hIL2-preS融合基因免疫小鼠诱导体液免疫应答

目的 探讨HBV preS基因免疫和hIL-2与preS融合基因免疫诱导BALB／c小鼠体液免疫反应的规律。方法 将preS基因及hIL2-preS融合基因分别克隆入真核表达载体pCMV4,转染COS－7细胞,明确有目的基因表达后,将重组质粒注射BALB／c小鼠臀部肌肉;ELISA方法检测小鼠血清抗体。结果 pCMV4-preS接种组,3／7小鼠产生抗preS2抗体。pCMV4-hIL2-preS接种组有3／7小鼠产生抗hIL-2抗体,而未检测到抗preS2抗体。结论 pCMV4-preS可有效诱导小鼠产生抗体反应。hIL2-preS融合基因接种BALB／c小鼠时,可诱导产生抗hIL-2抗体。     

乙肝核酸疫苗pCI/S2S接种小鼠后的免疫应答研究

目的 构建乙肝核酸疫苗pCI/S2S,研究其接种小鼠后,接种局部肌肉特异性抗原蛋白的表达以及所诱生的免疫应答反应.方法 从慢性乙肝患者的混合血清中制备HBV DNA模板,扩增出基因片段S2S,与pCI载体进行连接,得到重组质粒pCI/S2S.将其肌肉注射接种BALB/c小鼠,在不同的时间点检测血清中抗-HBs及抗-preS2;并于第12周时用细胞毒性检测试剂盒(LDH)检测体外细胞毒性T细胞(CTL)活性,同时以免疫组织化学法检测小鼠接种部位HBsAg的表达.结果 小鼠肌肉接种pCI/S2S完成后1周血清抗-HBs、抗-preS2开始阳转,阳转率于6周或8周达高峰,且能诱生特异性CTL应答.此外,免疫组织化学法能在小鼠的接种局部肌细胞中检测出目的抗原蛋白的表达.结论 乙肝核酸疫苗pCI/S2S接种小鼠后,能在小鼠体内诱生特异性的体液免疫和细胞免疫应答.     

河蚌提取物增强环磷酰胺造成免疫低下模型小鼠DTH及PFC的作用

目的：观察河蚌提取物（ＫＡＬ）对免疫低下小鼠的迟发性过敏反应（ＤＴＨ）和溶血空斑形成细胞（ＰＦＣ）反应的影响。方法：以环磷酰胺（Ｃｙ）造成小鼠免疫低下模型;迟发性过敏反应（ＤＴＨ）采用ＤＮＦＢ致敏小鼠耳片法;抗体水平测定采用ＳＲＢＣ诱导的空斑形成细胞（ＰＦＣ）实验法。结果：ＫＡＬ可使Ｃｙ造成的低下的ＤＴＨ反应增强;对低下的ＰＦＣ反应有所加强。结论：ＫＡＬ对免疫低下模型小鼠有较好的免疫抑制恢复作用。     

重组免疫毒素hIL-2-Luffin P1对大鼠肾移植存活时间的影响

目的 以人IL-2片段与植物毒素Luffin P1重组获得的免疫毒素hIL-2-Luffin P1,观察它对大鼠肾移植排斥反应的抑制作用.方法 采用同种异体大鼠肾移植模型,观察hIL-2-Luffin P1对移植物存活的影响,以及移植物的组织病理学观察.结果 hIL-2-Luffin P1组大鼠存活时间延长(13.86±2.11)d,与对照组比较相差显著(P＜0.01);而Luffin P1处理组与对照组相比无明显差异.同时,病理结果显示对照组移植肾单位结构破坏,淋巴细胞浸润明显,而在同一时间hIL-2-Luffin P1处理组大鼠的移植肾脏病理变化较轻;T淋巴细胞亚群检测显示经hIL-2-Luffin P1处理后,受体外周血T细胞的活化程度降低.结论 hIL-2-Luffin P1能够抑制免疫排斥反应,延长移植物存活时间.     

