芹黄素对缺血缺氧性脑损伤大鼠的神经保护作用

目的:探究芹黄素激活Nfr2-ARE通路对缺血缺氧性脑损伤的保护作用。方法:选取60只7日龄SD大鼠,采用随机分组法将SD大鼠分为:假手术组(Sham)、缺血缺氧模型组(HIBD)、低浓度芹黄素组(AP-L)、高浓度芹黄素组(AP-H)每组15只。利用颈总动脉结扎法HIBD模型,使用HE染色观察大鼠海马区病理学变化;使用Western Blot检测大鼠脑组织中Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3、i NOS、Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达情况;使用全自动生化分析仪检测大鼠血清SOD、MDA、TNF-α、IL-1β、MPO水平;使用免疫组化检测大鼠海马区ICAM-1的表达。结果:HE染色结果显示,使用芹黄素处理后大鼠海马区细胞分布较为均匀、坏死细胞显著减少。与假手术组相比,缺血缺氧模型组Bcl-2、SOD、Nrf2、HO-1、NQO-1水平显著降低(P 0. 05),Bax、Caspase-9、Caspase-3、MDA、TNF-α、IL-1β、MPO、i NOS水平显著升高(P 0. 05);相比缺血缺氧模型组,使用芹黄素处理的各组Bcl-2、SOD、Nrf2、HO-1、NQO-1水平显著升高(P 0. 05),Bax、Caspase-9、Caspase-3、MDA、TNF-α、IL-1β、MPO、i NOS水平显著降低(P 0. 05),且呈浓度依赖性。免疫组化结果显示,模型组大鼠大鼠海马区ICAM-1阳性表达显著升高,使用芹黄素处理的各组ICAM-1阳性表达显著降低。结论:芹黄素可以激活Nfr2-ARE通路降低大鼠体内氧化应激反应和炎症反应,同时抑制脑细胞的凋亡缓解缺血缺氧性脑损伤,且在一定浓度范围内呈浓度依赖性。     

温补脾肾法对脾肾阳虚型UC大鼠JAK2/STAT3-SOCS6信号通路相关蛋白及基因表达的影响北大核心CSCD

目的:观察以温补脾肾法为指导的理中汤合四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型病变结肠组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS6蛋白及基因表达的影响。方法:采用病证结合造模方法复制脾肾阳虚型UC模型,成模大鼠随机分为模型组、柳氮磺砒啶组(SASP组)、理中汤合四神丸高、中、低剂量组,16只/组,同时设16只大鼠作为空白组。空白组与模型组给予蒸馏水灌胃,各治疗组给予对应的药物及剂量灌胃治疗,连续21 d。HE染色观察大鼠结肠黏膜组织病理变化;免疫组化法检测大鼠结肠黏膜组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、SOCS6蛋白表达情况;RT-qPCR检测大鼠JAK2、STAT3、SOCS6mRNA表达情况;ELISA检测大鼠组织和血清中TGF-β1、ICAM-1含量。结果:与空白组相比,模型组大鼠结肠黏膜组织JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达显著升高(P<0.01),JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白着色深,表达呈强阳性,SOCS6蛋白表达显著降低(P<0.01),SOCS6蛋白着色浅,表达呈弱阳性。JAK2、STAT3 mRNA表达显著升高,SOCS6 mRNA表达显著降低(P<0.01),组织和血清中TGF-β1含量显著降低(P<0.01),ICAM-1含量显著升高(P<0.01);与模型组相比,中药高、中剂量组及SASP组JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达显著降低(P<0.01),JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白着色浅,表达呈弱阳性,SOCS6蛋白表达显著升高(P<0.01),SOCS6蛋白着色深,表达呈强阳性。JAK2、STAT3 mRNA表达显著降低(P<0.01),SOCS6 mRNA表达显著升高(P<0.01),组织和血清中TGF-β1含量显著升高(P<0.01),ICAM-1含量显著降低(P<0.01)。结论:以温补脾肾法为指导的理中汤合四神丸可能通过抑制JAK2/STAT3-SOCS6信号通路的激活,调节免疫系统平衡,修复受损结肠黏膜,达到治疗UC的目的。     

