慢性痛大鼠模型前扣带皮层内小胶质细胞活化与细胞因子表达

目的:观察慢性炎症性疼痛大鼠前扣带皮层(ACC)中小胶质细胞标记物(CD14,IBA1)及促炎症细胞因子(IL-1β,TNF-α)的表达变化。方法:单侧足底注射完全弗氏佐剂(CFA)诱导大鼠慢性炎症性疼痛,用RT-PCR检测ACC中CD14、IL-1β、TNF-αmRNA的表达,用免疫组织化学染色观察ACC中IBA1免疫阳性小胶质细胞的变化。结果:足底注射CFA后4 h、3 d双侧ACC中CD14 mRNA表达较生理盐水(NS)组有显著增加(P<0.001);CFA后4 h、3 d、14 d双侧ACC中IL-1βmRNA表达较NS组有显著增加(P<0.001);CFA后3 d、14 d双侧ACC中TNF-αmRNA表达较NS组有显著增加(P<0.001)。CFA 3 d组双侧ACC中IBA1免疫阳性小胶质细胞胞体变大、突起变粗。结论:ACC中小胶质细胞的活化以及IL-1β和TNF-α的表达增加可能在慢性炎症性疼痛的产生和维持中发挥作用。     

雷公藤内酯醇(T10)通过抑制脊髓内胶质细胞的激活改善大鼠CFA诱导的炎性痛的机制研究

目的:观察腹腔注射雷公藤内酯醇(Triptolide,T10)对完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)诱导的大鼠慢性炎性痛行为的改善作用并探讨其机制。方法:SD大鼠随机分为四组,即Saline+Veh组、Saline+T10组、CFA+Veh组和CFA+T10组。后两组大鼠于右侧足底注射CFA制备大鼠慢性炎性痛模型,前两组则在相同部位注射生理盐水。第二组和第四组大鼠分别于造模前1 h给予T10腹腔注射,随后每12 h给予腹腔注射药物1次,持续用药7 d;第一组和第三组则以相同方式给予100 ml/kg的生理盐水作为对照。采用辐射热法和机械刺激法连续观察给药后大鼠的痛行为;应用免疫组织化学染色和Western Blot方法观察连续给予T10 3d和7 d后大鼠腰膨大平面脊髓背角内小胶质细胞和星形胶质细胞的活化程度;应用实时定量PCR(RT-PCR)方法观察连续给药7 d后大鼠腰5背根神经节内炎性因子,如白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)的表达变化。结果:(1)与CFA+Veh组相比,CFA+T10组大鼠机械缩足阈值及辐射热痛潜伏期显著下降(P0.05),并持续到造模成功后7 d,表明腹腔注射T10可以明显改善CFA诱导的大鼠机械痛敏和辐射热痛敏。(2)免疫组织化学染色和Western Blot结果显示:造模后3 d和7 d后CFA+Veh组大鼠脊髓背角出现大量CFA诱导活化的小胶质细胞和星形胶质细胞;小胶质细胞标记物IBa-1和星形胶质细胞标记物GFAP的表达量分别在CFA造模后3 d和7 d显著增高(P0.05),而给予T10 3 d和7 d后炎性痛大鼠腰膨大平面IBa-1和GFAP的活化程度均显著减轻(P0.05)。(3)RT-PCR结果显示:与Saline+Veh组相比,CFA造模7 d后腰5背根神经节内炎性因子IL-1β、IL-6 mRNA和TNF-αmRNA的表达显著增高(P0.05),腹腔注射T10 7 d后上述炎性因子的表达则显著降低(P0.05)。结论:腹腔注射T10可以显著改善CFA诱导的大鼠慢性炎性痛,其机制可能与抑制脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞的活化以及炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的合成有关。     

慢性前列腺炎患者EPS中细胞因子测定的临床意义

目的：探讨前列腺液（EPS）中自细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-10（IL—10）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平与不同类型慢性前列腺炎患者之间的关系。方法：应用放射免疫分析（RIA）对86例慢性前列腺炎患者EPS中IL-1β、IL-2、IL-10、TNF-α含量进行了检测。结果：慢性前列腺炎组IL-1β、IL-2、TNF-α浓度均明显高于对照组（P均〈0．05或0．01），IL-10浓度明显低于对照组（P〈0．01）。慢性细菌性前列腺炎（CBP）组和慢性非细菌性前列腺炎／慢性骨盆疼痛综合征（CPPSⅢA）组EPS中IL-1β、TNF-α浓度明显高于慢性非细菌性前列腺炎／慢性骨盆疼痛综合征（CPPSⅢB）组（P〈0．05或0．01），IL-10浓度明显低于CPPSⅢB（P〈0．01）。结论：EPS中IL-1β、IL-2、IL-10、TNF-α在慢性前列腺炎的发病过程中起重要作用，检测EPS中的IL-1β、IL-2、IL-10、TNF-α水平是诊断慢性前列腺炎有价值的指标。亦是CPPSⅢ诊断与分型的重要指标。     