分子佐剂C3d增强人绒毛膜促性腺激素β基因避孕疫苗的免疫效应及转变免疫应答模式的研究

目的　研究分子佐剂C3d能否增强人绒毛膜促性腺激素 (hCG) βDNA疫苗的免疫原性 ,并转变Th1/Th2型免疫应答模式。方法　抽提纯化pcDNA3、pcDNA3 hCGβ、pcDNA3 hCGβ C3d3、pCMV4 hCGβ C3d34种质粒。将 12只 6周龄BALB/c雌性小鼠分为 12组 ,A1～ 3组各 6只以pcDNA3免疫 ,作为空白对照组 ;B1～ 3组各 6只以pcDNA3hCGβ免疫 ,作为阴性对照组 ;C1～ 3组各 6只以pcDNA3 hCGβ C3d3免疫 ,作为实验 1组 ;D1～ 3组各 5只以pCMV4 hCGβ C3d3免疫 ,作为实验 2组。免疫前 1周 ,于小鼠左后腿肌肉注射 0 2 5 %普鲁卡因 0 1ml。 1周后 ,在相同部位分别肌注前述 4种质粒 ,剂量分别为 :5pmol(A1～D1组 )、10pmol(A2～D2组 )、2 0pmol(A3～D3组 )。 3周后 ,再次给予相同剂量质粒加强免疫。于第 2次免疫后 3周 ,处死小鼠。用ELISA法测定外周血抗hCGβ抗体效价和经hCG抗原体外刺激脾细胞培养上清中Th1型 (IL 2、INF γ、TNF α) /Th2型 (IL 4、IL 10 )细胞因子分泌水平。结果　C3d分子佐剂能明显提高抗hCGβ抗体滴度。当免疫剂量为 2 0pmol时 ,与B3组比较 ,C3组抗hCG抗体最大效价达到 1∶4 5 0 ,提高了 9倍。D3组抗hCG抗体最大效价达到 1∶12 15 0 ,提高了 2 4 3倍。D3组与C3组相比较 ,抗hCG抗体水平提高了 2 7倍。受     

CpG ODN增强免疫力低下小鼠对乙肝疫苗的体液免疫应答

目的 探讨CpG ODN对免疫力低下小鼠的体液免疫增强作用。方法 选用老年C57BL／6小鼠和免疫抑制模型小鼠，将重组HBsAg疫苗和CpG ODN同时或单独肌注到小鼠体内，2周后以同样剂量加强免疫1次，再过3周后摘除眼球取血，用ELISA方法检测抗HBsAg IgG抗体。结果 免疫抑制模型中同时注射CpG ODN和疫苗组产生的IgG抗体绝对量是单独注射疫苗组的2倍；老年鼠组中10μg和20μg CpG ODN与疫苗同时注射组产生的IgG抗体绝对量分别是单独注射疫苗组的3倍和4倍。结论 CpG ODN能增强免疫力低下小鼠对乙肝疫苗的体液免疫应答。     

诺如病毒病毒样颗粒疫苗免疫小鼠诱导的体液和黏膜免疫应答

目的 观察GⅠ.1/GⅡ.4诺如病毒(Norovirus,NoV)病毒样颗粒疫苗免疫小鼠诱导的体液和黏膜免疫应答.方法 7周龄BALB/c小鼠20只被随机分为对照组和疫苗组,每组10只.疫苗组每只小鼠腹腔注射0.1 ml疫苗,含GⅠ.1和GⅡ.4型衣壳蛋白VP1各10μg及0.08 mg氢氧化铝佐剂,对照组腹腔注射0....     

增强DNA疫苗免疫效应的策略和方法

上世纪90年代初,随着分子生物学技术的迅猛发展;DNA疫苗便应运而生,从而开辟了人类疫苗发展史上的新纪元,研究表明DNA疫苗注射到机体后表达出相应的抗原蛋白,能够模拟自然感染刺激机体产生更加全面的免疫应答,因而比传统的减毒、灭活疫苗及蛋白质亚单位疫苗具有更大的优势和更为广阔的应用前景.但是在实际应用中发现,很多现有的DNA疫苗的免疫保护效果不及传统的减毒和灭活疫苗,因此,探索提高DNA疫苗有效性的策略和方法是目前DNA疫苗研制的重要环节.     

薤白对小鼠免疫功能的影响

目的:观察薤白对小鼠非特异性和特异性免疫功能的影响.方法:采用碳粒廓清法,对淋巴细胞介导红细胞溶血的分光光度法(QHS)进行探讨.结果:结果表明薤白能增加脾脏、胸腺的重量,增加碳粒廓清指数K及吞噬指数α,还能增加QHS值.结论:薤白既可以促进单核巨噬细胞的吞噬功能,还能提高机体的特异性免疫功能.     