基于Keap1/Nrf2/NLRP3炎症小体和p62途径探讨右美托咪定改善脑卒中后损伤的内在机制北大核心CSCD

目的:探讨右美托咪定(Dex)对脑卒中后模型脑损伤的改善作用,并基于Keap1/Nrf2/NLRP3炎症小体和p62途径探讨其作用机制。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、Dex组,除假手术组外,各组采用线栓法制造缺血性脑卒中大鼠模型,假手术组只穿线不结扎。造模成功后,依达拉奉组大鼠给予依达拉奉3.2 mg/kg,Dex组大鼠灌胃给予Dex 50 mg/kg,模型组、假手术组大鼠给予等体积生理盐水,连续给药14 d。采用改良m-NSS法评价大鼠行为学变化;TTC染色测定脑梗死体积;ELISA检测脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平;免疫荧光染色检测脑组织内ROS含量;RT-PCR检测脑组织Keap1、Nrf2、NLRP3、p62 mRNA水平;Western blot检测Keap1、Nrf2、NLRP3、p62蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠脑神经功能评分明显升高,脑梗死体积明显增大(P<0.01),脑组织中TNF-α、IL-6、IL-1β及ROS水平明显升高(P<0.01),Keap1、Nrf2、NLRP3、p62 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,Dex组大鼠脑神经功能评分明显降低,脑梗死体积明显减小(P<0.01),脑组织中TNF-α、IL-6、IL-1β及ROS水平明显降低(P<0.01),NLRP3、p62 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.01),Keap1、Nrf2 mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论:Dex可明显改善脑卒中大鼠脑损伤,其可能是通过调控Keap1、Nrf2、NLRP3炎症小体及p62相关基因及蛋白表达实现的。     

甘草甜素通过抑制炎症反应和氧化应激改善大鼠蛛网膜下腔出血后血脑屏障损伤

目的:探究甘草甜素对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后血脑屏障损伤的改善作用以及与炎症反应、氧化应激反应的关系。方法:将大鼠分为假手术组、模型组、甘草甜素低剂量组、中剂量组、高剂量组(25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg)、阳性组(40 mg/kg尼莫地平),每组30只大鼠,对大鼠神经行为进行评分,给药结束后24、48、72 h测定大鼠脑组织含水量,采用伊文氏蓝渗出量(EB)评估法检测血脑屏障通透性,HE染色观察大鼠基底动脉血管形态学变化,透射电镜观察脑组织超微结构变化情况,酶联免疫法检测脑组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、3-NT、8-OHDG表达;分别采用比色法、氮蓝四唑光还原法及硫代巴比妥酸法测定脑组织中氧化应激指标GSH-Px、SOD、MDA水平; RT-PCR检测脑组织中COX-2、iNOS、ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(WB)检测ZO-1,occludin、claudin-5、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠神经行为学评分降低,给药后24、48、72 h脑含水量升高,EB含量升高;模型组大脑皮层细胞凋亡率升高;与模型组相比,甘草甜素组大鼠神经行为学评分升高,脑含水量、EB含量、细胞凋亡率降低,具有剂量依赖性(P 0. 05)。与假手术组相比,模型组IL-1β、IL-6、TNF-α、3-NT、8-OHDG、MDA水平升高,SOD、GSH-Px水平降低;与模型组相比,甘草甜素组和阳性组IL-1β、IL-6、TNF-α、3-NT、8-OHDG、MDA水平均降低,SOD、GSH-Px水平升高,具有剂量依赖性(P 0. 05)。与假手术组相比,模型组COX-2、iNOS、ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达升高,ZO-1、occludin、claudin-5、Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高;与模型组相比,甘草甜素组和阳性组COX-2、iNOS、ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达降低,ZO-1、occludin、claudin-5、Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低,具有剂量依赖性(P 0. 05)。结论:甘草甜素能够降低大鼠蛛网膜下腔出血后的血脑屏障通透性增加,缓解基底动脉血管痉挛以及减少内皮细胞紧密连接丢失,其机制可能与抑制炎症反应和氧化应激反应有关。     