外周炎症性疼痛刺激诱导大鼠中脑导水管周围灰质胶质细胞激活及细胞因子的表达

目的观察完全弗氏佐剂(CFA)外周刺激后,大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、小胶质细胞标记物(Iba)以及细胞因子IL-β、TNF-α的表达变化。方法结合行为学检测,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western blotting以及免疫组织化学的方法,观察了大鼠后爪注射CFA后疼痛感觉的变化,并检测了PAG中上述标记物和细胞因子在基因水平和蛋白水平的表达变化。结果注射CFA后,注射侧后爪出现热痛过敏和机械性触诱发痛;大鼠的热痛过敏14d基本恢复正常,但机械性触诱发痛持续到21d时仍未恢复正常;星形胶质细胞标记物GFAP在急性期和慢性期有显著增加;小胶质细胞的标记物CD14、细胞因子(IL-β、TNF-α)在急性期、亚急性期和慢性期均有增加。结论小胶质细胞的激活可能与炎性疼痛的起始相关,而星形胶质细胞可能与疼痛的维持相关,细胞因子表达的增加可能对痛觉过敏的发生起重要作用。     

牙周炎对慢性细菌性前列腺炎大鼠前列腺的影响

目的研究牙周炎对慢性细菌性前列腺炎大鼠前列腺的影响。方法 80只SD大鼠随机分为4周组及8周组,每组40只,再将4周组和8周组分别随机分为空白对照组(N组)、慢性细菌性前列腺炎组(CBP组)、牙周炎组(PE组)和慢性细菌性前列腺炎合并牙周炎组(CBP+PE组),每组各10只。观察比较大鼠前列腺组织病理形态学改变、炎症评分、TNF-α、IL-1β的含量及牙周各项指标。结果在4周组中,PE组、CBP+PE组牙周各项指标高于N组、CBP组(P0.05),而PE组与CBP+PE组之间以及N组与CBP组之间牙周各项指标无明显差异(P0.05);CBP+PE组和CBP组前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β比N组和PE组均高(P0.05),而N组与PE组之间以及CBP+PE组与CBP组之间前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β无明显差异(P0.05)。在8周组中PE组、CBP+PE组牙周各项指标高于N组和CBP组(P0.05),而PE组与CBP+PE组之间以及N组与CBP组之间牙周各项指标无明显差异(P0.05);CBP+PE组、CBP组前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β较N组、PE组高(P0.05),而N组与PE组之间前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β无明显差异(P0.05),CBP+PE组前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β则较CBP组高(P0.05)。4周组和8周组比较,N组各项观察指标无明显差异;8周PE组牙周各项指标高于4周PE组(P0.05),前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β无明显差异(P0.05);8周CBP组前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β较4周CBP组降低(P0.05),而牙周各项指标无明显差异(P0.05);8周CBP+PE组与4周CBP+PE组比较前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β较低(P0.05),但8周CBP+PE组牙周各项指标较4周组高(P0.05)。结论慢性细菌性前列腺炎较长时间合并牙周炎,在大鼠模型上能抑制大鼠慢性细菌性前列腺炎的自愈倾向使其保持在慢性炎症阶段。     

c-Ski对创伤性脑损伤后小胶质细胞活化的抑制作用研究

目的观察c-Ski对小胶质细胞活化的影响,以探讨其对创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后炎症反应的调节作用。方法在小鼠中度TBI后的第1、3、7天,IBA-1免疫荧光检测伤周组织中活化小胶质细胞数量、形态改变;ELISA检测炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量变化;免疫荧光、Western blot检测c-Ski蛋白水平变化;然后转染腺病毒过表达c-Ski,观察上述指标的变化。结果在TBI后,伤周组织活化小胶质细胞数量与IL-1β、TNF-α含量均升高并在伤后1 d达高峰,伤后3 d时开始下降(P0.05);TBI后伤周组织活化的小胶质细胞中可见c-Ski表达,其水平在TBI后3 d达高峰(P0.05);Ski过表达则抑制了TBI后1 d、3 d伤周组织活化小胶质细胞的数量(P0.05),及IL-1β、TNF-α的含量(P0.05)。结论在TBI后,c-Ski可能通过抑制小胶质细胞活化而发挥抑制炎症反应的作用。     

