微量血APAAP法测定T淋巴细胞亚群

为解决取静脉血的困难,使测定T细胞亚群成为常规的工作,本文作者利用废旧一次性输血器自制微试管,初步建立了用微量碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶(APAAP)技术测定T淋巴细胞亚群的方法并用该法与常规方法测定了部分成年健康人与献血者,经统计两法均值比较P>0.05,差异无显著性。APAAP技术具有取材方便,简单快捷,易于推广的优点,特别适合于反复收检标本,有利于病情观察,在儿科领域更具有实用价值。在两种方法检测淋巴细胞亚群实验中发现CD_4~+/CD_8~+比值偏低,个别例数倒置的现象,值的进一步研究。     

脐血T淋巴细胞亚群分布特点及其临床意义探讨

目的比较脐血、骨髓及外周血中T淋巴细胞亚群的分布特点,探讨脐血移植后免疫重建延迟的发生机制.方法应用流式细胞仪分别检测脐血、骨髓及外周血中CD3 、CD3 CD5 、CD4 、CD4 CD28 、CD8 和CD8 CD28 细胞的含量.结果 CD3 、CD4 及CD8 细胞数在脐血、骨髓及外周血中无显著差异,P> 0.05.脐血中CD3 CD5 、CD4 CD28 及CD8 CD28 细胞数显著低于骨髓及外周血,P<0.05.骨髓与外周血中各T淋巴细胞亚群测定无显著差异,P>0.05.结论脐血中成熟的T淋巴细胞(CD3 CD5 )及细胞毒T淋巴细胞(CD4 CD28 、CD8 CD28 )的数量显著低于骨髓及外周血,这可能是脐血移植后免疫重建延迟的主要原因.     

脐血淋巴细胞亚群水平及其临床意义

目的检测新生儿脐血淋巴细胞亚群水平,探讨新生儿脐血的免疫功能。方法24例正常足月自然分娩新生儿脐血作为研究对象,26例健康成年献血员（男女不分）的血液作为对照,采用流式细胞术（FCM）检测脐血和成人血液中CD3（＋）、CD4（＋）、CD8（＋）、CD19（＋）、CD16＋56（＋）、CD4（＋）/CD8（＋）的水平,对结果进行统计学分析。结果脐血中CD3（＋）、CD4（＋）、CD8（＋）的量明显低于对照组（P〈0.01或〈0.05）;CD4（＋）/CD8（＋）的水平明显高于对照组（P〈0.01）;CD19（＋）、CD16＋56（＋）的水平与对照组相比差异无显著性（P〉0.05）。结论脐血的淋巴细胞免疫功能低于健康成人。     

急性病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群检测分析

目的 :了解急性甲、乙、丙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群对疗效和预后判断的价值。方法 :用APAAP桥联酶标法检测 10 2例急性甲、乙、丙型病毒型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群CD3 、CD4、CD8、及CD4/CD8,并检测了 2 9例急性甲、乙、丙型病毒性肝炎患者治疗前后T淋巴细胞亚群变化。结果 :与正常对照相比 ,10 2例急性甲、乙、丙型病毒性肝炎患者外周血CD3 、CD4、CD4/CD8均有不同程度的降低 (P <0 . 0 5 ) ,而各型肝炎的CD8均显著增高 (P <0 . 0 1) ;2 9例患者治疗前后T淋巴细胞亚群比较 ,7例治疗效果差者 ,其CD4、CD4/CD8处于低水平而CD8始终处于高水平 (P >0 . 0 5 ) ,另 2 2例治疗效果较好者 ,各亚群指标均接近或恢复正常水平 (P <0 .0 5 )。结论 :急性甲、乙、丙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的改变是以CD4、CD4/CD8的降低 ,特别是CD8的显著增高为其特征 ,各亚群在治疗过程中的动态变化在一定程度上可能反映疾病的疗效及预后。治疗时 ,应注意调节机体的细胞免疫功能。     

36例脑肿瘤患者外围血T淋巴细胞亚群测定分析

目的:观察脑肿瘤患者外围血淋巴细胞亚群水平变化,进一步了解患者免疫功能状态。方法:采用碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP法)桥联酶法技术,对36例颅内肿瘤患者进行T淋巴细胞亚群的CD2 、CD4 、CD8 细胞检测。结果:所查T淋巴细胞亚群CD2 、CD4 细胞水平及CD4 、CD8 细胞比值均低于正常参考值。结论:表明脑肿瘤患者均有不同程度的细胞免疫功能低下表现,良性肿瘤略低,恶性及颅内转移瘤显低。     