橙皮苷介导JAK2/STAT3通路改善急性牙髓炎模型大鼠牙髓组织损伤的机制研究

目的 探索橙皮苷（Hesperidin）治疗急性牙髓炎模型大鼠牙髓组织损伤的效果及其可能机制。方法 采用内毒素脂多糖（LPS）诱导法建立SD大鼠急性牙髓炎模型，将SD大鼠随机分为空白对照组、LPS组、橙皮苷组、JAK2激动剂+橙皮苷组及STAT3激动剂+橙皮苷组，HE染色观察各组大鼠牙髓组织病理学改变；ELISA法检测各组大鼠牙髓组织炎性因子水平；Western blot检测大鼠牙髓组织JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果 同对照组相比，LPS组大鼠牙髓组织牙髓细胞排列紊乱、空泡性变，血管显著扩张充血，炎症细胞浸润，同时IL-1β、TNF-α、IL-6水平升高，p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值升高（P<0.05）；橙皮苷组大鼠牙髓组织炎性病理改变较LPS组明显改善，同时IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低，p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值下降（P<0.05）；与橙皮苷组大鼠相比，JAK2激动剂+橙皮苷组及STAT3激动剂+橙皮苷组牙髓组织炎性病理改变加重，同时IL-1β、TNF-α、IL-6水平升高，p-JAK2/J...     

基于IL-6/JAK2/STAT3信号通路探讨灰树花提取物对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织炎症反应的影响

目的：探讨灰树花提取物通过调控白细胞介素6(IL-6)/蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和激活因子3(STAT3)信号通路,对溃疡性结肠炎（UC）大鼠结肠组织炎症反应的影响及作用机制。方法：将40只SD大鼠随机分为空白对照组、UC模型组、灰树花治疗组、西药治疗组、联合治疗组,每组8只。采用3%DSS自由饮用法7 d建立UC大鼠模型后,治疗组分别灌胃灰树花提取物10 mg/（kg·d）、柳氮磺吡啶0.3 g/（kg·d）及等量两种药物,连续14 d。实验期间观察大鼠一般状态,计算疾病活动指数（DAI）评分;采用HE染色法观察大鼠结肠组织病理改变;Western blot检测大鼠结肠组织IL-6、JAK2、STAT3、pSTAT3蛋白表达水平;ELISA检测大鼠血清中IL-6含量;免疫组化法测定大鼠结肠组织中IL-6R、MPO蛋白含量及表达情况。结果：与空白对照组比较,UC模型组大鼠一般状态欠佳,DAI评分升高,HE染色可见明显的组织黏膜损伤与炎症细胞浸润;结肠组织IL-6、JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平及IL-6R、MPO含量均显著升高（P<0.01）;血清...     

甲基莲心碱对脑缺血再灌注脑损伤的调节作用

目的探讨甲基莲心碱(Neferine,Nef)对缺血再灌注脑损伤大鼠脑保护作用及其机制.方法线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤(CI/R)模型.造模后对大鼠神经功能进行评分;HE检测病理损伤;检测血清MDA、SOD和LDH含量;TUNEL检测脑细胞凋亡;RT-PCR检测Caspase-3、-9 mRNA表达;免疫组化检测脑组织ICAM-1表达;ELISA检测IL-6、IL-18和IL-1β的含量;蛋白印迹检测TLR4、NF-κB P65(核)和MIP-2表达.结果甲基莲心碱能有效改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能(P<0.01),减少造模诱导的脑组织病理损伤;减少MDA和LDH含量(P<0.01),增加SOD活性(P<0.01);减少脑组织细胞凋亡率(P<0.01),下调凋亡相关蛋白Caspase-3、-9 mRNA表达水平(P<0.01);降低促炎因子(ICAM-1)、炎性因子(IL-6,IL-18,IL-1β)和炎性蛋白(TLR4,NF-κB P65,MIP-2)在脑组织中的表达水平(P<0.01).结论甲基莲心碱能对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织起保护作用,其机制与减少凋亡及抑制炎性反应有关.     