电针刺激对炎性痛大鼠脊髓背角小胶质细胞活化的影响

目的:探索电针(EA)刺激是否通过下调糖原合成酶激酶3β(GSK3β).抑制小胶质细胞活化缓解大鼠慢性炎性痛。方法:利用完全随机数字法将Sprague Dawley(SD)雄性大鼠分为对照组(control)、完全弗氏佐剂注射组(CFA)、CFA+电针刺激组(CFA+EA)和CFA+GSK3β抑制剂TDZD-8组(CFA+TDZD-8)。通过足底注射CFA方法制备大鼠炎性痛模型,利用电针刺激和给予不同的药物处理各组大鼠。采用经典von Frey丝检测各组大鼠机械缩足反射阈值(PWT),用WesternBlot法或免疫荧光检测脊髓背角GSK3β和小胶质细胞离子钙接头蛋白(Iba-1)表达的变化情况。结果:与control组相比,CFA组大鼠在各时间节点的PWT值均显著降低(P<0.01);脊髓背角中GSK3β和Iba-1表达明显增加(P<0.05)。与CFA组相比,CFA+EA组大鼠PWT显著升高(P<0.01),GSK3β和Iba-1表达量显著下调(P<0.05);CFA+TDZD-8组大鼠PWT显著升高(P<0.01),Iba-1的表达量显著下调(P<0.05)。结论:电针刺激可能是通过下调大鼠脊髓背角细胞中GSK3β表达,抑制小胶质细胞活化.减少炎性介质释放,达到缓解慢性炎性痛的治疗效果。     

外周注射福尔马林诱导前扣带皮层中胶质细胞激活和细胞因子表达增高

为了观察外周注射福尔马林对大鼠前扣带皮层(ACC)中星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S100B,小胶质细胞标记物CD14以及与胶质细胞密切相关的炎症前细胞因子白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响,本研究结合行为学检测和RT-PCR方法,观察了大鼠单侧足底皮下注射福尔马林后的行为学变化,并检测了在不同时间点ACC中GFAP、S100B、CD14、IL-1β和TNF-α在基因水平的表达变化。结果显示:福尔马林急性疼痛刺激的大鼠出现典型的双时相自发性疼痛反应。ACC中GFAP和S100B mRNAs表达水平在刺激后30min、1h增高,2h恢复正常;CD14 mRNA表达水平在15min开始增高,1h达到高峰,6h恢复正常;IL-1β和TNF-αmRNAs表达水平在刺激后30min、1h、2h增高,6h恢复正常。上述结果表明,福尔马林外周急性伤害性刺激能够诱导ACC内短暂性的星形胶质细胞、小胶质细胞激活及IL-1β、TNF-α表达增高,提示激活的胶质细胞及表达上调的炎症前细胞因子可能参与伤害性信息的调制。     

氯胺酮鞘内给药对神经病理性痛大鼠脊髓背角小胶质细胞活化、TNF-α和IL-1β产生的影响

目的:探究鞘内注射氯胺酮(ketamine,KTM)对坐骨神经结扎(CCI)神经病理性疼痛大鼠模型行为、脊髓背角肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素1β(IL-1β)以及小胶质细胞标记蛋白OX42表达的影响。方法:(1)建立CCI模型大鼠,鞘内注射KTM或MI(米诺四环素)进行干预,测定大鼠机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)。(2)运用ELISA法检测TNF-α和IL-1β表达水平。(3)使用Western Blot法检测OX42的表达情况。结果:(1)KTM组和MI组大鼠MWT和TWL值较CCI组显著升高;KTM组大鼠MWT和TWL值高于CCI组(P0.05)。(2)KTM组和MI组TNF-α和IL-1β表达水平低于CCI组(P0.05);其中KTM组TNF-α和IL-1β表达水平显著高于MI组(P0.05)。(3)KTM组和MI组OX42表达水平显著低于CCI组;KTM组OX42表达水平高于MI组(P0.05)。结论:鞘内KTM可以抑制脊髓背角小胶质细胞激活,减少TNF-α和IL-1β表达,显著改善坐骨神经结扎引起的神经病理性疼痛。     

