处理;损伤组在培养液中加入H2O2作用24h;基质细胞衍生因子1预处理组于H2O2损伤细胞前6h加入基质细胞衍生因子1;基质细胞衍生因子1+AMD3100(基质细胞衍生因子1受体CXCR4的阻断剂)组于H2O2细胞损伤前6h加入基质细胞衍生因子1与AMD3100共孵。结果与结论:H2O2能体外模拟缺血缺氧环境诱导骨髓间充质干细胞凋亡,且作用呈剂量依赖性。与损伤组比较,加入基质细胞衍生因子1预处理后细胞凋亡明显减轻(P<0.01),细胞E2F6基因表达增强(P<0.05),E2F1基因表达减少(P<0.05),线粒体细胞色素C转位减少(P<0.05),Caspase-3活性降低(P<0.05),AMD3100可阻断基质细胞衍生因子1对骨髓间充质干细胞的保护作用。提示基质细胞衍生因子1可能通过增强E2F6基因,负性调控E2F1基因抑制线粒体损伤导致的骨髓间充质干细胞凋亡。     

乌司他丁改善重症肌无力患者术中呼吸力学的临床研究

目的通过观察重症肌无力患者胸腺扩大切除术中呼吸力学的变化,研究乌司他丁对重症肌无力患者肺功能的保护作用。方法60例择期行胸腺扩大切除术的重症肌无力患者（OssermannI、IIb型）,按随机数字表法随机分为对照组（C组,n=30）和乌司他丁组（U组,n=30）。U组人手术室后即给予乌司他丁4000U／kg溶于20ml0．9％氯化钠注射液中,10min内缓慢静脉推注,然后以2000U／（kg·h）持续泵人至手术结束。C组给予等量的生理盐水。观察并记录麻醉前（T1）、切皮时（亿）、手术开始后30min（13）、手术开始后60min（T4）、术毕拔管前（T5）患者的心率、平均动脉压及肺顺应性、气道峰值压力、气道平台压力、吸气阻力、呼气阻力。结果两组患者T2与Tl比较,心率和平均动脉压均升高[U组患者他、T1心率：（90．2±13．5）、（78．6±10．4）次／min,平均动脉压：（15．5±2．3）、（12．1±1．5）kPa;C组患者T2、T1心率：（94．3±15．4）、（81．6±12．2）次／min,平均动脉压：（16．8±2．6）、（12．6±1．8）kPa;P均〈0．05],组间比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）;两组患者在,T3、T4、T5与T1比较,肺顺应性均降低[U组患者在仍、T4、T5、T1时肺顺应性分别为：（51．23±12．33）、（50．35±13．29）、（50．65±13．16）、（53．69±14．34）ml／cmH20;C组患者在髓、T4、T5、T1时肺顺应性分另0为：（41．56±11．20）、（42．02±10．12）、（39．85±10．31）、（53．45±15．21）mL／cmH20,P均〈0．05],气道峰值压力[U组患者在T3、T4、T5、T1时分别为（13．04±2．14）、（13．12±2．42）、（13．22±2．48）、（12．04±2．12）cm H2O;C组患者在T3、T4、T5、T1时分别为（16．25±3．27）、（15．56±4．34）、（16．64±3．45）、（13．12±2．32）cm H2O]、气道平台压力[U组患者在,13、T4、T5、T1时分别为（10．54±2．46）、（11．76±3．11）、（12．02±3．25）、（9．48±2．13）cm H2O;C组患者在T3、T4、T5、T1时分别为（15．02±3．87）、（15．51±3．13）、（15．67±3．02）、（9．25±1．26）cm H2O]、吸气阻力[U组患者在13、T4、T5、T1时分另0为（8．56±2．52）、（9．31±3．06）、（8．44±2．45）、（8．25±2．20）cm H2O;C组患者在T3、T4、T5、T1时分别为（11．52±3．06）、（12．16±3．02）、（12．83±3．14）、（8．31±2．24）cm H2O]、呼气阻力[U组患者在T3、T4、T5、T1时分别为（10．22±2．24）、（10．34±2．66）、（10．27±2．22）、（8．46±2．37）cm H2O;C组患者在乃、T4、T5、T1时分别为（14．43±3．18）、（14．56±3．32）、（14．46±3．52）、（8．55±2．18）cm H2O]均升高（P均〈0．05）;U组患者在T3、T4、T5、T1时肺顺应性降低的幅度及气道峰值压力、气道平台压力、吸气阻力、呼气阻力升高的幅度明显低于C组患者（F值分别为6．167、3．138、4．137、5．217、4．361,P均〈0．05）。结论乌司他丁能够改善患者的呼吸力学,减轻肺损伤,对重症肌无力患者术中肺功能有保护作用。     