佛司可林通过TLR4/STAT3通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤氧自由基水平和炎症反应的调节作用

目的研究佛司可林(Forskolin,FS)通过TLR4/STAT3通路对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤氧(HIBD)自由基水平和炎症反应的调节作用。方法将75只7日龄SD大鼠15只/组随机分为假手术组、模型组、佛司可林低、中、高剂量治疗组,其中模型组和模型加药组采用Rice-Vannucci方法建立HIBD模型,假手术组只做创伤不作处理。术后第1天模型加药组大鼠分别接受不同剂量剂量的佛司可林腹腔注射;模型组与假手术组腹腔注射等体积量的生理盐水,1次/d注射7 d。ELISA检测各组大鼠血清中炎症因子水平;HE染色和凋亡TUNEL染色进行脑组织病理学分析;商业试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;免疫组化分析细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达;Western blot分析脑组织中STAT3、TLR4、NF-κB p65、TNF-α、cleaved-caspase-3/9的表达。通过尾静脉注射0.4 mg/kg脂多糖(LPS)激活TLR4通路后,再注射佛司可林分析对HIBD大鼠炎症因子、氧化应激指标及TLR4/STAT3通路蛋白的表达影响。结果与模型组相比,佛司可林治疗后,大鼠的脑组织损伤显著改善,凋亡细胞比例明显降低(P0.05);同时脑组织液中MDA和LDH的水平明显降低,SOD含量显著上升,ICAM-1的表达和炎症因子IL-6、IL-8、IL-1β的释放明显受到抑制(P0.05)。Western blot结果显示,随着佛司可林剂量增加,p-STAT3、TLR4、p-p65和TNF-α表达量显著降低(P0.05)。此外佛司可林能够抑制LSP激活TLR4通路后p-STAT3、TLR4、pp65和TNF-α的表达,降低脑组织中IL-6的释放,提升SOD的水平含量(P0.05)。结论佛司可林能够通过TLR4/STAT3通路改善新生大鼠缺血缺氧性脑损伤,降低氧自由基水平和抑制炎症反应。     

连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的改善作用

目的　研究连翘苷元对老年大鼠氧化应激和肾功能的影响及相关机制。 方法　将15只 SD雌性老年大鼠（24月龄）随机分成3组,每组5只,老年对照组（Aged rats）,老年连翘苷元低剂量组[Aged rats+FA(20 mg/kg)],老年连翘高剂量组[Aged rats+FA(100 mg/kg)]。另取5只12周龄SD雌性大鼠为青年对照组（Young rats）。连翘苷元低、高剂量组大鼠灌胃给药60 d。考马斯亮蓝检测24 h尿液总蛋白并分析血清肌酐和尿素氮水平。HE染色和TUNEL染色检测肾组织病理损伤情况。Western Blot检测Caspase-3和Caspase-9的表达。检测氧化应激标记物超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）的水平。ELISA检测血清中炎症因子IL-18和IL-1β水平。Western Blot检测核因子E2相关因子（Nrf 2）、血红素氧合酶1（HO-1）和还原型辅酶/醌氧化还原酶（NQO-1）的表达。 结果　老年对照组与青年对照组相比,尿中蛋白含量显著提升,血清中肌酐和尿素氮含量显著上升;肾组织细胞排列不规则,出现大量炎性细胞浸润,凋亡细胞比率显著提高;Caspase-3和Caspase-9的表达水平显著上调;SOD活性显著降低,MDA含量显著上升,GSH含量显著下降;血清中IL-18和IL-1β含量显著升高;Nrf 2、HO-1和NQO-1的表达显著下调。连翘苷元低、高剂量组与老年对照组相比,尿液中蛋白含量显著降低,血清肌酐和尿素氮含量显著下降;肾组织细胞排列趋向规则,炎性细胞浸润明显减弱,凋亡细胞比率显著下降;Caspase-3和Caspase-9的表达水平显著下调;SOD活性显著提高,MDA含量显著降低,GSH含量显著上升;血清中IL-18和IL-1β含量显著降低;Nrf 2、HO-1和NQO-1的表达显著上调。 结论　连翘苷元抑制老年大鼠氧化应激反应,改善老年大鼠肾功能,其作用机制可能与Nrf 2-ARE通路激活相关。     