伤寒Ty21a-CpG佐剂减毒活疫苗诱导抗体应答的研究

目的探讨人工合成的CpG-ODN 作为佐剂对伤寒Ty21a减毒活疫苗诱导小鼠产生抗体的影响.方法将不同剂量的人工合成的含CpG ODN的硫代磷酸寡核苷酸作为佐剂与伤寒Ty21a减毒活疫苗混合,以小鼠作为免疫动物进行免疫接种,采用试管凝集法检测免疫小鼠的血清特异性抗体滴度.结果 CpG-ODN 30μg佐剂组与不用佐剂的Ty21a减毒活疫苗相比较,应用CpG-ODN 组小鼠产生更强的抗体应答,抗体几何均数滴度相比有明显的差异.结论 CpG-ODN作为佐剂可促进伤寒Ty21a减毒活疫苗诱导昆明小鼠产生特异性免疫应答.     

PFC及QHS抑制试验在食管癌免疫学诊断上的应用

用食管癌病人血清做小鼠空斑形成抑制实验(PFC)及体外溶血素分泌测定(QHS)。结果表明,食管癌病人血清免疫抑制活性明显升高,PFC实验中食管癌病人血清免疫抑制阳性率是78.43%,其它癌65.52%,良性疾病17.39%,健康人13.33%。QHS结果与PHC结果类似。本文研究结果表明,食管癌病人血清可抑制体液免疫反应,这一指标可用以区分癌与非癌病人,有助于食管癌病人的初步筛选。     

氯化镉对小鼠免疫功能的影响

本实验观察氯化镉对小鼠免疫功能的影响。在小鼠免疫后不同时间一次灌胃１５ｍｇ／ｋｇＣｄＣｌ２时，对Ｄ２组ＤＴＨ有明显抑制作用。在不同剂量多次灌胃试验中，２．４ｍｇ／ｋｇ和４．８ｍｇ／ｋｇ组，镉对ＤＴＨ．ＰＦＣ和淋巴细胞转化均明显抑制作用，以上结果表明氯化镉对小鼠免疫功能有抑制作用。     

酵母多糖对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

目的研究酵母多糖对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响,为研发酵母多糖相关产品提供实验依据。方法通过环磷腺苷制造免疫功能低下的小鼠模型,给予酵母多糖11d后观察小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素滴度和迟发型变态反应强度变化。结果酵母多糖组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素滴度和迟发型变态反应强度均较模型对照组显著提高,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论酵母多糖可以显著提高小鼠的免疫功能,可作为提高免疫力的添加剂应用于日常的生活生产中。     

黄芪桂枝五物汤中总皂苷对小鼠部分免疫功能的影响

目的：探讨黄芪桂枝五物汤中总皂苷对机体免疫功能的影响,从而为相关产品开发和临床应用提供实验依据。方法取40只小鼠,随机分为皂苷组1（低剂量）,皂苷组2（中等剂量）和皂苷组3（高剂量）以及正常对照组,每组10只 。 总皂苷组每天灌服0．2ml 浓度为5,10,20mg／ml 的总皂苷溶液,正常对照组每天灌服0．2ml 生理盐水,10d 后处死,取样测定小鼠各项免疫指标。①检测小鼠巨噬细胞吞噬功能;②小鼠后足迟发型超敏反应强度;③血凝法测定小鼠血清中溶血素含量;④对脾脏和胸腺称重计算脾脏指数和胸腺指数。结果皂苷各组小鼠巨噬细胞吞噬率和吞噬指数明显低于对照组（P ＜0．01）;皂苷各组小鼠左右后足重量差与对照组小鼠相比,有明显降低（P＜0．01）;皂苷各组小鼠抗体积数低于对照组（P＜0．05）;皂苷各组小鼠脾脏指数和胸腺指数均较对照组小鼠有明显降低（P＜0．01）。结论黄芪桂枝五物汤中总皂苷可以显著降低机体的部分固有免疫功能、细胞免疫功能和体液免疫功能。     

甲醛吸入对小鼠免疫功能影响的研究

目的:通过吸入染毒来观察甲醛对小鼠免疫功能的影响.方法:选用健康清洁级昆明种小鼠48只,随机分成4组,即阴性对照组、低剂量组(21mg/m3)、中剂量组(42mg/m3)和高剂量组(84mg/m3染毒组),每组12只,用静式吸入染毒方式染毒12w处死后,计算脾脏系数、胸腺系数;测定巨噬细胞吞噬功能、NK 细胞活性及脾淋巴细胞增殖反应.结果:甲醛吸入染毒可以引起小鼠脾脏系数、胸腺系数减小(P<0.05或P<0.01);巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性及脾淋巴细胞增殖反应均随染毒剂量的升高而下降(P<0.05或P<0.01).结论:吸入甲醛可导致小鼠免疫功能的损伤.     

