美金胺对急性高眼压大鼠视网膜神经节细胞保护作用的实验研究

目的探讨美金胺对急性高眼压大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）的保护作用。方法以生理盐水在前房内加压灌注制作大鼠急性高眼压模型，然后腹腔内注射美金胺或生理盐水，分为美金胺治疗组和急性高眼压对照组各20只，另设健康对照组大鼠8只。采用免疫组织化学法和脱氧核苷酸末端转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸末端标记法（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated 2＇-deoxyuridine 5＇-triphosphate-biotin nick end labeling，TUNEL），检测大鼠RGCs caspase-3和凋亡细胞的表达。结果健康对照组无caspase-3与凋亡细胞表达。急性高眼压对照组在高眼压6h后视网膜出现凋亡细胞，逐渐增加至24h达高峰，后逐渐减少，72h时仅有少数凋亡细胞；caspase-3表达改变与凋亡细胞表达相似。美金胺治疗组的变化规律同急性高眼压对照组。急性高眼压6，24和72h后凋亡细胞与caspase-3的表达在3组间的差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。结论细胞凋亡可能在视网膜急性高眼压损伤过程中起重要作用，美金胺对RGCs具有保护作用。     

重组人促红细胞生成素对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 制作Sprague-Dawley (SD)大鼠视网膜缺血-再灌注(RIR)损伤模型,探讨腹腔内注射重组人促红细胞生成素(rHuEPO)对急性RIR损伤所致的大鼠视网膜神经元损伤的保护作用及其对热休克蛋白72(HSP72)表达的影响.方法 采用前房灌注的方式建立RIR损伤模型,灌注压110 mm Hg(1 mm Hg=0.133kPa),缺血时间1h;腹腔注射rHuEPO.78只SD大鼠随机分组:正常组6只,EPO组、EPO+槲皮黄酮组、RIR组各24只,均以右眼为实验眼.采用免疫组织化学法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)分别测定正常对照组和各实验组大鼠再灌注24h、48 h、72 h和1周视网膜中HSP72及凋亡细胞的表达,观察各组大鼠视网膜病理学改变.结果 ①正常组大鼠视网膜中HSP72表达微弱,各实验组大鼠视网膜中HSP72表达自再灌注12 h开始增强,24h达到高峰,随后逐渐减弱,72 h时表达稍高于正常.再灌注后各时间段,EPO组大鼠视网膜中HSP72表达均高于RIR组、EPO+槲皮黄酮组(P＜0.05).②正常大鼠视网膜中几乎没有凋亡细胞.再灌注后12 h,各实验组大鼠视网膜中可见凋亡细胞,24 h达高峰,48 h后凋亡细胞数逐渐减少;再灌注后各组大鼠视网膜中凋亡细胞数比正常组多(P＜0.05).③再灌注后,RIR组,EPO+槲皮黄酮组大鼠内层视网膜明显水肿,炎性细胞侵入,膜结构逐渐破坏;EPO组大鼠视网膜结构保持相对完整,炎性细胞相对较少.结论 ①HSP72在正常大鼠视网膜中表达微弱,RIR损伤后表达增多.腹腔注射EPO可以明显诱导大鼠视网膜中HSP72的表达增多.②EPO可以减少大鼠RIR损伤后视网膜细胞凋亡,减少视网膜内炎性细胞的浸润,保护视网膜结构,对视网膜具有明显的保护作用.其机制可能与使HSP72表达上调有关.(中国眼耳鼻喉科杂志,2012,12:30-35)     