加兰他敏通过激活Nrf2 / ROS 通路缓解大鼠脑缺血再灌注后免疫反应和诱导神经再生相关蛋白的表达

目的:探究加兰他敏(GAL)对大鼠脑缺血再灌注后免疫反应和神经再生的影响。方法:SD大鼠随机分为5组(n=30):健康对照组,假手术组,I/R模型组,I/R加低剂量GAL组,I/R加高剂量GAL组。采用改良线栓法建立I/R大鼠模型。HE检测病理组织变化。免疫组化检测神经丝蛋白200(NF-200)的表达。Western blot检测NF-200、生长相关蛋白43(GAP-43)、排斥导向分子(RGMa)的表达水平。ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-6、IL-18的含量。Western blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、还原型辅酶氧化还原酶1(NQ01)的表达。试剂盒检测脑组织活性氧(ROS)的含量。结果:I/R模型组与假手术组相比,大鼠CA1区出现明显缺血病变; NF-200密度下降,NF-200蛋白表达显著下调,GAP-43蛋白表达显著下调,RGMa表达显著上调;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18的含量显著上升; Nrf2、HO-1、NQO-1的表达显著下调; ROS的含量显著上升。GAL加药组与I/R模型组相比,大鼠CA1区缺血病变明显改善; NF-200密度上升,NF-200蛋白表达显著上调,GAP-43蛋白表达显著上调,RGMa表达显著下调;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-18的含量显著降低; Nrf2、HO-1、NQO-1的表达显著上调; ROS的含量显著降低。结论:GAL激活Nfr2/ROS细胞信号通路,缓解大鼠脑缺血再灌注后免疫应激反应,诱导神经再生相关蛋白的表达。     

丙泊酚对呼吸机所致肺损伤大鼠的保护作用及机制

目的探索丙泊酚对呼吸机所致肺损伤(VILI)模型大鼠的保护作用,并分析其调控机制。方法利用大潮气量通气建立肺损伤模型,将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丙泊酚组,每组10只。检测大鼠肺组织湿/干重比(W/D)、大鼠肺组织形态学变化情况、大鼠肺组织中TNF-α和IL-6含量以及JAK、STAT3 mRNA和蛋白水平,并比较3组大鼠肺组织中SOD、MDA的含量。结果与假手术组相比,模型组W/D明显较高,肺组织病理学形态较差,肺组织中TNF-α和IL-6含量明显较高,JAK、STAT3 mRNA水平较高,p-JAK、p-STAT3蛋白水平较高,MDA的含量较高,而SOD的含量较低,以上差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,丙泊酚组W/D明显较低,肺组织形态学得到改善,肺组织中TNF-α和IL-6含量明显较低,JAK、STAT3 mRNA水平较低,p-JAK、p-STAT3蛋白水平较低,MDA的含量较低,SOD的含量较高,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丙泊酚对VILI模型大鼠具有减弱炎症反应的作用,其机制可能与抑制JAK/STAT3信号通路有关。     

橙皮苷对慢性支气管炎大鼠炎性因子表达的影响

目的:观察橙皮苷对慢性支气管炎大鼠模型的炎性因子表达变化的影响。方法:将大鼠随机分为3组:对照组、模型组和橙皮苷给药组。采用熏烟法建立慢性支气管炎大鼠模型,采用HE染色检测支气管肺组织的病理学情况;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)含量;Western blot法检测肺组织中ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达水平。结果:与模型组相比,橙皮苷给药组的支气管肺组织的炎性浸润减少,肺泡结构的完整性增加,支气管肺泡灌洗液中TNF-α和IL-6的含量显著下降(P0.05),IL-10含量无显著变化;肺组织中ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达水平显著下降(P0.05)。结论:橙皮苷具有降低慢性支气管炎中炎性因子TNF-α和IL-6含量的作用,可能与调节ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达有关。     

吴茱萸次碱对局灶性脑缺血模型大鼠脑组织病理、免疫失衡和氧化应激的调节作用及机制研究

目的:探究吴茱萸次碱(Rut)对局灶性脑缺血模型大鼠脑组织病理,免疫失衡和氧化应激的调节作用及机制研究。方法:大鼠随机分为空对照(Control)组,局灶性脑缺血模型(CI/R)组,Rut 5、10、20 mg/kg组,经过对应剂量的Rut灌胃处理后,除Control组外其余各组建立大鼠CI/R模型,进行神经功能评分,记录大鼠双侧贴纸去除时间,平衡木过杆时间,HE染色检测脑组织病理性改变,TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,RT-PCR检测Bax、Bcl-2基因表达,试剂盒检测白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、IL-4、IL-10浓度及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)浓度,Western blot检测Caspase-3、核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧化酶1(HO-1)、依赖还原型辅酶Ⅰ/Ⅱ醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达。结果:与Control组比较,CI/R组大鼠神经功能评分、双侧贴纸去除时间、平衡木过杆时间增加,脑组织发生明显病理性改变并且细胞凋亡增加,IL-6、IL-1β浓度升高,IL-4、IL-10浓度降低,SOD浓度降低,MDA、LDH、ROS浓度升高,Nrf2/HO-1/NQO1通路受到抑制;与CI/R组比较,Rut 5、10、20 mg/kg组神经功能损伤、病理性改变得到明显缓解,细胞凋亡减少,IL-6、IL-1β、MDA、LDH、ROS浓度降低,IL-4、IL-10、SOD浓度升高,Nrf2/HO-1/NQO1通路激活。结论:Rut对局灶性脑缺血具有脑组织保护作用,并缓解免疫失衡和氧化应激,其机制可能是通过Nrf2/HO-1/NQO1通路激活实现。     