激光对带瘤鼠免疫功能及外周血象的影响

采用Ｈｅ－Ｎｅ激光照射带瘤鼠脾区后，Ｔ淋巴细胞功能增强，血清ＩｇＧ水平升高，外周血粒细胞数量增加，资料经ｔ检验差异有显著性。     

苦丁茶对小鼠免疫功能的调节研究

目的：了解苦丁茶对免疫功能低下小鼠的影响。方法：经口灌服醋酸地塞米松（DEX）诱导小鼠免疫功能低下,7d后经口灌服蒲公英,采用苦丁茶和当归补血汤水煎液小鼠进行体液免疫功能测定。结果：苦丁茶可增强巨噬细胞吞噬指数水平,提高小鼠抗体生成水平和巨噬细胞的吞噬率,即通过改善机体的免疫抑制状态,进而增强和调节机体免疫功能作用。结论：苦丁茶有增强和上调免疫功能低下机体的作用。     

当归补血汤及其多糖对隐孢子虫感染的免疫抑制小鼠的免疫调节作用

目的：探讨当归补血汤及当归补血汤多糖对隐孢子虫感染的免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法：连续8d给灌服小鼠醋酸地赛米松后,于第9d经口接种1×106个隐孢子虫卵囊1次,建立隐孢子虫感染模型,再经当归补血汤及当归补血汤多糖灌胃治疗10d,计数粪便隐孢子虫卵囊,观察肠组织病理学改变,检测T细胞亚群和血清IL-2I、L-4I、FN-γ水平。并设正常对照、模型对照和西药对照组。结果：与模型组比较,当归补血汤组、当归补血汤多糖组和西药组卵囊排除数量减少（P〈0.05）,肠组织病理学改变较轻,免疫学检测发现CD4、CD4/CD8及IL-2I、L-4和IFN-γ水平明显升高（P〈0.05）。结论：当归补血汤及当归补血汤多糖通过增强机体免疫功能促进隐孢子虫感染小鼠恢复。     

Ge—132对荷瘤小鼠NK细胞活性及红细胞免疫功能的影响

为了探讨Ｇｅ－１３２抗癌作用机制，本文进行了Ｇｅ－１３２对荷瘤小鼠脾脏ＮＫ细胞活性和红细胞免疫粘附功能影响的体内实验研究。实验采用Ｃ５７ＢＬ／６荷瘤小鼠，腹腔注射Ｇｅ－１３２（剂量分别为１００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇ），每日１次，连续１４天后，取小鼠脾细胞和血液进行ＮＫ细胞活性及红细胞免疫粘附功能测定，并摘除瘤块称重，计算抑瘤率。结果表明，Ｇｅ－１３２对小鼠抑植瘤（Ｓ１８０）的生长具有显著的抑制效应，抑瘤率达５５％；荷瘤小鼠脾细胞ＮＫ活性明显低于正常对照组，Ｇｅ－１３２能使其得以恢复；荷瘤小鼠ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体花环率和肿瘤ＲＢＣ花环率明显低于正常对照组（Ｐ＜００１），ＲＢＣ－ＩＣ花环率则高于正常对照组（Ｐ＜００１），注射Ｇｅ－１３２可显著提高ＲＢＣ－Ｃ３ｂ受体花环率和肿瘤ＲＢＣ花环率，降低ＲＢＣ－ＩＣ花环率。表明Ｇｅ－１３２能增强荷瘤小鼠ＮＫ细胞杀伤活性和红细胞免疫粘附功能。     

弓形虫P30-P22复合DNA疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫应答

目的通过肌内注射弓形虫DNA疫苗PCDNA3．1-P30-P22直接免疫小鼠，观察其诱导的体液免疫应答及保护性作用。方法大量制备重组真核表达质粒PCDNA3．1-P30-P22，肌内注射免疫小鼠，ELISA法测定其抗体滴度的变化，用弓形虫作致死性攻击感染。结果实验组抗体水平明显高于对照组，二者存在显著性差异(P＜0．05)；攻击感染后实验组小鼠存活时间明显延长(P＜0．05)。结论重组真核表达质粒PCDNA3．1-P30-P22肌注BALB/C系小鼠可诱导一定的体液免疫应答，对攻击感染具有一定的保护性。