替普瑞酮对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

背景视网膜缺血-再灌注损伤是眼科常见的病理过程,可引起永久性的视力障碍,严重影响患者的视功能,是目前国内外研究的重点课题之一。目的探讨替普瑞酮对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用。方法44只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组4只、单纯模型组20只和替普瑞酮治疗组20只。单纯模型组及替普瑞酮治疗组造模前分别给予大鼠生理盐水和替普瑞酮灌胃,1周后采用前房加压法制作大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型,并分别于再灌注后6、24、48、72h制备视网膜铺片,经苏木精-伊红染色观察各组大鼠视网膜组织结构的变化,采用免疫组织化学法检测大鼠视网膜中热休克蛋白70（HSP70）和caspase-3的表达。结果视网膜缺血-再灌注后1～6h单纯模型组大鼠角膜及视网膜出现水肿,24h视网膜水肿加重,72h视网膜水肿减轻、结构较紊乱。替普瑞酮治疗组大鼠各时间点视网膜水肿较单纯模型组轻,缺血-再灌注后72h大鼠视网膜结构损害较单纯模型组减轻。正常对照组大鼠视网膜未见HSP70及caspase-3呈阳性表达。单纯模型组大鼠在再灌注后6h可见视网膜神经节细胞（RGCs）中HSP70呈阳性表达,再灌注后24h达高峰,之后逐渐下降。替普瑞酮治疗组各时间点HSP70在大鼠RGCs中的表达较单纯模型组明显增强,差异均有统计学意义（P〈0．05）。再灌注后6h可见单纯模型组大鼠RGCs中caspase-3表达,24h时caspase-3的表达量达高峰,48h后开始下降,72h仅有少量表达,而各时间点替普瑞酮治疗组视网膜中caspase-3的表达较单纯模型组大鼠明显减弱,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论在视网膜缺血-再灌注损伤大鼠模型中,替普瑞酮可通过上调视网膜中HSP70的表达和下调caspase-3的表达对RGCs起保护作用。     

大鼠急性高眼压模型视网膜组织中HSP60的表达及功能

目的:探讨HSP60(热休克蛋白60)在大鼠急性青光眼模型视网膜组织中的表达及其与血清中相应抗体的关系。方法:将SD大鼠70只随机分为高眼压组60只,正常对照组10只。大鼠全身及表面麻醉后,将一盛有等渗的生理盐水的储容器相连的7号针头于3∶00位的角膜缘处刺入前房,提升储容器的高度,使眼内压达到110mmHg,但不超过150mmHg,观察大鼠眼前段变白,且视网膜色白,未见红色反光时即为视网膜缺血,缺血1h后再灌注,并于再灌注后2,6,12,24,72,168h将大鼠麻醉过量致死,处死前测眼压,抽血2mL,供酶联免疫吸附测定使用,分析视网膜组织内HSP60抗原产生的血清中相应抗体水平。并立即取出眼球,同时对鼠眼视网膜组织进行石蜡切片,采用免疫组化法检测视网膜组织中HSP60的表达及分布情况,并对检测结果进行统计学分析。结果:急性高眼压诱导的视网膜缺血/再灌注组眼压明显升高,视网膜组织中的HSP60阳性表达率在术后各时间点,高眼压组与正常对照组比较,差异有统计学意义(F=97.21,40.72,83.85,95.82,48.63及44.37,均P<0.01)。神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)中HSP60阳性表达随着眼压升高及高眼压持续时间延长逐渐增强,且视网膜神经纤维层中也出现较明显的HSP60阳性表达。结论:HSP60表达增强可能在急性高眼压所致的视神经病变中具有重要作用。     