人工合成多肽FGL对神经细胞模型PC12细胞增殖与凋亡的影响

背景：FGL是NCAM的核心活性多肽片段,可直接作用于成纤维细胞生长因子受体1,激活NCAM的信号传导途径。目的：观察FGL人工合成多肽联合培养对PC12细胞增殖和凋亡的作用。方法：将培养的PC12细胞分为对照组和实验组,实验组预先加入1%的FGL多肽溶液。分别于培养1,3,5,7,9d采用细胞计数试剂8法检测细胞增殖情况。将PC12细胞分为正常组、实验组和损伤组,损伤组加入H2O2刺激16h。实验组加入H2O2与FGL人工合成多肽刺激16h,流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量PCR法检测PC12中的核转录因子κBmRNA表达。结果与结论：FGL人工合成多肽与PC12复合培养细胞生长良好,可明显促进PC12细胞的活性并且减低PC12细胞凋亡并可明显降低凋亡模型中PC12细胞核转录因子κB基因的表达。说明FGL多肽可以明显促进PC12细胞增殖,并可以抑制PC12细胞凋亡。     

过氧化氢诱导体外损伤性白内障模型的构建及晶状体上皮细胞的凋亡

背景：氧化应激能够诱导晶状体上皮细胞发生凋亡。目的：观察Fas蛋白与过氧化氢诱发白内障中晶状体上皮细胞凋亡的关系以及表没石子儿茶素没食子酸酯对Fas蛋白表达及晶状体上皮细胞凋亡的影响。方法：将健康成年兔透明晶状体随机分为3组：空白对照组仅加入DMEM培养液,过氧化氢组加入DMEM＋过氧化氢,表没石子儿茶素没食子酸酯组加入DMEM＋过氧化氢＋表没石子儿茶素没食子酸酯。结果与结论：各组体外培养72h后过氧化氢组晶状体上皮细胞凋亡率及Fas蛋白阳性表达率显著高于空白对照组（P〈0.05）。表没石子儿茶素没食子酸酯组晶状体上皮细胞凋亡率及Fas蛋白阳性表达率显著低于过氧化氢组（P〈0.05）。结果显示,过氧化氢可能是通过上调Fas蛋白的表达诱导晶状体上皮细胞凋亡,而抗氧化剂表没石子儿茶素没食子酸酯可下调Fas蛋白的表达而减轻晶状体上皮细胞的凋亡。     

CRP、ADA、LDH和TP联合检测对胸腔积液性质鉴别的价值

目的：探讨胸腔积液中的C反应蛋白（cRP）、腺苷脱氨酶（ADA）、乳酸脱氢酶（LDH）和总蛋白（TP）水平对胸腔积液鉴别诊断的价值。方法：检测95例不同病因引起胸腔积液的患者胸腔积液CRP、ADA、LDH和TP浓度。结果：结核组CRP和ADA平均含量为（27．14±21．72）U／L和（43．98±19．68）mg／L,显著高于癌症组和漏出液组（P〈0．01）;癌症组LDH平均含量为（859．90±551．69）U／L,显著高于结核组和漏出液组（P〈0．01）;漏出液组TP平均含量为（13．19±3．49）g／L,显著低于结核组和癌症组（P〈0．01）。结论：检测胸腔积液中CRP、ADA、LDH和TP,有助于临床医生对胸腔积液性质的鉴别、形成的原因的诊断。     

碱性成纤维细胞生长因子荧光真核表达载体构建及对过氧化氢诱导血管内皮细胞凋亡的影响

背景：已证实外源性碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）可抑制血管内皮细胞凋亡。目的：构建表达bFGF的荧光真核表达载体,探讨其对过氧化氢（H2O2）诱导的血管内皮细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响。方法：通过基因亚克隆构建荧光真核表达载体pcDNA3.1-bFGF-GFP,利用脂质体介导将bFGF基因导入人脐静脉内皮细胞内,通过荧光观察和RT-PCR检测基因的表达。实验分为3组,对照组（转染pcDNA3.1）、过氧化氢组（转染pcDNA3.1＋H2O2）和bFGF转染＋过氧化氢组（转染pcDNA3.1-bFGF-GFP＋H2O2）,流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blot检测caspase-3 P17活性亚单位和Bax蛋白表达。结果与结论：成功构建荧光真核表达载体pcDNA3.1-bFGF-GFP,该载体转染人脐静脉内皮细胞后,bFGF mRNA显著增加,并可观察到绿色荧光。与对照组相比,过氧化氢组细胞凋亡率和caspase-3 P17活性亚单位、Bax蛋白的表达量都明显增加（P〈0.01）,而bFGF转染＋过氧化氢组的细胞凋亡率和caspase-3 P17活性亚单位、Bax蛋白的表达量则比过氧化氢组显著降低（P〈0.01）。证实bFGF基因转染能抑制过氧化氢诱导的血管内皮细胞凋亡,其作用机制可能与调控Bax蛋白表达和caspase-3活性有关。