长春西汀抑制小胶质细胞M1/M2型极化改善慢性脑缺血大鼠认知功能及神经元损伤

目的 探讨长春西汀抑制小胶质细胞极化改善慢性脑缺血大鼠认知功能的作用机制。方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组（sham）、模型组（model）及长春西汀组（Vin）,每组10只,采用双侧颈总动脉结扎法复制慢性脑缺血大鼠模型,长春西汀组术后腹腔注射长春西汀10 mg/kg,共计28d。Morris水迷宫检测认知功能;HE染色观察大鼠海马区病变;免疫荧光染色检测微管相关蛋白2(MAP-2);ELISA测定各组大鼠脑组织匀浆中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-10(IL-10)及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量;免疫荧光染色检测M1型小胶质细胞极化标志物Iba-1/iNOS和M2型小胶质细胞极化标志物Iba-1/Arg1;Western blot检测Notch/Jagged通路相关蛋白Notch-1、NICD、Rbp-Jk及Jagged-1的表达。结果 与模型组相比,长春西汀显著改善大鼠认知功能,改善大鼠海马区病理损伤,显著增加海马区神经元数量,显著降低大鼠脑内IL-1β与TNF-α水平,显著增加大鼠脑内IL-10水平;显著降低Iba-1/iNOS细胞数量,显著增加Iba-1...     

CP患者前列腺按摩液中细胞因子及相关酶测定的临床意义

目的：探讨慢性前列腺炎（CP）患者前列腺液（EPS）中炎性细胞因子及相关酶学指标的变化及其临床意义。方法：将32例CP患者按美国国立卫生研究院（NIH）分类法分为三组：即慢性细菌性前列腺炎（CBP）组,慢性非细菌性前列腺炎/慢性炎性骨盆疼痛综合征（CPPSⅢA）组和慢性非细菌性前列腺炎/慢性炎性骨盆疼痛综合征（CPPSⅢB）组。EPSIL-1β、IL-2、IL-10水平均采用放射免疫分析（RIA）测定;LDH5/LDH1测定采用醋酸纤维素薄膜电泳法。结果：本文三组患者测定结果显示,CBP组EPSIL-1β、IL-2及LDH5/LDH1三项测定数值与对照组比较升高均非常显著（P均〈0.01）;IL-10水平与对照组比较降低非常显著（P〈0.01）;CPPSⅢA组IL-1β、IL-2及LDH5/LDH1水平也显著高于对照组（P均〈0.05）;IL-10水平与对照组比较降低非常显著（P〈0.01）;CPPSⅢB组则IL-1β、IL-2及LDH5/LDH1三项测定指标与对照组比较均无统计学差异（P均〉0.05）,IL-10水平与对照组比较降低仍显著（P〈0.05）。结论：CP患者EPS中炎性细胞因子及相关酶学指标均发生了明显的变化,其测定对于CP的诊断及两种前列腺炎的分型有一定帮助。     

慢性前列腺炎患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和IL-8检测的临床意义

目的：探讨了慢性前列腺炎患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和IL-8水平的变化及意义。方法：应用放射免疫分析对42例慢性前列腺炎患者进行了血清TNF-α、IL-6和IL-8检测,并与35名正常健康人作比较。结果：慢性前列腺炎患者在治疗前血清TNF-α、IL-6和IL-8水平均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经综合治疗后2周,除TNF-α水平与正常人比较无差异外,血清IL-6和IL-8水平与正常人比较仍有显著性差异（P〈0.05）。结论：血清TNF-α、IL-6和IL-8可能以不同的方式参与了慢性前列腺炎的发病,其检测对了解病情、指导治疗具有重要的临床价值。     

海马小胶质细胞在小鼠慢性炎性痛所致负性情绪中的形态变化

目的 探讨完全弗氏佐剂(CFA)所致慢性炎性痛小鼠模型情绪及海马小胶质细胞形态的改变.方法 32只ICR雄性小鼠随机分成生理盐水对照组(NS)和完全弗氏佐剂组(CFA).右后爪足底注射CFA建立小鼠慢性炎性痛模型.采用Von Frey纤维针测量小鼠右足底注射CFA后机械痛阈的变化;采用旷场实验检测小鼠活动度和焦虑样行为...     