葡萄糖调节蛋白在急性高眼压大鼠视网膜中的表达及其意义

背景 青光眼导致的视网膜神经节细胞(RGCs)进行性死亡是导致患者视功能损害的主要病理基础,研究表明内质网应激(ERS)参与此过程,葡萄糖调节蛋白78( GRP78)是内质网中的特异性标志物,检测GRP78在高眼压诱导视网膜中的表达对青光眼患者视神经功能保护机制的研究具有重要意义. 目的 检测GRP78在大鼠急性高眼压后不同时期视网膜中的表达情况,探讨ERS在急性青光眼损伤中的作用.方法 56只Wistar大鼠采用随机数字表法分为正常对照组、前房穿刺组、急性高眼压12h组及急性高眼压1、3、7、14 d组,每组8只眼.急性高眼压模型的制作采用前房穿刺灌注生理盐水法,眼压提高至66 mmHg.分别于造模后12h及1、3、7、14 d用过量麻醉法处死大鼠.苏木精-伊红染色法观察各组大鼠视网膜的病理形态学改变;免疫组织化学法检测视网膜中的GRP78蛋白表达的变化;实时定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法检测视网膜中GRP78 mRNA的表达变化. 结果 正常对照组大鼠视网膜各层细胞排列整齐,急性高眼压后12h视网膜水肿增厚、细胞核肿胀,1d时视网膜形态学异常改变达到高峰,3d后水肿减轻,视网膜变薄.免疫组织化学染色显示正常对照组、前房穿刺组大鼠RGCs层和内核层GRP78蛋白呈弱阳性表达,A值分别为0.195±0.006、0.196±0.005,急性高眼压12h组大鼠GRP78在视网膜的表达明显增强,A值为0.293±0.011,造模后1d时GRP78表达强度达到高峰,A值为0.499±0.039,造模后3d时GRP78表达明显降低,A值为0.268±0.017,与正常对照组大鼠比较差异均有统计学意义(t=0.098、0.304、0.073,P＜0.05),但造模后7d和14 d时GRP78在大鼠视网膜RGCs层和内核层中的表达量接近正常,与正常对照组比较差异均无统计学意义( t=0.002、0.001,P＞0.05).实时定量RT-PCR检测表明,GRP78 mRNA在正常对照组大鼠视网膜的相对表达量( 2-△△CT)为1.011±0.013,眼压升高12 h快速上调,为1.536±0.145,1 d时达高峰,为2.141±0.171,3d时迅速降低,为1.420±0.212,与正常对照组比较差异均有统计学意义(t=0.525、1.130、0.409,P＜0.05),而造模后7d及14 d GRP78 mRNA在大鼠视网膜的表达量明显下降,与正常对照组比较差异均无统计学意义(t=0.020.0.004,P＞0.05).结论 GRP78参与大鼠急性高眼压后视网膜损伤的发生机制,提示通过对ERS过程进行干预可能达到保护急性高眼压眼视神经功能的目的.     

急性高眼压大鼠视网膜RhoA的分布及表达

目的:探讨急性高眼压大鼠视网膜RhoA的分布及表达变化。方法:将56只SD大鼠随机分成正常对照组、急性高眼压后1,3,7d共4组,用免疫组化和半定量RT-PCR方法检测大鼠视网膜组织中的RhoA的分布及表达情况。结果:正常及急性高眼压后1d,RhoA主要分布于视网膜神经纤维层及神经节细胞层;3d分布于神经节细胞层及内丛状层;7d分布于神经节细胞层、内丛状层、内核层及外丛状层。半定量RT-PCR提示:在正常大鼠视网膜组织中,RhoA mRNA仅有微量表达,急性高眼压后1,3,7d,RhoA表达均显著高于正常组(P<0.05),7d组表达量最高。结论:大鼠急性高眼压损伤后,视网膜RhoA蛋白的分布及表达显著增加,其在介导抑制性信号阻断轴突再生的抑制过程中发挥着重要作用。     

孕酮对急性高眼压大鼠视网膜神经损伤保护作用的研究

目的：通过建立大鼠急性高眼压模型,应用孕酮干预,观察孕酮是否对视网膜神经细胞具有保护作用。

方法：Wistar大鼠140只,随机分为正常对照组(A组)20只、高眼压对照组(B组)60只、高眼压孕酮干预组(C组)60只。应用生理盐水前房灌注的方法建立大鼠急性高眼压模型,C组在高眼压后即刻予腹腔注射孕酮4.0mg/kg,以后于6,24h以及隔日行皮下注射,B组于相同时间注射等量的生理盐水。于高眼压后1,3,7d分别获取各组大鼠的视网膜组织。HE染色观察视网膜病理学的变化,用免疫组化染色、Western blot检测视网膜细胞凋亡基因Caspase-3蛋白的表达情况,TUNEL法检测细胞的凋亡程度,并对各组数据进行统计学分析。