青藤碱通过调节 Nrf2 通路保护心肌细胞免受缺氧复氧损伤 #br#

【摘要】 目的 探究青藤碱通过调节 Nrf2 通路对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响。 方法 建立缺氧复氧损伤细胞模型, CCK-8 法检测细胞存活率; 乳酸脱氢酶试剂盒检测 LDH 水平; 肌酸激酶同工酶测试盒检测CK-MB 水平; 肌钙蛋白测定测试盒检测 cTnⅠ 水平; DCFH-DA 探针检测 ROS 含量; 总超氧化物歧化酶测定试剂盒检测 SOD 含量; 测定试剂盒检测 MDA 含量; 过氧化氢酶测定试剂盒检测 CAT 含量; 谷胱甘肽过氧化物酶测试盒检测 GSH-Px 含量。 ELISA 检测 TNF-α、 IL-6 和 IL-1β 水平; Hoechst 染色检测细胞凋亡率;Western 印迹检测 Cleaved caspase-3、 Cleaved caspase-9、 Keap1、 Nrf2、 p-Nrf2、 HO-1、 NQO1 蛋白表达水平;利用 siRNA 敲减 Nrf2 低表达 Nrf2 后再次检测上述指标变化。 结果 与 OGD / R 组比较, 各剂量组细胞存活率降低, LDH、 CK-MB、 cTnⅠ 水平降低, ROS、 MDA 含量降低, SOD、 CAT 和 GSH-Px 含量升高, TNF-α、IL-6 和 IL-1β 水平降低, 细胞凋亡率降低, Cleaved caspase-3、 Cleaved caspase-9、 Keap1蛋白水平降低, pNrf2 / Nrf2、 HO-1、 NQO1 蛋白水平升高。 通过 siRNA 敲减 Nrf2 低表达 Nrf2 后, 氧化应激, 炎性反应和相关蛋白表达被逆转。 结论 青藤碱通过调节 Nrf2 通路保护心肌细胞免受缺氧复氧损伤。     

亚麻木酚素对TGF-β1诱导的心肌细胞H9C2损伤的影响北大核心CSCD

目的:探究亚麻木酚素(SDG)对TGF-β1诱导的心肌细胞H9C2损伤的影响。方法:心肌细胞H9C2分为对照组、模型组(20 ng/ml TGF-β1处理)、SDG低(20 ng/ml TGF-β1和50μmol/L SDG处理)、中(20 ng/ml TGF-β1和100μmol/L SDG处理)、高(20 ng/ml TGF-β1和200μmol/L SDG处理)剂量组。CCK-8法检测细胞增殖,试剂盒测定LDH、MDA、ROS、SOD水平,流式细胞术检测细胞凋亡变化,Western blot检测C-Caspase-3、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达。JAK2/STAT3信号抑制剂和SDG处理心肌细胞,采用上述方法检测细胞增殖、凋亡和LDH、MDA、ROS、SOD水平及C-Caspase-3、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组心肌细胞存活率降低,LDH释放率升高,MDA和ROS水平升高,SOD水平降低,凋亡率升高,C-Caspase-3蛋白表达增多,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达降低。与模型组相比,SDG低、中、高剂量组心肌细胞存活率升高,LDH释放率降低,MDA和ROS水平降低,SOD水平升高,凋亡率降低,C-Caspase-3蛋白表达减少,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达升高,且呈剂量依赖性。JAK2/STAT3信号抑制剂能够逆转SDG对TGF-β1诱导的心肌细胞H9C2损伤、凋亡和氧化损伤作用。结论:SDG通过激活JAK2/STAT3信号抑制TGF-β1诱导的心肌细胞H9C2损伤。     