Nurr-1对小胶质细胞微环境的影响

目的:探讨Nurr-1基因对小胶质细胞活化状态及其微环境的影响。方法:分离培养新生SD大鼠小胶质细胞,纯化、鉴定并分别用脂多糖(LPS)刺激活化和过表达Nurr1基因。实验随机分为小胶质细胞组、Nurr1过表达组、LPS处理组、Nurr1过表达+LPS处理组。ELISA分析过表达Nurr1基因对不同状态小胶质细胞分泌TNF-α、IL-1等炎症相关因子和BDNF、GDNF和PDNF等神经营养因子的影响。结果:(1)小胶质细胞混合培养、纯化、CD11b/c免疫细胞化学鉴定为阳性,纯度在95%;(2)Nurr1基因过表达小胶质细胞转染阳性率90%;(3)ELISA法检测结果显示:过表达Nurr1基因的小胶质细胞显著降低了TNF-α、IL-1的分泌,并促使了BDNF、GDNF和PDNF等神经营养因子的分泌。结论:Nurr1基因可抑制小胶质细胞的活化和减少炎症相关因子的产生,同时可促进GDNF、BDNF、PDNF等与DA能神经元存活和成熟等相关的神经营养因子的分泌。     

慢性前列腺炎患者治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α检测的临床意义

目的：检测了慢性前列腺炎患者治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α水平的变化及意义。方法：应用放免法和酶免法对40例慢性前列腺炎患者进行了治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α检测,并与35名健康人作比较。结果：慢性前列腺炎患者在治疗前血清IL-8、IL-1β和TNF-α水平均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经综合治疗2周后,除TNF-α水平与正常人组比较无差异外,血清IL-8、IL-1β水平与正常人组比较仍有显著性差异（P〈0.05）。结论：血清IL-8、IL-1β和TNF-α可能以不同的方式参与慢性前列腺炎的发生与发展,其检测对了解病情和指导治疗、预后观察均具有重要的治疗价值。     

舍曲林联合坦索罗辛治疗慢性前列腺炎顽固性尿道疼痛的近期疗效

目的 探讨舍曲林联合坦索罗辛治疗慢性前列腺炎顽固性尿道疼痛的近期疗效。方法 收集2017年12月~2018年6月我院诊治的慢性前列腺炎顽固性尿道疼痛患者52例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组26例。观察组给予舍曲林联合坦索罗辛治疗,对照组给予前列舒通联合坦索罗辛,比较两组治疗前与治疗8周后前列腺炎症状评分（CPSI）、抑郁自评量表评分(SDS)、国际勃起功能评分（IIEF-5）,疼痛缓解总有效率,血清炎症因子水平和不良反应发生率。结果 治疗后,两组CPSI、SDS评分较治疗前降低,IIEF-5评分较治疗前升高;且观察组CPSI、SDS评分低于对照组[（13.02±5.17）分vs（17.25±6.60）分]、[（40.78±11.92）分vs（48.25±15.09）分],观察组IIEF-5评分高于对照组[（19.39±5.72）分vs（14.45±4.81）分],差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组疼痛缓解总有效率为80.77%,高于对照组的65.38%,差异有统计学意义（P＜0.05）;治疗后,两组IL-6、TNF-α水平较治疗前降低,且观察组IL-6、TNF-α水平低于对照组[（6.03±3.21）pg/ml vs（12.23±6.64）pg/ml]、[（13.72±7.96）pg/ml vs（18.21±9.81）pg/ml],差异有统计学意义（P＜0.05）。观察组不良反应总发生率高于对照组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。结论舍曲林联合坦索罗辛治疗慢性前列腺炎顽固性尿道疼痛患者疗效确切,可有效改善患者尿道疼痛,减轻炎症反应,提高生活质量,减轻抑郁情绪,且安全可靠。     

慢性前列腺炎患者治疗前后血清hs-CRP、IL-8和TNF-α检测的临床意义

目的：探讨了慢性前列腺炎患者治疗前后血清hs-CRP、IL-8和TNF-α水平的变化及意义。方法：应用放射免疫分析和免疫比浊法对32例慢性前列腺炎患者进行了治疗前后血清hs-CRP、IL-8和TNF-α检测,并与35名正常健康人作比较。结果：治疗前慢性前列腺炎患者血清hs-CRP、IL-8和TNF-α水平均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经治疗2个月后则与正常人组比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：检测慢性前列腺炎患者血清水平的变化,可作为病情及预后评价的重要指标。