结果：B组和C组的大鼠视网膜均发生水肿, C组水肿程度明显低于B组。免疫组化染色及Western blot相对定量检测,C组Caspase-3表达程度低于B组。Caspase-3蛋白主要表达于视网膜神经节细胞层和内核层,于高眼压后第1d强度最大,以后随时间的推移逐渐减少。TUNEL检测细胞凋亡,B组和C组均出现阳性细胞,主要位于视网膜的节细胞层和内核层,C组细胞凋亡数量明显低于B组。

结论：孕酮对大鼠视网膜急性高眼压损伤有保护作用。     

葛根素对实验性视网膜缺血-再灌注损伤后视神经的保护作用

目的探讨葛根素对实验性高眼压视网膜缺血-再灌注损伤后视神经的保护作用及其机制。方法用眼内灌注法前房灌注林格氏液制成急性高眼压视网膜缺血-再灌注损伤模型。将70只SD大鼠随机分为正常对照组(10只),葛根素治疗组(30只)和模型组(30只)。其中后2组根据再灌注的时间不同分为1d、3d、7d组,每组10只大鼠。治疗组经大鼠腹腔注射葛根素注射液(60mg·kg-1),模型组经大鼠腹腔注射生理盐水(10mL·kg-1)。利用免疫组织化学法检测各组大鼠视网膜内一氧化氮合酶(neural nitrogenoxide synthase,nNOS)的表达,以及硫代巴比妥酸法测量丙二醛(malonaldialdehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。结果从再灌注1d开始,模型组视网膜内nNOS阳性表达明显增多,MDA水平持续升高,SOD活性持续下降,其差异与正常对照组相比,有统计学意义(P<0.01)。与模型组相比,再灌注各时段葛根素治疗组nNOS阳性神经元明显减少(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01),SOD活性升高(P<0.01),其中nNOS阳性神经元与正常对照组相比,无统计学意义(P>0.05)。结论葛根素可通过提高视网膜组织中SOD活性,降低MDA含量,以及增加组织中nNOS表达,对大鼠实验性高眼压视网膜缺血-再灌注损伤有一定的保护作用。     

超声微泡介导Ngb基因过表达对大鼠视网膜急性高眼压损伤的保护研究

目的 探讨超声微泡靶向破坏(ultrasound-targeted microbubble destruction,UTMD)技术介导的脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)过表达对大鼠急性高眼压损伤的视网膜保护作用.方法 40只SD大鼠右眼进行基因转染,即利用UTMD将携带外源性Ngb基因的重组质粒转染至大鼠视网膜组织;左眼为对照组(未转染组),即只升高眼压.在转染后48 h,采用前房加压灌注升高眼压的方法制作急性高眼压模型,术后5 min、10min、30 min、60 min分别处死各组大鼠,摘取眼球,分离视网膜.Westernblotting检测Ngb在急性高眼压时表达的变化情况,测定并比较双眼的caspase-3活性.结果 UTMD介导外源性Ngb在视网膜各层均有表达,对视网膜没有造成损伤.未转染组Ngb表达水平呈时相性变化,在高眼压缺氧5～ 10 min时明显增高,在10min时达到峰值,随后开始下降,在60 min时最低.转染组Ngb表达水平明显高于未转染组,在缺氧30 min时达到峰值,随后开始下降.随着高眼压时间的延长,caspase-3活性逐渐增加,说明死亡的视网膜神经纤维层细胞越来越多.转染组的caspase-3活性明显低于未转染组,在相同时间点,两组之间差异均有统计学意义(均为P ＜0.05).结论 UTMD能够在体内安全、有效地介导Ngb基因转染至视网膜组织中.Ngb过表达可以降低视网膜对缺血缺氧的敏感性,起到视网膜组织保护作用.     