电针改善慢性脑低灌注大鼠空间学习记忆能力和海马IL-6/JAK2/STAT3的信号调节

目的:观察电针调节慢性脑低灌注(chronic cerebral hypoperfusion,CCH)对大鼠海马JAK2/STAT3通路和炎症反应的影响,探讨电针减轻CCH所致空间学习记忆能力障碍的作用机制。方法:将成年SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组(n=10),行改良永久性双侧颈总动脉结扎术造模,电针组采用2/15 Hz频率刺激(30 min/d,持续4周)大鼠百会和大椎穴,其余2组动物进行平衡处理。采用Morris水迷宫实验和激光多普勒血流仪评估及检测大鼠的空间学习记忆能力和局部脑血流量(regional cerebral blood flow,r CBF);采用ELISA、RTPCR与Western blot法分别检测大鼠海马组织中炎性因子白细胞介素6(IL-6)和IL-1β浓度,海马JAK2和STAT3的mRNA表达及其磷酸化蛋白含量;HE染色观察海马组织的病理变化。结果:电针组大鼠r CBF、各时点平均逃避潜伏期和原平台象限停留时间均较模型组动物有明显改善(P0.01或P0.05)。电针组大鼠海马组织中IL-1β与模型组相比显著降低(P0.05),而IL-6的含量有显著升高(P0.05),海马JAK2和STAT3的mRNA表达及pJAK2和p-STAT3蛋白含量也均比模型组明显升高(P0.05),海马CA1区神经细胞损伤减轻。结论:电针可通过调节IL-6/JAK2/STAT3信号通路抑制炎症反应,从而减轻海马神经细胞损伤和认知障碍。     

杜仲水提物对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响

目的 探索杜仲水提物对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响。 方法 将 40 只大鼠随机分为对照 组、 模型组、 杜仲水提物组和 Ravoxertinib 组, 各 10 只。 HE 染色检测大鼠大脑皮质损伤、 TUNEL 染色检 测大鼠大脑皮质细胞凋亡、 ELISA 法检测氧化应激指标超氧化物歧化酶 ( SOD)、 丙二醛 (MDA) 和半胱 氨酸天冬氨酸蛋白酶 3 (Caspase-3) 水平; Western 印迹检测大鼠大脑皮质中 ERK1 / 2 信号通路。 结果 HE 染色结果显示, 对照组大鼠脑组织无明显病理变化, 模型组大鼠脑组织病理损伤显著增加 (P< 0. 05), 杜 仲水提物组和 Ravoxertinib 组大鼠脑组织病理损伤明显减轻 (P< 0. 05); 与对照组大鼠相比, 模型组大鼠神 经细胞凋亡率、 Caspase-3 和 MDA 水平、 p-ERK1 / 2 / ERK1 / 2 和 Bax 表达水平明显升高, SOD 水平明显降低 (P< 0. 05); 与模型组大鼠比较, 杜仲水提物组大鼠和 Ravoxertinib 组大鼠神经细胞凋亡率、 Caspase-3 和 MDA 水平、 p-ERK1 / 2 / ERK1 / 2 和 Bax 表达水平明显下降, SOD 含量明显上升 (P< 0. 05); 与杜仲水提物 组大鼠比较, Ravoxertinib 组大鼠上述指标无明显差异 (P > 0. 05)。 结论 杜仲水提物通过调控 ERK1 / 2 信 号通路, 改变大鼠脑组织神经细胞生物学行为, 调节氧化应激反应, 从而对脑梗死发挥治疗作用。     