HIV感染者T淋巴细胞亚群水平分析

目的：检测AIDS患者和HIV感染者外周血T淋巴细胞亚群的表达和绝对计数情况，分析T淋巴细胞亚群水平表达与HIV患者的病程进展情况。方法：应用流式细胞仪三色荧光标记和绝对计数法检测30例正常健康成人．15例AIDS患者和20例HIV感染者的外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋的表达水平。结果：AIDS患者和HIV感染者的CD4^＋琳巴细胞明显比正常人低，特别是AIDS患者CD4呻沐巴细胞数低于200个/／mm^3，CD8^＋淋巴细胞显著增高，CD4^＋／CD8^＋比值倒置。结论：用FCM检测AIDS患者和HIV感染者的免疫状况可作为评价AIDS病程进展的重要指标。     

老年人T淋巴细胞亚群变化观察

目的：随着人口老龄化的加速，对老年疾病的防治工作已愈来愈引起广大医务工作的重视。本试图通过测定老年人T细胞亚群的分布状态，探讨年龄对细胞免疫指标的影响及生理、病理意义，为提高老年人的抗病能力提供理论基础。方法：应用流式细胞仪（FACSCALIBUR，美国BD公司）以“门技术”确定淋巴细胞亚群，分析数据结果，对21例健康老年受试及29例健康青年受试进行测定。结果：老年人的CD3、CD4、CD4／CD8较青年组有下降（P＜0．05），其中CD4较青年组明显下降（P＜0．01），差异有显性。从而表明随年龄增加，机体的免疫活性降低。结论：加强对老年人的免疫检测及调节，是提高老年患的生活质量，改善疾病预后的重要手段。     

脐血T细胞亚群的观察

测定脐带血和成人血的Ｔ淋巴细胞亚群（ＣＤ３．ＣＤ４．ＣＤ８）结果提示：脐带血的ＣＤ３．ＣＤ４．ＣＤ８较成人低，两者差异有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。说明胎儿的免疫力低于成人，但脐血的Ｔ淋巴细胞在胎儿生长发育的过程中起着相当重要的作用     

窒息新生儿脐血T细胞亚群变化

本文于 1999年 11月至 2 0 0 0年 4月检测了 2 0例窒息新生儿脐血 T细胞亚群的变化 ,现将结果报告如下。1　对　象窒息组 2 0例 ,男 12例 ,女 8例。轻度窒息 11例 ,重度窒息 9例 ,均并存缺氧缺血性脑病。对照组 30例 ,男女各 15例 ,为出生时无窒息的正常新生儿。2　方　法于婴儿出生时断脐后即刻留取脐血涂片 ,用 α-醋酸萘酯酶染色法检测 T细胞亚群。3　结　果窒息儿脐血 T细胞亚群检测结果 :见表 1表 1　窒息儿脐血 T细胞亚群变化 (x±s)窒息组 (n=2 0 )正常组 (n=30 ) t pCD3 5 0 .1± 8.45 7.4± 10 .8 3.89<0 .0 1CD4 32 .3± 9.…     

复发尖锐湿疣患者外周血T淋巴细胞亚群测定

近年来的研究表明，尖锐湿疣(CA)患者细胞免疫状态的改变与CA的发生及转归有关。为研究CA的复发与细胞免疫功能的关系，作者对治疗后复发及非复发的CA患者T淋巴细胞亚群进行检测，报道如下。     

急性病毒性肝炎T细胞亚群的检测及意义

本文应用单克隆抗体碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）法测定急性肝炎患者Ｔ细胞亚群ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８的百分比，共检测８７例，其中甲肝患者３０例、乙肝患者２５例、正常对照组３２例。甲、乙肝两者在发病期ＣＤ８均高于正常对照组（Ｐ〈０．０１），ＣＤ３、ＣＤ４则无明显变化（Ｐ〉０．０５），ＣＤ４／ＣＤ８的比值均低于正常对照组（Ｐ〈０．０１），在疾病的恢复期各值均接近正常（Ｐ〉０．０５）。因此在急性肿炎     