黄芪多糖对急性高眼压诱导大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

背景青光眼患者视神经保护的问题日益引起关注。黄芪多糖（APS）是黄芪的主要活性成分,可增加再生神经蛋白的表达并促进损伤的周围神经修复,但其对视网膜神经节细胞（RGCs）再生作用的研究少见报道。目的探讨APS对急性高眼压状态下RGCs的保护作用。方法采用抽签法将40只SPF级sD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量APS组和高剂量APS组,每组各10只。低剂量APS组和高剂量APS组大鼠自实验开始每日分别给予APS500mg／kg、2000mg／kg（均溶于2．5ml生理盐水）灌胃,模型对照组仅给予2．5ml生理盐水灌胃,正常对照组不做任何处理。用药2周后,除正常对照组外,其余3个组均抽取0．2ml房水继而单眼前房注射等体积甲基纤维素使眼压升高至22mmHg（1mmHg=0．133kPa）以上制作急性高眼压模型。造模后5d,过量麻醉法处死动物,摘除该眼球制作视网膜石蜡切片,常规组织病理学观察视网膜的形态结构变化,采用免疫组织化学法检测caspase-3蛋白在大鼠视网膜中的表达,采用TUNEL染色法观察和计算各组大鼠RGCs的凋亡率。ImageProPlus5．1软件测量各组大鼠视网膜厚度和神经纤维层厚度。结果大鼠成模后5d,模型对照组、低剂量APS组和高剂量APS组大鼠的眼压均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义（t=-8．900、-10．700、-11．300,P〈0．01）。正常对照组大鼠视网膜形态正常;模型对照组大鼠视网膜水肿,细胞排列紊乱;低剂量APS组视网膜可见空泡样变性,但视网膜细胞排列较模型对照组整齐,视网膜水肿减轻;高剂量APS组视网膜水肿较明显。低剂量APS组视网膜厚度、外颗粒层及视神经纤维层厚度值均明显低于模型对照组,差异均有统计学意义（t=-23．700、-14．770、-11．640,P〈0．01）,但高剂量APS组外颗粒层及视神经纤维层厚度与模型对照组比较差异均无统计学意义（t=-0．780、-0．460,P〉0．05）。低剂量APS组大鼠caspase-3蛋白阳性RGCs百分比及RGCs凋亡百分率均明显低于模型对照组（caspase-3蛋白：F=87．710,P=0．001;RGCs凋亡：F=272．840,P〈0．01）,差异均有统计学意义（t=-11．700、-8．600,P〈0．01）,高剂量APS组与模型对照组比较caspase-3蛋白阳性RGCs百分比及RGCs凋亡百分率的差异均有统计学意义（t=-7．900、-6．400,P〈0．05）。结论500mg／kgAPS可有效抑制急性高眼压模型大鼠的视网膜水肿及RGCs的凋亡率,对急性高眼压大鼠的RGCs有保护作用。     

近视性屈光参差患者双眼角膜生物力学及眼压特点的研究

目的观察近视性屈光参差患者双眼角膜生物力学及眼压的特点。设计回顾性病例系列。研究对象116例(232眼)近视性屈光参差患者。方法按每人双眼等效球镜度(SE)高低分为低SE眼和高SE眼,比较双眼标志角膜生物力学参数的角膜阻力因子量(CRF)、角膜滞后量(CH)和眼压的特点;根据双眼间等效球镜度差值分为组1(SE差值2.5～3.0 D,37例)、组2(SE差值﹥3.0 D～6.0 D,44例)和组3(SE差值>6.0 D,35例),比较不同屈光参差程度组内低SE眼和高SE眼CRF、CH和眼压的特点。主要指标CRF、CH、角膜补偿眼压。结果总体低SE眼和高SE眼间的CRF分别为(10.40±1.74)mm Hg和(10.38±1.63)mmHg,差异无统计学意义(t=0.113,P=0.683),CH分别为(9.71±1.68)mm Hg和(9.66±1.90)mm Hg,差异亦无统计学意义(t=0.144,P=0.886)。在屈光参差程度不同的三组中,双眼间低SE眼与高SE眼CRF的差异均无统计学意义,组1:(10.58±1.74)mm Hg,(10.65±1.61)mm Hg(t=-0.175,P=0.862);组2:(10.31±1.88)mm Hg,(10.14±1.58)mm Hg(t=0.434,P=0.666);组3:(10.35±1.47)mm Hg,(10.31±1.65)mm Hg(t=-0.141,P=0.903)。各组双眼间CH差异亦均无统计学意义,组1:(9.66±1.59)mm Hg,(9.74±1.52)mm Hg(t=-0.210,P=0.834);组2:(9.89±1.90)mm Hg,(9.83±2.21)mm Hg(t=0.122,P=0.903);组3:(9.59±1.35)mm Hg,(9.35±1.71)mm Hg(t=0.336,P=0.512)。总体低SE眼和高SE眼间的角膜补偿眼压分别为(18.37±3.58)mm Hg和(18.67±3.48)mm Hg,也未发现差异有统计学意义(t=-0.607,P=0.545)。结论近视性屈光参差患者双眼间角膜生物力学参数及眼压无显著性差异。     