景芪愈溃胶囊对脾胃虚寒型胃溃疡大鼠的作用及其机制

目的:研究景芪愈溃胶囊对脾胃虚寒型胃溃疡大鼠的影响并探讨其机制。方法:将70只SPF级Wistar大鼠按完全随机设计分为空白组和造模组,造模组采用大黄苦寒泻下法+饥饱失常喂养法+改良Okabe法综合因素构建脾胃虚寒型胃溃疡大鼠模型,造模成功后按随机数字表法分为模型组,景芪愈溃胶囊高、中、低剂量组,中药阳性对照(安胃疡胶囊)组,以及西药阳性对照(雷贝拉唑钠肠溶胶囊)组。空白组和模型组给予2 mL/d蒸馏水灌胃,其余各药物干预组分别给予对应剂量的胶囊内容物混悬液2 mL/d灌胃,持续干预14 d。使用游标卡尺测量胃溃疡最大长径并计算溃疡指数(UI);采用HE染色观察大鼠胃组织形态学变化;采用ELISA法检测大鼠胃组织中白细胞介素1(IL-1)、IL-4、IL-6和IL-13的含量;采用RT-qPCR法检测大鼠胃组织中血管细胞黏附因子1(VCAM-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的mRNA表达水平,并采用Western blot法检测大鼠胃组织中上述指标的蛋白相对表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜可见明显溃疡面,光镜下观察可见黏膜组织缺失和坏死,胃组织IL-1和IL-6含量明显升高,IL-4和IL-13含量明显降低,VCAM-1和ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P0.01);与模型组比较,景芪愈溃胶囊高剂量组大鼠的UI显著降低,光镜下观察胃溃疡的恢复情况最接近空白组,胃组织IL-1和IL-6含量显著降低,IL-4和IL-13含量显著升高,VCAM-1和ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P0.01)。结论:景芪愈溃胶囊可有效促进胃溃疡的愈合,其机制可能与抑制细胞黏附分子VCAM-1和ICAM-1表达进而减少促炎因子IL-1和IL-6含量,增加抗炎因子IL-4和IL-13含量,从而调节促炎因子与抗炎因子的平衡有关。     

厄贝沙坦联合卡维地洛对心肌梗死后心衰大鼠心肌氧化应激的作用及可能机制

目的 探究厄贝沙坦联合卡维地洛对心肌梗死后心衰大鼠心肌氧化应激的作用及可能机制。方法30只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（Model组）和厄贝沙坦联合卡维地洛组（Irbesartan+carvedilol组）,每组10只。超声诊断仪检测大鼠心功能,HE染色观察大鼠心肌病理学改变,TUNEL检测大鼠心肌细胞凋亡,ELISA检测大鼠心肌组织氧化应激因子水平,荧光探针检测大鼠心肌组织活性氧水平,Western blot检测心肌组织Notch1、JAK2和STAT3蛋白表达水平。结果 厄贝沙坦联合卡维地洛降低大鼠心脏左心室舒张末径,增加射血分数和短轴缩短率,改善心肌组织病理损伤,降低心肌组织细胞凋亡水平,降低心肌组织MDA含量和ROS水平,增加SOD活性,增加心肌组织Notch1、JAK2和STAT3蛋白表达水平。结论 厄贝沙坦联合卡维地洛改善心肌梗死所致心衰大鼠心肌损伤,降低心肌细胞凋亡和氧化应激,其机制可能与激活Notch1/JAK2/STAT3信号通路有关。     

瑞芬太尼调节2型糖尿病并动脉粥样硬化大鼠炎症反应、氧化应激和脂代谢

目的探究瑞芬太尼对2型糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠氧化应激、脂代谢和炎性反应的调节作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素及高脂饮食构建2型糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠模型(DM);经尾静脉泵注射不同剂量的瑞芬太尼;通过全自动生化分析仪分析血清中TC、TG、HDL及LDL含量,HE染色观察心肌损伤,Western blot检测Caspase-3、Caspase-9、AMPKα1、PGC-1α、GLUT4、ACC和CPT-1的表达,试剂盒检测LDH、MDA、SOD含量,ELISA检测IL-6、IL-1β、iNOS和TNF-α的含量,免疫组化检测心肌IL-6水平。结果与DM组相比,给药组TC、TG和LDL含量显著减少,HDL含量显著增多,病理损伤减轻,Caspase-3和Caspase-9的表达显著下调,MDA和LDH含量显著减少,SOD含量显著增多,IL-6、IL-1β、iNOS和TNF-α的含量显著减少,IL-6阳性比率显著减少,AMPKα1、PGC-1α、GLUT4和ACC表达显著上调,CPT-1表达显著下调;显著效果和给药量成正比。结论瑞芬太尼呈剂量依赖性改善2型糖尿病合并动脉粥样硬化大鼠血脂含量,减轻病理损伤,抑制氧化应激和炎症反应,改善糖脂代谢。