轻度子宫内膜异位症不孕患者腹腔液IL-6及外周血T细胞亚群变化

目的 探讨子宫内膜异位症导致不孕的免疫机理。方法 选择临床轻度子宫内膜异位症不孕患者为研究对象，以多囊卵巢综合征及不明原因不孕的正常盆腔为对照。采取ELISA检测腹腔液IL—6水平，以流式细胞分选技术检测外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果 与对照组相比，轻度子宫内膜异位症不孕患者腹腔液IL—6水平显著增高，外周血CD4^ T细胞数目增加，而CD8^ T细胞变化不明显。结论 轻度子宫内膜异位症不孕患者腹腔免疫细胞处于异常活化状态、体内存在免疫调节异常，在局部表现特别明显。提示IL—6可能通过直接细胞毒或协同作用干扰生殖活动多个环节，从而在子宫内膜异位症导致不孕中发挥重要作用。     

骨髓增生异常综合征患者T淋巴细胞亚群变化

用直接ＳＰＡ菌花环法体外测定１３例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）患者外周血Ｔ细胞亚群，结果表明：患者平均ＯＫＴ＋４细胞百分值、ＯＫＴ＋４／ＯＫＴ＋８比值均显著低于正常（Ｐ＜０．０５～０．００２），平均ＯＫＴ＋８细胞百分值显著高于正常（Ｐ＜０．００５）。说明ＭＤＳ患者淋巴细胞亚群分布异常。并发现Ｔ细胞亚群随病情发展而变化，提示外周血Ｔ细胞亚群的变化可以作为判断病情，预后及疗效的辅助参考指标之一。     

雷公藤多甙对小儿哮喘病人T淋巴细胞亚群的影响

本文应用单克隆抗体OKT系列检测了33名支气管哮喘儿童外周血的T淋巴细胞(OKT3~+细胞)、T辅助细胞(OKT4~+细胞)和T抑制/杀伤细胞(OKT8~+细胞)。采用间接免疫荧光法和流式细胞仪检测了口服雷公藤多甙前后T细胞亚群数量的变化:服药后OKT4~+细胞明显减少而OKT8~+细胞明显增高,T4/T8比值明显降低(P<0.05)。上述结果表明雷公藤多甙对哮喘儿童的T淋巴细胞亚群的分布确有影响,也进一步证明了雷公藤及其制剂的免疫抑制作用。     

原发肾病综合征患者T淋巴细胞亚群变化与糖皮质激素疗效的关系

目的：探讨原发肾病综合征（ Ｎ Ｓ）病人 Ｔ 淋巴细胞亚群比例与激素疗效的关系。方法：采用人类 Ｔ 淋巴细胞单克隆抗体间接免疫荧光法观察正常人及肾病综合征Ⅱ型病人 Ｔ 淋巴细胞 Ｃ Ｄ３ ， Ｃ Ｄ４， Ｃ Ｄ８ 百分率及 Ｃ Ｄ４／ Ｃ Ｄ８ 比例，以及应用激素前后变化。结果：激素有效组 Ｃ Ｄ８ 较正常人明显减少， Ｃ Ｄ４ ／ Ｃ Ｄ８ 较正常人明显升高。用药后 Ｃ Ｄ８ 较用药前明显升高， Ｃ Ｄ４／ Ｃ Ｄ８ 比例较用药前下降，且趋于正常。而激素无效组上述改变不明显。结论： Ｎ Ｓ病人 Ｔ 淋巴细胞亚群变化特别是 Ｃ Ｄ８ 比例变化是影响激素疗效的关键。     

保尔佳对肿瘤患者免疫功能的影响

在24例恶性肿瘤患者应用保尔佳前、后，用APAAP法检测外周血的T淋巴细胞亚群、末梢血WBC、plt、Hb结果显示：使用保尔佳后，CD3 、CD4 淋巴细胞亚群及WBC数均显著增高（P＜0．05），余无显著差异（P＞0．05）。提示保尔佳是一种很好的抗肿瘤药物。     

系统性红斑狼疮患者妊娠期外周血中的T淋巴细胞亚群的变化

目的：探讨系统性红斑狼疮（ＥＬＥ）孕妇外周血中的Ｔ淋巴细胞亚群的改变。方法：采用流式细胞仪对１４例系统性红斑狼疮患者妊娠后（ＳＬＥ＋ＮＰ组）的外周血Ｔ淋业九进行检测，并以１８例系统性红斑狼疮非行娠妇女（ＳＬＥ组），２０例正常非妊娠妇女（ＮＮＰ组）作对照。结果：ＳＬＥ＋ＮＰ组的ＣＤ３、ＣＤ８百分率与ＳＬＥ，ＮＮＰ组比较无显著性差异，而ＣＤ４的百分率和ＣＤ４／ＣＤ８的比值都低于ＳＬＥ和ＮＮＰ组。结论：     