大鼠视网膜缺血-再灌注损伤后P38丝裂原活化蛋白激酶和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶表达的变化及尼莫地平对二者的影响

目的探讨L型钙通道阻滞剂尼莫地平对大鼠视网膜缺血一再灌注损伤的保护作用及其对细胞信号转导通路的影响。方法Wistar大白鼠95只,随机分为4组。A组正常（空白）对照组5只,B组视网膜缺血-再灌注组（实验对照组）30只,C组视网膜缺血-再灌注＋尼莫地平组（实验组）30只,D组低压灌注组（假手术组）30只,以前房灌注升高眼压的方法制备大鼠视网膜缺血-再灌注模型,分别于再灌注发生后2、6、12、24、72、168h各处死5只大鼠,石蜡包埋后切片。以原位杂交方法检测各时间点视网膜P38丝裂原活化蛋白激酶类（P38MAPK）mRNA表达情况,以免疫组化法检测视网膜半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）表达情况。结果于Metamorph软件上处理,取平均吸光度值作统计分析。结果视网膜缺血-再灌注损伤后,P38MAPK和caspase-3表达增强。视网膜P38MAPK mRNA原位杂交信号位于节细胞层和内核层的细胞核内,正常视网膜只有少量表达。P38于B组缺血-再灌注后,6h表达即明显增加,至12h达到顶峰,持续至24h,72h后逐渐下降。C组使用尼莫地平后,P38表达趋势与B组相同,但表达水平下降。caspase-3表达情况与P38相似。2h开始见内核层细胞核散在阳性,6h后节细胞层内核层细胞核阳性数增加,至24h达到顶峰。C组caspase-3表达趋势同B组,阳性细胞数及着染深度均小于B组。对平均吸光度值行统计学分析表明：P38MAPK mRNA表达,在6、12、24、72h,B组与A、C组,C组与A、D组间差异有统计学意义。caspase-3表达,除0h、168h这两个时间点外,其他各时间点A、D组与B组,A、D组与C组,B组与C组间差异均有统计学意义。A组与D组间差异无统计学意义。结论P38 MAPK和caspase-3均参与了视网膜缺血-再灌注损伤中视网膜神经细胞信号的转导,尼莫地平通过下调P38MAPK和caspase-3的表达而实现对视网膜的保护作用。（中华眼科杂志,2006,42：435-442）     

活血化瘀方剂对急性高眼压大鼠视网膜损伤的保护作用

目的观察活血化瘀方剂对急性高眼压大鼠视网膜损伤后的保护作用及对脑源性神经营养因子（BDNF）表达变化的影响。方法 100只清洁级Wistar大鼠随机分为正常对照组10只、穿刺组10只、模型组40只及模型＋中药组40只。采用前房灌注生理盐水加压法升高眼压至66mmHg,制作急性高眼压模型。模型组分别于造模后1、3、7、14d处死动物,模型＋中药组在造模后即刻给予2mL活血化瘀方剂灌胃,每日2次,并分别在给药后1、3、7、14d处死动物。苏木精-伊红染色光镜下观察各组视网膜的形态学改变;荧光免疫组织化学法测定BDNF蛋白在视网膜组织中表达量的变化;实时定量逆转录聚合酶链反应（real-time PCR）法检测BDNF mRNA在视网膜组织中的表达。结果光镜下可见模型组造模后1d视网膜全层高度水肿,7~14d视网膜神经节细胞（RGCs）数目减少,视网膜萎缩变薄,模型＋中药组视网膜组织的病理损害程度较相应时间点模型组轻。荧光免疫组织化学染色可见急性高眼压后BDNF蛋白在视网膜组织中的表达在1d时达高峰,之后逐渐下降,其在模型＋中药组中的表达均高于相应时间点模型组（P〈0.05）。Real-time PCR半定量结果显示,高眼压后BDNF mRNA的表达变化趋势与荧光免疫组织化学染色结果一致,BDNF mRNA在模型＋中药组中的表达均高于相应时间点模型组（P〈0.05）。结论活血化瘀方剂对急性高眼压造成的视网膜损伤有保护作用,这种保护作用可能与其促进视网膜内源性BDNF的表达有关。     

Expression and role of autophagy related protein p62 and LC3 in the retina in a rat model of acute ocular hypertension

AIM: To investigate the expression and possible role of the autophagy related protein p62 and LC3 in the retina based on a rat model of acute ocular hypertension.METHODS: Fifty rats were randomized into five groups: control group A, B, C, and D. Groups A to D all received normal saline perfusion into the anterior chamber with pressure of 80 mm Hg for one hour, and retina tissue was obtained at 6, 12, 24 and 48 h after perfusion respectively, to investigate the activation of autophagy following ischemiareperfusion. The distribution and semi-quantification of autophagy related protein p62 and LC3 in the retina were detected using immunohistochemistry technique. The expression level of these two proteins was evaluated using Western blot.RESULTS: The number of retinal ganglion cells(RGCs) decreased with increasing reperfusion time, and significant reduction in the retinal thickness was observed 48 h after perfusion. In normal adult rats, LC3 protein was mainly expressed in the ganglion cell layer(GCL), and p62 protein was expressed in the nerve fiber layer(NFL), GCL, inner plexiform layer(IPL), inner nuclear layer(INL) and outer plexiform layer(OPL). In comparison to the control group, the expression level of LC3-II was higher in all the experimental groups(P<0.05), with the peak expression at 12 h after reperfusion. Additionally, the expression level of p62 was higher in all the experimental groups than the control(P<0.05, except for group A), with the peak level occurred 24 h after reperfusion. CONCLUSION: Both p62 and LC3 show low level and uneven expression in the retina of normal adult rats. Acute ocular hypertension can lead to upregulation of LC3-II and p62 expression in the retina. Autophagy flux is damaged 12 h after reperfusion, potentially resulting in further loss of RGCs.     

吲哚青绿联合光照对兔眼前房反应影响的实验研究

目的通过研究吲哚青绿（ICG）介导光动力对兔眼后发性白内障的抑制作用,观察1CG联合光照对兔眼前节组织的影响。方法32只兔眼随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,分别行超声乳化及皮质吸出术。低、中、高剂量组吸出皮质后,前房内注入浓度分别为1．25、2．5、5mg／mL的0．5mLICG,再用810nm的半导体激光对囊膜进行低能量（50mW／em）照射2rain。于术后1d、3d、7d观察眼前节组织、眼压及房水总蛋白含量的变化情况。结果术后1d,低、中、高剂量组的眼压分别为（15．67±2．17）、（15．94±2．35）、（16．08±2．12）mmHg（1mmHg=0．133kPa）,术后3d分别为（17．41±2．85）、（17．87±2．51）、（17．95±2．64）mmHg,术后7d分别为（16．65±2．24）、（16．93±2．06）、（17．24±2．32）mmHg,各组间相比差异无统计学意义（P〉0．05）,与对照组及与术前比较,差异亦无统计学意义（P〉0．05）。术后1d,低、中、高剂量组的房水总蛋白含量分别为（0．73±0．26）、（0．76±0．28）、（0．80±0．25）mg／mL,术后3d分别为（0．66±0．12）、（0．71±0．23）、（0．73±0．31）mg／mL,术后7d分别为（0．53±0．27）、（0．58±0．17）、（0．61±0．23）mS／mL,各组问相比差异无统计学意义（P〉0．05）,与对照组比较,差异亦无统计学意义（P〉0．05）。4组问前房反应评分,两两配对比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论ICG联合光照短期内对兔眼前节组织无明显毒副作用。（中国眼耳鼻喉科杂志,2013,13：11—13）     