22例重型SARS的临床和T淋巴细胞亚群特征分析

目的探讨重型传染性非典型肺炎(AP,SARS)的临床和T淋巴细胞亚群分析.方法对我院2003年2月9日～2003年5月15日住院的重型SARS患者的临床和实验室资料进行总结.结果22例重型SARS患者,平均年龄(36.6±23.2)岁,部分合并基础疾病,发热100%,咳嗽91%,呼吸困难100%,胸闷82%,胸痛41%;中性粒细胞比例升高95%,淋巴细胞比例降低95%;心肌酶谱升高86%,肝功能异常73%,肾功能损害9%;CD4 T细胞计数(12.6±4.5)%,CD8 T细胞计数(19.6±8.9)%,CD3 T细胞计数(46.0±15.1)%,与正常人和普通SARS患者比较,CD4 T、CD8 T、CD3 T均降低,差异有显著性意义(P＜0.01).胸片大片状阴影22例(100%),病变范围48 h超过50%为63.6%,肺实变100%,肺不张23%,肺纤维化82%.使用激素治疗22例,日达仙治疗7例,无创呼吸机通气7例,气管插管或气管切开2例,治愈或好转19例,转院治疗2例.平均发热时间(20±10)d,平均住院时间(42±24)d,胸片开始吸收好转时间(14±6)d.结论重型SARS年龄较大,部分患者合并基础疾病,中性粒细胞显著降低,淋巴细胞比例和绝对数显著下降,细胞免疫功能显著降低,心肌酶谱显著升高,动脉氧分压显著降低,肺部病灶发展快,病变重,吸收慢,多合并肺纤维化.早期使用大剂量激素联合利巴韦林可能对病情减轻有帮助.     

子宫内膜异位症不孕患者腹腔液IL-2活性及外周血T细胞亚群变化

探讨子宫内膜异位症导致不孕的免疫机制,方法：选择临床轻度子宫内膜异位症不孕患者,以多囊卵巢综合征及不明原因不孕的患者为对照。采取ＣＴＬＬ细胞 法检测腹腔液ＩＬ－２生物活性,以流式细胞分选技术检测外周血Ｔ淋巴细胞亚群的变化。     

DC-CIK 生物治疗后肺癌患者Pro-GRP 和T 淋巴 细胞亚群对免疫功能评价的临床意义

目的 探讨生物治疗前后肺癌患者胃泌素释放肽前体（Pro-GRP）和T 淋巴细胞亚群对免疫功 能评价的临床意义,方法 选取2014 年9 月-2015 年8 月天津市第五中心医院收治经病理确诊的肺癌患者45 例,根据病理组织学分为小细胞肺癌组（SCLC）和非小细胞肺癌组（NSCLC）,选取同期健康体检者40 例为 对照组。采用贝克曼- 库尔特FC500 流式细胞仪检测受检者外周血CD3+、CD4+、CD8+、调节性T 细胞（Treg）, 采用德国罗氏COBAS 6000 检测受检者外周血的Pro-GRP、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）、 细胞角蛋白19 的可溶性片段（CYFAR21-1）,化疗结束后,联合生物治疗DC-CIK 自体细胞回输3 个周期后, 用相同方法采集患者静脉血,检测Pro-GRP、T 淋巴细胞亚群、Treg。结果 DC-CIK 细胞生物治疗后NSCLC 组CD8+T 淋巴细胞和Treg 细胞较治疗前下降,CD3+、CD4+T 淋巴细胞、CD4+/CD8+ 比值较治疗前上升; SCLC 组CD3+、CD4+、CD8+ T 淋巴细胞数量较治疗前增加,Treg 细胞较治疗前下降;Pro-GRP 各组均较治疗 前下降;Pro-GRP 与T 淋巴细胞亚群在SCLC 组呈负相关,在NSCLC 组无相关;Pro-GRP 与Treg 细胞在各 组呈正相关（P <0.05）。结论 Pro-GRP 在SCLC 患者与T 淋巴细胞亚群存在相关性,可用于辅助早期临床 诊断,并与T 淋巴细胞亚群共同评价患者的免疫调节功能,DC-CIK 细胞回输生物治疗可增强患者特异性杀伤 肿瘤的能力,提高机体的免疫监视功能,抑制肿瘤免疫逃逸,改善患者的免疫功能。