依据24h眼压峰值的青光眼个性化药物治疗观察

目的 通过对开角型青光眼患者进行24h眼压监测后采用不同的降眼压用药时间,来探索青光眼的个性化治疗.方法 入选18例正常眼压性青光眼和14例原发性开角型青光眼,治疗前均给予视野检查,进行24 h眼压监测(每2h1次),并根据眼压波动曲线,给予前列腺素类降眼压药,1次/d,用药时间为峰值眼压提前12 h;1个月后复查24 h眼压,随访(23.7±12.4)个月,记录随访终末期的视野.结果 治疗前平均眼压(16.8±3.5)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),峰值眼压(20.8±4.6)mm Hg,谷值眼压(13.7±3.1)mm Hg,眼压波动值(7.1 ±2.4)mm Hg;治疗后平均眼压(13.2±2.6) mm Hg,峰值眼压(16.4±3.4) mm Hg,谷值眼压(10.7±2.3)mm Hg,眼压波动值(5.7±2.1)mm Hg.治疗前后平均眼压、峰值眼压、谷值眼压、眼压波动值的差异均具有统计学意义(P ＜0.000 1).治疗前视敏度(19.0±5.2)dB,视敏度缺损值(8.2±4.9)dB;治疗后视敏度(19.7±5.5)dB,视敏度缺损值(7.2±5.1)dB.结论 通过依据24h眼压峰值来确定青光眼的用药及其用药时点的选择,以及青光眼随访过程中治疗药物的调整,是一种值得推广的青光眼个性化治疗模式.(中国眼耳鼻喉科杂志,2012,12:36-39)     

超声乳化手术治疗慢性闭角型青光眼术前晶状体厚度的研究

目的评价晶状体厚度对白内障超声乳化摘出联合人工晶状体植入治疗慢性闭角型青光眼手术效果的影响。方法对30例（36眼）慢性闭角型青光眼行白内障超声乳化摘出联合人工晶状体植入术，手术前后行超声生物显微镜（ultrasound biomicroscopy，UBM）检查。根据手术前的晶状体厚度分为晶状体厚度增大组（20眼）和晶状体厚度正常组（16眼）。术后随访11—30周。结果晶状体厚度增大组术后早期及随访时眼压平均下降（15．05±3．68）mmHg（1mmHg：0．133kPa）及（10．42±4．98）mmHg，晶状体厚度正常组则分别下降（9．88±4．60）mmHg及（7．50±4．58）mmHg。两组的手术成功率分别为95．0％和62．5％，差异有统计学意义。结论白内障超声乳化摘出联合人工晶状体植入术治疗闭角型青光眼，术前以UBM测量晶状体厚度，可对手术的降眼压效果及术后远期疗效作出评估。     

替普瑞酮对大鼠慢性高眼压视网膜HSP70表达的影响

目的：研究慢性高眼压大鼠视网膜HSP70表达的变化及替普瑞酮的影响。方法：Wistar大鼠70只随机分为3组：空白对照组10只;慢性高眼压模型组30只;慢性高眼压模型＋GGA组30只。采用烧灼巩膜浅层静脉的方法制备大鼠慢性高眼压模型。模型成功后给予替普瑞酮800mg／（kg·d）每目灌胃。应用免疫组织化学方法观察应用及未应用替普瑞酮的慢性高眼压大鼠视网膜不同时点的差异及HSP70表达的变化。结果：平均眼压高于正常眼压40％的手术眼为造模成功。与正常对照组相比,慢性高眼压大鼠应用与未应用替普瑞酮者,视网膜均随着高眼压时间的延长逐渐出现形态学变化,于高眼压的21d和28d视网膜变薄,节细胞数量减少;在此过程中,HSP70表达增多。慢性高眼压大鼠视网膜应用替普瑞酮者与未应用提普瑞酮者相比,其形态学变化较小,而HSPT0表达则明显增多,两者差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：替普瑞酮通过上调HSP70表达发挥对慢性高眼压视网膜的保护作用。